（統(tǒng)考版）2023版高考生物一輪復(fù)習(xí)課后定時(shí)檢測(cè)案42基因工程

課后定時(shí)檢測(cè)案42基因工程[基礎(chǔ)對(duì)點(diǎn)練]——考綱對(duì)點(diǎn)·夯基礎(chǔ)1．下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物B．限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C．人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性D．載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)2．在DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)中，對(duì)DNA提取量影響較小的是（）A．使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂并釋放出DNA等核物質(zhì)B．?dāng)嚢钑r(shí)要用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪動(dòng)C．在析出DNA黏稠物時(shí)，要緩緩加入蒸餾水，直至黏稠物不再增多D．要用冷酒精沉淀DNA，甚至可將混合液再放入冰箱中冷卻[提能強(qiáng)化練]——考點(diǎn)強(qiáng)化·重能力3．[經(jīng)典高考]北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，抗凍能力越強(qiáng)，下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過(guò)程示意圖，有關(guān)敘述正確的是（）①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測(cè)序B．將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白C．過(guò)程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因，需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D．應(yīng)用DNA探針技術(shù)，可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá)[大題沖關(guān)練]——綜合創(chuàng)新·求突破4．[2022·廣東汕頭市高三三模]葉綠體基因工程是指向葉綠體基因組中引入外源目的基因，并使之表達(dá)。Rubisco酶（簡(jiǎn)稱R酶）是光合作用中CO2固定的關(guān)鍵酶，深紅紅螺菌的R酶活性是一般植物的4倍?？茖W(xué)家嘗試將該菌的Rubisco基因（簡(jiǎn)稱R基因）導(dǎo)入玉米葉綠體，提高玉米R(shí)酶活性，進(jìn)而提高玉米光合能力。RbcL基因位于葉綠體DNA上，其產(chǎn)物參與光合作用過(guò)程。（1）在構(gòu)建基因表達(dá)載體中，使用了玉米葉綠體特異性基因RbcL基因的啟動(dòng)子和終止子，其目的是。在構(gòu)建該表達(dá)載體時(shí)，需要使用的工具酶有。（2）科學(xué)家試圖修改R基因中部分堿基，以改變R酶部分氨基酸序列，以進(jìn)一步提高R酶的活性，該操作屬于工程。（3）獲得成功轉(zhuǎn)化R基因的玉米細(xì)胞，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植株其中使用到三種培養(yǎng)基主要激素配方如下（NAA是一種生長(zhǎng)素類似物，6－BA是一種細(xì)胞分裂素）。其中培養(yǎng)基A主要作用是，誘導(dǎo)培養(yǎng)物生根的培養(yǎng)基編號(hào)為。培養(yǎng)基編號(hào)ABCNAA（mg/L）6－BA（mg/L）5.[2022·天津高三三模]針對(duì)新冠病毒（SARS－CoV－2）的重組蛋白疫苗、核酸疫苗（包括DNA疫苗和RNA疫苗）等疫苗都在研發(fā)當(dāng)中。下圖為其中一種疫苗的研發(fā)思路，圖中①～⑦表示過(guò)程，箭頭表示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)（四種酶的識(shí)別序列詳見表），標(biāo)記基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存。（1）圖中①過(guò)程需要使用酶先得到cDNA，再使用技術(shù)擴(kuò)增得到S基因。（2）為使③過(guò)程順利進(jìn)行，需先使用限制酶和切割質(zhì)粒B，選用兩種限制酶對(duì)新冠病毒的S基因進(jìn)行切割的目的是_________________________________________________________________________________________________________________________________________（答出1點(diǎn)即可）。（3）圖中表示篩選的過(guò)程是（填編號(hào)），為達(dá)到利用標(biāo)記基因篩選的目的，普通的P型酵母菌應(yīng)該滿足的條件是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。（4）重組疫苗注入志愿者體內(nèi)后，S蛋白基因指導(dǎo)合成的S蛋白作為，刺激機(jī)體產(chǎn)生能與之相結(jié)合的抗體，抗體的分泌量可作為檢測(cè)疫苗對(duì)志愿者免疫效果的指標(biāo)。參加臨床試驗(yàn)的志愿者需要滿足的條件之一是（選填“有”或“無(wú)”）SARS－CoV－2感染史，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。6．[2022·遼寧沈陽(yáng)市高三三模]絞股藍(lán)細(xì)胞中含有抗煙草花葉病毒（TMV）基因，能合成抗TMV蛋白，使絞股藍(lán)葉片能抗TMV感染。科研人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將絞股藍(lán)細(xì)胞中的抗TMV基因轉(zhuǎn)入煙草細(xì)胞，培育出了抗TMV的煙草，主要流程如圖所示。請(qǐng)分析下圖并回答問(wèn)題：（1）從絞股藍(lán)細(xì)胞中提取抗TMV基因轉(zhuǎn)錄的RNA，合成目的基因。過(guò)程①需要的酶是。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，反應(yīng)體系中除有緩沖液、原料（dNTP）、目的基因外，還應(yīng)含有。（2）由①獲得的目的基因在構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)在目的基因的首端和尾端分別添加，同時(shí)為了與表達(dá)載體連接，通常在兩端插入不同的限制性酶切位點(diǎn)，主要原因是。由圖可知，在過(guò)程③中應(yīng)將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T－DNA上，同時(shí)該片段中還應(yīng)有抗性基因。（3）將含抗TMV基因的煙草細(xì)胞經(jīng)⑤獲得再生植株的生物技術(shù)是。這項(xiàng)技術(shù)不僅能實(shí)現(xiàn)快速繁殖作物還能保持優(yōu)良品種的。（4）過(guò)程⑥在個(gè)體生物學(xué)水平鑒定，需要做實(shí)驗(yàn)，可檢測(cè)植株是否具有抗性以及抗性的強(qiáng)度。7．超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的獲得與鑒定。在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖1所示，P蛋白在玉米株系的表達(dá)量如圖2所示。回答下列問(wèn)題：（1）強(qiáng)啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被識(shí)別并結(jié)合，驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用酶組合，將片段和Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。（2）據(jù)圖2分析，選擇a1、a2、a3玉米株系，作為超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的生理特性研究的實(shí)驗(yàn)材料，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。課后定時(shí)檢測(cè)案421．解析：目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物，A正確；限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶，B正確；胰島素具有生物活性，胰島素原不具有生物活性，所以人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性，C正確；載體上的抗性基因可用于篩選含重組DNA的細(xì)胞，但不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)，D錯(cuò)誤。答案：D2．解析：A項(xiàng)的做法是為了充分釋放出核中的DNA分子，使進(jìn)入濾液中的DNA盡量的多；C、D項(xiàng)是讓DNA充分沉淀，保證DNA的量；B項(xiàng)的操作并不能使DNA增多或減少。答案：B3．解析：過(guò)程①獲得的目的基因已不含非編碼區(qū)和內(nèi)含子，因此不能用于比目魚基因組測(cè)序，A錯(cuò)誤；多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的新基因表達(dá)的是多個(gè)抗凍蛋白的重復(fù)序列，而不是抗凍蛋白中11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，因此不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白，B正確；導(dǎo)入農(nóng)桿菌是為了擴(kuò)增和更易導(dǎo)入番茄細(xì)胞，C錯(cuò)誤；DNA探針技術(shù)不能檢測(cè)基因是否完全表達(dá)，目的基因的完全表達(dá)應(yīng)該檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)，D錯(cuò)誤。答案：B4．解析：（1）啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，用于啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄，而終止子是基因轉(zhuǎn)錄的結(jié)束信號(hào)，故在構(gòu)建基因表達(dá)載體中，使用了玉米葉綠體特異性基因RbcL基因的啟動(dòng)子和終止子，其目的是保證R基因可以在葉綠體中正常表達(dá)；表達(dá)載體構(gòu)建需用到的工具酶有限制酶（切割目的基因和運(yùn)載體）和DNA連接酶（連接切割過(guò)的目的基因和運(yùn)載體）。（2）結(jié)合分析可知，“修改R基因中部分堿基，以改變R酶部分氨基酸序列，以進(jìn)一步提高R酶的活性”的目的是改造蛋白質(zhì)，故屬于蛋白質(zhì)工程，該工程是在基因水平進(jìn)行的操作。（3）在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例影響細(xì)胞的分化：當(dāng)生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例適中時(shí)，可誘導(dǎo)形成愈傷組織，故培養(yǎng)基A的主要作用是誘導(dǎo)脫分化形成愈傷組織；當(dāng)生長(zhǎng)素的比例大于細(xì)胞分裂素比例時(shí)，可誘導(dǎo)生根，故誘導(dǎo)培養(yǎng)物生根的培養(yǎng)基編號(hào)為C。答案：（1）保證R基因可以在葉綠體中正常表達(dá)限制酶和DNA連接酶（2）蛋白質(zhì)（3）誘導(dǎo)脫分化形成愈傷組織C5．解析：（1）利用RNA得到相應(yīng)DNA的方法為逆轉(zhuǎn)錄，起作用的酶為逆轉(zhuǎn)錄酶，在體外將DNA擴(kuò)增的技術(shù)是PCR（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）。（2）NcoⅠ的識(shí)別切割位點(diǎn)為C↓CATGG，NheⅠ的識(shí)別切割位點(diǎn)為G↓GATCC，C分子的兩端分別有－GATC和GTAC－序列，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，可知需要用限制酶NcoⅠ、NheⅠ切割質(zhì)粒B。由于同種限制酶切割得到的DNA片段兩端黏性末端相同，用DNA連接酶連接時(shí)可出現(xiàn)S基因自身環(huán)化以及S基因與運(yùn)載體反向連接的現(xiàn)象，所以常選用兩種限制酶對(duì)新冠病毒的S基因進(jìn)行切割，目的是防止S基因自身環(huán)化、防止S基因與運(yùn)載體反向連接、防止運(yùn)載體自身環(huán)化。（3）圖中表示篩選的過(guò)程是⑤（篩選含重組質(zhì)粒的P型酵母菌），其質(zhì)粒上的標(biāo)記基因SUC2能控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存，篩選時(shí)應(yīng)使用以蔗糖為唯一碳源的培養(yǎng)基。為達(dá)到利用標(biāo)記基因篩選的目的，普通的P型酵母菌應(yīng)該滿足的條件是自身不能合成蔗糖酶（普通的P型酵母菌不能利用培養(yǎng)基中的蔗糖生存）。（4）重組疫苗注入志愿者體內(nèi)后，S蛋白基因指導(dǎo)合成的S蛋白作為抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫過(guò)程，機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生能與之相結(jié)合的抗體，抗體的分泌量可作為檢測(cè)疫苗對(duì)志愿者免疫效果的指標(biāo)。參加臨床試驗(yàn)的志愿者需要滿足無(wú)SARS－CoV－2感染史，即未感染過(guò)新冠病毒，因?yàn)橛蠸ARS－CoV－2感染史的志愿者血清中會(huì)存在一定量的相應(yīng)抗體，對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾。答案：（1）逆轉(zhuǎn)錄PCR（2）NcoⅠNheⅠ防止S基因自身環(huán)化、防止S基因與運(yùn)載體反向連接、防止運(yùn)載體自身環(huán)化（3）⑤不能合成蔗糖酶（4）抗原無(wú)有SARS－CoV－2感染史的志愿者血清中會(huì)存在一定量的相應(yīng)抗體，對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾6．解析：（1）過(guò)程①為逆轉(zhuǎn)錄出單鏈的DNA，在合成雙鏈DNA時(shí)，需要的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶。利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增目的基因，PCR反應(yīng)體系中除含緩沖液、模板DNA、四種脫氧核苷酸外，還應(yīng)有引物和熱穩(wěn)定性的DNA聚合酶（Taq酶）。（2）為了使目的基因能正常表達(dá)，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要在目的基因的兩端添加啟動(dòng)子和終止子。為了使目的基因能定向插入表達(dá)載體，避免自身環(huán)化，常常在目的基因的兩端插入不同的限制性酶切位點(diǎn)。圖中⑤過(guò)程在含有卡那霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，說(shuō)明構(gòu)建的重組質(zhì)粒上含有的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因。（3）將離體的細(xì)胞培育成一個(gè)完整的植株采用的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。這種技術(shù)的繁殖方式為無(wú)性繁殖，能夠保持優(yōu)良品種的遺傳特性。（4）若從個(gè)體水平鑒定，可通過(guò)接種煙草花葉病毒（TMV）的方法來(lái)確定植株是否具有抗性以及抗性的強(qiáng)度。答案：（1）逆轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶引物和Taq酶（2）啟動(dòng)子和終止子使目的基因能定向插入表達(dá)載體，避免自身環(huán)化卡那霉素（3）植物組織培養(yǎng)（或答：“微型繁殖技術(shù)”）遺傳特性（4）TMV接種7．解析：（1）強(qiáng)啟動(dòng)子能驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄，說(shuō)明強(qiáng)啟動(dòng)子能被RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，同時(shí)確保強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因不