人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹

人絨毛膜促性腺激素（HCG）稀釋經驗分享和臨床應用介紹

鄭州金域生化發(fā)光室1人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024概述人絨毛膜促性腺激素（HCG）的簡單介紹人絨毛膜促性腺激素（HCG）的定量檢測人絨毛膜促性腺激素（HCG）的臨床應用2人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024關于人絨毛膜促性腺激素（HCG）HCG是由兩個非共價鍵相連的肽鏈組成的糖蛋白激素。其單個亞基不具有生物活性，當連接成完整化合物時始具活性，分子量約為4.7萬。HCGα亞單位的氨基酸排列與黃體生成素（LH）α亞單位相似，故用完整的抗HCG分子的抗體測定HCG時與LH間有免疫交叉反應。但它們的β亞單位各不相同。因此為避免交叉反應，目前均采用抗β-HCG單克隆抗體進持特異的HCG檢查，近年來還有報道采用抗β-HCG羧基末端肽單克隆抗體以進一步提高檢測的敏感性和特異性。3人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024HCG與其它激素的區(qū)別HCG與LH、FSH、TSH有一個相同的α亞基和一個不同的β亞基。LH的β亞基含121個氨基酸，HCG的β亞基相當于在LH的β亞基的C末端延伸了24個氨基酸，共有145個氨基酸。4人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024HCG的檢測最初為膠體金法進行定性檢測（試紙條定性）上世紀九十年代，使用放射免疫法目前主流使用化學發(fā)光、電化學發(fā)光（貝克曼庫爾特Access，雅培Axsym，德普DPC系列，羅氏Elecsys，強生Eci）5人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024定性檢測局限定性檢測的應用與局限1、由于是定性的方法也就是說只是給出陽性陰性的結果，而不能給出正確的數值。因此在用于判定其它疾病方面用定量檢測血清HCG來代替。2、由于檢測者可能是取隨機尿液檢測，就有可能在妊娠早期出現假陰性的結果。3、一些與HCG有相同或相適片斷的激素可能會與尿試紙條上的抗體結合而造成假陽性。如黃體生成素(LH)、某些前列腺素、某些激素類避孕藥6人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024定量檢測放射免疫分析由于其靈敏度及穩(wěn)定性不如現在的化學發(fā)光也已被淘汰。7人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024（電）化學發(fā)光檢測（電）化學發(fā)光檢測相比較放射免疫分析靈敏度，準確度，穩(wěn)定性及線性范圍均有明顯的優(yōu)勢，但是由于臨床所需檢測HCG范圍極廣，且由于免疫檢測鉤狀效應的存在使得（電）化學發(fā)光檢測HCG檢測仍然存在一定的局限。在日常檢測中我們通過利用HCG試紙條聯合應用達到節(jié)約試劑的目的，同時可以有效避免鉤狀效應的出現。8人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024鉤狀效應鉤狀效應是指免疫檢測中由于抗原、抗體濃度比例不合適而致檢測結果呈假陰性的現象。1929年Heidelberger利用等量抗體檢測濃度遞增抗原，當抗原濃度較低，抗體濃度相對較高時，沉淀反應不明顯；當抗原濃度增加到與抗體濃度比例合適時，沉淀反應明顯；繼續(xù)增加抗原濃度時，沉淀反應反而減弱。據此繪出雙相應答曲線，曲線高峰區(qū)域，抗體、抗原濃度呈最適比，沉淀反應明顯，稱等價帶。高峰區(qū)域左側，由于抗體濃度過高，沉淀反應不明顯，稱前帶；高峰區(qū)域右側。由于抗原濃度過高，沉淀反應也不明顯，稱后帶。抗體濃度過高所致結果稱前帶現象，抗原濃度過高所致結果稱后帶現象，統(tǒng)稱為帶現象。1977年Green把此現象稱為鉤狀效應（hookeffect），包括了前后帶現象。9人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024定量檢測HCG現狀 在HCG的定量檢測中經常會遇到一些高值標本，超過儀器的分析范圍，只能報告：>線性。而臨床要求檢驗科提供準確的檢驗結果，以便采取適當的治療措施。為了避免盲目選擇稀釋倍數，造成不必要的試劑浪費和延長檢驗時間。我們發(fā)現可以借助HCG試紙條先定性檢測血HCG，根據檢測帶（以下簡稱T帶）出現或不出現的時間和顏色的深淺，經過與質控帶（以下簡稱C帶）比較來選擇稀釋倍數，從而使超過儀器分析范圍的高值標本盡快地、并盡可能地一次就報告準確結果。10人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024定量檢測HCG現狀由于HCG在體內的變化很快，個體差異極大。而且在妊娠期的不同時間（平均2.2天，HCG上翻一倍）HCG水平差異極大。特別是對于葡萄胎，惡性葡萄胎，絨毛膜癌等疾病，血清HCG極高。這樣就有一些極高值的HCG標本，無法準確報告結果。但臨床又要求一個準確的檢驗結果，以便采取適當的治療方法。這樣，有的實驗室盲目地選擇稀釋倍數，必定浪費試劑和時間。如果稀釋倍數選擇太小，稀釋后仍大于儀器分析范圍，必然要試著增加稀釋倍數后重新測定。如果稀釋倍數過大，會造成過度稀釋后的標本中HCG含量極微量而測不出，或者不在儀器的線性范圍內造成很大的誤差，必然要縮小稀釋倍數再進行測定。雖然該儀器有機內稀釋功能，但是固定為某一稀釋倍數如2、3、5、10、20、50、100。而且只有在第一次測試超線。才會采用機內稀釋。這樣就有兩個問題：第一，不稀釋或稀釋倍數過小必然會浪費試劑。第二，在大多數情況下，固定高稀釋倍數，會造成稀釋后的標本，不在測試線性范圍內，造成很大的測定誤差，影響臨床的判斷。11人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024試紙條初篩與定量檢測聯合應用試紙條顯示狀況

判斷稀釋倍數結果1100>10000002503878273502038814209072552093019651495675195098不稀釋327.69不稀釋194.7

判斷稀釋倍數結果1100>10000002503878273502038814209072552093019651495675195098不稀釋327.69不稀釋194.712人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024試紙條顯色分析T帶不出現，C帶出現。血HCG定性試驗陰性，說明HCG含量為零或極低，可直接原倍檢測T帶出現，顏色很淺，說明HCG含量較低，可直接定量測定。T帶出現，顏色略淺于C帶。有就T帶分析有兩種情況，就T帶本身而言為一長方形，a：此長方形內左側顏色比右側深，這種標本一般濃度不會太高，只需選擇較低倍數（不超20倍）稀釋上機檢測即可。b:右側顏色深者，標本HCG濃度一般很高，至少在就我們經驗來看，在羅氏E601儀器上一般要選至少20倍上機稀釋檢測。其濃度至少在七八萬，高者達兩三百萬。T帶出現，但顏色與C帶深淺相當或是深于C帶，前提是T帶長方形內著色均勻，此類標本血HCG較高，但其濃度一般低于b種情況下濃度13人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024試紙條初篩與定量檢測聯合應用我們在定量測定前，首先用HCG定性試紙條定性測定血HCG，根據T帶與C帶出現的時間以及顏色的深淺等來選擇相應的稀釋倍數進行定量測定，不必多次進行定量測定。極大地提高了一次報告成功率，而且定性試紙條相對于定量試劑來說，要廉價得多。這樣既節(jié)約了試劑成本；又可以避免鉤狀效應的出現同時縮短了時間，可以說是達到了事半功倍得效果。14人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024在我們之前發(fā)現的幾例鉤狀效應的標本中試紙條分析情況均同于b種情況，具體檢測數據見下表：以下數據來至于西門子標本稀釋檢測結果鉤狀效應原倍結果1200121188在此種情況中，如缺少試紙條的先期判斷，恐怕我們就會發(fā)出錯誤報告了。15人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024HCG的臨床意義HCG的檢查對早期妊娠診斷有重要意義，對與妊娠相關疾病、滋養(yǎng)細胞腫瘤等疾病的診斷、鑒別和病程觀察等有一定價值。16人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024HCG的臨床意義1．診斷早期妊娠：孕后35-50天HCG可升至大于2500IU/L。60-70天可達8萬IU/L，多胎妊娠者尿HCG常高于一胎妊娠。在妊娠最初3個月，HCG水平每（2.2±0.5）天約升高一倍，17人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024HCG的臨床意義2．異常妊娠與胎盤功能的判斷：①異位妊娠：如宮外孕時，本試驗只有60%的陽性率，在子宮出血3天后，HCG仍可為陽性，故HCG檢查可作為與其它腹癥的鑒別。HCG常為312-625IU/L。如果用HCG難以確認，還可用血孕酮來做輔助性診斷。宮外孕患者的血孕酮水平低，這是公認的。故可作為早期診斷方法之一。臨界值為63nmol/L.異位妊娠引起腹腔內出血時，腹腔血β-HCG均大于正常值，且明顯高于靜脈血β-HCG。18人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024HCG的臨床意義婦女受孕后，從第９－11天起即可測出血中β－HCG升高，以后每兩天β－HCG的量可升高２倍（就算有先兆流產，HCG的增加比率不會變）。

比如今天是234，如果后天測出來是450左右就就可認為是正常宮內早孕。異位妊娠時,由于輸卵管肌層菲薄、滋養(yǎng)細胞發(fā)育不良,血供差,合體滋養(yǎng)細胞合成hCG量顯著減少,每天升高幅度也減少如果連續(xù)兩次增加速度緩慢，表明宮外孕或者胚胎不正常發(fā)育遲緩。比如今天是10，后天是15，再2天才17，這樣的HCG值肯定不正常，保胎的成功率極低。如果HCG值持續(xù)而明顯的下降，就算B超測到胎心也最好做清宮手術，表明胎兒其實已經腦死亡。19人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024HCG的臨床意義CA-125是一種來源于體腔上皮、生殖道粘膜和卵巢上皮細胞表面的衍生腫瘤相關抗原,胎兒絨毛膜羊水和母體脫膜中均有大量的CA-125。有資料表明異位妊娠流產患者血清CA-125水平顯著高于異位妊娠成活組;相反,βhCG水平顯著低于異位妊娠成活組;并且血清CA-125水平有隨著β-hCG水平的降低而增高的趨勢,認為CA-125水平升高是對β-hCG降低的一種補償,并有助于鑒別異位妊娠流產和成活性異位妊娠;但血清CA-125與β-hCG之間無統(tǒng)計學相關性。對于流產型異位妊娠患者可在血清CA125和連續(xù)β-hCG監(jiān)測條件下采用期待療法或藥物治療。20人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024HCG的臨床意義②流產診斷與治療：不完全流產如子宮內尚有胎盤組織殘存，HCG檢查仍可呈陽性；完全流產或死胎時HCG由陽性轉陰性，因此可作為保胎或吸宮治療的參考依據。③先兆流產：如尿中HCG仍維持高水平多不會發(fā)生難免流產。如HCG在2500IU/L以下，并逐漸下降，則有流產的或死胎的可能，當降至600IU/L則難免流產。在保胎治療中，如HCG仍繼續(xù)下降說明保胎無效，如HCG不斷上升，說明保胎成功④在產后4天或人工流產術后13天，血清HCG應低于1000IU/L，產后9天或人工流產術后25天，血清HCG應恢復正常。

如不符合這一情況，則應考慮有異常可能。21人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/2024HCG的臨床意義3．滋養(yǎng)細胞腫瘤診斷與治療監(jiān)測①葡萄胎、惡性葡萄胎、絨毛膜上皮癌及睪丸畸胎瘤等患者尿中HCG顯著升高，有的可達10萬到數百萬IU/L，可用稀釋試驗診斷如妊娠12周以前1：500稀釋尿液呈陽性，妊娠12周以后1：250稀釋尿液呈陽性，對葡萄胎診斷有價值。1：100-1：500稀釋尿液呈陽性對絨毛膜癌也有診斷價值，如男性尿中HCG升高，要考慮睪丸腫瘤如精原細胞癌、畸形及異位HCG瘤等。如果HCG增加速度非?？?，表明有葡萄胎的可能，必須緊密監(jiān)測。當然也有可能是雙胞胎。②滋養(yǎng)層細胞腫瘤患者術后3周后尿HCG應<50IU/L,8-12周呈陰性；如HCG不下降或不轉陰，提示可能有殘留病變，這類病例常易復發(fā)，故需定期檢查。22人絨毛膜促性腺激素HCG稀釋經驗分享和臨床應用介紹5/8/20244．其它更年期、排卵及雙側卵巢切除術均可