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分子生物學(xué)復(fù)習(xí)資料第二章nucleicacid(核酸)一以核苷酸為基本組成單位的生物信息大分子,包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)兩大類。DNA存在于細(xì)胞核和線粒體內(nèi),攜帶遺傳信息,決定著細(xì)胞和個(gè)體的遺傳型;RNA存在于細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核和線粒體內(nèi),參與遺傳信息的復(fù)制與表達(dá)。unusualcomponent(稀有堿基)又稱修飾堿基(themodifiedcomponent)指上述五種堿基環(huán)上的某一位置被一些化學(xué)基團(tuán)(如甲基化、甲硫基化等)修飾后的衍生物。一般這些堿基在核酸中的含量稀少,在各種類型核酸中的分布也不均一。如DNA中的修飾堿基主要見于噬菌體DNA,RNA中以tRNA含修飾堿基最多。Ribose戊糖RNA:D-核糖 DNA:D-2-脫氧核糖D-核糖的C-2所連的-OH脫去氧就是D-2脫氧核糖B-DNA:生理?xiàng)l件下最穩(wěn)定的結(jié)構(gòu);A-DNA:脫水條件下DNA雙螺旋、及生理?xiàng)l件下的RNA雙螺旋和DNA-RNA雜合雙螺旋中。結(jié)構(gòu)特征:右手雙螺旋、螺旋直徑2.6nm、螺距2.5nm,11個(gè)堿基/周;Z-DNA:存在于CGCGCGCG結(jié)晶體結(jié)構(gòu)中。結(jié)構(gòu)特征:左手螺旋、螺旋直徑1.8nm、螺距4.5nm、12堿基/周、核酸鏈骨架顯Z字型走行。Supercoil(超螺旋):在共價(jià)閉環(huán)雙螺旋基礎(chǔ)上進(jìn)一步扭轉(zhuǎn)盤曲,形成超螺旋Chromosome(染色體)一獨(dú)立攜帶必需遺傳信息的DNA分子,并包括決定其結(jié)構(gòu)的有關(guān)蛋白質(zhì)。Chromatin(染色質(zhì)):真核生物染色體都包含一個(gè)很長(zhǎng)的線性DNA分子,并被組裝在細(xì)胞核內(nèi)。染色質(zhì)用來(lái)描述構(gòu)成真核生物染色體的高度有序的DNA—蛋白質(zhì)復(fù)合物。染色質(zhì)結(jié)構(gòu)用來(lái)包裝和組構(gòu)染色體DNA,并能在細(xì)胞周期的不同階段調(diào)整壓縮DNA的水平。Centromere(著絲粒)一兩條染色單體相連的區(qū)域Telomere(端粒)一一條染色體的兩個(gè)末端染色粒之一,用于保持真核生物染色體末端穩(wěn)定性的DNA片段Chromatid(染色單體)一由染色體復(fù)制產(chǎn)生的兩股染色單體中之一,它們由著絲粒拉在一起,在有絲分裂時(shí),染色單體變成分離的染色體。雙鏈RNA(dsRNA)誘導(dǎo)序列特異的轉(zhuǎn)錄后基因沉默。其作用具有放大和持續(xù)的特點(diǎn).Denaturation(核酸的變性)在某些理化因素作用下,核酸分子互補(bǔ)雙鏈之間氫鍵斷裂,使雙螺旋結(jié)構(gòu)松散變成單鏈的過程。如:溫度、酸堿、有機(jī)溶劑、尿素hyperchromiceffect(增色效應(yīng))核酸在加熱變性過程中260nm波長(zhǎng)吸收值(A260)增加。它反映了核酸雙鏈的解鏈程度。meltingtemperature,Tm(解鏈溫度或熔解溫度) 核酸加溫變性過程中,A260達(dá)到最大值一半時(shí)的溫度。在Tm時(shí),核酸分子內(nèi)50%的雙鏈結(jié)構(gòu)被解開。Renaturation(核酸的復(fù)性)又稱退火(annealing):變性核酸在一定條件下,如溫度逐步恢復(fù)到生理范圍內(nèi),兩條互補(bǔ)單鏈重新恢復(fù)天然的雙螺旋構(gòu)象。Hypochromicity(減色效應(yīng)):?jiǎn)我坏暮塑账岬奈罩当萊NA和單鏈DNA的吸收值都大,單鏈DNA又比雙鏈DNA大。這種雙鏈DNA相對(duì)于單鏈DNA吸收值減少的現(xiàn)象稱為減色效應(yīng)molecularhybridization(分子雜交):不同來(lái)源的核酸經(jīng)變性和復(fù)性的過程,其中一些不同的核苷酸單鏈由于存在局部堿基互補(bǔ)片段,而在復(fù)性時(shí)形成雜化雙鏈(heteroduple_)的過程。Probe(分子探針):帶有某種標(biāo)記物的分子,如核苷酸鏈片段。第三章peptidebone(肽鍵)一個(gè)氨基酸的?-羧基與另一個(gè)氨基酸的?-氨基之間脫水縮合形成的化學(xué)鍵。peptideunit(肽平面——肽單元)參與構(gòu)成肽鍵的6個(gè)原子(C?1、C、O、N、H、C?2)被約束在同一個(gè)平面上,C?1和C?2處平面對(duì)角,這樣的平面單位稱為肽平面。Conformation(構(gòu)象):指一類不涉及共價(jià)鍵改變的立體結(jié)構(gòu)問題。如蛋白質(zhì)的一、二、三、四級(jí)結(jié)構(gòu)。configuration(構(gòu)型):指一類涉及共價(jià)鍵改變的立體結(jié)構(gòu)問題。如氨基酸的L-型和D-型。Primarystructure(一級(jí)結(jié)構(gòu))指多肽鏈中氨基酸的排列順序稱為蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)。Secondarystructure(二級(jí)結(jié)構(gòu))指多肽鏈主鏈以肽平面為單位折疊形成局部肽段的空間排布方式。即主鏈原子的局部空間排布(即構(gòu)象),并不涉及側(cè)鏈部分的位置-heli_(?-螺旋)蛋白質(zhì)分子中局部肽鏈的肽平面通過a碳原子旋轉(zhuǎn),使碳鏈主鏈沿中心軸盤曲成穩(wěn)定的右手螺旋構(gòu)象-pleatedsheet(?-折疊)多肽鏈的局部肽段,以肽鍵平面為單位折疊成鋸齒狀的一種較伸展結(jié)構(gòu).-turn(?-轉(zhuǎn)角)多肽鏈中的某局部出現(xiàn)180度回折處形成的特定構(gòu)象randomcoil(無(wú)規(guī)則卷曲)沒有明確規(guī)律性的那部分肽段的結(jié)構(gòu)。但這些一無(wú)規(guī)則卷曲口也象其他二級(jí)結(jié)構(gòu)那樣是明確而穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。即蛋白質(zhì)在其多肽鏈的不同區(qū)段可形成不同的二級(jí)結(jié)構(gòu)。supersecondarystructure(超二級(jí)結(jié)構(gòu))即模體(motif)是指在多肽鏈內(nèi)順序上相互靠近的二級(jí)結(jié)構(gòu)常常在空間折疊中彼此相互作用,形成規(guī)則的二級(jí)結(jié)構(gòu)聚合體。Domain(結(jié)構(gòu)域)是指在較大蛋白質(zhì)分子中,由于多肽鏈上相鄰的超二級(jí)結(jié)構(gòu)緊密聯(lián)系,形成二個(gè)或多個(gè)在空間上可以明顯區(qū)別的局部區(qū)域(一般為球狀),常具有特定的功能。有時(shí)也稱功能域(functionaldomain)。tertiarystructure(三級(jí)結(jié)構(gòu))指在二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上,多肽鏈進(jìn)一步卷曲、折疊而形成具有一定規(guī)律的三維空間結(jié)構(gòu)。三級(jí)結(jié)構(gòu)是一條多肽鏈的完整的構(gòu)象,包括全部的主鏈和側(cè)鏈的專一性的空間排布。Quaternarystructure(四級(jí)結(jié)構(gòu))指具有二條或二條以上獨(dú)立三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽鏈組成的蛋白質(zhì),其多肽鏈間通過次級(jí)鍵相互結(jié)合,而形成空間結(jié)構(gòu)molecularchaperone(分子伴侶):為蛋白質(zhì)折疊提供一個(gè)有利的折疊環(huán)境,與未折疊肽段的疏水部分可逆結(jié)合,防止聚集和錯(cuò)誤折疊,誘導(dǎo)正確折疊。如熱休克蛋白(heatshockprotein)等denaturation(蛋白質(zhì)的變性)天然蛋白質(zhì)的嚴(yán)密結(jié)構(gòu)在某些理化因素的作用下,其特定的空間結(jié)構(gòu)破壞,從而導(dǎo)致質(zhì)理化性質(zhì)改變和生物學(xué)活性喪失renaturation(復(fù)性)若蛋白質(zhì)變性程度較輕,去除變性因素后,有些蛋白質(zhì)仍可恢復(fù)或部分恢復(fù)其原有的構(gòu)象和功能。densitygradient(密度梯度):密度隨距離不同而改變,尤其指在試管或小室中,溶液的密度從一端向另一端改變。densitygradientzonalcentrifugation(密度梯度離心):為了制備或分析,將大分子通過密度梯度進(jìn)行離心的方法。Electrophoresis(電泳)蛋白質(zhì)在高于或低于其等電點(diǎn)(pI)的溶液中為帶電的顆粒,在電場(chǎng)中能向正極或負(fù)極移動(dòng)。通過蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中泳動(dòng)而達(dá)到分離各種蛋白質(zhì)的目的。Chromatography(層析)待分離蛋白質(zhì)溶液(流動(dòng)相)經(jīng)過一個(gè)固態(tài)物質(zhì)(固定相)時(shí),根據(jù)溶液中待分離的蛋白質(zhì)顆粒大小、電核多少及親和力等,使待分離的蛋白質(zhì)組分在兩相中反復(fù)分配,并以不同的速度流經(jīng)固定相而達(dá)到分離蛋白質(zhì)的目的。第四章Gene(基因):是指攜帶有遺傳信息的DNA或RNA序列,也稱為遺傳因子,是控制性狀的基本遺傳單位?;蛲ㄟ^指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成來(lái)表達(dá)自己所攜帶的遺傳信息,從而控制生物個(gè)體的性狀表現(xiàn)。codingregions(編碼區(qū)),開放閱讀框(openreadingframe,ORF):可以翻譯成蛋白質(zhì)的DNA區(qū)域;在真核細(xì)胞中,編碼區(qū)可被內(nèi)含子隔斷。internalnoncodingregions非編碼區(qū),非翻譯區(qū)(untranslatedregions,UTRs):轉(zhuǎn)錄單位中不能翻譯成蛋白質(zhì)的部分。在編碼區(qū)兩側(cè)的UTRs為5’和3'UTRs(或稱為前導(dǎo)和尾隨序列)。Operator(操縱子):包含幾個(gè)基因及其共同調(diào)控元件的細(xì)菌基因座Locus(基因座):又稱座位?;蛟谌旧w上所占的位置。在分子水平上,是有遺傳效應(yīng)的DNA序列。一個(gè)基因座可以是一個(gè)基因,一個(gè)基因的一部分,或具有某種調(diào)控作用的DNA序列。編碼在相同基因座上的DNA被稱為等位基因。E_on(外顯子):基因中編碼的序列,轉(zhuǎn)錄單位余下部分通過剪接結(jié)合起來(lái)并表達(dá)的區(qū)域,是基因中對(duì)應(yīng)于mRNA序列的區(qū)域。Intron(內(nèi)含子):基因中不編碼的、打斷轉(zhuǎn)錄單位的間插序列,必需在RNA水平上去除。Genome(基因組):生物機(jī)體一個(gè)細(xì)胞所有不同染色體上全部的DNA總和稱為基因組?;蚪M中不同區(qū)域具有不同的功能,有些是編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因,有些是復(fù)制及轉(zhuǎn)錄的調(diào)控信號(hào),有些區(qū)域的功能尚不清楚。Genomeinprokaryoticcell(原核生物基因組):環(huán)狀或線狀的雙鏈分子所含有的全部DNA,包括染色體外的質(zhì)?;蚪M。euKaryoticgenome(真核生物基因組):真核生物的基因組,包括染色體基因組和核內(nèi)染色體外基因組,以及細(xì)胞質(zhì)中的線粒體、葉綠體基因組等。C值(C-value):是指一個(gè)單倍體基因組中的全部DNA含量。C值矛盾(C-valueparado_):生物體形態(tài)學(xué)復(fù)雜程度與C值大小不一致的現(xiàn)象。uniquesequence(單拷貝序列):非重復(fù)序列,在基因組中只有一個(gè)拷貝-結(jié)構(gòu)基因。moderatelyrepetitivesequence(中度重復(fù)序列)幾十到幾十萬(wàn)個(gè)拷貝,一般是不編碼的序列satelliteDNA(衛(wèi)星DNA),隨體DNA:高度重復(fù)序列,百萬(wàn)次重復(fù),占總序列10-60%,6-100bp,不轉(zhuǎn)錄。invertedrepeatsequence(反向重復(fù)序列):兩個(gè)序列相同但方向相反在同一DNA鏈上互補(bǔ)拷貝的一段重復(fù)序列multigenefamily(多基因家族)真核生物基因組中許多來(lái)源相同、結(jié)構(gòu)相似、功能相關(guān)的一組基因。mutation(突變):在基因組的某一特定區(qū)域核苷酸序列發(fā)生改變而引起的基因型穩(wěn)定的可遺傳的改變。Mutant(突變體):帶有某一特定突變基因的基因組、細(xì)胞或個(gè)體。genemutation(基因突變):局部突變,即影響單個(gè)核苷酸或一小簇核苷酸。發(fā)生在某一基因內(nèi)部,會(huì)影響基因產(chǎn)物的性質(zhì)或干擾其表達(dá)。genetransfer(基因轉(zhuǎn)移):外源的遺傳信息進(jìn)入一個(gè)細(xì)胞的現(xiàn)象。這種過程在細(xì)菌和真核生物中都會(huì)自然發(fā)生接合(conjugation)指通過細(xì)胞的直接接觸(如菌毛),遺傳信息從供體單向轉(zhuǎn)移到受體的過程。轉(zhuǎn)化(transformation)細(xì)胞從周圍介質(zhì)中吸收裸露的DNA,而獲得新的遺傳表型。轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)通過病毒介導(dǎo)發(fā)生在供體細(xì)胞與受體細(xì)胞之間的DNA轉(zhuǎn)移及基因重組。轉(zhuǎn)座(transposition)由插入序列和轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移或重排。轉(zhuǎn)座子(transposon):在基因組中可以移動(dòng)的一段DNA序列。RecombinantDNA不同DNA之間發(fā)生共價(jià)連接形成新的DNA分子。重組產(chǎn)物為重組體DNA。位點(diǎn)特異性重組:由整合酶或轉(zhuǎn)座酶

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