腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座

腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移InvasionandMetastasis

腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第1頁惡性腫瘤為何會(huì)侵襲與轉(zhuǎn)移？過程中有沒有標(biāo)識(shí)？能否預(yù)防？

問題解答最終將是從腫瘤轉(zhuǎn)移分子機(jī)制中尋找。瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移過程是瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞之間相互作用連續(xù)過程，這個(gè)過程是復(fù)雜、多步驟。1腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第2頁腫瘤轉(zhuǎn)移(tumormetastasis)是指腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)生長部位,經(jīng)過各種路徑轉(zhuǎn)運(yùn),在機(jī)體內(nèi)遠(yuǎn)離原發(fā)部位器官/組織繼續(xù)增殖生長,形成一樣性質(zhì)腫瘤(轉(zhuǎn)移瘤)過程.在原發(fā)部位生長腫瘤稱為原發(fā)瘤（primarytumor）,在遠(yuǎn)隔部位生長腫瘤稱為轉(zhuǎn)移瘤(metastatictumor).腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤最顯著生物學(xué)特征之一,是臨床腫瘤病人主要死因.2腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第3頁瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移步驟：

①

腫瘤細(xì)胞同質(zhì)型粘附降低，從原發(fā)灶脫離；

②腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）發(fā)生異質(zhì)型粘附增加；

③ECM降解；腫瘤細(xì)胞與ECM中大分子作用，分泌蛋白降解酶類降解ECM成份，形成腫瘤細(xì)胞移動(dòng)通道，并以此為誘導(dǎo)血管生成基礎(chǔ)；

④

腫瘤細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性增強(qiáng)在粘附降解過程中移動(dòng)，穿透ECM，并穿透血管壁基底膜進(jìn)入循環(huán)；

⑤

在循環(huán)中運(yùn)行逃防止疫系統(tǒng)識(shí)別與破壞；

⑥

抵達(dá)繼發(fā)部位后，在有新生血管形成前提下增殖，形成轉(zhuǎn)移灶。3腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第4頁4腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第5頁腫瘤轉(zhuǎn)移主要路徑淋巴道轉(zhuǎn)移：淋巴道轉(zhuǎn)移是癌轉(zhuǎn)移主要路徑，少數(shù)肉瘤如滑膜肉瘤、惡性纖維組織細(xì)胞瘤也可發(fā)生淋巴道轉(zhuǎn)移。淋巴道轉(zhuǎn)移與淋巴引流方向相同，但少數(shù)情況下也可發(fā)生跳躍轉(zhuǎn)移或逆行轉(zhuǎn)移。瘤細(xì)胞侵入淋巴管，隨引流淋巴液進(jìn)入局部淋巴結(jié)，先聚集在淋巴結(jié)邊緣竇，逐步累及破壞整個(gè)淋巴結(jié)，并可深入轉(zhuǎn)移到下一站引流淋巴結(jié)，最終經(jīng)胸導(dǎo)管進(jìn)入體循環(huán)。受累淋巴結(jié)腫大、變硬、相互粘連成團(tuán)，切面灰白而干燥。顯微鏡下淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)被破壞，出現(xiàn)數(shù)量不等腫瘤細(xì)胞，嚴(yán)重者整個(gè)淋巴結(jié)被腫瘤組織取代。5腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第6頁6血道轉(zhuǎn)移：血道轉(zhuǎn)移是肉瘤轉(zhuǎn)移主要路徑，部分癌如腎細(xì)胞癌、肝細(xì)胞癌、肺癌以及其它癌晚期也發(fā)生血道轉(zhuǎn)移。肝、肺是兩個(gè)血道轉(zhuǎn)移主要靶器官。種植性轉(zhuǎn)移：體腔內(nèi)器官腫瘤累及到器官表面時(shí)，瘤細(xì)胞可脫落并種植到體腔各器官表面，形成種植性轉(zhuǎn)移瘤。腹腔、胸腔最常受累，心包腔、蛛網(wǎng)膜下腔亦可受累。常在漿膜面形成多數(shù)轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)，極少侵入器官深層，并常伴血性積液，積液內(nèi)可查到腫瘤細(xì)胞。腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第7頁第一節(jié)瘤細(xì)胞同質(zhì)型粘附下降

同質(zhì)型（homotypic）粘附是指同種細(xì)胞間粘附，主要由存在于細(xì)胞表面粘附分子（celladhesionmoleculeCAM）所介導(dǎo)。同質(zhì)型粘附下降，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞從瘤體上脫落，所以CAM在腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移中起主要作用。7CAM是指由細(xì)胞合成并組裝與細(xì)胞表面或分泌至胞外基質(zhì)可存進(jìn)細(xì)胞粘附一類分子。介導(dǎo)細(xì)胞之間或細(xì)胞與胞外基質(zhì)之間選擇性粘附，在機(jī)體發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、炎癥反應(yīng)、凝血和維持組織結(jié)構(gòu)完整性起著主要作用。腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第8頁粘附因子相關(guān)腫瘤改變趨勢整合素 a2b1 a4b1 a5b1 a7b1 a6b1鈣粘蛋白 E-鈣粘蛋白免疫球蛋白超家族 DCC ICAM-1 CEA其它因子

選擇素 CD44

粘蛋白受體乳腺癌、肺癌黑色素瘤乳腺癌、小細(xì)胞肺癌黑色素瘤結(jié)腸癌乳腺癌、頭頸腫瘤結(jié)直腸癌黑色素瘤結(jié)腸癌淋巴瘤乳腺癌、結(jié)直腸癌、肺癌增加或降低增加降低增加增加降低降低增加增加增加增加增加8腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第9頁1、鈣粘蛋白（Cadherin）

鈣粘蛋白是鈣依賴性跨膜糖蛋白，是一組依賴細(xì)胞外Ca2+CAM，介導(dǎo)Ca2+依賴性細(xì)胞間粘附，經(jīng)過同類或同分子親和反應(yīng)相結(jié)合。鈣粘蛋白參加建立和維持細(xì)胞間連接，可能是最主要形成細(xì)胞間聯(lián)絡(luò)細(xì)胞粘附因子之一。已克隆了4種鈣粘蛋白，一級結(jié)構(gòu)相同，由723-748個(gè)氨基酸組成，每個(gè)鈣粘蛋白分子包含一個(gè)信號肽，一個(gè)含三個(gè)重復(fù)結(jié)構(gòu)細(xì)胞外區(qū)，一個(gè)跨膜錨定作用高疏水區(qū)，還有一個(gè)較長胞內(nèi)尾部。不一樣組織不一樣種族之間鈣粘蛋白同源性為50-60%。9腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第10頁腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第11頁

依據(jù)基因克隆免疫學(xué)特征及分布組織不一樣，將鈣粘蛋白家族分為三個(gè)亞類:①E-Cad：見于成熟上皮細(xì)胞;②N-Cad：成熟神經(jīng)組織及肌肉組織;③P-Cad:

起初在胎盤及上皮基底層發(fā)覺，以后發(fā)覺發(fā)育過程中在其它組織也有短暫表示。

最近又發(fā)覺新亞類，如內(nèi)皮細(xì)胞鈣粘蛋白和橋連粘附蛋白（desmoglein），以及V-Cad,M-Cad,B-Cad，R-Cad,T-Cad等。10腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第12頁鈣粘蛋白選擇性地與同種分子親和性結(jié)合，這種粘附反應(yīng)是利用其細(xì)胞外結(jié)構(gòu)中“組-丙-頡”（HAV）序列來識(shí)別和介導(dǎo)，鈣粘蛋白功效依賴于胞漿內(nèi)結(jié)構(gòu)與細(xì)胞骨架元件之間作用。但這種作用是間接與三種胞漿連鎖蛋白（catenin）αβγ結(jié)合，這些分子與鈣粘蛋白一起位于細(xì)胞粘附小帶(zonuleadherin)上，參加連接形成與穩(wěn)定。鈣粘蛋白也是主要形態(tài)分子，E-Cad作用于形成完整上皮層，P-Cad則在基底層起作用，這些鈣粘蛋白存在對于保持上皮和內(nèi)皮結(jié)構(gòu)很主要，其表示改變將造成細(xì)胞-細(xì)胞間正常連接完整性喪失。11腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第13頁當(dāng)前認(rèn)為與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移關(guān)系最親密是E-Cad。許多研究證實(shí)E-Cad與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，可能因?yàn)镋-Cad能促進(jìn)瘤細(xì)胞同質(zhì)型粘附不易使瘤細(xì)胞從瘤體上脫落。在很多腫瘤組織中呈低表示、不均勻性表示、甚至表示缺失狀態(tài)，其表示強(qiáng)度往往伴隨腫瘤分化程度降低而下降。表示下調(diào)是各種上皮源性惡性腫瘤如乳腺癌、頭頸部鱗癌、婦科腫瘤等發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移主要原因之一。12腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第14頁Biawy報(bào)道67%舌鱗癌E-Cad表示下降。E-Cad（-）者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率遠(yuǎn)高于E-Cad（+）者。以攜帶E-CadmRNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染高侵襲性癌細(xì)胞，可使其侵襲性消失。所以認(rèn)為E-Cad是一個(gè)抑制侵襲轉(zhuǎn)移因子。然而并非全部腫瘤轉(zhuǎn)移都與E-Cad表示呈負(fù)相關(guān)。GunjiN等報(bào)道E-Cad表示與原發(fā)性胰腺癌肝轉(zhuǎn)移不存在顯著關(guān)系。13腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第15頁2、腫瘤細(xì)胞表面電荷增加

瘤細(xì)胞表面電荷增加時(shí)瘤細(xì)胞間排斥力增大，促使瘤細(xì)胞從瘤體上脫落。瘤細(xì)胞表面電荷大小能夠經(jīng)過電泳速度表現(xiàn)出來。細(xì)胞電泳率大小與轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。所以細(xì)胞電泳速度被認(rèn)為是篩選不一樣浸潤和轉(zhuǎn)移潛能瘤細(xì)胞初篩標(biāo)識(shí)。另外溶解性酶釋放，細(xì)胞間隙壓力增加，也有利于瘤細(xì)胞從瘤體上脫落下來。14腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第16頁第二節(jié)瘤細(xì)胞異質(zhì)型粘附增加

異質(zhì)型（heterotypic）粘附是指瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞，或宿主基質(zhì)粘附。瘤細(xì)胞脫離瘤體，浸潤到基底膜或穿過基底膜遭遇宿主基質(zhì)和宿主細(xì)胞，這一過程就是異質(zhì)型粘附過程。這一過程有利于瘤細(xì)胞穿過基質(zhì)、基底膜血管壁，有利于瘤細(xì)胞在血管內(nèi)聚積。15腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第17頁（一）整合素（Integrin）

是一組介導(dǎo)異質(zhì)粘附細(xì)胞粘附分子。

整合素：是一類廣泛分布含有二價(jià)陽離子依賴性細(xì)胞表面糖蛋白。由α/β亞單位經(jīng)過非共價(jià)鍵相連異二聚體，現(xiàn)已發(fā)覺18種α亞單位和11種β亞單位，可形成20各種整合素。

16腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第18頁整合素配體：Ⅰ型、Ⅳ型膠原、LN、FN、Vitronectin、endotoxin、ICAM-1、VCAM-1。整合素與相鄰細(xì)胞上或ECM中對應(yīng)配體相結(jié)合，介導(dǎo)細(xì)胞間以及與ECM間粘附作用，參加細(xì)胞信號傳導(dǎo)及影響細(xì)胞運(yùn)動(dòng)。在細(xì)胞生長、分化、形成連接和維持極性等方面起主要作用。在整合素配體中多含有RGD（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸）序列，這一序列是整合素結(jié)合位點(diǎn)。17腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第19頁依據(jù)作用方式分三類：介導(dǎo)細(xì)胞與ECM粘附反應(yīng)：α4/β1、α5/β1、αV/β1均可與FN相結(jié)合；αV/β3、αV/β5可與LN相結(jié)合，αV/β3還可與纖維蛋白原結(jié)合介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞間粘附反應(yīng)：αL/β2（LFA-1）配體是ICAM-1，αM/β2（MAC-1）配體是ICAM-1、C3bi、Endotoxin;α4/β1配體是VCAM-1。既介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞又介導(dǎo)細(xì)胞-ECM粘附反應(yīng)：VLA-4及αM/β2。18腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第20頁ListofIntegrinReceptorsandTheirLigands19腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第21頁樁蛋白踝蛋白紐蛋白紐蛋白（黏著斑蛋白、聯(lián)結(jié)蛋白VCL）：連接肌動(dòng)蛋白與質(zhì)膜踝蛋白（Talin）：膜下一個(gè)細(xì)胞骨架蛋白樁蛋白（Paxillin）

聚焦粘附激酶（FAK）

引發(fā)細(xì)胞膜磷脂酰肌醇代謝，將細(xì)胞外信號轉(zhuǎn)導(dǎo)到胞質(zhì)核糖體合成基因轉(zhuǎn)錄所需蛋白質(zhì)。20腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第22頁Regulationofintracellularsignallingbyintegrins

21腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第23頁IntegrinbindingtoECMligandspreventsapoptosis

失巢凋亡anoikis22腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第24頁表示可隨腫瘤轉(zhuǎn)移不一樣階段而改變。如在轉(zhuǎn)移早期，一些整合素（如FN受體、α5β1）表示減弱或功效喪失，造成腫瘤細(xì)胞間及腫瘤細(xì)胞與ECM間粘附作用降低而易于從瘤體脫落；而當(dāng)腫瘤細(xì)胞進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)后，瘤細(xì)胞表面一些整合素分子如α2β1（膠原/LN受體）表示增強(qiáng)，促進(jìn)了與血管內(nèi)皮細(xì)胞間粘附，有利于轉(zhuǎn)移灶最終形成。23腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第25頁整合素分子結(jié)構(gòu)或表示水平改變與腫瘤細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移行為親密相關(guān)。而且在各種不一樣瘤細(xì)胞中表示頻率不一樣，如：α4β1、α1β1、α2Bβ3主要在黑色素瘤中表示；浸潤性黑色素細(xì)胞瘤β3亞單位表示上升；在黑色素細(xì)胞生長過程中VLA-4整合素增加，α6亞單位表示下降。N膠質(zhì)細(xì)胞瘤、惡性星形細(xì)胞瘤VN-R、αv/β3表示增加。當(dāng)N母細(xì)胞瘤有αv/β3、α4/β1、α6/β4表示而無N-myc原癌基因表示時(shí)腫瘤預(yù)后很好。24腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第26頁上皮性腫瘤整合素表示也有異質(zhì)性，分化差腫瘤中一些整合素亞單位（尤其是膠原、LN結(jié)合亞單位α2、α3、α6）表示下降。在許多研究中發(fā)覺基底膜完整性與整合素表示之間存在一定關(guān)系，浸潤性腫瘤基底膜缺乏完整性，與基底膜結(jié)合整合素（如α6）趨于不表示；膠原α2/β1在正常乳腺細(xì)胞中有較強(qiáng)表示，而在浸潤性乳腺癌中表示顯著下降。α5β1主要在乳腺癌和小細(xì)胞肺癌中表示。α6β主要在結(jié)腸癌中表示。25腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第27頁（二）LN受體（LN—R）腫瘤細(xì)胞只有經(jīng)過基底膜才能產(chǎn)生浸潤與轉(zhuǎn)移。LN是基底膜主要組成部分，腫瘤細(xì)胞經(jīng)過其表面LN-R與基底膜中LN結(jié)合而穿過基底膜。

其高表示與乳癌，肺癌，結(jié)腸癌等許多腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移能力呈正相關(guān)。26腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第28頁（三）CD44及其變體

也稱為Hermes抗原，H-CAM、Pag-1抗原，細(xì)胞外基質(zhì)受體Ⅲ（ECM-Ⅲ）。CD44V1-10，分子量約85-160KD，當(dāng)前研究較多是CD44v6。CD44是一個(gè)淋巴細(xì)胞表面歸巢（homing）受體，在各種高轉(zhuǎn)移性癌中高表示。CD44原為淋巴細(xì)胞和小靜脈內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)分子，CD44陽性腫瘤細(xì)胞也可能所以取得淋巴細(xì)胞偽裝，更易進(jìn)入淋巴結(jié)形成轉(zhuǎn)移。27腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第29頁CD44是一個(gè)多功效跨膜透明質(zhì)酸受體,介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞間，細(xì)胞與ECM間相互作用.28腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第30頁胞膜外區(qū):是CD44分子發(fā)揮生物學(xué)功效主要結(jié)構(gòu)，在此區(qū)域，CD44分子信號肽氮末段功效區(qū)（糖基化位點(diǎn)和硫酸軟骨素連接位點(diǎn)）能夠連接胞外基質(zhì)及基底膜透明質(zhì)酸，從而調(diào)整細(xì)胞運(yùn)動(dòng)及形態(tài)；跨膜區(qū):由21個(gè)疏水氨基酸組成；胞漿區(qū):部分可作為蛋白激酶C（PKC）底物被磷酸化，參加信號傳導(dǎo)過程。N-連接糖基化位點(diǎn)

連接糖基化位點(diǎn)

硫酸軟骨素連接位點(diǎn)

29腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第31頁

CD44功效：1）作為透明質(zhì)酸受體（C-C,C–ECM間黏附）；2）為淋巴細(xì)胞歸巢分子；3）賦予腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移潛能；4）參加正常免疫應(yīng)答(Tc活動(dòng)和炎癥反應(yīng)）。

30腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第32頁

腫瘤細(xì)胞表示CD44刺激腫瘤生長路徑：1）固定腫瘤細(xì)胞，為克隆形成提供病灶場所；2）腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞相互作用產(chǎn)生EGF及VEGF，促進(jìn)腫瘤生長；3）CD44還可識(shí)別宿主組織額外配體，直接刺激腫瘤細(xì)胞增殖；4）CD44胞漿內(nèi)部分與細(xì)胞骨架蛋白作用，傳導(dǎo)細(xì)胞分裂信號。31腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第33頁Culty等進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)表明，乳癌細(xì)胞CD44表示與其浸潤能力呈正相關(guān)，只有CD44高表示細(xì)胞株才有結(jié)合降解透明質(zhì)酸鹽能力，[H3]標(biāo)識(shí)透明質(zhì)酸鹽降解率與CD44含量和細(xì)胞浸潤生物學(xué)潛能親密相關(guān)，CD44結(jié)合降解透明質(zhì)酸鹽能力可被抗CD44抗體Hermes-1阻斷。介導(dǎo)降解透明質(zhì)酸鹽是CD44在腫瘤細(xì)胞浸潤過程中主要功效之一。32腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第34頁Washington等免疫組化分析表明，CD44表示與胃癌浸潤表型及生存期相關(guān)，認(rèn)為CD44高表示是浸潤表型及預(yù)后差指標(biāo)。Castella等用免疫組化方法檢測14例早期胃癌，37例晚期胃癌，18例胃周圍轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。結(jié)果表明浸潤程度與CD44表示沒有顯著關(guān)系，但腸型胃癌轉(zhuǎn)移灶CD44V6陽性率比彌漫型胃癌轉(zhuǎn)移灶中CD44V6陽性率顯著增高，說明CD44V6表示可能與腸型胃癌，而不是彌漫型胃癌轉(zhuǎn)移相關(guān)。

33腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第35頁

Guo等用ELISA測定腫瘤病人血清中CD44濃度，表明血清CD44濃度與腫瘤轉(zhuǎn)移及腫瘤增殖相關(guān)，外科切除腫瘤后血清CD44水平顯著下降，認(rèn)為血清CD44濃度可作為監(jiān)測腫瘤增殖及腫瘤轉(zhuǎn)移指標(biāo)。Matsumura等測定尿中脫落細(xì)胞CD446號外顯子產(chǎn)物診療膀胱癌，敏感性91%（40/44），特異性83%（38/46）。體液：治療：抗CD44抗體在腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移治療中有潛力。（靜脈，皮下）34腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第36頁（四）路易斯寡糖（SLEX）

SLEX在正常成人分布于粒細(xì)胞，單核細(xì)胞表面。在腫瘤分布于上皮性腫瘤細(xì)胞表面如肺癌，胃癌，結(jié)腸癌等。SLEX可分泌入血，腫瘤病人血清中可查到SLEX。最近研究指出，腫瘤細(xì)胞表面唾液酸化SLEX作為血管內(nèi)皮細(xì)胞上E-選擇素配體，是結(jié)腸癌早期診療、癌浸潤、預(yù)后不良一個(gè)指標(biāo)。結(jié)腸癌細(xì)胞表面SLEX抗原結(jié)構(gòu)和數(shù)量改變是造成轉(zhuǎn)移關(guān)鍵原因。所以檢測血清或腫瘤組織中SLEX能夠有效監(jiān)測腫瘤，尤其是結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移。35腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第37頁36選擇素是一類新發(fā)覺以唾液化路易斯a和x抗原為識(shí)別配體跨膜蛋白。在腫轉(zhuǎn)移關(guān)鍵步驟如進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)腫瘤細(xì)胞聚集，腫瘤細(xì)胞與特定臟器血管內(nèi)皮錨定粘附等，選擇素被認(rèn)為是可能與腫瘤轉(zhuǎn)移器官選擇性相關(guān)。腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第38頁1、開始黏附選擇素與糖蛋白E\Pselectin---Ec---CD34

SLEX----腫瘤細(xì)胞--Lselectin2、腫瘤細(xì)胞經(jīng)過selectin結(jié)合或介導(dǎo)selectin間相互作用3、受體間相互作用出現(xiàn)牢靠黏附4、腫瘤細(xì)胞與Ec表面同形分子（CD31）相互作用介導(dǎo)細(xì)胞間移出。

37腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第39頁

（五）免疫球蛋白超家族（Ig-SF）Ig-SF包含許多有共同結(jié)構(gòu)特征分子，這一結(jié)構(gòu)包含170-110氨基酸組成7-9個(gè)β折疊，每個(gè)單位在兩條β鏈之間由二硫鍵形成穩(wěn)定復(fù)合物。Ig-SF大部分組員參加細(xì)胞間識(shí)別（包含那些有免疫功效分子，如MHA、CD4、CD8和T細(xì)胞受體，參加N發(fā)育（N-CAM，L1）白細(xì)胞交流（ICAM-1，VCAM-1，PECAM-1）和信息傳遞（CSF-1受體，血小板源性生長因子受體）。38腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第40頁39腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第41頁1．CEA

CEA是一個(gè)高度糖基化細(xì)胞表面糖蛋白，分子量為180KD。近年來對CEA基因及蛋白結(jié)構(gòu)分析表明，CEA是Ig-SF組員之一，是一個(gè)主要細(xì)胞粘附分子，可能有細(xì)胞識(shí)別和相互作用功效，作為粘附分子，CEA可增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞間結(jié)合。Hostetter等給予外源性CEA后，促進(jìn)結(jié)、直腸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移潛能。Benchimol等觀察到產(chǎn)生CEA多細(xì)胞株比產(chǎn)生CEA少細(xì)胞株聚集得快，這種聚集可被CEA抗體完全抑制。將CEAcDNA轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞株，測定細(xì)胞株CEA表示水平，再將表示CEA不一樣細(xì)胞株注射入裸鼠脾臟，結(jié)果表明，CEA高表示細(xì)胞株肝臟轉(zhuǎn)移顯著高于CEA低表示者，而且有肝轉(zhuǎn)移裸鼠血清CEA亦顯著升高。40腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第42頁2．N-CAM

N-CAM是一個(gè)同種親和性鈣依賴性細(xì)胞-細(xì)胞粘附分子，起初表示于N系統(tǒng)。N-CAM表示隨發(fā)育而改變，N-CAM可降低細(xì)胞粘附性，使細(xì)胞呈“漂浮”狀態(tài)。N-CAM在惡性發(fā)展過程中可能機(jī)制：包括細(xì)胞生長接觸抑制。轉(zhuǎn)化N-CAM細(xì)胞株喪失接觸抑制，用抗N-CAM抗體則可抑制腫瘤生長。41腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第43頁3．V-CAM-1（INCAM10）VCAM（vascularcelladhesionmolecule-1）或INCAM（induciblecelladhesionmolecule）是血管內(nèi)皮細(xì)胞中細(xì)胞因子誘導(dǎo)粘附分子，屬Ig-SF組員，是VLA-4（α4/β1）受體。VCAM-1功效是介導(dǎo)白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞之間粘附反應(yīng)，許多惡性細(xì)胞中也有VLA-4表示，所以VCAM-1在這些有VLA-4表示腫瘤中作為腫瘤細(xì)胞粘附受體。42腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第44頁4、ICAM-1是相對分子質(zhì)量為9000糖蛋白，可與整合素αLβ2和Mac-l連接，主要參加細(xì)胞與細(xì)胞之間連接，與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系親密。除介導(dǎo)粘附外，試驗(yàn)證實(shí)ICAM-1可從腫瘤細(xì)胞表面脫落，進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)形成可溶性分子，可助腫瘤細(xì)胞逃逸CTL和NK細(xì)胞免疫監(jiān)視效應(yīng)，促進(jìn)腫瘤發(fā)生與轉(zhuǎn)移。ICAM-1表示增加與黑色素瘤惡性發(fā)展，及增加轉(zhuǎn)移危險(xiǎn)性相關(guān)。

43腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第45頁第三節(jié)

細(xì)胞外基質(zhì)降解

細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）主要由膠原，糖蛋白，蛋白多糖和氨基葡萄糖組成。ECM以基底膜和間質(zhì)結(jié)締組織形式存在，膠原是ECM主要成份，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型膠原主要存在于間質(zhì)結(jié)締組織中，Ⅳ型膠標(biāo)準(zhǔn)主要存在于基底膜。ECM中糖蛋白包含LN，F(xiàn)N，EN（內(nèi)動(dòng)蛋白）和ND（接觸蛋白）等。ECM是腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移天然屏障，腫瘤從原位增殖到浸潤轉(zhuǎn)移演進(jìn)過程中必須具備降解ECM能力。能溶解ECM酶主要是蛋白水解酶，它們活性均與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)。44腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第46頁45腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第47頁四類蛋白水解酶基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）絲氨酸蛋白酶半胱氨酸蛋白酶（Caspase家族）天門冬氨酸蛋白酶幾乎能降解ECM中全部成份，是近年腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移研究中熱點(diǎn)。46腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第48頁（一）、基質(zhì)金屬蛋白酶（MatrixmetalloprotinaseMMP）是一組鋅離子依賴性內(nèi)肽酶（①間質(zhì)膠原酶②明膠酶③間充質(zhì)溶解素），當(dāng)前已發(fā)覺最少28個(gè)組員，幾乎能降解除多糖外全部ECM成份。經(jīng)典MMP以水溶性酶原形式分泌至胞外，需要在激活劑作用下，脫去前肽才具酶活性。新型MMP則不一樣，間質(zhì)溶素可直接以活性酶形式分泌至胞外。膜類MMP（membraNetypeMMPMT-MMP）則結(jié)合于胞膜上，它們共同特征是在前肽區(qū)和催化區(qū)間有一含RXKR序列插入?yún)^(qū)，可能與其活化相關(guān)。47腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第49頁

MMP調(diào)整三個(gè)水平調(diào)控MMP表示和活性1、受酶原合成：生長因子和細(xì)胞因子等活性介質(zhì)(EGF,TGF-β等是酶原合成階段最主要調(diào)整因子)，它們不但能促進(jìn)或抑制MMPmRNA轉(zhuǎn)錄，而且能影響其半衰期。2、酶原活化：組織金屬蛋白酶抑制劑（tissueinhibitorofmetalloproteinaseTIMP）能夠經(jīng)過結(jié)合MMP鋅離子活性中心抑止其活性。

48腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第50頁TissueinhibitorsofmetalloproteinasesIsoformsTargetMMPsTargetpro-MMPsTIMP-1MMP-2、9Pro-MMP-9TIMP-2MMP-2、9Pro-MMP-2TIMP-3MMP-2、9Pro-MMP-2、9TIMP-4MMP-2、9Pro-MMP-23、抑制劑抑制：49腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第51頁TargetsforinhibitingMMPexpressionandactivity

50腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第52頁各種MMP之間含有一定底物特異性，但不是絕正確。同一個(gè)MMP可降解各種ECM成份，而某一個(gè)ECM成份又能夠被各種MMP降解。但不一樣酶降解效率可有不一樣。MMP眾多調(diào)控原因組成微妙調(diào)整網(wǎng)絡(luò)，正是這種準(zhǔn)確調(diào)控機(jī)制確保了機(jī)體內(nèi)生理狀態(tài)下細(xì)胞遷移ECM重構(gòu)；反之就成為腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移等病理過程發(fā)生原因。51腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第53頁

MMP與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移關(guān)系

MMP與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系正被MMP基因轉(zhuǎn)染技術(shù)所證實(shí)，將基質(zhì)溶素和MT1-MMP完整cDNA導(dǎo)入無轉(zhuǎn)移潛能或轉(zhuǎn)移潛能較弱細(xì)胞后，受染細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移率大大提升。反之將MMP反義核酸序列導(dǎo)入高侵襲轉(zhuǎn)移潛能細(xì)胞后，可使其侵襲轉(zhuǎn)移表型減弱。經(jīng)過調(diào)整MMP抑制劑水平，也證實(shí)了MMP在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中作用。52腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第54頁

MMP在人體腫瘤中表示較復(fù)雜，不一樣研究結(jié)果也不盡相同，腫瘤細(xì)胞及其附近間質(zhì)細(xì)胞中都有表示報(bào)道。間質(zhì)細(xì)胞主要是指（成）纖維細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞，巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等。腫瘤周圍間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生MMP，提醒腫瘤細(xì)胞能夠經(jīng)過可溶性介質(zhì)或膜結(jié)合分子與間質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行信息交換，協(xié)同產(chǎn)生和調(diào)整MMP，這在腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移機(jī)制中含有主要意義。53腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第55頁（二）組織蛋白酶Cathepsin家族是一類在大多數(shù)動(dòng)物組織中存在細(xì)胞內(nèi)肽鍵水解酶。包含CathepsinB、D、H等，CathepsinD能降解基底膜、間質(zhì)Ⅰ、Ⅲ型膠原、蛋白聚糖、肌動(dòng)蛋白、肌球蛋白、FN，從而促進(jìn)許多腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移。其表示及分泌受惡性轉(zhuǎn)化、生長因子和促癌劑誘導(dǎo)。組織蛋白酶D是天冬氨酸蛋白酶。54腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第56頁（三）半胱氨酸蛋白酶Caspase家族至今已發(fā)覺有14種Caspase，分為3組。1、Caspase-2，-8，-9，是細(xì)胞凋亡起始Caspase，2、Caspase-3，-6，-7，執(zhí)行細(xì)胞凋亡，是效應(yīng)Caspase。這兩組Caspase在細(xì)胞凋亡中缺一不可。3、由Caspase-1，-4，-5組成，與細(xì)胞凋亡關(guān)系不是很親密，可能與各種炎癥因子成熟相關(guān)。55腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第57頁（四）絲氨酸蛋白酶（纖溶酶原激活劑，PA）

是一個(gè)單鏈絲氨酸蛋白酶，能催化纖維蛋白溶酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白溶酶（plasmin），后者除能引發(fā)血凝塊溶解外，還可降解ECM中層粘蛋白（LN）、纖維連接蛋白（FN）及蛋白聚糖（PG）等，但不降解膠原和彈力蛋白。分為組織型（t-PA）和尿激酶型（u-PA）兩種。56腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第58頁t-PA：促使腫瘤細(xì)胞降解ECM，腫瘤組織勻漿中t-PA水平可作為預(yù)后判斷指標(biāo)之一；u-PA：腫瘤細(xì)胞膜表面uPA受體可與鄰近內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等釋放uPA相結(jié)合，經(jīng)過參加細(xì)胞分化、血管形成、細(xì)胞遷移、ECM降解和組織重建等促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移。另外u-PA還可促進(jìn)細(xì)胞粘附、遷移以及整合素信號通路傳遞等，所以在腫瘤轉(zhuǎn)移中更為主要。57腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第59頁P(yáng)A特異性抑制物為PAI，主要包含PAI-1、PAI-2和PAI-3。

PAI-1分布在腫瘤細(xì)胞及鄰近組織細(xì)胞中，其高水平表示在大多數(shù)腫瘤可提醒預(yù)后不佳，作用機(jī)制可能與調(diào)整腫瘤細(xì)胞蛋白水解酶活性及抑制凋亡相關(guān)。

PAI-2在多數(shù)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移時(shí)表示水平降低，所以其高表示往往提醒預(yù)后良好。58腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第60頁第四節(jié)腫瘤運(yùn)動(dòng)性增強(qiáng)

（一）移動(dòng)素（Motogen）能夠刺激腫瘤細(xì)胞移動(dòng)性不一樣方面，包含：遷移、趨化性、化學(xué)激動(dòng)作用、吞噬動(dòng)力學(xué)等。59腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第61頁移動(dòng)素分為三大類1、刺激腫瘤細(xì)胞移動(dòng)與浸潤因子，如移動(dòng)刺激因子、單核細(xì)胞源性分散因子、膠原性移動(dòng)因子和自分泌移動(dòng)因子（AMF）。2、刺激生長與移動(dòng)因子，如肝細(xì)胞生長因子（HGF）、分散因子、內(nèi)皮生長因子（EGF）和IL-1，3，6。3、刺激移動(dòng)但抑制生長因子，如轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）和干擾素（INF）。60腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第62頁自分泌移動(dòng)因子（AMFs）AMFs是一類由各種腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生蛋白因子，各自有特異糖蛋白受體，信號傳導(dǎo)受G蛋白調(diào)整，最近發(fā)覺AMFs還能夠旁分泌方式作用，此時(shí)稱之為旁分泌移動(dòng)因子（PMF），調(diào)整細(xì)胞生長及移動(dòng)。新組員：autotaxin（ATX）61腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第63頁第五節(jié)腫瘤新生血管是轉(zhuǎn)移阻力最小通道

腫瘤長到1-2mm3時(shí)，為確?？焖僭鲋潮仨毿律苤С?。由腫瘤誘導(dǎo)產(chǎn)生血管，其基底膜薄而且易斷裂，腫瘤細(xì)胞很輕易進(jìn)入這種血管。所以新生血管形成十分有利于腫瘤轉(zhuǎn)移，而一切有利于腫瘤新生血管形成細(xì)胞因子也都有利于腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移。這些細(xì)胞因子包含酸性或堿性纖維母細(xì)胞生長因子（aFGF、bFGF）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）又叫血管通透因子（VPF）、表皮生長因子/轉(zhuǎn)化生長因子（EGF/TGF）。除此之外IL-8、GM/M-GSF、IGF-1、IFN2、促血管素（angiotropin）、P物質(zhì)等能促進(jìn)腫瘤新生血管形成。62腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第64頁腫瘤血管生成因子（TAF）是一個(gè)能促進(jìn)宿主毛細(xì)血管和小靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分裂并刺激毛細(xì)血管生長，胃腫瘤生長與轉(zhuǎn)移提供有利條件。主要由宿主細(xì)胞和瘤細(xì)胞本身分泌可溶性物質(zhì)。血管生長素（Angiogenin）含有強(qiáng)烈誘發(fā)血管生成作用。63腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第65頁與正常組織相比,腫瘤內(nèi)毛細(xì)血管往往處于連續(xù)生長狀態(tài).這些血管極少分化成熟,且形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)出很大差異,如結(jié)構(gòu)粗糙,走行紊亂,常呈不規(guī)則狹窄,擴(kuò)張及扭曲.多數(shù)血管壁薄,僅有一層內(nèi)皮細(xì)胞,細(xì)胞間裂隙較大,基底膜不完整或缺如.這些異常結(jié)構(gòu)非常有利于腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血管腔,進(jìn)而向遠(yuǎn)處播散.腫瘤血管生成受到來自宿主細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞本身產(chǎn)生分泌血管生成刺激因子和抑制因子調(diào)整.當(dāng)前明確有調(diào)整血管生成作用內(nèi)源性因子主要包含：血管生成刺激因子：aFGF,bFGF,angiogenin,IL-8,TGF-a,TGF-b,TNF-a,前列腺素E1,E2,血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子VEGF等。血管生成抑制因子：angiostatin,IFNa,IFNb,TIMPs,肝素酶,血小板因子4,血小板反應(yīng)蛋白等。64腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第66頁UchidaS等研究顯示VEGF表示與食管癌浸潤程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高度相關(guān)。VEGF促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制除了與它參加腫瘤新生血管形成，使血管通透性增加外，還與它能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞金屬蛋白酶和間質(zhì)膠原酶產(chǎn)生相關(guān)。

研究表明腫瘤微血管數(shù)目和微血管密度直接與腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移相關(guān)，誘發(fā)腫瘤血管生成是含有轉(zhuǎn)移潛能腫瘤細(xì)胞特征之一。65腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第67頁第六節(jié)腫瘤逃防止疫系統(tǒng)識(shí)別與破壞

腫瘤細(xì)胞即使從瘤體脫落下來，突破細(xì)胞外基質(zhì)或基底膜進(jìn)入血液循環(huán)或淋巴系統(tǒng)，也不一定能在血液或淋巴系統(tǒng)中存活下來，它可能會(huì)被免疫系統(tǒng)識(shí)別和毀滅掉，所以逃防止疫系統(tǒng)識(shí)別和破壞是腫瘤轉(zhuǎn)移形成又一關(guān)鍵步驟。當(dāng)前認(rèn)為在腫瘤轉(zhuǎn)移時(shí)MHC功效受到抑制，細(xì)胞刺激信號作用減弱，造成了腫瘤細(xì)胞免疫逃逸，這是腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生主要原因。66腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第68頁轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞HLA抗原表示極弱或消失，分化越差瘤細(xì)胞HLA表示也越弱。DouNall等人采取免疫組化法分析110例結(jié)腸癌活檢標(biāo)本，結(jié)果發(fā)覺44%結(jié)腸癌HLA表示幾乎消失，50%呈中度降低。日本學(xué)者研究發(fā)覺，凡攜帶HLA-DR4患者結(jié)腸癌是極易轉(zhuǎn)移，即攜帶HLA-DR4者有47.4%發(fā)生轉(zhuǎn)移，而不帶HLA-DR4者只有18./5%發(fā)生轉(zhuǎn)移。誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡67腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第69頁第七節(jié)轉(zhuǎn)移過程中信號傳導(dǎo)

信號傳導(dǎo)（signaltransduction）是90年代以來生命科學(xué)研究領(lǐng)域熱點(diǎn)與前沿，即使當(dāng)前尚無統(tǒng)一確切定義，但約定俗成基本概念是指細(xì)胞外因子經(jīng)過與受體結(jié)合所引發(fā)細(xì)胞內(nèi)一系列生化反應(yīng)，蛋白與蛋白相互作用，直至細(xì)胞生理反應(yīng)所需基因表示開始過程，即信號從細(xì)胞外經(jīng)過膜到細(xì)胞核過程。68腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第70頁

細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)路徑G蛋白路徑酪氨酸激酶路徑胞膜磷脂酰肌醇代謝路徑蛋白激酶C（PKC）路徑鈣調(diào)蛋白依賴路徑在侵襲轉(zhuǎn)移整個(gè)過程中，包含粘附、降解、移動(dòng)都有信號傳遞參加，細(xì)胞表面受體接收刺激將信號傳入細(xì)胞內(nèi)，調(diào)整細(xì)胞骨架蛋白，激發(fā)移動(dòng)，激活細(xì)胞產(chǎn)生各種蛋白降解酶類。69腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第71頁蛋白酪氨酸路徑

FAK和/或Ras激活有絲分裂原活化蛋白激酶（MAPK）級鏈反應(yīng)傳遞細(xì)胞生長因子信號到細(xì)胞核激活包括細(xì)胞生長與增殖相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄參加細(xì)胞活化、增殖、分化、分泌、遷移、凋亡等

細(xì)胞膜磷脂酰肌醇代謝路徑

聚焦粘附激酶（FAK，focaladhesionkinase，F(xiàn)AK）引發(fā)細(xì)胞膜磷脂酰肌醇代謝，將細(xì)胞外信號轉(zhuǎn)導(dǎo)到胞質(zhì)核糖體合成基因轉(zhuǎn)錄所需蛋白質(zhì)。70腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第72頁整合素經(jīng)FAK和ILK路徑信號轉(zhuǎn)導(dǎo)71腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第73頁第八節(jié)腫瘤轉(zhuǎn)移基因調(diào)控

在癌轉(zhuǎn)移這個(gè)復(fù)雜過程中，必定有許多基因在不一樣層次上參加調(diào)控，包含腫瘤轉(zhuǎn)移基因激活和轉(zhuǎn)移抑制基因失活。許多與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)基因表現(xiàn)為多效性（pleiotropy），同一基因在不一樣組織類型腫瘤中作用有異，而同一腫瘤不一樣階段又可能有不一樣組合多個(gè)基因參加。

72腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第74頁

用突變r(jià)as基因轉(zhuǎn)染鼠成纖維細(xì)胞NIH3T3使之取得轉(zhuǎn)移能力。以后研究表明，最少10余種癌基因由細(xì)胞轉(zhuǎn)染試驗(yàn)證實(shí)可誘導(dǎo)或促進(jìn)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移潛能。最近經(jīng)過對以ras基因蛋白為中心信號傳導(dǎo)系統(tǒng)說明，將癌基因“網(wǎng)絡(luò)化”，網(wǎng)絡(luò)上游癌基因有src、fes、erb-B2等，這些基因編碼含有酪氨酸激酶（PTK）活性蛋白；下游基因有raf、fos、myc等；ras基因蛋白則經(jīng)過GTP與GDP功效狀態(tài)轉(zhuǎn)換,在網(wǎng)絡(luò)中起分子開關(guān)作用。73腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第75頁（一）Nm23：1988年由美國國立癌癥研究院steeg等首先在7株含有不一樣轉(zhuǎn)移能力鼠K-1735黑色素瘤細(xì)胞系中，以消減雜交方法從cDNA文庫中分離到Nm23基因（Non-metastasis非轉(zhuǎn)移性），而且是檢驗(yàn)到第23個(gè)克隆基因。這是當(dāng)前分離到唯一對腫瘤轉(zhuǎn)移起著負(fù)調(diào)控作用基因，它出現(xiàn)造成了腫瘤轉(zhuǎn)移基因及轉(zhuǎn)移抑制基因概念形成。74腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第76頁Nm23H1基因全長8.5Kb,由5個(gè)外顯子和4個(gè)內(nèi)含子組成，位于17號染色體著燃點(diǎn)附近。m23H1基因編碼152氨基酸組成多肽，分子量約17KD，為二磷酸核苷激酶（NDPK）A亞基。NDPKB亞基由Nm23H2基因編碼。NDPK是一類廣泛存在酶，已知其在正常發(fā)育和腫瘤發(fā)生發(fā)展中起一定作用。NDPK可能經(jīng)過參加微管聚合或解聚來影響細(xì)胞有絲分裂和細(xì)胞運(yùn)動(dòng)，并參加經(jīng)過G蛋白介導(dǎo)信號傳導(dǎo)。近年來大量相關(guān)Nm23基因與腫瘤轉(zhuǎn)移報(bào)道，在一些腫瘤中，如乳腺癌、肝癌、黑色素瘤、胃癌等，其Nm23mRNA蛋白表示與腫瘤轉(zhuǎn)移及臨床預(yù)后不良呈反相關(guān)。

75腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第77頁

Nm23基因缺乏與腫瘤轉(zhuǎn)移親密相關(guān)，顯示了Nm23基因作為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因特征。但在另一些腫瘤中，如結(jié)腸癌、N母細(xì)胞瘤、肺癌、前列腺癌、腎細(xì)胞癌、子宮內(nèi)膜癌、喉癌等，其Nm23基因表示水平缺失與腫瘤是否轉(zhuǎn)移及臨床預(yù)后無關(guān)。甚至一些腫瘤如N母細(xì)胞瘤，其惡化和轉(zhuǎn)移時(shí)Nm23表示可能增高。而且對同一個(gè)腫瘤研究結(jié)果也不盡相同，這一系列矛盾結(jié)果使Nm23基因作為一個(gè)簡單化腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因角色受到挑戰(zhàn)，說明人們對Nm23全方面認(rèn)識(shí)遠(yuǎn)未完成，需擴(kuò)大研究范圍并深入進(jìn)行研究。76腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第78頁（二）、KAI1／CD82KAI1基因位于11p11．2區(qū)，長約80kb，其編碼蛋白質(zhì)含277個(gè)氨基酸，相對分子質(zhì)量為29．61×1O3，與CD82結(jié)構(gòu)相同，是一個(gè)高度糖基化細(xì)胞膜蛋白，KAI1蛋白這種結(jié)構(gòu)與其參加調(diào)控細(xì)胞粘附、遷移、增殖、分化相關(guān)，并最終抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。KAI1是一個(gè)通用轉(zhuǎn)移抑制基因，在體內(nèi)分布廣泛，能抑制肝癌、直腸癌、食道癌、胰腺癌、肺癌、膀胱癌、卵巢癌、宮頸癌和乳腺癌等轉(zhuǎn)移。

77腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第79頁KAI1／CD82抑制腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制不清楚，可能與以下原因相關(guān)：(1)KAI1／CD82與β1-整合素、E-鈣連素結(jié)合形成復(fù)合體，調(diào)整β1-整合素、E-鈣連素粘附功效，從而影響腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移。(2)KA11／CD82經(jīng)過影響Src激酶介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)路徑，促進(jìn)細(xì)胞之間同質(zhì)性粘附，抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。(3)KAI1／CD82可與表皮生長因子(epidermalgrowthfactor，EGF)相互作用，下調(diào)EGF與對應(yīng)受體結(jié)合，致使EGF誘導(dǎo)信號傳遞快速衰減，上皮細(xì)胞板狀偽足伸展和細(xì)胞遷移受抑制，從而抑制血管形成，最終抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。

78腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第80頁（三）、Kiss

從人類胎盤中分離到含有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移作用基因。產(chǎn)物是G蛋白結(jié)合受體內(nèi)源性配體，能使細(xì)胞內(nèi)鈣濃度顯著增加。KISS-1能顯著抑制腫瘤細(xì)胞化學(xué)趨化性和侵襲性，并限制腫瘤細(xì)胞遷移功效。

利用熒光標(biāo)識(shí)技術(shù)，發(fā)覺含Kiss1黑色素瘤轉(zhuǎn)移細(xì)胞能抵達(dá)轉(zhuǎn)移靶器官組織，但只表現(xiàn)為單個(gè)細(xì)胞而不能形成瘤組織，表明它們在轉(zhuǎn)移點(diǎn)生長受到抑制。同時(shí)Kiss1能抑制胃癌、肝癌、鱗狀上皮食道癌、胰腺癌等轉(zhuǎn)移。

79腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第81頁(四)、轉(zhuǎn)移基因（MTSL）1989年Ebrallidze從乳腺肉瘤細(xì)胞株中分離出一個(gè)在轉(zhuǎn)移細(xì)胞中高度或中度表示，而非轉(zhuǎn)移細(xì)胞中不表示基因，稱之為轉(zhuǎn)移基因mtsl。Mtsl基因編碼一個(gè)101氨基酸蛋白，這種蛋白屬鈣結(jié)合蛋白家族S100鈣結(jié)合蛋白亞族，是一個(gè)S100相關(guān)鈣結(jié)合蛋白。這種蛋白與細(xì)胞骨架成份作用調(diào)整細(xì)胞移動(dòng)性和侵襲性。當(dāng)前研究表明mtsl基因表示水平與細(xì)胞移動(dòng)性以及腫瘤細(xì)胞侵襲性顯著相關(guān)。80腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制專家講座第82頁（五、腫瘤侵襲誘導(dǎo)基因（TIAM-1）TIAM-11994年由Habets等報(bào)道，TIAM-1位于人21號染色體q22帶上，含兩個(gè)外顯子一個(gè)內(nèi)含子，cDNA長約7.3Kb,編碼1591氨基酸蛋白。TIAM-1蛋白可能是Rac和/或Rho活性調(diào)整因子，后二者為