色譜分析的一般步驟

關(guān)于色譜分析的一般步驟主要內(nèi)容色譜分析簡(jiǎn)介、分類及特點(diǎn)色譜分析的一般流程常見色譜儀的主要部件第2頁,共27頁，2024年2月25日，星期天1.色譜分析簡(jiǎn)介、分類及特點(diǎn)

色譜法（chromatography）又稱“色譜分析”、“色譜分析法”、“層析法”，是一種分離和分析方法。色譜原型裝置：俄國(guó)植物學(xué)家茨維特在1906年使用的裝置1.1簡(jiǎn)介1.2分類第3頁,共27頁，2024年2月25日，星期天色譜法簡(jiǎn)單分類第4頁,共27頁，2024年2月25日，星期天第5頁,共27頁，2024年2月25日，星期天高效液相色譜儀第6頁,共27頁，2024年2月25日，星期天平板色譜第7頁,共27頁，2024年2月25日，星期天色譜法的特點(diǎn)高分離度高速度高靈敏度高容量高靈活性高效率作為檢測(cè)手段作為制備手段分離方式眾多應(yīng)用范圍廣第8頁,共27頁，2024年2月25日，星期天2.色譜分析的一般流程樣品預(yù)處理前處理的目的都是一致的，就是提純目標(biāo)物，并使背景簡(jiǎn)單，使樣品適合檢測(cè)儀器的要求，提高檢出限，避免污染。一般有溶劑萃取、熱解吸、頂空、洗脫、酯化、衍生等等。氣相色譜預(yù)處理：化學(xué)衍生化、裂解色譜技術(shù)、分離與富集

第9頁,共27頁，2024年2月25日，星期天氣相色譜法的一般流程

第10頁,共27頁，2024年2月25日，星期天高效液相色譜分析的流程第11頁,共27頁，2024年2月25日，星期天由泵將儲(chǔ)液瓶中的溶劑吸入色譜系統(tǒng)，然后輸出，經(jīng)流量與壓力測(cè)量之后，導(dǎo)入進(jìn)樣器。被測(cè)物由進(jìn)樣器注入，并隨流動(dòng)相通過色譜柱，在柱上進(jìn)行分離后進(jìn)入檢測(cè)器，檢測(cè)信號(hào)由數(shù)據(jù)處理設(shè)備采集與處理，并記錄色譜圖。廢液流入廢液瓶。遇到復(fù)雜的混合物分離（極性范圍比較寬）還可用梯度控制器作梯度洗脫。這和氣相色譜的程序升溫類似，不同的是氣相色譜改變溫度，而HPLC改變的是流動(dòng)相極性，使樣品各組分在最佳條件下得以分離。第12頁,共27頁，2024年2月25日，星期天3.常見色譜儀的主要部件進(jìn)樣系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng)(色譜柱)檢測(cè)系統(tǒng)溫控系統(tǒng)記錄系統(tǒng)第13頁,共27頁，2024年2月25日，星期天氣相色譜儀的組成部分：載氣系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、檢測(cè)記錄系統(tǒng)。高效液相色譜儀組成部分：高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)及梯度洗脫等輔助裝置。第14頁,共27頁，2024年2月25日，星期天氣相色譜儀載氣系統(tǒng)包括氣源、凈化干燥管和載氣流速控制；常用的載氣有：氫氣、氮?dú)?、氦氣；凈化干燥管：去除載氣中的水、有機(jī)物等雜質(zhì)（依次通過分子篩、活性炭等）；載氣流速控制：壓力表、流量計(jì)、針形穩(wěn)壓閥，控制載氣流速恒定。第15頁,共27頁，2024年2月25日，星期天進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)：進(jìn)樣器+氣化室；

氣體進(jìn)樣器（六通閥）：推拉式和旋轉(zhuǎn)式兩種。試樣首先充滿定量管，切入后，載氣攜帶定量管中的試樣氣體進(jìn)入分離柱；第16頁,共27頁，2024年2月25日，星期天液體進(jìn)樣器：

不同規(guī)格的專用注射器，填充柱色譜常用10μL；毛細(xì)管色譜常用1μL；新型儀器帶有全自動(dòng)液體進(jìn)樣器，清洗、潤(rùn)沖、取樣、進(jìn)樣、換樣等過程自動(dòng)完成，一次可放置數(shù)十個(gè)試樣。微量注射器

氣化室：將液體試樣瞬間氣化的裝置。無催化作用。第17頁,共27頁，2024年2月25日，星期天分離系統(tǒng)（色譜柱）

作用：將混合物中各組分在一定色譜條件下實(shí)現(xiàn)分離，是色譜儀的核心部件。包括填充柱和毛細(xì)管柱。柱材料：金屬、玻璃、融熔石英、Teflon等填充柱：多為U形或螺旋形，內(nèi)徑2~4mm，長(zhǎng)1~6m，由柱管和固定相組成。毛細(xì)管柱：又叫開管柱。通常將固定液均勻地涂漬或交聯(lián)到內(nèi)徑0.1~0.5mm的毛細(xì)管內(nèi)壁，長(zhǎng)達(dá)幾十至100m。通常彎成直徑10~30cm的螺旋狀。填充柱毛細(xì)管柱第18頁,共27頁，2024年2月25日，星期天

分離室：準(zhǔn)確控制分離需要的溫度。當(dāng)試樣復(fù)雜時(shí)，分離室溫度需要按一定程序控制溫度變化，各組分在最佳溫度下分離；溫控系統(tǒng)溫度是色譜分離條件的重要選擇參數(shù)；

氣化室、分離室、檢測(cè)器三部分在色譜儀操作時(shí)均需控制溫度；

氣化室：保證液體試樣瞬間氣化；

檢測(cè)器：保證被分離后的組分通過時(shí)不在此冷；第19頁,共27頁，2024年2月25日，星期天檢測(cè)系統(tǒng)色譜儀的眼睛，

通常由檢測(cè)元件、放大器、顯示記錄三部分組成；

被色譜柱分離后的組分依次進(jìn)入檢測(cè)器，按其濃度或質(zhì)量隨時(shí)間的變化，轉(zhuǎn)化成相應(yīng)電信號(hào)，經(jīng)放大后記錄和顯示，給出色譜圖；檢測(cè)器：濃度型——檢測(cè)信號(hào)值與組分的濃度成正比；質(zhì)量型——檢測(cè)信號(hào)值與單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)入檢測(cè)器組分的質(zhì)量成正比；廣普型——對(duì)所有物質(zhì)均有響應(yīng)；專屬型——對(duì)特定物質(zhì)有高靈敏響應(yīng)；

常用的檢測(cè)器：熱導(dǎo)檢測(cè)器、氫火焰離子化檢測(cè)器；第20頁,共27頁，2024年2月25日，星期天熱導(dǎo)檢測(cè)器(TCD)單臂四臂柱前柱前柱后柱后第21頁,共27頁，2024年2月25日，星期天氫火焰電離檢測(cè)器（FID）第22頁,共27頁，2024年2月25日，星期天電子捕獲檢測(cè)器(ECD)63Ni或3HUU過高，電子速度快，不易捕獲通常為基流電壓的2/3第23頁,共27頁，2024年2月25日，星期天火焰光度檢測(cè)器（FPD）FPD結(jié)構(gòu)：

噴嘴+濾光片+光電管。>濾光片放大器記錄儀光電管石英窗H2Air載氣+組分出口第24頁,共27頁，2024年2月25日，星期天參考文獻(xiàn)[1]許增輝.色譜分析液氧中痕量總烴準(zhǔn)確度影響因素的研討[J]．中國(guó)高新技術(shù)企業(yè)，2011.02:44-45.[2]邊爽.色譜分析法在測(cè)定苯甲酸等物質(zhì)中的應(yīng)用[J]．化學(xué)工程與裝備，2011，1:161-162[3]趙清鐵.高效液相色譜分析[J]．技術(shù)論文，33[4]

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張祥民.