生物樣品采集（食品微生物樣本采集）

第二章采樣及抽樣單項技術(shù)2-1項目1固體樣品采集2-2項目2液體樣品采集2-3項目3氣體樣品采集2-4項目4生物樣品采集2-5項目5樣品抽取2-6項目6樣品交接流轉(zhuǎn)過程（一）肉與肉制品樣品的采集與制備1、樣品的采取a、生肉及臟器檢樣屠宰后的畜肉，于開腔后，用無菌刀取兩腿內(nèi)側(cè)肌肉各50g（或劈半后取兩側(cè)背最長肌肉各50g）；冷藏或銷售的生肉，用無菌刀取腿肉或其他部位肌肉100g。檢樣采取后放入無菌容器內(nèi)，立即送檢，不超過3h。送檢時應(yīng)冷藏，不得加入任何防腐劑。檢樣送往化驗室應(yīng)立即檢驗或放置冰箱暫存。五、食品微生物檢樣樣品的采集與制備實例b、禽類（包括家禽和野禽）鮮、凍家禽采取整只，放無菌容器內(nèi)；帶毛野禽可放清潔容器內(nèi)，立即送檢。（一）肉與肉制品樣品的采集與制備1、樣品的采取c、各類熟肉制品包括醬鹵肉、肴肉、方圓腿、熟灌腸、熏烤肉、肉松、肉脯、肉干等，一般采取250g；熟禽采取整只。均放無菌容器內(nèi)，立即送檢。（一）肉與肉制品樣品的采集與制備1、樣品的采取d、臘腸、香肚等生灌腸采取整根、整只，小型的可采數(shù)根、數(shù)只，其總量不少于250g。（一）肉與肉制品樣品的采集與制備1、樣品的采取2、檢樣的處理a、生肉及臟器檢樣的處理先將檢樣進(jìn)行表面消毒（在沸水內(nèi)燙3s~5s，或灼燒消毒），再用無菌剪剪取檢樣深層肌肉25g，放入無菌乳缽內(nèi)用滅菌剪剪碎后，加滅菌海砂或玻璃砂或玻璃砂研磨，磨碎后加入滅菌水225mL，混勻后即為1:10稀釋液。（一）肉與肉制品樣品的采集與制備2、檢樣的處理b、鮮、凍家禽檢樣的處理先將檢樣進(jìn)行表面消毒，用滅菌剪或刀去皮后，剪取肌肉25g（一般可從胸部或腿部剪?。韵绿幚硗?。帶毛野禽去毛后，同家禽檢樣處理。（一）肉與肉制品樣品的采集與制備c、各類熟肉制品檢樣的處理直接切取或稱取25g，以下處理同生肉。（一）肉與肉制品樣品的采集與制備2、檢樣的處理d、臘腸、香腸等生灌腸檢樣處理先對生灌腸表面進(jìn)行消毒，用滅菌剪取內(nèi)容物25g，以下處理同生肉。（一）肉與肉制品樣品的采集與制備2、檢樣的處理（一）肉與肉制品樣品的采集與制備2、檢樣的處理注：以上樣品的采集和送檢及檢樣的處理均以檢驗肉禽及其制品內(nèi)的細(xì)菌含量從而判斷其質(zhì)量鮮度為目的。如須檢驗肉禽及其制品受外界環(huán)境污染的程度或檢索其是否帶有某種致病菌，應(yīng)用棉拭采樣法。

3、棉拭采樣法和檢樣處理一般用板孔5cm2的金屬制規(guī)板，壓在受檢物上，將滅菌棉拭稍沾濕，在板孔5cm2的范圍內(nèi)揩抹多次，然后將板孔規(guī)板移壓另一點，用另一棉拭揩抹，如此共移壓揩抹10次，總面積50cm2。每支棉拭在揩抹完畢后立即剪斷或燒斷后投入盛50ml滅菌水的三角瓶或大試管中，立即送檢。檢驗時充分振搖瓶、管中液體，作為原液，再作10倍遞增稀釋。檢驗致病菌，不必用規(guī)板，在可疑部位用棉拭揩抹即可。（一）肉與肉制品樣品的采集與制備a、散裝或大型包裝的乳品

用滅菌刀、勺取樣，在移采另一件樣品前，刀、勺清洗滅菌。采樣時應(yīng)注意部位的代表性。每件樣品數(shù)量不少于200g，放入滅菌容器內(nèi)及時送檢。鮮乳一般不應(yīng)超過3h，在氣溫較高或路途較遠(yuǎn)的情況下應(yīng)進(jìn)行冷藏，不得使用任何防腐劑。（二）乳與乳制品樣品的采集與制備1、樣品的采取和送檢b、小型包裝的乳品應(yīng)采取整件包裝，采樣時應(yīng)注意包裝的完整。各種小型包裝乳與乳制品，每件樣品量為：生奶1瓶或1包；消毒奶1瓶或1包；奶粉1瓶或1包（大包裝者200g）；奶油1塊（113g）；酸奶1瓶或1罐；煉乳1瓶或1罐；奶酪1個。c、成批產(chǎn)品對成批產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量鑒定時，其采樣數(shù)量每批以千分之一計算，不足千件者抽取1件。（二）乳與乳制品樣品的采集與制備1、樣品的采取和送檢a、鮮奶、酸奶

無菌操作去掉瓶口的紙罩紙蓋，瓶口火焰消毒，以無菌操作吸取25ml檢樣，放入裝有225ml滅菌生理鹽水的三角瓶內(nèi)，振搖均勻（酸乳如有水分析出于表層，應(yīng)先去除）。（二）乳與乳制品樣品的采集與制備2、檢樣的處理b、煉乳

將瓶或罐先用溫水洗凈表面，再用點燃酒精棉球消毒瓶或罐的上表面，然后用滅菌的開罐器打開罐（瓶），以無菌操作稱取25g（ml）檢樣，放入裝有225ml滅菌生理鹽水的三角燒瓶內(nèi)，振搖均勻。（二）乳與乳制品樣品的采集與制備2、檢樣的處理c、奶油無菌操作打開包裝，取適量檢樣于滅菌三角燒瓶內(nèi)，450C水浴或溫箱中加溫溶解，用滅菌吸管取25mL奶油放入含225ml滅菌生理鹽水或滅菌奶油稀釋液的燒瓶（瓶裝稀釋液應(yīng)預(yù)置于450C水浴中保溫，10倍遞增稀釋時所用稀釋液亦同），振搖均勻，從檢樣融化到接種完畢時間不應(yīng)超過30min。注：奶油稀釋液：格林氏液（配法：氯化鈉9g、氯化鉀0.12g、氯化鈣0.24g、碳酸氫鈉0.2g、蒸餾水1000ml）250mL、蒸餾水750ml、瓊脂1g、加熱溶解，分裝每瓶225ml，1210C滅菌15min。

（二）乳與乳制品樣品的采集與制備2、檢樣的處理d、奶粉罐裝奶粉的開罐取樣法同煉乳，袋裝奶粉應(yīng)用蘸有75%酒精的棉球涂擦消毒袋口，以無菌操作開封取樣，稱取檢樣25g，放入裝有適量玻璃珠的滅菌三角燒瓶內(nèi)，將225ml溫?zé)岬臏缇睇}水徐徐加入（先用少量生理鹽水將奶粉調(diào)成糊狀，再全部加入，以免奶粉結(jié)塊），振搖使充分溶解和混勻。（二）乳與乳制品樣品的采集與制備2、檢樣的處理e、奶酪先用滅菌刀削去部分表面封蠟，用點燃的酒精棉球消毒表面，然后用滅菌刀切開奶酪，以無菌操作切取表層和深層檢樣各少許，置于滅菌乳缽內(nèi)切碎，加入少量生理鹽水研成糊狀。（二）乳與乳制品樣品的采集與制備2、檢樣的處理（三）調(diào)味品的采集與制備瓶裝樣品：用點燃的酒精棉球燒灼瓶口滅菌，石碳酸紗布蓋好，再用滅菌開瓶器啟開，袋裝樣品用７５％酒精棉球消毒袋口后進(jìn)行檢驗。（三）調(diào)味品的采集與制備醬類：用無菌操作稱?。玻担?，放入滅菌容器內(nèi)，加入２２５ｍｌ滅菌蒸餾水；或者吸取醬油２５ｍ１，加入滅菌２２５ｍＬ蒸餾水，制成混懸液。（三）調(diào)味品的采集與制備食醋：用20%－30%滅菌碳酸鈉溶液調(diào)ｐＨ到中性。（四）蛋和蛋制品樣品的采集與制備鮮蛋、皮蛋等：用流水沖洗外殼，再用75%酒精棉涂查消毒后放入無菌容器中，按照檢樣要求，加入滅菌生理鹽水，用滅菌棉拭子充分擦拭蛋殼，檢驗擦洗液。（五）清涼飲料樣品的采集與制備5.3檢樣的處理5.3.1瓶裝飲料：用點燃的酒精棉球燒灼瓶口滅菌，用石碳酸紗布蓋好，塑料瓶口可用75%酒精棉球擦拭滅菌，用滅菌開瓶器將蓋啟開，含有二氧化碳的飲料可倒入另一滅菌容器內(nèi)，口勿蓋緊，覆蓋一滅菌紗布，輕輕搖蕩。待氣體全部逸出后，進(jìn)行檢驗。

（五）清涼飲料樣品的采集與制備5.3檢樣的處理5.3.2冰棍：用滅菌鑷子除去包裝紙，將冰棍部分放入滅菌磨口瓶內(nèi)，木棒留在瓶外，蓋上瓶蓋，用力抽出木棒，或用滅菌剪子剪掉木棒，置45℃水浴30min，溶化后立即進(jìn)行檢驗。

（五）清涼飲料樣品的采集與制備5.3檢樣的處理5.3.3冰淇淋：放在滅菌容器內(nèi)，待其溶化，立即進(jìn)行檢驗。（六）糖果糕點樣品的采集與制備6.1樣品的采取和送檢糕點、果脯可用滅菌鑷子夾取不同部位樣品,放入滅菌容器內(nèi),糖果采取原包裝樣品,采取后立即送檢。6.2樣品采取量糕點、果脯采取200g,糖果采取100g。（六）糖果糕點樣品的采集與制備6.3檢樣處理糕點:如為原包裝,用滅菌鑷子夾下包裝紙,采取外部及中心部位。如為帶餡糕點,取外皮及內(nèi)餡25g,奶花糕點,采取奶花及糕點部分各一半共25g,加入225mL滅菌生理鹽水中,制成混懸液。果脯:采取不同部位稱取25g檢樣,加入滅菌生理鹽水225mL,制成混懸液。（六）糖果糕點樣品的采集與制備6.3檢樣處理糖果:用滅菌鑷子夾取包裝紙,稱取數(shù)塊共25g,加入預(yù)溫至45℃的滅菌生理鹽水225mL,等溶化后檢驗。（七）酒類樣品的采集與制備用點燃