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生物制品及其質(zhì)量管理中國藥品生物制品檢定所

1本資源由藥智網(wǎng)收集整理1/47主要內(nèi)容

一、生物制品定義二、生物制品種類三、生物制品基本屬性和特點四、生物制品管理五、生物制品GMP現(xiàn)場檢驗關(guān)鍵點2本資源由藥智網(wǎng)收集整理2/47一、生物制品定義

生物制品(BiologicalProducts)是應(yīng)用普通或以基因工程、細胞工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程等生物技術(shù)取得微生物、細胞及各種動物和人源組織和液體等生物材料制備，用于疾病預(yù)防、治療和診療藥品。3本資源由藥智網(wǎng)收集整理3/47二、生物制品分類

按生物制品組成和性質(zhì)可分為:疫苗（Vaccines）抗毒素及免疫血清(AntitoxinandAntisera)血液制品（BloodProducts）細胞因子和重組DNA產(chǎn)品（CytokinesandRecombinantDNAProducts）診療制品(DiagnosticReagents)其它制品4本資源由藥智網(wǎng)收集整理4/47細菌類疫苗由細菌、螺旋體或其衍生物制備而成，包含：減毒活疫苗：卡介苗、人用炭疽和人用鼠疫疫苗等滅活疫苗：霍亂菌體疫苗、鉤端螺旋體疫苗等亞單位疫苗：腦膜炎球菌多糖疫苗、傷寒Vi多糖疫苗等重組DNA疫苗：重組瘧疾疫苗、重組幽門螺桿菌疫苗等5本資源由藥智網(wǎng)收集整理5/47病毒類疫苗由病毒、衣原體、立克次體或其衍生物制備而成，包含：減毒活疫苗：乙型腦炎減毒疫苗、麻疹疫苗、風(fēng)疹疫苗、OPV等滅活疫苗：乙型腦炎滅活疫苗、出血熱疫苗、狂犬疫苗等亞單位疫苗：重組乙肝疫苗等重組DNA疫苗：重組乙肝疫苗等6本資源由藥智網(wǎng)收集整理6/47聯(lián)合疫苗

由兩種或兩種以上疫苗抗原原液配制而成含有各種免疫原性疫苗。比如：吸附百白破聯(lián)合疫苗麻風(fēng)腮三聯(lián)疫苗

7本資源由藥智網(wǎng)收集整理7/47抗毒素及免疫血清

——由特定抗原免疫動物血清而制備

主要產(chǎn)品：白喉抗毒素破傷風(fēng)抗毒素抗狂犬病血清等8本資源由藥智網(wǎng)收集整理8/47血液制品

——由健康人血漿或特異免疫人血漿分離、提純或由重組技術(shù)制成血漿蛋白組分或血細胞組分制品。主要產(chǎn)品：人血白蛋白人免疫球蛋白人凝血因子等

9本資源由藥智網(wǎng)收集整理9/47細胞因子和重組DNA產(chǎn)品

——由健康人血細胞增值、分離、提純或由重組技術(shù)制成多肽類或蛋白類制劑。主要產(chǎn)品：干擾素(IFN)白細胞介素(IL)集落刺激因子(CSF)紅細胞生成素(EPO)等

10本資源由藥智網(wǎng)收集整理10/47診療制品

體外診療制品——由特定抗原、抗體或相關(guān)生物物質(zhì)制成用于體外診療疾病試劑或試劑盒，如傷寒、副傷寒等細菌診療菌液，沙門氏菌屬診療血清，HBsAg診療試劑盒等。體內(nèi)診療制品——由抗原制成用于體內(nèi)診療疾病試劑，如卡介苗純蛋白衍生物（BCG-PPD）、錫克試劑毒素、標(biāo)識單克隆抗體等。

11本資源由藥智網(wǎng)收集整理11/47其它制品

由相關(guān)生物材料或特定方法制成，上述5類產(chǎn)品以外生物制品，如變態(tài)反應(yīng)原、微生態(tài)制劑、重組DNA產(chǎn)品、基因治療產(chǎn)品、單克隆抗體制劑、一些細胞治療制劑等。12本資源由藥智網(wǎng)收集整理12/47生物制品按用途分類

預(yù)防類生物制品

疫苗、類毒素、被動免疫制劑

診療類生物制品免疫學(xué)診療試劑、基因診療試劑、生化試劑

治療類生物制品血液制劑、細胞因子制劑、酶和激素、

特異性抗體、非特異性免疫治療制劑、基因及細胞治療制品等

13本資源由藥智網(wǎng)收集整理13/47預(yù)防類生物制品減毒活疫苗與滅活疫苗比較減毒活疫苗滅活疫苗優(yōu)點注射一次即可有效接種后似自然感染，形成完整免疫在一定范圍內(nèi)疫苗病毒可排斥野毒可各種抗原混合制成多價疫苗抗原性穩(wěn)定經(jīng)過滅活處理不會污染其它病原可提純抗原，加入佐劑增加免疫效果缺點抗原不穩(wěn)定，滅活即失效易污染其它病原普通需注射2~3次才顯著有效普通僅產(chǎn)生體液免疫抗原要求量大，制造工藝較繁瑣14本資源由藥智網(wǎng)收集整理14/47三、生物制品基本屬性和特點（一）

其起始材料均為生物活性物質(zhì)；生物制品生產(chǎn)加工全過程是生物學(xué)過程，是無菌操作過程；有些生物制品生產(chǎn)過程是有毒或有菌過程;生物制品多為蛋白質(zhì)或多肽類物質(zhì)，分子量較大，并含有復(fù)雜分子結(jié)構(gòu),較不穩(wěn)定，易失活，易被微生物污染，易被酶解破壞。15本資源由藥智網(wǎng)收集整理15/47三、生物制品基本屬性和特點（二）其質(zhì)量控制和質(zhì)量檢定是采取生物學(xué)分析方法，其效價或生物活性檢定有其變異性；生物制品原材料、中間品、成品、運輸、貯存、甚至使用保持在“冷鏈”系統(tǒng)中；尤其是預(yù)防制品使用對象不是病人，而是健康人群；生物制品質(zhì)量控制實施生產(chǎn)全過程監(jiān)控;

生產(chǎn)現(xiàn)場檢驗時要充分考慮這些特點16本資源由藥智網(wǎng)收集整理16/47四、生物制品管理生物制品國家管理6項基本職能1．完整疫苗和生物制品審批程序和審批標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)文件；2．審批結(jié)論要以試驗和臨床試驗數(shù)據(jù)為依據(jù)；3．國家質(zhì)控當(dāng)局對疫苗和生物制品出廠銷售實施國家批簽發(fā)制度；4．要有對疫苗和生物制品進行質(zhì)量評價法定試驗檢定機構(gòu)和試驗實施；5．對生物制品生產(chǎn)企業(yè)實施GMP定時檢驗；6．對生物制品有效性和不良反應(yīng)進行上市后檢測。17本資源由藥智網(wǎng)收集整理17/47生物制品實施國家批簽發(fā)《藥品管理法實施方法》中要求，國家對所要求生物制品實施國家批簽發(fā)制度。國家批簽發(fā)——國家藥品監(jiān)督管理部門授權(quán)國家藥品檢定機構(gòu)，對所要求生物制品，在出廠前或進口時，按批進行審查和簽發(fā)，凡審查或檢定不合格不允許銷售或者進口。18本資源由藥智網(wǎng)收集整理18/47生物制品國家批簽發(fā)分為三種類型一、僅對某種制品每批批統(tǒng)計摘要進行審查，符合要求發(fā)給批簽發(fā)證；二、審查批統(tǒng)計摘要＋對部分批次制品進行抽檢檢定、審查和檢定符合要求發(fā)給批簽發(fā)證；三、審查批統(tǒng)計摘要＋批批檢定，審查和批批檢定符合要求發(fā)給批簽發(fā)證。19本資源由藥智網(wǎng)收集整理19/47菌種篩選#種子批#建立及檢定菌種接種#原液合并半成品*配置殺菌原液收獲#擴大培養(yǎng)原液保留分裝*包裝檢定圖-１細菌疫苗工藝流程及環(huán)境區(qū)域劃分示意圖10000級100000級20本資源由藥智網(wǎng)收集整理20/47毒種篩選#種子批#建立及檢定毒種接種#培養(yǎng)細胞原液合并半成品*配置病毒滅活病毒收獲過濾#擴大細胞培養(yǎng)病毒原液保留分裝*包裝檢定圖-２病毒疫苗工藝流程及環(huán)境區(qū)域劃分示意圖原代細胞制備或傳代細胞復(fù)蘇減毒活疫苗10000級100000級21本資源由藥智網(wǎng)收集整理21/47細菌和病毒類疫苗質(zhì)控關(guān)鍵點1．全部原輔材料符合《中國藥典》或《中國生物制品主要原輔料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》；2．采取強毒菌株（鼠疫、霍亂、炭疽等）、芽胞菌和強毒病毒株，應(yīng)有專用生產(chǎn)操作間，專用生產(chǎn)設(shè)備及隔離實施，操作人員應(yīng)有安全防護設(shè)施；3．所用生產(chǎn)菌株或病毒株，要建立原始種子批、主代種子批、生產(chǎn)種子批三級種子批系統(tǒng)；病毒疫苗生產(chǎn)用細胞也要建立上述三級細胞庫系統(tǒng)；4．菌苗及疫苗原液、中間品合并、分離、純化等每道加工工序后均要做無菌試驗和判別試驗；22本資源由藥智網(wǎng)收集整理22/47細菌和病毒類疫苗質(zhì)控關(guān)鍵點5．細菌類及病毒類滅活疫苗，加入滅活劑后，必須要做活菌或活毒試驗，確保徹底滅活；6．原材料、半成品及成品，應(yīng)按現(xiàn)行《中國生物制品規(guī)程》相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進行檢定；7．對制品安全、效價或免疫力試驗等項目檢定所用試驗動物應(yīng)符合清潔級；8．從起始材料直至使用，全過程，必須無菌操作，制品2—8℃保留；9．生物制品生產(chǎn)用水均為注射用水。23本資源由藥智網(wǎng)收集整理23/47血漿合并病毒滅活精洗滅菌除熱原低溫乙醇法超濾濃縮入庫外包材血漿內(nèi)包材圖-３血液制品工藝流程及環(huán)境區(qū)域劃分示意圖除菌過濾*分裝*包裝粗洗10000級100000級24本資源由藥智網(wǎng)收集整理24/47血液制品質(zhì)量控制關(guān)鍵點1．生產(chǎn)用具，經(jīng)過嚴(yán)格清洗、去熱原處理、滅菌處理；2．原料血漿要經(jīng)過乙肝、丙肝、艾滋、梅毒、ABO定型診療試劑檢測合格，-20℃以下保留；3．生產(chǎn)工藝采取低溫乙醇法分部提取各組份；工藝中應(yīng)有去除/滅活病毒工藝步驟；4．原液、半成品、成品符合現(xiàn)行《中國生物制品規(guī)程》對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)；5．所用血源檢測和成品檢測乙肝、丙肝、艾滋、梅毒等檢測試劑均為國家批批檢定試劑。25本資源由藥智網(wǎng)收集整理25/47細胞復(fù)蘇擴大培養(yǎng)大罐培養(yǎng)粗純擴大培養(yǎng)發(fā)酵粗純接種＊滅菌除熱原精洗粗洗內(nèi)包材菌種細胞種子原液除菌過濾除菌過濾＊配制及除菌過濾＊分裝＊包裝入庫外包裝圖-４重組產(chǎn)品工藝流程及環(huán)境區(qū)域劃分示意圖原核表示真核表示10000級100000級26本資源由藥智網(wǎng)收集整理26/47重組DNA產(chǎn)品質(zhì)量控制關(guān)鍵點

1．生產(chǎn)用工程菌株或工程細胞株要建立原始種子批、主代種子批、生產(chǎn)種子批系統(tǒng)，定時進行質(zhì)粒穩(wěn)定性檢驗；2．發(fā)酵用培養(yǎng)基應(yīng)不含抗生素，生產(chǎn)用細胞培養(yǎng)液應(yīng)不含血清和抗生素；3．發(fā)酵培養(yǎng)過程中應(yīng)依據(jù)工藝要求控制其培養(yǎng)溫度、pH、溶氧、輔料及培養(yǎng)時間；4．依據(jù)其工藝要求，經(jīng)過初步純化和高度純化到達要求質(zhì)量要求；5．重組產(chǎn)品原液，應(yīng)做：蛋白質(zhì)含量、比活性、純度、效價、SDS法、高效液相色譜法、分子量、外源性DNA殘留含量、宿主蛋白殘留含量、等電點、紫外光譜肽圖（最少每年1次），N末端氨基酸序列（最少每年測一次）；27本資源由藥智網(wǎng)收集整理27/47重組DNA產(chǎn)品質(zhì)量控制關(guān)鍵點6．半成品及成品應(yīng)按現(xiàn)行《中國生物制品規(guī)程》相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進行檢定；7．工程菌株應(yīng)進行菌落形態(tài)、革蘭氏染色、抗生素抗性、電鏡檢驗、生化反應(yīng)、表示量、質(zhì)粒酶切圖譜等檢驗；8．工程細胞應(yīng)進行外源因子（細菌、真菌、支原體、病毒）檢驗、致病性試驗、細胞判別試驗、表示量測定等；9．重組DNA產(chǎn)品生產(chǎn)，必須按其生產(chǎn)所用工程菌株或工程細胞株、將原核細胞系與真核細胞系徹底分離分別進行生產(chǎn)。28本資源由藥智網(wǎng)收集整理28/47菌種篩選#組裝圖-5酶聯(lián)免疫診療試劑工藝流程及環(huán)境區(qū)域劃分示意圖抗原包被微孔板酶標(biāo)識抗體其它組分陽性對照*100000級隔離區(qū)29本資源由藥智網(wǎng)收集整理29/47酶聯(lián)免疫診療試劑質(zhì)控關(guān)鍵點

1．所用抗原或抗體純度、帶型、效價及穩(wěn)定性等符合現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)，起源要固定；2．辣根過氧化物酶R2不應(yīng)低于3.0；3．微孔板CV（%）小于10%；4．選擇最正確濃度進行抗原或抗體包被，選擇最正確濃度進行酶標(biāo)識5．酶標(biāo)識后抗體加入相關(guān)保護劑，低溫保留；6．應(yīng)有陽性血清處理、分裝隔離操作間。30本資源由藥智網(wǎng)收集整理30/47菌種篩選#組裝圖-６PCR診療試劑工藝流程及環(huán)境區(qū)域劃分示意圖PCR組份１PCR組份２PCR組份３陽性對照*100000級隔離區(qū)31本資源由藥智網(wǎng)收集整理31/47PCR診療試劑質(zhì)控關(guān)鍵點

1．應(yīng)有陽性血清處理、分裝隔離操作間；2．PCR試劑生產(chǎn)區(qū)與檢定區(qū)嚴(yán)格分開；3．PCR引物設(shè)計要合理，引物合成要有固定場所及專用設(shè)備；純度到達現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)；4．DNA聚合酶活性及穩(wěn)定性達現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)并有固定起源；5．PCR檢測方法要可靠，操作人員經(jīng)專門培訓(xùn)。32本資源由藥智網(wǎng)收集整理32/47五、生物制品GMP檢驗關(guān)鍵點保護環(huán)境和操作者預(yù)防交叉污染，嚴(yán)格分區(qū)，獨立空調(diào)局部負壓盡可能一個產(chǎn)品、一個車間徹底消毒和清場嚴(yán)格動物使用及動物管理環(huán)境溫度33本資源由藥智網(wǎng)收集整理33/471．強毒與弱毒“強毒”系指生物制品生產(chǎn)及檢定用細菌株及病毒株，其致病力強，傳染性強，感染機率高，感染后癥狀較重，可危及生命健康，甚至引發(fā)傳染病暴發(fā)流行細菌菌株及病毒株。“弱毒”系指生物制品生產(chǎn)及檢定用細菌株及病毒株，經(jīng)過天然或人工改造方法，去除或封閉其毒力因子，使其致病力減弱，普通不引發(fā)感染或發(fā)病細菌菌株及病毒株。強毒株與弱毒株，不允許混放在一起，其生產(chǎn)及檢定操作場所須嚴(yán)格分開，并有專用設(shè)備。生物制品GMP認證檢驗關(guān)鍵點34本資源由藥智網(wǎng)收集整理34/472．死毒與活毒“活毒”是制備滅活疫苗第一階段或減毒活疫苗生產(chǎn)時，將生產(chǎn)用細菌或病毒株進行大規(guī)模培養(yǎng)制備，其生產(chǎn)過程和生產(chǎn)場所、生產(chǎn)設(shè)備、器材含有大量活細菌或活病毒生物體，稱之為“活毒”?！八蓝尽笔侵苽錅缁钜呙鐣r，第一階段生產(chǎn)出大量活細菌或或病毒后，到第二階段，對活生物體加入一定量甲醛或適宜滅活劑，將全部細菌或病毒殺死，稱之為“死毒”?！盎疃尽迸c“死毒”生產(chǎn)場所、生產(chǎn)設(shè)備及器材，須嚴(yán)格分開。35本資源由藥智網(wǎng)收集整理35/473．“脫毒前”與“脫毒后”“脫毒前”系指破傷風(fēng)梭狀菌、白喉桿菌繁殖培養(yǎng)時，生產(chǎn)大量破傷風(fēng)毒素及白喉毒素，對人體有致病性，這一階段為“脫毒前”?！懊摱竞蟆毕抵付舅刂屑尤胍欢考兹┗蜻m宜脫毒劑，將毒素去掉毒性，不再含有致病性，仍保留其抗原性和免疫原性，稱之為“脫毒后”。“脫毒前”與“脫毒后”生產(chǎn)場所、生產(chǎn)設(shè)備及器材須嚴(yán)格分開。36本資源由藥智網(wǎng)收集整理36/474．血液制品、抗血清、人和動物組織制備制品，其生產(chǎn)所用原材料，為人血漿、動物免疫血清、人和動物器官、組織及組織液等，均含有大量人和動物異種蛋白質(zhì)或細胞活性物質(zhì)，含有較強致敏原物質(zhì)，不經(jīng)過對應(yīng)處理和加工，可致人體過敏反應(yīng)或血清病。所以，血液制品、抗血清、人和動物組織生產(chǎn)制備制品時，須有專用生產(chǎn)場所、生產(chǎn)設(shè)備及器材，不可與其它生物制品混用。37本資源由藥智網(wǎng)收集整理37/475．芽孢菌制品，系用炭疽桿菌、破傷風(fēng)梭菌、肉毒梭菌等含有芽孢菌來生產(chǎn)制備制品，芽孢菌是微生物對外周環(huán)境抵抗力最強生命單位。芽孢菌在自然界可存活數(shù)十年及百年之久，100℃可耐受2小時以上，在70％酒精中存活20年，低溫和干燥對其毫無作用。生產(chǎn)芽孢菌制品生產(chǎn)場所、生產(chǎn)設(shè)備和器材須專用，與其它制品生產(chǎn)嚴(yán)格分開。38本資源由藥智網(wǎng)收集整理38/476．卡介苗與結(jié)核菌制品生產(chǎn)場所，必須嚴(yán)格分開，其生產(chǎn)設(shè)備、器材、生產(chǎn)用菌種必須專用，不能混用。1930年德國Lubeck地方，給251名嬰兒誤用結(jié)核菌液，而不是減毒卡介苗，造成72名嬰兒死亡，病死率為28.68％，有142名嬰兒感染結(jié)核，感染率為56.5％，稱之為“Lubeck疫苗接種事故”。39本資源由藥智網(wǎng)收集整理39/477．衛(wèi)生部1985年衛(wèi)藥第11號文《中國醫(yī)學(xué)微生物菌毒種保藏管理方法》，要求一類、二類菌種和毒種為“強毒微生物”。一類：鼠疫桿菌、霍亂弧菌、天花病毒（已毀滅）、黃熱病毒、馬腦炎病毒、Lassa病毒、Mstburg病毒、Ebola病毒、猴皰疹病毒等。二類：布氏菌、炭疽桿菌、肉毒梭菌、麻風(fēng)桿菌、結(jié)核分枝桿菌等?？袢《荆ń侄荆⒘餍行猿鲅獰岵《?、登革熱病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、艾滋病病毒（當(dāng)初還未列上）等。40本資源由藥智網(wǎng)收集整理40/478．強毒操作區(qū)空氣潔凈特殊要求——必須設(shè)置氣閘和緩沖區(qū)；——與其它區(qū)域分開，自成一區(qū)；——經(jīng)過兩道連鎖門，更衣進入；——在生物安全柜內(nèi)操作；——操作區(qū)有高壓滅菌設(shè)備；——相對操作區(qū)外部保持相對負壓，相對壓強-30Pa～-40Pa，緩沖相對壓強-15Pa～-20Pa。41本資源由藥智網(wǎng)收集整理41/479．生產(chǎn)用菌、毒種三級種子批系統(tǒng)——原始種子批，起源清楚，生物特征經(jīng)典最原始起源單一培養(yǎng)物；——主代種子批，由原始種子批而來單一培養(yǎng)物；——工作種子批，由主代種子批而來單一培養(yǎng)物，可直接用于疫苗生產(chǎn)；——只有原研發(fā)單位才擁有原始種子批，普通企業(yè)可能只有主代種子批或工作種子批。42本資源由藥智網(wǎng)收集整理42/4710．生產(chǎn)用細胞三級細胞庫系統(tǒng)——原始細胞庫，由原始細胞群而來單一細胞株，起源