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文檔簡介
T/CIRAXXXXX—2021
ICS67.020
CCSX04
團體標準
T/CIRAXXXXX—2023
白紋伊蚊規(guī)?;椪招坌圆挥夹g要求
Technicalrequirementsforlarge-scaleirradiation-basedsterilityinductionofAedes
albopictusmalemosquitoes
(征求意見稿)
2023年8月2日
XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實施
中國同位素與輻射行業(yè)協(xié)會發(fā)布
T/CIRAXXXXX—2023
白紋伊蚊規(guī)?;椪招坌圆挥夹g要求
1范圍
本文件規(guī)定了應用輻照技術(X射線)對白紋伊蚊(Aedesalbopictus)雄蚊進行規(guī)?;^育的技術
要求。
本文件適用于在昆蟲不育技術框架下,對工廠化飼養(yǎng)的白紋伊蚊雄蚊進行規(guī)模化輻照誘導雄性不
育。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,
僅該日期對應的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本
文件。
GB/T15446輻射加工劑量學術語
GB/T16841能量為300keV~25MeV電子束輻射加工裝置劑量學導則
ISPMNo.18將輻照技術作為植物檢疫措施準則(Guidelinesfortheuseofirradiationasa
phytosanitarymeasure)
T/CIRAXXXXX-2023白紋伊蚊雄蚊規(guī)模化生產(chǎn)技術要求
3術語和定義
下列術語和定義適用于本文件。
3.1
雄蚊malemosquito
1-3日齡的白紋伊蚊雄性成蚊。
3.2
雄蚊包裝mosquitopackage
將雄蚊置于冷庫中,在低溫條件下使其進入昏睡狀態(tài),收集稱重后分裝到器皿中,蓋緊蓋子,用于
后續(xù)輻照。
3.3
輻照源irradiationsource
加速器產(chǎn)生的能量為5MeV或5MeV以下的X射線。
3.4
輻照距離irradiationdistance
II
T/CIRAXXXXX—2023
輻照光源到輻照物品之間的距離。
3.5
中心劑量率centraldoserate
光源穿透0.1mm或0.2mm銅濾波片或無濾波片后到達輻照杯中心的劑量率。
3.6
輻照溫度exposuretemperature
輻照期間,腔室內(nèi)設置的溫度。
3.7
水平旋轉horizontalrotation
輻照杯位于旋轉臺上,輻照期間,旋轉臺會以每分鐘一定的速度進行旋轉。
3.8
上下倒置canisterswapping
達到設定輻照劑量一半時,將上下的兩個輻照杯進行位置調(diào)換。
3.9
目標輻照劑量targetdose
在目標吸收的輻照劑量,一般由目標中心測得的劑量率乘以輻照時間。
3.10
劑量均一性doseuniformityratio(DUR)
單位時間內(nèi)在規(guī)定的輻照區(qū)域內(nèi)最大吸收劑量和最小吸收劑量的比值(DUR)。
3.11
絕育雄蚊sterilemales
接收目標輻照劑量的白紋伊蚊雄蚊,一般其絕育強度(inducesterility,IS)大于或等于99%。
3.12
絕育強度inducesterility(IS)
絕育雄蚊與正常雌蚊交配后,阻止雌蚊產(chǎn)下蚊卵成功孵化變成幼蟲的效果。
3.13
競爭交配力指數(shù)malematingcompetitivenessindex
絕育雄蚊與正常雄蚊競爭交配正常雌蚊的能力。
3.14
III
T/CIRAXXXXX—2023
存活率survival
經(jīng)輻照、冷藏、運輸?shù)忍幚砗?,絕育雄蚊恢復飛行的占比。
4儀器與材料
4.1器皿
塑料,透明材質,規(guī)格為直徑100mm,高度18mm,用于裝載雄蚊。
4.2輻照杯
塑料,透明材質,規(guī)格為直徑104mm,高度59mm,用于裝載輻照物品(如裝有雄蚊器皿)的裝
置。
4.3輻照裝置
X射線輻照儀,由X射線管、高壓發(fā)生器、電源系統(tǒng)、室內(nèi)水機組和制冷外機組成。
4.4濾波片
0.1mm或0.2mm的銅濾波片。
4.5膠片
一種免沖洗膠片,吸收射線后顏色會發(fā)生變化,且變化程度與吸收劑量相關。輻照前,將剪裁為15
mm×15mm的膠片與被輻照物品雄蚊放置一起。
5操作條件
5.1冷庫條件
溫度10±2℃,相對濕度70%±10%。
5.2輻照間條件
溫度20±2℃,相對濕度45%±5%。
5.3輻照腔體條件
溫度10±2℃,相對濕度65%±15%。
6輻照流程
6.1雄蚊包裝
將雄蚊置于冷庫中,待雄蚊昏睡后,稱重并分裝到器皿中,每皿約放4000-5000只雄蚊,并放入一
張未輻照膠片,蓋上蓋子后,將皿轉移至輻照杯中,每個輻照杯可裝3個皿,每次輻照可同時容納2
個輻照杯,共計可裝24000-30000只雄蚊。雄蚊的包裝流程參見附錄A圖A.1。
6.2輻照條件設定
輻照條件設定見表1。
IV
T/CIRAXXXXX—2023
表1.白紋伊蚊規(guī)模化輻照條件
條件參數(shù)備注
輻照溫度10±2℃通過制冷系統(tǒng),將腔體的溫度設定在10±2℃,保證在輻照
期間,雄蚊處于昏睡狀態(tài)
X射線管160KV,37.5mA射線管功率為6.0KW
銅濾波片0.1或0.2mm銅濾波片掛在射線進入輻照腔體的進口處
輻照距離36cm光源達到輻照物品中心的水平距離
旋轉臺2轉/分鐘輻照期間通過水平旋轉可以降低劑量均一度
上下置換-在達到目的劑量一半時,停止輻照,將輻照杯進行上下倒置
后,再進行剩余劑量的輻照
劑量均一性(DUR)1.14兩個輻照杯疊放區(qū)域的最高吸收劑量與最低吸收劑量比值
目標劑量60Gy可誘導雄蚊產(chǎn)生超過99%的絕育強度
最小吸收劑量~56Gy根據(jù)DUR=1.14推測得出
最大吸收劑量~64Gy根據(jù)DUR=1.14推測得出
6.3輻照處理
開啟輻照儀,使輻照腔的溫度維持在10±2℃。將4.1裝有雄蚊的輻照杯放到旋轉臺上,根據(jù)一半
目標劑量設置輻照時間。輻照結束后,將輻照杯進行上下倒置,然后再進行另一半目標劑量輻照,雄蚊
的輻照流程參見附錄A圖A.2??傒椪談┝吭O定為60Gy,輻照劑量與雄蚊絕育強度參見附錄B。
6.4輻照標識
輻照后,將裝有絕育雄蚊的培養(yǎng)皿從輻照杯中取出,然后取出膠片,如觀察到膠片顏色發(fā)生變化,
證明雄蚊接受過輻照,貼上“輻照過”標簽,標簽上設有輻照批次、輻照日期、輻照劑量等關鍵信息,然
后放置在冷庫中,等待后續(xù)運輸?shù)揭巴膺M行釋放。
7輻照不育關鍵技術指標
——輻照劑量:56Gy-64Gy,雄蚊規(guī)?;椪照T導絕育的劑量范圍為56Gy-64Gy。
——絕育強度:99%-100%,本文件規(guī)定經(jīng)輻照后的雄蚊(絕育雄蚊)與正常雌蚊交配后,阻止雌
蚊產(chǎn)下蚊卵成功孵化變成幼蟲的效果大于或等于99%,即平均絕育強度≥99%。
8其它指標
除上述規(guī)定絕育雄蚊的關鍵技術指標,結合已有文獻報導和主編、參編單位中試研究結果,對絕育
雄蚊的其它指標建議如下:
——平均競爭交配力指數(shù):0.7-2.0,絕育雄蚊與正常雄蚊競爭交配正常雌蚊的能力大于或等于0.7。
V
T/CIRAXXXXX—2023
——平均存活率:90%-100%,經(jīng)輻照、冷藏、運輸?shù)忍幚砗螅^育雄蚊的平均存活率大于或等于
90%。
9其它影響因素
可能影響絕育雄蚊技術指標的主要因素包括:
——規(guī)則制度,輻照處理應嚴格按照GB/T16841相關要求進行,從事生物輻照的人員需要嚴格遵守
相關輻照管理制度,參見附錄C。
——輻照劑量率,過低或過高的劑量率均會影響絕育強度,為達到本文件的絕育強度,建議選擇的
輻照劑量率在3.0-15Gy/min之間。
——處理容積,增加輻照杯的半徑可以增加雄蚊裝載量,但同時可能會影響輻照劑量均一性DUR,
建議劑量均一性數(shù)值處于1.0-1.3之間。
——其它因素,蚊蟲飼養(yǎng)條件、飼養(yǎng)環(huán)境、人工操作過程、運輸過程等因素改變,可能會影響絕育
雄蚊的競爭交配力指數(shù)以及存活率,需要對各個技術環(huán)節(jié)進行嚴格把控,保證絕育雄蚊質量滿足技術指
標。
10附加聲明
本文件所規(guī)定的白紋伊蚊雄性成蚊輻照工藝和技術指標是依據(jù)主編和參編單位在中試條件下取得
的實驗研究結果。
在昆蟲不育技術框架下,對工廠化飼養(yǎng)的埃及伊蚊(Aedesaegypti)、致倦庫蚊(Culex
quinquefasciatus)和斯氏按蚊(Anophelesstephensi)等雄性成蚊進行輻照絕育,輻照工藝和技術指標可
參照本文件。
VI
T/CIRAXXXXX—2023
附錄A
(資料性)
白紋伊蚊雄蚊包裝和輻照流程
圖A.1輻照前白紋伊蚊雄蚊包裝流程圖
圖A.2白紋伊蚊雄蚊輻照流程圖
7
T/CIRAXXXXX—2023
附錄B
(資料性)
輻照劑量與雄蚊絕育強度關系
根據(jù)世界衛(wèi)生組織和國際原子能機構制定《昆蟲不育技術作為防治媒介伊蚊傳播疾病的
測試指導框架》規(guī)定,經(jīng)輻照的伊蚊雄蚊的絕育強度大于或等于99%。為確定應用輻照技術
對白紋伊蚊雄蚊進行規(guī)?;^育的輻照劑量,選擇工廠化飼養(yǎng)的白紋伊蚊雄蚊進行不同劑量
輻照,來確定劑量與絕育強度的關系。
選擇1-3日齡的白紋伊蚊雄蚊,按照4.1進行包裝,然后進行輻照,輻照劑量選擇35Gy,
40Gy,45Gy,50Gy,55Gy和60Gy。輻照后,將雄蚊置于籠子中。待蚊蟲蘇醒后,隨機
挑選輻照雄蚊100只,放入100只未經(jīng)交配的正常雌蚊。6-7日后,給籠子中的雌蚊吸血產(chǎn)卵。
待蚊卵發(fā)育成熟后,進行孵化,并記錄卵孵化率為Hs。同時設定對照組正常雄蚊(未經(jīng)輻
照,0Gy)與正常雌蚊交配,記錄卵孵化率為Hn。
雄蚊絕育強度計算公式為:IS%=100%-(Hs/Hn)*100%
根據(jù)表B.1實驗結果,隨著輻照劑量增加,雄蚊的絕育強度逐漸增強,當為55Gy或60Gy
時,絕育強度超過99%。為保證絕育效果的穩(wěn)定性,選擇60Gy作為目標劑量。
為驗證輻照劑量與雄蚊絕育強度的重復性,選擇60Gy作為輻照劑量,連續(xù)開展30批次
輻照,結果顯示雄蚊的平均絕育強度超過99%,如表B.2所示。
表B.1輻照劑量與雄蚊絕育強度關系試驗結果
交配組合劑量試驗批次卵孵化率卵孵化率絕育強度
(%,Hs)
(Gy)(%,Hn)(%,IS)
正常雄蚊×正常雌蚊0189.04-0
輻照雄蚊×正常雌蚊351-8.9189.99
輻照雄蚊×正常雌蚊401-4.4794.98
輻照雄蚊×正常雌蚊451-2.4697.24
8
T/CIRAXXXXX—2023
輻照雄蚊×正常雌蚊501-1.5798.24
輻照雄蚊×正常雌蚊551-0.5799.36
輻照雄蚊×正常雌蚊601-0.3999.56
表B.2輻照劑量與雄蚊絕育強度重復性試驗結果
交配組合劑量試驗批次卵孵化率卵孵化率絕育強度
(Gy)(%,Hn)(%,Hs)(%,IS)
正常雄蚊×正常雌蚊03091.74-0
輻照雄蚊×正常雌蚊6030-0.6699.27
9
T/CIRAXXXXX—2023
附錄C
(資料性)
輻照管理制度
[1]未經(jīng)允許不得擅自進入輻照間。
[2]技術人員操作輻照儀前需經(jīng)過關于輻照生物安全知識培訓。
[3]進入輻照間必須佩帶個人劑量監(jiān)測儀。
[4]輻照應嚴格按照標準操作進行。
[5]輻射結束后,按照操作關閉裝置電源。
[6]每次輻射結束后必須進行登記。
[7]儀器使用中途發(fā)生故障,須先切斷電源,上報后,專業(yè)人員進行維護修理。
[8]輻照間室內(nèi)外均需配置相應的防護裝置和安全警示牌。
[9]技術人員須每三到六個月進行常規(guī)身體檢查。
10
T/CIRAXXXXX—2023
參考文獻
[1]世界衛(wèi)生組織和國際原子能機構.昆蟲不育技術作為防治媒介伊蚊傳播疾病的測試指導
框架.日內(nèi)瓦:世界衛(wèi)生組織和國際原子能機構;2020.許可:CCBY-NCSA3.0IGO.
WHO&IAEA.Guidanceframeworkfortestingthesterileinsecttechniqueasavector
controltoolagainstAedes-bornediseases.Geneva:WorldHealthOrganizationandthe
InternationalAtomicEnergyAgency;2020.Licence:CCBY-NCSA3.0IGO.
[2]聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織/國際原子能機構糧食和農(nóng)業(yè)核技術聯(lián)合中心.HananoYamada,
AndrewParker,HamidouMaiga,RafaelArgilesandJérémyBouyer(編者).昆蟲不育技術
項目中蚊蛹輻照操作指南.聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織/國際原子能機構糧食和農(nóng)業(yè)核技術
聯(lián)合中心.維也納,奧地利,2020,42頁.第一版本.
FAO/IAEA.HananoYamada,AndrewParker,HamidouMaiga,RafaelArgilesandJérémy
Bouyer(eds.).GuidelinesforIrradiationofMosquitoPupaeinSterileInsectTechnique
Programmes.FoodandAgricultureOrganizationoftheUnitedNations/InternationalAtomic
EnergyAgency.Vienna,Austria.2020.42pp.Version1.0.
[3]張東京,奚志勇,李永軍,王曉華,YamadaH,邱潔茹,梁永康,張美春,吳瑜,鄭小英.
應對實施昆蟲不相容和昆蟲不育技術控制蚊蟲:優(yōu)化釋放前白紋伊蚊雄蚊操作處理的
冷藏條件.PLoSNeglTropDis,2020,14(9):e0008561.
ZhangD,XiZ,LiY,WangX,YamadaH,QiuJ,LiangY,ZhangM,WuY,ZhengX.
Towardimplementationofcombinedincompatibleandsterileinsecttechniquesformosquito
control:optimizedchillingconditionsforhandlingAedesalbopictusmaleadultspriorto
release.PLoSNeglTropDis,2020,14(9):e0008561.
11
T/CIRAXXXXX—2023
前言
本文件按照GB/T1.1-2020給出的規(guī)則起草。
請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。
本文件由中國同位素與輻射行業(yè)協(xié)會提出并歸口。
本文件起草單位:中山大學、中大核昆生物技術(東莞)有限公司。
本文件主要起草人:。
I
T/CIRAXXXXX—2023
白紋伊蚊規(guī)?;椪招坌圆挥夹g要求
1范圍
本文件規(guī)定了應用輻照技術(X射線)對白紋伊蚊(Aedesalbopictus)雄蚊進行規(guī)?;^育的技術
要求。
本文件適用于在昆蟲不育技術框架下,對工廠化飼養(yǎng)的白紋伊蚊雄蚊進行規(guī)?;椪照T導雄性不
育。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,
僅該日期對應的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本
文件。
GB/T15446輻射加工劑量學術語
GB/T16841能量為300keV~25MeV電子束輻射加工裝置劑量學導則
ISPMNo.18將輻照技術作為植物檢疫措施準則(Guidelinesfortheuseofirradiationasa
phytosanitarymeasure)
T/CIRAXXXXX-2023白紋伊蚊雄蚊規(guī)?;a(chǎn)技術要求
3術語和定義
下列術語和定義適用于本文件。
3.1
雄蚊malemosquito
1-3日齡的白紋伊蚊雄性成蚊。
3.2
雄蚊包裝mosquitopackage
將雄蚊置于冷庫中,在低溫條件下使其進入昏睡狀態(tài),收集稱重后分裝到器皿中,蓋緊蓋子,用于
后續(xù)輻照。
3.3
輻照源irradiationsource
加速器產(chǎn)生的能量為5MeV或5MeV以下的X射線。
3.4
輻照距離irradiationdistance
II
T/CIRAXXXXX—2023
輻照光源到輻照物品之間的距離。
3.5
中心劑量率centraldoserate
光源穿透0.1mm或0.2mm銅濾波片或無濾波片后到達輻照杯中心的劑量率。
3.6
輻照溫度exposuretemperature
輻照期間,腔室內(nèi)設置的溫度。
3.7
水平旋轉horizontalrotation
輻照杯位于旋轉臺上,輻照期間,旋轉臺會以每分鐘一定的速度進行旋轉。
3.8
上下倒置canisterswapping
達到設定輻照劑量一半時,將上下的兩個輻照杯進行位置調(diào)換。
3.9
目標輻照劑量targetdose
在目標吸收的輻照劑量,一般由目標中心測得的劑量率乘以輻照時間。
3.10
劑量均一性doseuniformityratio(DUR)
單位時間內(nèi)在規(guī)定的輻照區(qū)域內(nèi)最大吸收劑量和最小吸收劑量的比值(DUR)。
3.11
絕育雄蚊sterilemales
接收目標輻照劑量的白紋伊蚊雄蚊,一般其絕育強度(inducesterility,IS)大于或等于99%。
3.12
絕育強度inducesterility(IS)
絕育雄蚊與正常雌蚊交配后,阻止雌蚊產(chǎn)下蚊卵成功孵化變成幼蟲的效果。
3.13
競爭交配力指數(shù)malematingcompetitivenessindex
絕育雄蚊與正常雄蚊競爭交配正常雌蚊的能力。
3.14
III
T/CIRAXXXXX—2023
存活率survival
經(jīng)輻照、冷藏、運輸?shù)忍幚砗?,絕育雄蚊恢復飛行的占比。
4儀器與材料
4.1器皿
塑料,透明材質,規(guī)格為直徑100mm,高度18mm,用于裝載雄蚊。
4.2輻照杯
塑料,透明材質,規(guī)格為直徑104mm,高度59mm,用于裝載輻照物品(如裝有雄蚊器皿)的裝
置。
4.3輻照裝置
X射線輻照儀,由X射線管、高壓發(fā)生器、電源系統(tǒng)、室內(nèi)水機組和制冷外機組成。
4.4濾波片
0.1mm或0.2mm的銅濾波片。
4.5膠片
一種免沖洗膠片,吸收射線后顏色會發(fā)生變化,且變化程度與吸收劑量相關。輻照前,將剪裁為15
mm×15mm的膠片與被輻照物品雄蚊放置一起。
5操作條件
5.1冷庫條件
溫度10±2℃,相對濕度70%±10%。
5.2輻照間條件
溫度20±2℃,相對濕度45%±5%。
5.3輻照腔體條件
溫度10±2℃,相對濕度65%±15%。
6輻照流程
6.1雄蚊包裝
將雄蚊置于冷庫中,待雄蚊昏睡后,稱重并分裝到器皿中,每皿約放4000-5000只雄蚊,并放入一
張未輻照膠片,蓋上蓋子后,將皿轉移至輻照杯中,每個輻照杯可裝3個皿,每次輻照可同時容納2
個輻照杯,共計可裝24000-30000只雄蚊。雄蚊的包裝流程參見附錄A圖A.1。
6.2輻照條件設定
輻照條件設定見表1。
IV
T/CIRAXXXXX—2023
表1.白紋伊蚊規(guī)?;椪諚l件
條件參數(shù)備注
輻照溫度10±2℃通過制冷系統(tǒng),將腔體的溫度設定在10±2℃,保證在輻照
期間,雄蚊處于昏睡狀態(tài)
X射線管160KV,37.5mA射線管功率為6.0KW
銅濾波片0.1或0.2mm銅濾波片掛在射線進入輻照腔體的進口處
輻照距離36cm光源達到輻照物品中心的水平距離
旋轉臺2轉/分鐘輻照期間通過水平旋轉可以降低劑量均一度
上下置換-在達到目的劑量一半時,停止輻照,將輻照杯進行上下倒置
后,再進行剩余劑量的輻照
劑量均一性(DUR)1.14
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