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免疫膠體金層析法
——金標(biāo)記免疫法測(cè)HCG2021/3/29星期一1原理采用膠體金標(biāo)記抗體,以硝酸纖維素膜為載體,使抗原抗體反應(yīng)和洗滌在同一滲濾膜上,反應(yīng)后根據(jù)在膜上的顏色判斷結(jié)果。以硝酸纖維素膜為載體,利用微孔膜毛細(xì)管作用,使膜一端的液體慢慢向另一端滲移,猶如層析2021/3/29星期一2←鼠抗人HCG單抗←膠體金顆?!鸋CG分子←膠體金標(biāo)記鼠抗人HCG單抗←羊抗鼠IgG2021/3/29星期一3MAXHCG陽性標(biāo)本尿中HCG與金標(biāo)記的鼠抗人HCG單抗結(jié)合形成免疫復(fù)合物在檢測(cè)線未結(jié)合的金標(biāo)記鼠抗人HCG單抗(IgG)隨著尿液上行,到達(dá)質(zhì)控線與羊抗鼠IgG(二抗)結(jié)合而顯色,作為質(zhì)控對(duì)照。隨層析作用向上移動(dòng),至檢測(cè)線與鼠抗人HCG抗體結(jié)合而聚集顯色positive2021/3/29星期一4MAXHCG陰性標(biāo)本尿中無HCG與金標(biāo)記的鼠抗人HCG單抗結(jié)合形成免疫復(fù)合物在檢測(cè)線未結(jié)合的金標(biāo)記鼠抗人HCG單抗(IgG)隨著尿液上行,到達(dá)質(zhì)控線與羊抗鼠IgG(二抗)結(jié)合而顯色,作為質(zhì)控對(duì)照。隨層析作用向上移動(dòng),至檢測(cè)線與鼠抗人HCG抗體不結(jié)合而不顯色negative2021/3/29星期一5MAX試紙條失效金標(biāo)鼠抗人IgG單抗隨層析作用向上移動(dòng),到達(dá)質(zhì)控線,無羊抗鼠IgG(二抗)或破壞失效,不結(jié)合而不顯色,作為質(zhì)控對(duì)照。失效2021/3/29星期一6MAX大便隱血2021/3/29星期一7注意事項(xiàng)1.將試條有標(biāo)志線的下端浸入尿液標(biāo)本中,深度不可超過標(biāo)志線(若超過,可能會(huì)出現(xiàn)假陽性)2.約3秒后取出,平放,5分鐘內(nèi)觀察結(jié)果(時(shí)間不能小于5分鐘):兩條紅線為(+),提示尿中含HCG。一條紅線為(一),表示不含HCG。(時(shí)間過短,可能有假陰性)2021/3/29星期一8方法學(xué)評(píng)價(jià)該法為定性檢測(cè)尿中HCG,不能確定其濃度因?yàn)樵摲ㄊ怯脝慰箒頊y(cè)定HCG,特異性較高,黃疸、蛋白、血細(xì)胞和渾濁度對(duì)結(jié)果觀察都無影響。、晨尿中一般含有最高的HCG值,檢出率較高。檢測(cè)時(shí)間:HCG一般在受精卵著床后幾天才出現(xiàn)在尿液中,而且要達(dá)到一定的量才能被檢出,因此,對(duì)于平時(shí)月經(jīng)正常的婦女需在月經(jīng)推遲后才可能在尿中檢出,二月經(jīng)周期長(zhǎng)或排卵異常的婦女有可能在停經(jīng)
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