非洲豬瘟病毒的活性與滅活

非洲豬瘟（AfricanSwineFever，ASF）是由非洲豬瘟病毒引起的豬的一種傳染病。該病毒除具有一般病毒所具有的常規(guī)屬性之外，還有其獨(dú)特的個(gè)體特性。自2018年8月，我國(guó)首次報(bào)道非洲豬瘟疫情以來(lái)，該病對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的打擊。針對(duì)該病，目前仍然沒(méi)有特定的治療措施和有效的疫苗預(yù)防，唯一的辦法就是加強(qiáng)防控，通過(guò)生物安全措施進(jìn)行預(yù)防。然而，防控方案及生物安全措施的制定與實(shí)施，必須要依據(jù)該病毒的特性確定。為此，搜集相關(guān)材料,以供參考。1非洲豬瘟病毒簡(jiǎn)介非洲豬瘟病毒屬于DNA病毒目（dsDNA），非洲豬瘟病毒科（Asfarviridae），非洲豬瘟病毒屬（Asfivirus）。易感動(dòng)物為豬和鈍緣軟蜱。非洲豬瘟病毒與虹彩病毒形態(tài)相似，但其DNA結(jié)構(gòu)及復(fù)制方式則與痘病毒相似。非洲豬瘟病毒的浮密度在Percoll中為1.095g/cm3,在CsCl中為1.19～1.24g/cm3，沉降系數(shù)（S20w）約為3500S。病毒含有5種多肽，并含有依賴子DNA的RNA多聚糖、蛋白激酶、核酸三磷酸、磷酸水解酶、拓?fù)洚悩?gòu)酶。2非洲豬瘟病毒的活性1.非洲豬瘟病毒的理化特性。非洲豬瘟病毒對(duì)腐敗、溫度、干燥及消毒劑具有較強(qiáng)的抵抗力。在血液、尿和糞中非常穩(wěn)定，能保留在經(jīng)加工的豬肉制品中。適宜的蛋白質(zhì)環(huán)境中，非洲豬瘟病毒可在較大的溫度范圍和pH范圍內(nèi)存活。

1）溫度。高度耐低溫。病毒在冷凍中保存6年仍有感染性；4℃可存活1年以上；25～37℃可存活數(shù)周。凍干的病毒在40℃15d或50℃下3.5h仍不被破壞。加熱：56℃/70min滅活，60℃/20min滅活。實(shí)驗(yàn)室條件下，-70℃存放非洲豬瘟病毒，能否保持感染性尚不確定，但-20℃存放能被滅活。相對(duì)于-20℃，4℃更能夠維持病毒的感染活性。

2）pH。在無(wú)血清培養(yǎng)基中pH<3.9或>11.5可被滅活。血清可增加病毒的抵抗力，例如在pH為13.4時(shí)，抵抗力在沒(méi)有血清的情況下可持續(xù)21h，在有血清的情況下可持續(xù)7d。某些毒株在pH1.9～13.4范圍內(nèi)2h或更長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)可保持活性。

3）化學(xué)品/消毒劑。非洲豬瘟病毒對(duì)乙醚、氯仿等脂溶劑敏感，完整的病毒粒子能夠抵抗蛋白酶的作用，但易被胰蛋白酶滅活。在0.5%石碳酸和50%甘油混合液中，于室溫下可保存536d。1%福爾馬林在6d內(nèi)或2%氫氧化鈉24h可殺死血中病毒。滅活：8/1000氫氧化鈉（30min），次氯酸鹽-2.3%氯（30min），3/1000福爾馬林（30min），3%鄰苯基苯酚（30min）和碘化合物。病毒對(duì)環(huán)境的抵抗力較強(qiáng)，有效消毒劑的種類較少。目前最有效的消毒劑是10%的苯及苯酚。

2.在豬體內(nèi)的存活能力。非洲豬瘟病毒感染后，家豬在出現(xiàn)癥狀前24～48h可以承受感染病毒的襲擾。急性感染期，豬的組織、血液、分泌物和排泄物中均含有大量病毒。急性感染后存活豬數(shù)月內(nèi)仍可以向體外排毒，但藏匿病毒的能力下降。野豬只有在淋巴結(jié)聚集具有感染水平的病毒量，其他組織一般在感染2個(gè)月后很難聚集有足夠感染水平的病毒量。在野豬或家豬的淋巴組織中，具備感染能力的病毒滴度持續(xù)期尚不清楚，但不同個(gè)體間可能存在差異。

非洲豬瘟病毒超強(qiáng)毒株可導(dǎo)致豬在12～14d內(nèi)100%死亡，病豬血液中的病毒含量大于108個(gè)病毒粒子/mL,主要侵襲淋巴細(xì)胞，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞凋亡、血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和出血。中等毒力毒株感染豬死亡率一般為30%～50%，低毒力毒株感染僅引起少量豬只死亡，偶見(jiàn)低水平的病毒血癥和體溫升高，病毒可在感染康復(fù)豬體內(nèi)持續(xù)存在。

3.在血液中的存活能力。在室溫下血中的病毒可存活數(shù)周，室溫條件下，在血清中非洲豬瘟病毒可存活18個(gè)月，從放在室溫下15周的腐敗血清中及放在4℃18個(gè)月到6年的血液中能分離到該病毒。在冷凍的血液中可存活6年，37℃可在血液中存活1個(gè)月，在腐敗的血液中能存活15周。

4.在豬場(chǎng)圈舍中的存活能力。暴發(fā)非洲豬瘟后全區(qū)撲殺的豬場(chǎng)圈舍中3個(gè)月后仍能發(fā)現(xiàn)病毒。

5.在血液和土壤混合物中的存活能力。在23℃及以下溫度，病毒在血液和土壤混合物中能存活4個(gè)月。

6.在冷凍肉或尸體內(nèi)可以存活15年，在腐敗的野豬尸體中至少存活20d。

7.在糞便中可以存活11d以上，20℃在糞便中存活11d。

8.在腐敗的骨髓中可存活數(shù)月。在骨髓中存活180d，但不能從腐敗的病料樣品中分離到非洲豬瘟病毒。

9.在缺乏蛋白質(zhì)的環(huán)境中，病毒的存活能力大大降低。

10.病毒可在軟蜱組織中存活數(shù)年之久?？梢栽诿浇殁g緣軟蜱（鈍緣蜱屬，Ornithodorossp.）中繁殖。

11.該病毒可在壁虱體內(nèi)增殖，并能經(jīng)卵傳遞病毒。

12.對(duì)小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、馬、貓等動(dòng)物不發(fā)生自然感染和人工感染。

13.在肉制品中的存活能力。非洲豬瘟病毒可在血液、糞便和組織中長(zhǎng)期存活，特別是可在已受感染的、未煮熟或煮的不熟的豬肉制品中長(zhǎng)期存活。凍肉中可存活數(shù)年至數(shù)十年，在帕爾瑪火腿里存活399d，從加工后貯存5個(gè)月的火腿和貯存了6個(gè)月的火腿的骨髓中發(fā)現(xiàn)了非洲豬瘟病毒。3非洲豬瘟病毒在相關(guān)物品中的滅活程序1.泔水中非洲豬瘟病毒的滅活程序。根據(jù)最新版即2018年（第27版）《OIE陸生動(dòng)物衛(wèi)生法典》（簡(jiǎn)稱2018年《OIE陸生法典》）中的規(guī)定，泔水中非洲豬瘟病毒的滅活應(yīng)采用以下程序：在連續(xù)攪拌的情況下，將泔水保持在至少90℃的溫度下至少60min，或在絕對(duì)壓力為3巴（bar）的情況下，將泔水保持在至少121℃的溫度下至少10min，或用已證明可以使非洲豬瘟病毒滅活的其他等效措施處理。

2.肉中非洲豬瘟病毒的滅活程序。2018年《OIE陸生法典》規(guī)定，肉中非洲豬瘟病毒的滅活，應(yīng)采用以下程序之一：1）熱處理。肉中非洲豬瘟病毒的滅活應(yīng)按下列程序之一進(jìn)行處理：在密閉的容器中進(jìn)行熱處理，F(xiàn)o值大于或等于3.00；在最低溫度為70℃的情況下熱處理至少30min，應(yīng)確保整塊肉內(nèi)外都達(dá)到該溫度。2）干腌豬肉。肉用鹽腌制，并干燥至少6個(gè)月。

3.豬腸衣中非洲豬瘟病毒的滅活程序。豬腸衣中非洲豬瘟病毒的滅活，應(yīng)采用以下程序：在12℃或更高溫度下，用干鹽（NaCl）或飽和鹽水（Aw<0.80）或含86.5%NaCl、10.7%Na2HPO4和2.8%Na3PO4（重量/重量/重量）的磷酸鹽補(bǔ)充干鹽處理至少30d。

4.豬皮和豬裝飾品中非洲豬瘟病毒的滅活程序。皮和裝飾品中非洲豬瘟病毒的滅活，應(yīng)采用以下程序之一：1）在水中煮沸一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間，以確保去除除骨、獠牙或牙齒以外的任何物質(zhì)。2）在4%（w/v）的洗滌用蘇打（碳酸鈉，Na2CO3）溶液中浸泡并攪動(dòng)，保持pH值在11.5或以上，至少48h。3）在保持pH3.0以下的甲酸溶液（每1000L水中加100kg鹽和12kg甲酸）中浸泡攪動(dòng)至少48h，可添加潤(rùn)濕劑和敷料劑。4）對(duì)于生皮（未加工過(guò)的），用含2%洗滌堿（碳酸鈉）的鹽腌制至少28d。5）用1%福爾馬林處理至少6d。

5.豬鬃中ASFV的滅活程序。工業(yè)用豬鬃中ASFV的滅活，應(yīng)采用以下程序之一：1）煮沸至少30min。2）在1%甲醛溶液中浸泡至少24h。

6.豬用雜物（墊草）和糞便中非洲豬瘟病毒的滅活程序。豬用雜物（墊草）和糞便中非洲豬瘟病毒的滅活，應(yīng)采用以下程序之一：1）在最低溫度55℃下進(jìn)行至少1h的濕熱處理。2）在最低溫度70℃下進(jìn)行至少30min的濕熱處理。

7.豬血原料中非洲豬瘟病毒的滅活程序。非洲豬瘟病毒在血液的含量較高，且對(duì)外界的抵抗力極強(qiáng)，因此含有非洲豬瘟病毒的血液物品是該病傳播的高風(fēng)險(xiǎn)因素。在血液物品的處理、運(yùn)輸、保存過(guò)程中必須實(shí)施嚴(yán)格的生物安全管理措施。

中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第91號(hào)（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部2018年12月28日），以豬血為原料的飼用血液制品，產(chǎn)品生產(chǎn)應(yīng)采用噴霧干燥工藝，噴霧干燥設(shè)備進(jìn)風(fēng)溫度不低于220℃、出風(fēng)溫度不低于80℃，噴霧干燥后的物料要在60℃以上保持20min以上。成品要在成品庫(kù)（室溫維持20℃以上）存放20d以上，并實(shí)施產(chǎn)品檢驗(yàn)合格和