五味子乙素干預(yù)二氧化硅致大鼠肺損傷的研究

五味子乙素干預(yù)二氧化硅致大鼠肺損傷的研究目的:探討五味子乙素（SchisandrinB,Sch-B）對(duì)二氧化硅（SiO₂）致肺損傷的干預(yù)作用及其作用機(jī)制。方法:92只Wistar大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、染矽塵組、Sch-B干預(yù)Ⅰ組和Sch-B干預(yù)Ⅱ組。非暴露氣管法給大鼠氣管內(nèi)注射SiO₂粉塵懸液,建立肺損傷模型,對(duì)照組給以等體積的生理鹽水。Sch-B干預(yù)Ⅰ組和Sch-B干預(yù)Ⅱ組分別在染塵后第一天、第八天開(kāi)始灌胃給予Sch-B80mg/（kg·d）,連續(xù)21天。Sch-B干預(yù)Ⅰ組藥后3、7、14和21d,Sch-B干預(yù)Ⅱ組藥后7、14和21d均隨機(jī)取6只,對(duì)應(yīng)各時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)取對(duì)照組大鼠4只,染矽塵組6只,處死取其肺組織。測(cè)定肺系數(shù);取右肺組織行常規(guī)HE染色,觀察肺組織病理學(xué)變化;免疫組織化學(xué)法檢測(cè)核轉(zhuǎn)錄因子-κB（nuclearFactor-kappaB,NF-κB）的核轉(zhuǎn)移率;紫外分光光度法測(cè)定左肺組織羥脯氨酸（hydroxyproline,HYP）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、還原性谷胱甘肽（glutathione,GSH）含量和超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathioneperoxidase,GSH-Px）活力;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）測(cè)定腫瘤壞死因子-α（tumornecrosisfactor-alpha,TNF-α）,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（transformingGrowthfactor-beta1,TGF-β₁）mRNA表達(dá)水平;Westernblot法分析絲裂素活化蛋白激酶（mitogen-activatedproteinkinase,MAPK）家族中3個(gè)主要成員細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellularsignal-regulatedproteinkinase,ERKs）、c-Jun氨基末端激酶（c-JunNH2-terminalaminokinase,JNK）和p38活化表達(dá)的變化情況。結(jié)果:1.Sch-B對(duì)肺組織損傷的病理形態(tài)學(xué)有明顯的改善作用,可以降低染矽大鼠的肺系數(shù)。2.Sch-B可以降低肺組織HYP和MDA含量,維持GSH含量和SOD、GSH-px活力,與染矽塵組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05或P＜0.01）。3.Sch-B干預(yù)Ⅰ組各時(shí)間點(diǎn)大鼠肺組織TNF-αmRNA表達(dá)水平都高于對(duì)照組,在第7和14天與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）,在第21天與染矽塵組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）。Sch-B干預(yù)Ⅱ組各時(shí)間點(diǎn)大鼠肺組織TNF-αmRNA水平也都高于對(duì)照組,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）;在第14天高于染矽塵組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）,之后與染矽塵組表達(dá)水平相當(dāng)。4.Sch-B干預(yù)Ⅰ組各時(shí)間點(diǎn)大鼠肺組織TGF-β₁mRNA表達(dá)水平都高于對(duì)照組,基本呈下降趨勢(shì),在第3天與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）,尚不能認(rèn)為與染矽塵組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Sch-B干預(yù)Ⅱ組各時(shí)間點(diǎn)大鼠肺組織TGF-β₁mRNA水平也都高于對(duì)照組,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）;在第14和28天高于染矽塵組,其中第14天有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）。5.Sch-B干預(yù)Ⅰ組大鼠肺組織NF-κB/P65核轉(zhuǎn)移率在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中呈直線上升趨勢(shì)發(fā)展,從第7天起與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）,在各時(shí)間點(diǎn)均低于染矽塵組（P＜0.01）;Sch-B干預(yù)Ⅱ組大鼠各時(shí)間點(diǎn)肺組織NF-κB/P65核轉(zhuǎn)移率高于對(duì)照組（P＜0.01）,在第21天低于染矽塵組（P＜0.01）,而在第28天高于染矽塵組（P＜0.01）。6.Sch-B干預(yù)Ⅰ組和Sch-B干預(yù)Ⅱ組各時(shí)間點(diǎn)大鼠肺組織ERKs蛋白的磷酸化程度都低于染矽塵組（P＜0.05或P＜0.01）;Sch-B干預(yù)Ⅰ組JNK1磷酸化程度在第7天達(dá)到最高峰后持續(xù)下降到低于染矽塵組（P＜0.01）,而Sch-B干預(yù)Ⅱ組各時(shí)間點(diǎn)JNK1磷酸化程度均低于染矽塵組（P＜0.01）;Sch-B干預(yù)Ⅰ組p38磷酸化程度第3天高于染矽塵組,第7天后低于染矽塵組,呈波浪形發(fā)展;Sch-B干預(yù)Ⅱ組p38磷酸化程度不斷降低。結(jié)論:1.Sch-B對(duì)SiO₂致大鼠肺損傷具有顯著的保護(hù)作用,能夠抑制SiO₂粉塵誘導(dǎo)的肺纖維化,且在矽塵接觸早期和后期進(jìn)行干預(yù)均有效果。2.Sch-B進(jìn)入機(jī)體后通過(guò)提高機(jī)體的抗氧化能力,對(duì)SiO₂致大鼠肺損傷發(fā)揮保護(hù)作用。3.Sch-B對(duì)染矽早期大鼠肺組織TNF-α和TGF-β₁mRNA表達(dá)水平有一定的調(diào)節(jié)作用。對(duì)于SiO₂誘導(dǎo)的肺損傷,在不同發(fā)病階段給予Sch-B干預(yù),TNF-α和TGF-β₁mRNA表達(dá)水平發(fā)展趨勢(shì)不同。