YY1699-2020殼聚糖-標準版

中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標準代替YY/T0606.7—2008組織工程醫(yī)療器械產品殼聚糖Tissueengineeringmedicaldeviceproducts—Chi國家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布I保留)(見第2章，2008年版的第2章);——修改了規(guī)范性引用文件以及《中華人民共和國藥典》的版本年號(見第2章，2008年版的第2章);——修改了分類(見第4章，2008年版的第4章);——修改了動物源性材料要求(見第5章，2008年版的第5章);——修改了性狀的要求(見6.1,2008年版的6.1);——增加了傅里葉變換紅外光譜的部分主要特征峰(見6.2,2008——修改了脫乙酰度試驗方法(見7.4,2008年版的7.3);——修改了重金屬含量的試驗方法(見7.8,2008年版的7.6及附錄A);——修改了無菌試驗要求及試驗方法(見6.16,7.16,2008年版的6.13及7.13);——刪除了生物學評價的具體要求及試驗方法，僅保留總則(見6.18、7.18,2008年版的6.14及——刪除了第7章檢驗規(guī)則(見2008年版的第8章);——刪除了附錄D背景資料(見2008年版的附錄D);本標準由全國外科植入物和矯形器械標準化技術委員會組織工程醫(yī)療器械產品分技術委員會Ⅱ份有限公司。1組織工程醫(yī)療器械產品殼聚糖本標準規(guī)定了用于制備組織工程醫(yī)療器械產品的殼聚糖及其鹽的要求、試驗方法等。本標準適用于制備組織工程醫(yī)療器械產品的殼聚糖及其鹽。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T191包裝儲運圖示標志GB/T16886.1醫(yī)療器械生物學評價第1部分：風險管理過程中的評價與試驗GB/T16886.7醫(yī)療器械生物學評價第1部分：環(huán)氧乙烷滅菌殘留量GB/T16886.12醫(yī)療器械生物學評價第12部分：樣品制備與參照樣品GB18278.1醫(yī)療保健產品滅菌濕熱第1部分：醫(yī)療器械滅菌過程的開發(fā)、確認和常規(guī)控制GB18279.1醫(yī)療保健產品滅菌環(huán)氧乙烷第1部分：醫(yī)療器械滅菌過程的開發(fā)、確認和常規(guī)控制的要求GB18280.1醫(yī)療保健產品滅菌輻射第1部分：醫(yī)療器械滅菌過程的開發(fā)、確認和常規(guī)控制YY/T0771.1動物源醫(yī)療器械第1部分風險管理應用YY/T0771.2動物源醫(yī)療器械第2部分：來源、收集與處置的控制YY/T0771.3動物源醫(yī)療器械第3部分：病毒和傳播性海綿狀腦病(TSE)因子去除與滅活的《中華人民共和國藥典》(2015年版)四部3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。2脫乙酰度degreeofdeacetylation一個殼聚糖分子中葡萄糖胺單元(脫乙酰基的單元)的摩爾分數(shù)。按照是否與酸結合，可分為殼聚糖、殼聚糖鹽酸鹽、殼聚糖乙酸鹽、殼聚糖谷氨酸鹽和殼聚糖乳酸鹽。5動物源性材料要求動物組織中提取制備的殼聚糖及其鹽應按照YY/T進行管理和控制0771.1、YYT07713、YY/T0771.3的要求6.2傅里葉變換紅外光譜CPTR)表1二傅里葉變換紅外光譜主要特征峰基團特征峰u(C=O)酰胺I帶注：s——強峰；b——寬峰。3以干燥品計算，殼聚糖或其鹽的含量應不小于85%。應為標示值的90%～110%。殼聚糖檢測液的pH應為5.0～8.0;殼聚糖鹽檢測液的pH應為4.0～6.0。在20℃時殼聚糖的動力黏度不得超過標示量的80%～120%。6.7重均分子量及相對分子質量分布殼聚糖或其鹽重均分子量和相對分子質量分布(M。/M。)由制造商確定。殼聚糖蛋白質殘留量應不大于0.2%(質量分數(shù))。6.10乙醇等有機溶劑殘余量乙醇殘余量應不大于0.5%(質量分數(shù))。6.11干燥失重應不大于10%(質量分數(shù))。應不大于1.0%(質量分數(shù))。應不大于0.5%(質量分數(shù))。不得過百萬分之一。6.15細菌內毒素含量每1.0mg殼聚糖或其鹽細菌內毒素含量應小于0.05EU。4應無菌。如果殼聚糖或其鹽以無菌方式提供，應進行該項目的檢測，并按照GB18278.1、GB18279.1、GB18280.1進行無菌工藝確認。如果采用環(huán)氧乙烷滅菌，還應按照GB/T16886.7對其殘留量進行控制和檢測。每克(g)供試品中需氧菌總數(shù)小于100CFU,霉菌和酵母菌菌落數(shù)小于20CFU,不得檢出金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和大腸埃希菌。6.18生物學性能7試驗方法肉眼直接觀測，應符合6.規(guī)定7.4脫乙酰度準確稱取在105℃下干燥至恒重的樣品0.2g～0.3g,置于250mL錐形瓶中，加入0.1mol/L的鹽酸滴定液30mL,在20℃~25℃下攪拌至完全溶解(可加入適量水稀釋)。加入甲基橙-苯胺藍(將0.1%的甲基橙水溶液和0.1%苯胺藍水溶液以1:2體積比混合)指示劑5滴～6滴，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)滴至紅色褪去。按式(1)和式(2)計算。 (2)p——樣品中氨基含量，%;5D.D——樣品的脫乙酰度，%;準確稱取在105℃下干燥至恒重的樣品0.D.D——樣品的脫乙酰度，%;比例加入純化水，在37℃±1℃于密閉容器中浸提24h,制備檢測液，按照《中華人民共和國藥典》(2015年版)四部通則0631pH測定法測定，應華人民共和國藥典》(2015年版)四部通則0操作溶液有顏色，可按2015年版四部，通則0821,重金屬檢查法(第一法)第一段中“若供試液帶顏色”進行。應符合6.8規(guī)定。6應滿足6.12要求。準確稱取供試品2.0g,殼聚糖用1%乙酸溶液或殼聚糖鹽用純化水400mL溶解，待完全溶解后。將溶液轉移至2L容器中，加純化水200mL。加熱至沸騰并保持微沸2h,加熱過程中蓋住燒杯口。用砂芯漏斗(3#)過濾，用水洗滌殘留物，100℃~105℃干燥至恒重，按照殘留物重量與取樣量進行計78.3貯運標志8(規(guī)范性附錄)A.1測定方法按《中華人民共和國藥典》(2015年版)四部，通則0704,氮測定法第二法(半微量法)規(guī)定的方法進行。A.2結果計算殼聚糖含量按照式(A.1)和式(A.2)(殼聚糖及其一元羧酸鹽)、式(A.3)(殼聚糖二元羧酸鹽)計算：N——待檢樣品中的總氮含量，單位為毫克每克(mg/g);F——待檢樣品中水分含量，%;V?——樣品管消耗標準硫酸溶液體積，單位為毫升(mL);V?——空白管消耗標準硫酸溶液體積，單位為毫升(mL);w——殼聚糖含量，%;14——氮原子質量；M——理論條件下，殼聚糖或其鹽單元平均相對分子質量。殼聚糖或殼聚糖鹽單元平均相對分子質量計算式：殼聚糖及其一元羧酸鹽：203-42×DD%+M×DD%………………(A.4)殼聚糖二元羧酸鹽：203-42×DD%+1/2×M×DD%………………(A.5)式中：M——殼聚糖鹽的羧酸根摩爾質量[殼聚糖：0;鹽酸鹽：36.5;DD%——殼聚糖或其鹽的脫乙酰度，%。9(規(guī)范性附錄)重均相對分子質量及相對分子質量分布系數(shù)測定B.1原理光散射法是測定高聚物絕對分子質量的方法。高分子溶液可視為不均勻介質，當光通過它時，人射光就會發(fā)生散射。其散射光強度遠高于純溶劑，并且與高聚物的相對分子質量鏈形態(tài)、溶液濃度、散射光角度和折光指數(shù)增量(dn/de)密切相關。因此由光散射法測得不同濃度(c)的高聚物溶液在不同散射角(θ)下的散射光強(I)數(shù)據(jù)后，即可求得其重均相對分子質量(M)等。君要得到相對分子質量分布系數(shù)，可采用激光散射-凝膠滲透色譜聯(lián)用法(LLS-GPC)。B.2設備相關色譜柱1.0L進樣環(huán)。B.3溶液制備B.3.1流動相(推薦)0.25mol/L乙酸-乙酸鈉緩沖液520.2%疊氮化鈉)推確稱取乙酸鈉205g疊氮化鈉2.0g,準確稱取供試品適量用上述流動相溶解并稀釋至適宜濃度，用0.22μm過濾器過濾。B.3.3樣品制備(dn/de測定)準確稱取供試品適量，用上述流動相溶解并稀釋至適宜濃度，再用流動相按照1:5、2:4、3:3、4:2、5:1的濃度比進行梯度稀釋，配制成6個不同濃度的系列樣品，用0.22μm過濾器過濾。B.4步驟B.4.1折光指數(shù)增量(dn/dc):用流動相清洗后的進樣器，依次從低濃度到高濃度抽取適量樣品，注入示差檢測器，在基線出現(xiàn)平行時采集數(shù)據(jù)1min,通過儀器系統(tǒng)測定出dn/dc。B.4.2將色譜柱與激光散射儀和示差檢測器連接，流動相沖洗至基線平穩(wěn)后，取適量樣品溶液進樣，在規(guī)定流速、色譜柱溫度條件下檢測樣品的相對分子質量及相對分子質量分布。B.5結果計算檢測完畢后，通過儀器配套的色譜分析軟件確定樣品的峰面積，輸入dn/dc值，根據(jù)軟件要求設置其他相關參數(shù)，計算相對分子質量及相對分子質量分布系數(shù)并輸出報告。(規(guī)范性附錄)蛋白質含量測定C.1原理考馬斯亮藍(CoomassieBrilliantBlue)G-250具有兩種色調，在游離狀態(tài)下呈紅色，與蛋白質結合后轉為青色，蛋白質與染料結合物在598mm處有最大光吸收，吸光度與蛋白質含量成正比，可用比色法測定。C.2設備C.2.1分析天平C.2.3旋渦式混合器。C.3溶液制備C.3.1考雪斯亮藍G-250斌液：稱取考馬斯密藍C-250100ng溶解手50mL的95%乙醇中，再加入濃鹽酸50mL,并用水稀釋至1000mL,混號過濾，取法液，置于標色C.3.2蛋白質標準液(30μg/I)精確稱取生血清白蛋日對照品，用水稀釋成藥300/g/ml作為儲備C.4樣品準備準確稱取供試品約50mg,用1%乙酸溶解并稀釋，制成5mg/mL的溶液。精密量取1mL置樣品C.5測定步驟C.5.1按下表制備蛋白質標準液。表C.1蛋白質標準溶液系列濃度0234501%乙酸溶液/mL0蛋白質濃度/(μg/mL)036C.5.2在標準液系列的各試管及樣品試管中分別加入5mL的考馬斯亮藍G-250溶液。用旋渦式混合器使試管中溶液充分混合，并在室溫20℃±500μg的標準儲備溶液。在4℃下貯存，有效期為1個月。臨用前，取上述標準儲備溶液稀釋成D.6步驟[1]動物源性醫(yī)療器械產品注冊申報資料指導原則(2009年發(fā)布，關于印發(fā)無源植入性和動物源性醫(yī)療器械注冊申報資料指導原則的通知，食藥監(jiān)辦械函[2009]519號).tartingMaterialsIntended