細菌的接種和注意事項終極版

關(guān)于細菌的接種和注意事項終極版第2頁,共34頁，2024年2月25日，星期天滅菌接種環(huán)1.要充分滅菌接種環(huán)，以免污染其標本。2.要適當冷卻再取標本，以免帶不出標本中的菌種。第3頁,共34頁，2024年2月25日，星期天第4頁,共34頁，2024年2月25日，星期天取標本1.蘸取標本時應適量，以免標本太少漏檢。2.液體標本，如尿液，應注意混勻。第5頁,共34頁，2024年2月25日，星期天接種1.細菌的接種方法有很多，如平板劃線法、斜面接種法、穿刺接種法，等等。但我們用的最多的是：★平板劃線法—意義指把混雜在一起的微生物，用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線，稀釋得到較多的獨立分布的單個菌落，即將樣本在固體培養(yǎng)基表面多次做由點到線稀釋而達到分純的目的。第6頁,共34頁，2024年2月25日，星期天★一區(qū)：所占區(qū)域大約是平板面積的1/5~1/4二區(qū)：由一區(qū)向二區(qū)帶出三四條平行線三區(qū)：由二區(qū)引出三四次，但三區(qū)面積最大第7頁,共34頁，2024年2月25日，星期天第8頁,共34頁，2024年2月25日，星期天CO2在細菌培養(yǎng)中的意義第9頁,共34頁，2024年2月25日，星期天1有些細菌在初次分離培養(yǎng)時，需要5﹪-10﹪的CO2。因為細菌在生長過程中能夠分解培養(yǎng)基中的某些含氮物質(zhì)產(chǎn)生氮，對該菌有殺滅作用，而CO2能中和細菌產(chǎn)生的氮，以減少對細菌的毒性。如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布魯菌等。

2.為細菌提供碳源，促進細菌的生長。如肺炎鏈球菌，草綠色鏈球菌。在細菌室的培養(yǎng)箱上有一個CO2的開關(guān)，為什么要用CO2呢？第10頁,共34頁，2024年2月25日，星期天常見細菌的鑒別及其特點第11頁,共34頁，2024年2月25日，星期天陽性球菌葡萄球菌---金黃色葡萄球菌第12頁,共34頁，2024年2月25日，星期天金葡特點是人類化膿性感染最常見的病原菌，可以引起局部感染，也可以引起全身感染。血漿凝固酶，陽性。血平板上呈黃色菌落，大而凸起，表面光滑，有β溶血環(huán)。G+陽性球菌，葡萄狀排列，無芽孢，無莢膜。1.2.3.4.第13頁,共34頁，2024年2月25日，星期天葡萄球菌---表面葡萄球菌第14頁,共34頁，2024年2月25日，星期天表葡特點正常存在于人體皮膚、黏膜表面，多見于院內(nèi)感染，如體內(nèi)異物留置，靜脈導管等血漿凝固酶，陰性表葡形態(tài)同金葡相似，但是為白色、扁平菌落，無溶血環(huán)1.2.3.3.第15頁,共34頁，2024年2月25日，星期天鏈球菌

常見的鏈球菌主要有化膿性鏈球菌、草綠色鏈球菌、肺炎鏈球菌。

根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)不同可以把鏈球菌分為A、B、C、D等二十個群，但對人類有致病性的大多數(shù)屬于A群，少量屬于B群。第16頁,共34頁，2024年2月25日，星期天根據(jù)在血平板上溶血分為以下三種：甲型（α型）溶血性鏈球菌，又稱草綠色鏈球菌，菌落周圍有草綠色溶血環(huán)，致病力弱，是條件致病菌。乙型（β型）溶血性鏈球菌，產(chǎn)生強烈的溶血毒素，在血平板上可使菌落周圍出現(xiàn)2～4mm的無色透明溶血環(huán)。丙型（r-）鏈球菌，菌落周圍無溶血環(huán)，又叫不溶血性鏈球菌，通常不致病。

第17頁,共34頁，2024年2月25日，星期天肺炎鏈球菌菌落特點：在血平板上0.5～1.5mm,灰白色半透明，表面光滑，扁平，周圍環(huán)繞草綠色溶血環(huán)，培養(yǎng)放置24h以上的菌落，還會因為產(chǎn)生自溶酶的作用，而致菌落中央塌陷而邊緣隆起，呈臍窩狀。第18頁,共34頁，2024年2月25日，星期天肺炎鏈球菌、Ａ群、Ｂ群的區(qū)分：

Ｏpt試驗抑菌環(huán)>14,鑒定為肺鏈＋桿菌肽試驗－＋－Ａ群CAMP試驗＋B群第19頁,共34頁，2024年2月25日，星期天Opt實驗第20頁,共34頁，2024年2月25日，星期天桿菌肽實驗第21頁,共34頁，2024年2月25日，星期天11第22頁,共34頁，2024年2月25日，星期天葡萄球菌與鏈球菌的鑒別：1.涂片—涂片革蘭染色，葡萄球菌呈葡萄串樣，鏈球菌呈鏈狀。2．M-H試驗—當染片不能區(qū)別時，接種到M-H平板，長成菌落之后，可挑單個菌落做觸酶試驗，+是葡萄球菌，－是鏈球菌。第23頁,共34頁，2024年2月25日，星期天腸球菌腸球菌屬特點：Ｇ+，成圓球形或橢圓形，單個，成對，或短鏈，均可。在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑，0.5~1.0mm大小的菌落，可有溶血現(xiàn)象。第24頁,共34頁，2024年2月25日，星期天以糞腸球菌和屎腸球菌為常見：

阿拉伯糖山梨醇屎腸球菌陽性陰性糞腸球菌陰性陽性

第25頁,共34頁，2024年2月25日，星期天陰性桿菌大腸桿菌：G-桿菌，有鞭毛、菌毛，無芽胞。菌落2~3mm,圓形凸起，灰白濕潤，光滑半透明，邊緣整齊。某些菌落可產(chǎn)生有透明溶血環(huán)。第26頁,共34頁，2024年2月25日，星期天鮑曼不動桿菌菌落特點：圓形、凸起光滑、邊緣整齊不透明、灰白色有粘性的菌落多數(shù)菌落不溶血在中國蘭上為粉紅色菌落第27頁,共34頁，2024年2月25日，星期天菌落特點：較大菌落、凸起、灰白色黏液型、相鄰菌落容易發(fā)生融合可挑出長絲狀細絲肺炎克雷伯桿菌

第28頁,共34頁，2024年2月25日，星期天變形桿菌遷徙生長菌落特點：G-，兩邊鈍圓，有明顯的多形性，呈球形或絲狀，無芽胞無莢膜，有鞭毛，運動活潑。普通變形桿菌和奇異變形桿菌的大多數(shù)菌株呈遷徙擴散生長，迅速彌漫。波紋狀薄膜布滿整個培養(yǎng)基表面。第29頁,共34頁，2024年2月25日，星期天嗜麥芽假單胞菌菌落特點：G-桿菌，細長略彎曲。不透明，灰黃色菌落，在血平板上可產(chǎn)生氨味。本菌氧化酶陰性，與大多數(shù)假單胞菌不同。第30頁,共34頁，2024年2月25日，星期天在普通瓊脂培養(yǎng)基上能產(chǎn)生水溶性綠色素，使整個培養(yǎng)基變?yōu)榫G色菌落灰綠色、半透明、大而扁平、表面濕潤、邊緣不齊；有金屬光澤；有生姜樣芳香氣味；菌落周圍有寬大的蘭綠色透明溶血環(huán)。銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌第31頁,共34頁，2024年2月25日，星期天流感嗜血桿菌、副流感嗜血桿菌在巧克力平板上生長，菌落為灰白色，扁平，半透明的小菌落第32頁,共34頁，