課件藥分章六章芳酸類

第六章芳酸類非甾體抗炎藥物的分析

AnalysisofAromaticcarboxylicacids&esters一類不含甾體骨架的抗炎藥代表：阿司匹林（1898）、對(duì)乙酰氨基酚、吲哚美辛、萘普生、萘普酮、雙氯芬酸、布洛芬、尼美舒利、羅非昔布、塞來昔布等，藥理作用：具有抗炎、抗風(fēng)濕、止痛、退熱和抗凝血等作用，在臨床上廣泛用于骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多種發(fā)熱和各種疼痛癥狀的緩解。非甾體抗炎藥（NonsteroidalAntiinflammatoryDrugs，NSAIDs）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有芳酸或其酯羧基直接與苯環(huán)相連使芳酸的酸性強(qiáng)度各有不同本章重點(diǎn)掌握水楊酸類，苯甲酸類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)；掌握苯甲酸鈉，阿司匹林及其制劑的鑒別、含量測(cè)定掌握阿司匹林中特殊雜質(zhì)的項(xiàng)目、來源及檢查方法了解其它芳酸類藥物的結(jié)構(gòu)、鑒別含量測(cè)定方法進(jìn)一步了解體內(nèi)藥物分析第一節(jié)典型芳酸類非甾體抗炎藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)可呈游離狀態(tài)水楊酸、阿司匹林

具有羧基可呈鹽或呈酯雙氯芬酸鈉可呈酰胺結(jié)構(gòu)吡羅昔康

具有苯環(huán)有不同的結(jié)構(gòu)特征

有硫、氯、氟等元素，也可作為鑒別的依據(jù)

一、典型藥物與結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

1、苯甲酸類阿司匹林

水楊酸鈉1結(jié)構(gòu)：羧基和苯環(huán)直接相連決定了酸性較強(qiáng)的特征。2苯環(huán)及其取代基，具有特征的紫外和紅外吸收光譜，可用于鑒別和含量測(cè)定。代表性藥物水楊酸類結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：羧基和苯環(huán)不直接相連。與前兩類相比酸性較弱。鄰氨基苯甲酸苯乙酸甲芬那酸雙氯芬酸鈉代表性藥物結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：羧基和苯環(huán)不直接相連，酸性較弱。鄰芳基苯丙酸布洛芬（芬必得）代表性藥物吲哚乙酸類吲哚美辛苯駢噻嗪甲酸類吡羅昔康其他非甾體抗炎藥對(duì)乙酰氨基酚二、主要理化性質(zhì)（一）物理性質(zhì)（1）固體具有一定的熔點(diǎn)（2）溶解性游離芳酸類藥物幾乎不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；芳酸堿金屬鹽及其它鹽易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑。（二）化學(xué)性質(zhì)酸性：芳酸具游離羧基，呈酸性，其pKa在3～6之間，屬中等強(qiáng)度的酸或弱酸

—X、—NO2、—OH等吸電子取代基存在使酸性增強(qiáng)

—CH3、—NH2等斥電子取代基存在使酸性減弱分子內(nèi)氫健，酸性大為增強(qiáng)

pKa=2.952、水解性具有酯鍵：阿司匹林、雙水楊酯具有酰胺鍵：吲哚美辛、吡羅昔康、對(duì)乙酰氨基酚◆利用其水解得到酸和醇的性質(zhì)可進(jìn)行鑒別◆利用酯水解定量消耗氫氧化鈉的性質(zhì)，可用水解后剩余滴定法測(cè)定含量◆芳酸類藥物還應(yīng)檢查因水解而引入的特殊雜質(zhì)

3.UV：具有苯環(huán)，所以具有紫外吸收。吸收帶E1帶：

*184nm(

＞10000)E2帶：

*203nm(

≈7400)B帶：

*254nm(≈200)苯在環(huán)己烷中的紫外吸收光譜

4.IR：具有苯環(huán)，所以具有紫外吸收。乙苯的紅外光譜圖苯環(huán)的=C-H伸縮振動(dòng)烷基-C-H伸縮振動(dòng)苯環(huán)的骨架振動(dòng)1600~1450cm-1苯環(huán)上取代基彎曲振動(dòng)5.基團(tuán)或元素特性：對(duì)乙酰氨基酚的酚羥基酮洛芬的二苯甲酮與苯肼縮合顯色美洛昔康中的硫元素顯色反應(yīng)沉淀反應(yīng)紅外紫外吸收色譜法第二節(jié)鑒別試驗(yàn)第二節(jié)鑒別試驗(yàn)一、FeCl3反應(yīng)紫堇色配合物1.水楊酸反應(yīng)++反應(yīng)適宜條件：

反應(yīng)溶液pH4~6(強(qiáng)酸易使配合物分解)反應(yīng)宜在稀溶液中進(jìn)行一、三氯化鐵反應(yīng)（顯色反應(yīng)）水楊酸反應(yīng)藥物試驗(yàn)方法結(jié)果水楊酸水溶液紫堇色阿司匹林加熱水解后反應(yīng)紫堇色雙水楊酯氫氧化鈉試液中煮沸紫色二氟尼柳溶于乙醇深紫色2、酚羥基反應(yīng)對(duì)乙酰氨基酚水溶液藍(lán)紫色吡羅昔康三氯甲烷溶液玫瑰紅色美洛昔康三氯甲烷溶液淡紫紅色

酮洛芬

具有二苯甲酮結(jié)構(gòu)，酸性條件下與二硝基苯肼縮合生成橙色偶氮化合物二、縮合反應(yīng)三、重氮化－耦合反應(yīng)（芳香伯胺類的特征鑒別反應(yīng)）對(duì)氨基水楊酸鈉具有芳伯胺基結(jié)構(gòu)，在鹽酸酸性溶液中，與亞硝酸鈉試液發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成重氮鹽，與堿性β-萘酚偶合產(chǎn)生橙紅色沉淀。橙黃～猩紅色-

對(duì)乙酰氨基酚的鑒別（間接）三、氧化反應(yīng)甲芬那酸＋H2SO4

深藍(lán)色△黃色并產(chǎn)生綠色熒光隨即變?yōu)樽鼐G色四、氧化反應(yīng)四、水解反應(yīng)阿司匹林五、水解反應(yīng)六、紫外分光光度法1.最大吸收波長(zhǎng)法：丙磺舒(20μg/ml,95%乙醇溶液)

λmax=225nm,249nm;A249nm≈0.67最大2.吸光度法：甲酚那酸(20μg/ml,1mol/L鹽酸-甲醇1:99)

λmax=279nm,350nm;A279nm≈0.69~0.74,A350nm≈0.56~0.604.吸收度比值法：二氟尼柳(20μg/ml,0.1mol/L鹽酸

乙醇)

λmax1=251nm;

λmax2=315nm A1/A2=4.2～4.63.最大與最小吸收波長(zhǎng)法：布洛芬(0.25mg/ml,0.4%氫氧化鈉溶液)

λmax=265nm,273nm;

λmin=245nm,271nm;

λsh=259nm七、紅外光譜法八、薄層色譜法九、高效液相色譜法（阿司匹林片、泡騰片、腸溶片、腸溶膠囊）第三節(jié)、特殊雜質(zhì)檢查副產(chǎn)物ASA阿司匹林一、阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查Salicyclicacid1.游離水楊酸目的：乙?；煌耆蛩猱a(chǎn)生對(duì)人體有毒性的水楊酸，結(jié)構(gòu)中酚羥基易被氧化，生成有色的醌型物質(zhì)，使藥物成品變色原理：①05年版藥典：水楊酸結(jié)構(gòu)中有游離的酚羥基，在酸性的條件下與高鐵鹽反應(yīng)生成紫堇色（可以檢出1μg的水楊酸）檢查方法05版藥典檢查原理:

對(duì)照比色法靈敏度:1g②10年版藥典：反相法，為防止阿司匹林水解，用1%冰醋酸甲醇溶液制備供試品，外標(biāo)法計(jì)算限量（HPLC法）

原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林腸溶片：1.5%；阿司匹林腸溶膠囊：1.0%泡騰片、阿司匹林栓：3.0%①未反應(yīng)完全的酚類②水楊酸精制時(shí)溫度過高產(chǎn)生脫羧副反應(yīng)的苯酚③合成工藝過程中由副反應(yīng)生成的醋酸苯酯、水楊酸苯酯和乙酰水楊酸苯酯等10年版藥典：反相色譜法，采用不加校正因子的主成分自身對(duì)照法，所有雜質(zhì)峰（要扣除水楊酸峰）之和不得大于對(duì)照液主成分峰面積（P208)2.有關(guān)物質(zhì)第四節(jié)

含量測(cè)定含量測(cè)定一、酸堿滴定法直接滴定法水解后剩余滴定法兩步滴定法非水溶液滴定法二、紫外分光光度法1.直接紫外分光光度法2.柱分配色譜－紫外分光光度法三、高效液相色譜法第四節(jié)、含量測(cè)定一、酸堿滴定法（一）

直接滴定法

原理：阿司匹林具有游離羧基，具有酸性，以標(biāo)準(zhǔn)堿滴定液直接滴定COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O反應(yīng)摩爾比為1∶1阿司匹林ChP

取本品約0.4g，精密稱定，加中性乙醇（對(duì)酚酞指示液顯中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氫氧化鈉滴定液（0.1mo1/L）相當(dāng)于18.02mg的C9H8O4。堿性區(qū)變色測(cè)定方法及計(jì)算滴定度(titer)——單位容量滴定液相當(dāng)于被測(cè)物質(zhì)的質(zhì)量aA+bB

cC+dD優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)便、快速缺點(diǎn)：酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定） 酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸超限時(shí)）適用范圍：不能用于含水楊酸過高或制劑分析，只能用于合格原料藥的含量測(cè)定溫度對(duì)滴定結(jié)果影響不大中性乙醇①溶解供試品；②防止酯水解；③“中性”是對(duì)中和法所用指示劑而言第四節(jié)、含量測(cè)定（二）水解后剩余滴定法－酯的一般含量測(cè)定方法原理：阿斯匹林酯結(jié)構(gòu)在堿性溶液中易于水解，加入定量過量的氫氧化鈉滴定液，加熱使酯水解,剩余的堿用酸回滴。2NaOH（過量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：特點(diǎn)：消除了酯鍵水解的干擾注意：需做空白試驗(yàn)校正，原因：NaOH在加熱時(shí)易吸收CO2，影響結(jié)果方法：每1mL的氫氧化鈉滴定液(0.5mol/L)相當(dāng)于45.04mg的C9H8O41.5gNaOH滴定液(0.5mol/L)50ml煮沸10min/酚酞指示液3滴H2SO4滴定液(0.25mol/L)3.討論：空白試驗(yàn)——?dú)溲趸c受熱時(shí)易吸收CO2酸回滴定時(shí)消耗減少,結(jié)果偏高(三)水解后剩余滴定法滴定度——阿司匹林:氫氧化鈉(0.5mol/L)(1:2)T=1/2×0.5×180.16=45.04mg/mL第四節(jié)、含量測(cè)定（四）

兩步滴定法－適用于阿斯匹林片劑片劑穩(wěn)定劑（酒石酸或枸櫞酸）+分解產(chǎn)物（水楊酸和醋酸）第一步中和第四節(jié)、含量測(cè)定第二步水解后剩余滴定水解剩余滴定2NaOH（過量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O

反應(yīng)摩爾比為1∶1

本法消除了酸性穩(wěn)定劑的干擾，降低了酯鍵水解的干擾

終點(diǎn)：溶液顯粉紅色每1ml的NaOH滴定液(0.lmol/L)相當(dāng)于18.02mg的阿司匹林（C9H8O4）。片劑含量測(cè)定結(jié)果的計(jì)算吡羅昔康具有吡啶環(huán)，顯弱堿性，采用冰醋酸做溶劑，高氯酸為滴定液測(cè)定（四）非水溶液滴定法第七章P229HPLC法用于測(cè)量阿司匹林栓劑的含量1.色譜條件

色譜柱：C18柱（填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠）

流動(dòng)相：乙腈：四氫呋喃：冰醋酸:水=20：5：5：70

檢測(cè)波長(zhǎng)：276nm

2.系統(tǒng)適用性

理論塔板數(shù)（n）：按阿司匹林峰計(jì)應(yīng)不低于3000

分離度：阿司匹林、水楊酸之間的分離度（Rs)應(yīng)大于1.53、計(jì)算方法：外標(biāo)法抑制阿司匹林的解離三、高效液相色譜法本章小結(jié)TEXT分類和理化性質(zhì)鑒別試驗(yàn)體內(nèi)藥物分析一、典型藥物與結(jié)構(gòu)特點(diǎn)二、主要理化性質(zhì)酸性水解性吸收光譜基團(tuán)或元素特性一、與鐵鹽的反應(yīng)二、重氮化-偶合反應(yīng)三、氧化反應(yīng)四、水解反應(yīng)五、分解反應(yīng)六、紫外吸收光譜七、紅外吸收光譜一、阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查二、甲芬那酸中2,3-二甲基苯胺的檢查三、二氟尼柳中有關(guān)物質(zhì)的檢查四、對(duì)乙酰氨基酚有關(guān)雜質(zhì)檢查一、酸堿滴定法1直接滴定法2水解后剩余滴定法3兩步滴定法二、UV法直接UV法柱分配色譜-UV法三、HPLC法特殊雜質(zhì)檢查含量測(cè)定分類與理化性質(zhì)一、血漿中阿司匹林和水楊酸的HPLC測(cè)定法二、人血漿中布洛芬的HPLC測(cè)定與立體選擇性代謝研究1.阿司匹林片規(guī)格為0.3g，含阿司匹林（M=180.2）應(yīng)為標(biāo)示量的95%～105%，現(xiàn)用氫氧化鈉滴定液（