【雞大腸桿菌滅活疫苗的研制實(shí)驗(yàn)探究7300字（論文）】

-PAGEIII-雞大腸桿菌滅活疫苗的研制實(shí)驗(yàn)探究目錄96761緒論 187981.1研究背景 1218321.2研究目的與意義 1190391.3研究現(xiàn)狀 1272732相關(guān)概念界定 3207162.1雞大腸桿菌 3147352.2研制滅活疫苗的必要性 368972.2.1大腸桿菌是條件性病原體 363602.2.2表雞群易繼發(fā)感染大腸桿菌 374743材料和方法 4106003.1材料 4160363.2方法 4693.3疫苗佐劑的制備 5272883.4疫苗的研制 5175144實(shí)驗(yàn)結(jié)果 6146574.1毒株的選擇 6117164.2疫苗的安全性檢驗(yàn) 623914.3疫苗的最小劑量試驗(yàn) 7298844.4無(wú)菌檢驗(yàn) 7317174.5效力檢驗(yàn) 7325925結(jié)果與討論 72954結(jié)論 916343參考文獻(xiàn) 10690致謝 12PAGE2–PAGE11–1緒論1.1研究背景近幾年來(lái),隨著養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展,大腸桿菌的發(fā)病率越來(lái)越高,不同養(yǎng)雞場(chǎng)的血清型不盡相同,而且大腸桿菌病用藥治療時(shí)又極易產(chǎn)生抗藥性。飼養(yǎng)場(chǎng)、戶在雞群發(fā)病時(shí),憑主觀想象、憑一時(shí)經(jīng)驗(yàn)用藥、加大用藥量等盲目用藥、濫用藥,往往達(dá)不到治療效果,既增加了飼養(yǎng)成本,又延誤了治療時(shí)機(jī)。對(duì)于出口企業(yè)來(lái)說(shuō),難以控制藥物殘留,降低產(chǎn)品品質(zhì),影響出口創(chuàng)匯。也給養(yǎng)雞業(yè)造成很大損失。研制不同血清型的大腸桿菌油乳劑滅活疫苗迫在眉睫,并在此基礎(chǔ)上制定科學(xué)的免疫程序,從而達(dá)到預(yù)防該病的效果。1.2研究目的與意義雞大腸桿菌病是由致病性雞大腸桿菌引起的一種最常見(jiàn)近傳染病,也是危害養(yǎng)雞生產(chǎn)最嚴(yán)重的一種傳染病,其感染率幾近100%,致死率在15%以上。此病在不同季節(jié)、不同日齡均可發(fā)生,易與其他病混合感染,誘發(fā)了其他疾病的發(fā)生,增加了用藥成本,降低了飼料報(bào)酬,同時(shí)降低了家禽產(chǎn)品的品質(zhì),造成重大經(jīng)濟(jì)損失。據(jù)我國(guó)學(xué)者介紹雞致病性大腸桿菌具有70多個(gè)血清型,各血清型之間交叉保護(hù)率極低,各地方血清型種類且差異大,為該病的防治帶來(lái)極大的困難。大腸桿菌病,往往會(huì)由來(lái)自場(chǎng)內(nèi)的一個(gè)或數(shù)個(gè)血清型的致病性大腸桿菌所引起。為有效地控制本病的發(fā)生,本論文進(jìn)行了雞大腸桿菌滅活疫苗的研制實(shí)驗(yàn)，希望能為雞大腸桿菌的治療貢獻(xiàn)微薄之力。1.3研究現(xiàn)狀滅活疫苗指的是第一種病毒或細(xì)菌培養(yǎng)，然后用物理或化學(xué)方法殺死完整的致病微生物，殺死疫苗生產(chǎn)的滅活疫苗根據(jù)生產(chǎn)過(guò)程中使用的佐劑分為不溶性鋁膠體佐劑活疫苗，油乳液“滅活疫苗，蜂膠滅活疫苗。滅活疫苗開(kāi)發(fā)周期短，使用安全，易于保存運(yùn)輸，不易產(chǎn)生不良反應(yīng);但滅活的動(dòng)物疫苗不能繁殖，往往需要接種疫苗才能產(chǎn)生保護(hù)性免疫，因而引起免疫反應(yīng)通常是體液免疫，很少甚至沒(méi)有細(xì)胞接種滅活疫苗產(chǎn)生隨時(shí)間降低的抗體滴度，因此大多數(shù)滅活疫苗需要定期接種疫苗。目前，獸醫(yī)應(yīng)用病毒疫苗是滅活幼苗和減毒幼苗。雖然對(duì)家畜禽類有一定的保護(hù)作用，但一些疫苗的效果并不理想。所以需要開(kāi)發(fā)有效的新型疫苗。近年來(lái)，基因工程，蛋白質(zhì)工程和免疫學(xué)的快速發(fā)展為新疫苗的開(kāi)發(fā)提供了條件。目前有一些已獲得許可的疫苗;其他人仍處于試驗(yàn)階段。最好的疫苗應(yīng)該達(dá)到100％的保護(hù)，但這是不現(xiàn)實(shí)的。理想的疫苗應(yīng)在免疫后數(shù)周內(nèi)免疫，免疫力達(dá)90％以上。這不僅可以降低反復(fù)免疫的成本，而且可以顯著減少環(huán)境中的疾病數(shù)量。理想疫苗的另一個(gè)特點(diǎn)是成本會(huì)計(jì)低，這很重要。疫苗的使用應(yīng)該是安全的，沒(méi)有任何副作用，免疫抑制和干擾同時(shí)免疫的其他疫苗。當(dāng)使用多種疫苗時(shí)，疫苗的協(xié)調(diào)是疫苗設(shè)計(jì)者的關(guān)注點(diǎn)。另外，該疫苗在遺傳學(xué)和熱穩(wěn)定性上都能通過(guò)。遺傳穩(wěn)定，以防病毒回祖先成為病源，這是傳統(tǒng)減毒幼苗最大的缺點(diǎn)。從生產(chǎn)疫苗到最終使用過(guò)程中，不能總是保持冷藏，所以疫苗的熱穩(wěn)定性決定疫苗效果的另一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)。最后一點(diǎn)是，在家畜和家禽的情況下，應(yīng)以被動(dòng)方式進(jìn)行免疫接種。不幸的是，目前沒(méi)有符合上述標(biāo)準(zhǔn)的疫苗，但隨著新方法的應(yīng)用，疫苗的開(kāi)發(fā)至少可以達(dá)到相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)。新的獸醫(yī)疫苗是免疫學(xué)和病毒學(xué)的熱點(diǎn)，包括亞單位疫苗，基因工程幼苗，重組病毒活載體疫苗和基因疫苗。已廣泛應(yīng)用于研究和疾病預(yù)防與控制。最近的疫苗開(kāi)發(fā)重點(diǎn)是基因疫苗。疫苗開(kāi)發(fā)的重點(diǎn)是高效，安全，穩(wěn)定，低成本。2相關(guān)概念界定2.1雞大腸桿菌雞大腸桿菌病是由致病性大腸桿菌所引起雞全身性或局部性感染的一種疾病。雞大腸桿菌病在雞的育雛期、育成期和成年產(chǎn)蛋期均可發(fā)生，一般雛雞多呈急性敗血癥經(jīng)過(guò)，而成年產(chǎn)蛋雞卻往往在開(kāi)產(chǎn)階段發(fā)病，并導(dǎo)致產(chǎn)蛋雞的死淘率增高，嚴(yán)重地影響產(chǎn)蛋雞的產(chǎn)蛋生產(chǎn)性能；種雞場(chǎng)發(fā)生大腸桿菌病之后，不僅會(huì)影響到種雞的產(chǎn)蛋生產(chǎn)性能，而且還會(huì)直接影響到種蛋的孵化率、出雛率，從而會(huì)造成種蛋在孵化過(guò)程中的死胚率增高，孵出雛雞的健康水平降低。雞患大腸桿菌病雖然臨床癥狀表現(xiàn)得多種多樣，但多以引起敗血癥、心包炎、肝周炎、氣囊炎、腹膜炎、輸卵管炎、滑膜炎、大腸桿菌性肉芽腫、臍炎等病變?yōu)橹饕l(fā)病特征，且在多數(shù)情況下常會(huì)因感染雞群受到各種應(yīng)激因素的影響以及其他繼發(fā)感染和并發(fā)感染疾病的影響，則會(huì)導(dǎo)致感染雞群的發(fā)病癥狀表現(xiàn)得更加嚴(yán)重，從而更加增大了雞大腸桿菌病的控制難度。雞大腸桿菌病是由致病性大腸埃希氏桿菌引起的一種傳染病。該病的血清型較多，臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣。該病為條件性傳染病，多繼發(fā)或并發(fā)于其他疾病。根據(jù)大腸桿菌的菌體抗原(O)、表面原(K)和鞭毛抗原(H)的組合不同，可將本菌分為不同的血清型。迄今為止已知的血清型大約有數(shù)千種之多。2.2研制滅活疫苗的必要性2.2.1大腸桿菌是條件性病原體在大腸桿菌普遍存在于自然界和各種動(dòng)物的胃腸道內(nèi)，一般在雞群抵抗力正常的情況下是不易引起雞群致病的，而當(dāng)雞群受到各種應(yīng)激因素的刺激而使得機(jī)體的抵抗力降低時(shí)，則可引起雞群發(fā)病，如給雞群免疫接種疫苗、雞群的養(yǎng)殖密度過(guò)大、雞群轉(zhuǎn)群并舍、更換飼料、舍內(nèi)寒冷潮濕和氣候突變等，這對(duì)雞群來(lái)說(shuō)都是較大的應(yīng)激刺激，均可能會(huì)降低雞群的抵抗力而引起大腸桿菌病感染，尤其是在育雛期或育成期，由于給雞群免疫注射疫苗、雞群轉(zhuǎn)群并舍、更換飼料等，對(duì)雞群均是比較強(qiáng)烈的應(yīng)激刺激，很容易導(dǎo)致雞大腸桿菌病發(fā)生。2.2.2表雞群易繼發(fā)感染大腸桿菌當(dāng)雞群發(fā)生其他疾病(如新城疫、禽流感、傳染性支氣管炎、雞白痢、葡萄球菌病、球蟲(chóng)病、傳染性法氏囊病、馬立克氏病等)之后，雞群的抵抗力降低，有的雞病(如傳染性法氏囊病、馬立克氏病等)還會(huì)對(duì)雞的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生破壞，導(dǎo)致雞群出現(xiàn)不同程度的免疫抑制，從而為大腸桿菌的入侵打開(kāi)了門戶，更容易導(dǎo)致雞群繼發(fā)感染大腸桿菌病。。3材料和方法3.1材料（1）菌種：雞敗血性大腸桿菌EC24、EC30、EC45、EC50、EC44等菌種。（2）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：1~4月齡健康雞。（3）主要器材：無(wú)菌室、無(wú)菌操作工作臺(tái)、恒溫培養(yǎng)箱、搖床、膠體磨、高壓流通蒸汽滅菌柜、干熱箱、顯微鏡、電子天平、燒杯、三角瓶、中性瓶、量筒、試管、平皿、吸管、注射器等。（4）試劑：蛋白胨營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、普通肉湯培養(yǎng)基、T.G小管、G.A斜面、G.P小管；甲醛溶液、10號(hào)白油、司盤-80、吐溫-80、硬脂酸鋁等。面。3.2方法（1）種毒的選擇：種毒的分離和培養(yǎng)，取場(chǎng)內(nèi)多例典型的臨床病雞,無(wú)菌取心血、肝臟組織液劃線于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂和麥康凱平板,置于37e恒溫培養(yǎng)18~24h,挑單個(gè)菌落與麥康凱平板純繁后行革蘭氏染色鏡檢和生化培養(yǎng)鑒定。（2）細(xì)菌的培養(yǎng)特性:在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂種生長(zhǎng)良好,菌落濕潤(rùn),灰白色、光滑,邊緣整齊,隆起。在麥康凱平板上,生長(zhǎng)有粉紅色、光滑、邊緣整齊、不透明、直徑為1~1.5mm的菌落。在營(yíng)養(yǎng)肉湯中生長(zhǎng)良好,有絮狀沉淀。再經(jīng)API生化鑒定。（3）動(dòng)物回歸試驗(yàn):取細(xì)菌肉湯培養(yǎng)物,以0.1ml/羽的劑量肌注10日齡雛雞5羽,另設(shè)肌注生理鹽水對(duì)照組,剖檢死亡病雞,分離致病細(xì)菌。由蛋白胨、氯化鈉、牛肉膏、蛋白粉、硫酸鹽、硫胺素、H2O組成122調(diào)pH為0.1。（4）大腸桿菌滅活疫苗的制備：大腸桿菌的增殖:將大腸桿菌E.y1和E.y2株分別劃線于麥康覬平板,37e培養(yǎng)18~24h,挑菌落于小瓶增菌液中,37e恒溫培養(yǎng)12h,再以1B50的比例擴(kuò)大培養(yǎng)12h,期間每2h振搖1次,根據(jù)所需第三次擴(kuò)大培養(yǎng)12~15h后終止培養(yǎng),檢驗(yàn)計(jì)數(shù)。增菌液的細(xì)菌純檢與計(jì)數(shù):將培養(yǎng)液用細(xì)管稀釋法培養(yǎng)計(jì)數(shù)132,將細(xì)菌密度穩(wěn)定在10ml上。在伊紅亞甲藍(lán)平板上生長(zhǎng)的菌落呈紫黑色,并有金屬光澤。（5）增菌液毒力的檢驗(yàn):以0.1ml的劑量肌注5日齡雛雞5羽,隔離飼養(yǎng)觀察。32~48h內(nèi)能全部致死,并具典型病變。（6）細(xì)菌的滅活:菌液中加入甲醛滅活,終濃度為4j,每隔3h振搖1次,置37e滅活24h,4e保存?zhèn)溆谩?.3疫苗佐劑的制備（1）蜂膠佐劑:將蜂膠置15-24h,敲碎,高速粉碎過(guò)篩,1份蜂膠加4份95%分析純乙醇,25e溶解24h以上,4000r/min離心5min,取上清,4e保存?zhèn)溆?52。（2）油相的制備:注射用白油94ml、司本-806ml、硬脂酸鋁2g的比例混合后,高壓滅菌10磅壓力(115e)30min,冷至室溫備用1.4.6蜂膠滅活疫苗的配制:將等量的E.y1和E.y2菌液,加4%吐溫-80,讓其充分溶解混合后,再加入適量配置好的蜂膠稀釋液,以8000r/min攪拌1min。分裝,4e保存?zhèn)溆?。?）油乳滅活苗的配制:如上同法配制水相,徐徐加入在油相中,以8000r/min攪拌3min,乳化而成。分裝,4e保存?zhèn)溆?。?）大腸桿菌菌液培養(yǎng)：將大腸桿菌菌種，分別接種于小管或小瓶普通肉湯培養(yǎng)基中，置36~37℃培養(yǎng)18~24h，經(jīng)過(guò)純凈檢驗(yàn)合格后作為種子液。將種子液接種于蛋白胨營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，置36~37℃培養(yǎng)18~24h。加適量無(wú)菌生理鹽水將細(xì)菌洗下，裝入滅菌的中性瓶中，充分震蕩菌液，使細(xì)菌分散開(kāi)。將培養(yǎng)的細(xì)菌菌液接種于瓊脂培養(yǎng)基表面，置36~37℃培養(yǎng)18~24h。觀察菌落大小、顏色，應(yīng)均勻一致。用麥?zhǔn)媳葷峁芊y(cè)定菌數(shù)，將菌數(shù)調(diào)整為15億個(gè)/ml。（5）乳化配苗：取注射用白油94份，加司盤-806份，混合后，加硬脂酸鋁2份，隨加隨攪拌至透明為止，高壓滅菌備用。滅活菌液96份，取冷卻后滅菌的吐溫-804份，裝入帶玻璃珠滅菌的瓶中，充分振搖使吐溫-80完全溶解為止。取油相2份放于膠體磨或乳劑缸內(nèi)，開(kāi)動(dòng)電機(jī)慢速轉(zhuǎn)動(dòng)攪拌，同時(shí)徐徐加入水相1份，加完后再以10000r/min攪拌2～5分鐘，在終止攪拌前加入1％硫柳汞溶液，使其最終濃度為0.01％。乳化后，取3～5ml以3000r/min離心15分鐘，若有分層現(xiàn)象，應(yīng)重復(fù)攪拌一次。3.4疫苗的研制將分離到的大腸桿菌在無(wú)菌條件下,接種于肉湯培養(yǎng)基內(nèi),于37℃恒溫箱中增殖,待增殖到預(yù)定菌數(shù)時(shí)取出,按終濃度3‰加入分析純甲醛溶液,置于37℃恒溫箱中滅活24h,每隔4h搖晃1次,然后取出,作無(wú)菌檢驗(yàn),確定無(wú)任何細(xì)菌生長(zhǎng)后,密封,存放于4℃冰箱中備用。另取10號(hào)醫(yī)用白油加入定量硬脂酸鋁和適量的司盤80,高溫消毒后,作為生產(chǎn)疫苗的油相備用。再取檢驗(yàn)合格的菌液,加入定量的吐溫80,作為生產(chǎn)疫苗的水相,按油相∶水相=1.5∶1混合后,經(jīng)膠體磨乳化成大腸桿菌油乳劑滅活苗備用。蜂膠苗:黃褐色,色澤均勻,無(wú)沉淀。油乳苗:乳白色,均質(zhì),不分層。4實(shí)驗(yàn)結(jié)果4.1毒株的選擇培養(yǎng)物經(jīng)染色鏡檢為革蘭氏陰性桿菌,其主要生化特征見(jiàn)下表將兩株有生化特征差異的大腸桿菌E.y1和E.y2,進(jìn)行回歸試驗(yàn)表明:在24~48h內(nèi)能全部致死試驗(yàn)雞,剖檢觀察:具有典型的心包炎、肝周炎等病變,并可從心血、肝組織液中分離回大腸桿菌。4.2疫苗的安全性檢驗(yàn)用1~4月齡健康雞4只，各皮下注射1rnl，注射后允許有輕微精神不振或食欲減退，但應(yīng)在48h內(nèi)恢復(fù)，均應(yīng)健康活潑注射疫苗的雞群在觀察期內(nèi)若由于疫苗注射而表現(xiàn)精神沉郁、食欲不振或下降、排黃綠色稀便、甚至死亡現(xiàn)象,其中出現(xiàn)任何一項(xiàng)均視為不合格。15d宰殺檢查注射部位,若腫脹、潰爛或有干物質(zhì)存在,出現(xiàn)其中任何一項(xiàng)為不合格。取兩疫苗分別劃線于鮮血瓊脂斜面、普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂、麥康凱平板、營(yíng)養(yǎng)肉湯37e培養(yǎng)72h,所有培養(yǎng)基均未見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)。另以0.5ml/羽的劑量肌注10日齡雛雞10羽,隔離飼養(yǎng)觀察1周。疫苗的抗體消長(zhǎng)情況觀察：（1）檢測(cè)方法的建立:根據(jù)大腸桿菌有凝集紅細(xì)胞的原理162,用綿羊紅細(xì)胞,經(jīng)戎二醛固定鞣化后抗原致敏。以1%馬血清為稀釋液,在醫(yī)用微量反應(yīng)板上進(jìn)行間接血球凝集反應(yīng)試驗(yàn)172(按常規(guī)操作方法進(jìn)行),在對(duì)照孔合格的前提下,以呈現(xiàn)/++0凝集的最大稀釋倍數(shù)為該份血清的最高抗體效價(jià)。（2）免疫抗體的檢測(cè):以0.3ml/羽的劑量,取蜂膠苗和油乳苗免疫5日齡雛雞,兩者隔離飼養(yǎng)。免后5、10、15、20、30、40、50d,采血分離血清,用血凝試驗(yàn)檢測(cè)免疫抗體。4.3疫苗的最小劑量試驗(yàn)從同群雞中取試驗(yàn)成雞40只,分成4組,其中1組作為對(duì)照,其余3組分別按0.5ml/只、1ml/只、1.5ml/只的劑量進(jìn)行免疫。免疫20d后,用分離的大腸桿菌液按0.1ml/只腹腔注射,觀察7d,以出現(xiàn)精神沉郁、采食量下降,排黃綠色糞,甚至死亡現(xiàn)象均為不保護(hù)。試驗(yàn)雞每只雞注射疫苗0.5ml,分別于免疫后60d、120d、180d進(jìn)行攻毒試驗(yàn),攻毒方法及判定標(biāo)準(zhǔn)同上,測(cè)定疫苗的保護(hù)期。4.4無(wú)菌檢驗(yàn)將成品1ml直接接種T.G培養(yǎng)基50ml，置37℃培養(yǎng)，3d后從小瓶中吸取培養(yǎng)物，分別接種T.G小管和G.A斜面各2支，每支0.2rnl。1支置37℃，1支置25℃；另取0.2ml接種1支G.P小管，25℃培養(yǎng)5d。應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。按菌液體積加入終濃度為0.3%的甲醛溶液，于37℃溫箱中滅活24h，期間震蕩數(shù)次。滅活后抽取少量菌液，接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24-~48h，進(jìn)行滅活檢驗(yàn)。菌液滅活后應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。4.5效力檢驗(yàn)用3~6月齡健康易感雞8只，各頸部注射疫苗1rnl,3~周后，連同條件相同的對(duì)照組雞8只，各肌肉注射10個(gè)致死量強(qiáng)毒菌液1rnl，觀察14d，對(duì)照組雞全部死亡，免疫組雞至少保護(hù)6只為合格。5結(jié)果與討論雞大腸桿菌病是由致病性大腸桿菌引起的一種雞傳染性疾病。主要表現(xiàn)為膿毒癥、心包炎、肝周炎、氣囊炎、輸卵管炎、腹膜炎、大腸桿菌肉芽腫和全眼炎。目前，該病的預(yù)防和治療一方面由化學(xué)藥物控制，另一方面由疫苗接種。由于化學(xué)藥物的長(zhǎng)期使用，導(dǎo)致了許多耐藥問(wèn)題，耐藥菌株對(duì)動(dòng)物和人類健康造成了嚴(yán)重危害。雞大腸桿菌病的發(fā)病率和死亡率都比較高,同時(shí)還能引發(fā)其它的并發(fā)或繼發(fā)癥,對(duì)養(yǎng)雞業(yè)的危害相當(dāng)嚴(yán)重。由于大腸桿菌易產(chǎn)生耐藥性且耐藥質(zhì)粒能夠遺傳,目前普遍存在抗生素濫用現(xiàn)象,因此藥物治療的療效不佳,研制大腸桿菌疫苗具有重要意義。由于導(dǎo)致雞大腸桿菌病的大腸桿菌致病性菌株的血清型較多,而且各地的分布不盡相同,其免疫原性又存在差異,所以在分離出細(xì)菌后還應(yīng)該對(duì)它的免疫原性進(jìn)行研究,所生產(chǎn)的疫苗在含有優(yōu)勢(shì)血清型的同時(shí),還要具有較好的免疫原性。另外,不同地區(qū)使用時(shí)應(yīng)該考慮含有本地分離的主要流行株,從多個(gè)角度提高免疫效果。本試驗(yàn)研制的雞大腸桿菌多價(jià)滅活疫苗含有標(biāo)準(zhǔn)菌株和多種地方分離菌株,并對(duì)菌種經(jīng)過(guò)系統(tǒng)篩選,具有較好的免疫原性,在實(shí)際生產(chǎn)中能夠起到較好的免疫預(yù)防效果,在當(dāng)前藥物防治效果不佳的情況下使用,不但能夠達(dá)到較好的預(yù)防目的,而且可以有效地節(jié)約藥費(fèi)支出,降低生產(chǎn)成本,同時(shí)滅活疫苗的運(yùn)輸、保存及使用都比較方便,因此該疫苗適合在生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。雞大腸桿菌自家滅活疫苗經(jīng)實(shí)驗(yàn)室和場(chǎng)內(nèi)應(yīng)用試驗(yàn)證明,具有堅(jiān)強(qiáng)的保護(hù)力,臨床應(yīng)用效果顯著,操作簡(jiǎn)便,使用安全,對(duì)降低使用化學(xué)藥物、改善生態(tài)環(huán)境、提高生產(chǎn)品質(zhì)和經(jīng)濟(jì)效益皆具一定的重要作用,有較好的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。從臨床上對(duì)雞支原體(慢呼)病的診斷來(lái)看,幾乎都混合有大腸桿菌的感染,而大腸桿菌病的發(fā)生也較易引發(fā)慢呼病的發(fā)生,克制了這一方也就阻止了另一方的生長(zhǎng),因此筆者認(rèn)為要做好慢呼的防控,需先做好大腸桿菌的防疫。雞大腸桿菌滅活疫苗制作工藝簡(jiǎn)單,設(shè)備要求低,有利于實(shí)際應(yīng)用。結(jié)論做好雞舍的衛(wèi)生和消毒：大腸桿菌存在于自然界中，任何被大腸桿菌污染的東西都有可能成為傳播媒介，所以雞舍的環(huán)境衛(wèi)生需要及時(shí)進(jìn)行打掃消毒。飼料的選擇：選擇適合雞群的飼料，可在飼料中添加適量的維生素、抗生素以及微量元素?？股刂委煟喝绻挥写竽c桿菌感染，可以選擇恩諾沙星、氧氟沙星、氟苯尼考、粘桿菌素、阿莫西林等藥物進(jìn)行治療；如果是大腸桿菌與支原體混合感染可選用氟苯尼考、利福平和鎮(zhèn)喘寧這三種藥物一起進(jìn)行治療；大腸桿菌和病毒混合感染時(shí)可以選用恩諾沙星和雙黃連口服液來(lái)治療。動(dòng)物的大腸桿菌病經(jīng)常在雞和雞中發(fā)生，大腸桿菌病的發(fā)生大多都與養(yǎng)殖的環(huán)境衛(wèi)生程度有關(guān)，大腸桿菌可能感染養(yǎng)殖場(chǎng)中所有的東西，當(dāng)動(dòng)物接觸到被污染的物品或吃到被污染的飼料時(shí)就會(huì)被感染，剛出生的幼仔也有可能因?yàn)槟赣H被感染在哺乳時(shí)被間接感染。目前對(duì)于大腸桿菌病的診斷主要是通過(guò)實(shí)驗(yàn)室的細(xì)菌分離培養(yǎng)鑒定、觀察臨床癥狀、各種檢測(cè)技術(shù)。防治首要的是保證環(huán)境衛(wèi)生，其次可以通過(guò)疫苗、抗生素、中藥進(jìn)行治療?？股氐氖褂眯柚?jǐn)慎，抗生素使用過(guò)多會(huì)破壞動(dòng)物體內(nèi)的正常菌群的平衡，也會(huì)增加菌株耐藥性。在最近的研究中，有研究人員提出了噬菌體療法，噬菌體可以有效防治大腸桿菌病。防治最重要的就是保護(hù)易感動(dòng)物、切斷病原的傳播途徑。

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