化妝品中限用組分二氨基嘧啶氧化物的測定 高效液相色譜法

ICS71.100.70

CCSY42

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/TXXXXX—XXXX

化妝品中限用組分二氨基嘧啶氧化物的測

定高效液相色譜法

Determinationofrestricted2,4-diamino-pyrimidine-3-oxideincosmetics—High

performanceliquidchromatography

（征求意見稿）

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實施

國家市場監(jiān)督管理總局

發(fā)布

國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/TXXXXX—XXXX

化妝品中限用組分二氨基嘧啶氧化物的測定高效液相色譜法

1警示——使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗。本文件并未指出所有可能的安全問題。

使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧⒈ＷC符合國家有關(guān)規(guī)定的條件。范圍

本文件描述了化妝品中二氨基嘧啶氧化物的高效液相色譜測定方法的原理、試劑和材料、儀器設(shè)備、

試驗步驟、結(jié)果計算、回收率和精密度、允許差等內(nèi)容。

本文件適用于化妝品中二氨基嘧啶氧化物的測定。

本文件方法檢出限和定量限：方法檢出限為3.0mg/kg，方法定量限為10.0mg/kg。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4原理

試樣用10%甲醇溶液分散提??；提取液經(jīng)離心、過濾后，用高效液相色譜儀測定。根據(jù)保留時間和光

譜圖定性，外標(biāo)法定量。

5試劑和材料

除另有說明外，所用試劑均為分析純。

5.1水：GB/T6682，一級。

5.2甲醇：色譜純。

5.3乙腈：色譜純。

5.4正己烷：色譜純。

5.510%甲醇溶液：準(zhǔn)確量取10mL甲醇（5.2）和90mL水，混勻后備用。

5.6標(biāo)準(zhǔn)品：二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品的中文名稱、英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量及化學(xué)

結(jié)構(gòu)式見附錄A表A.1，純度不小于98%。

5.7標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液：分別準(zhǔn)確稱取適量標(biāo)準(zhǔn)品（5.6）（精確至0.1mg），用甲醇（5.2）配制成質(zhì)

量濃度為1000μg/mL的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)貯備液（于4℃避光保存，可保存6個月）。準(zhǔn)確移取單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲備液

1.0mL，置于10mL棕色容量瓶中，用甲醇（5.2）定容，制得標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液（100μg/mL，現(xiàn)配現(xiàn)用）。

5.8濾膜：孔徑為0.45μm的有機(jī)系濾膜。

2

GB/TXXXXX—XXXX

6儀器設(shè)備

6.1高效液相色譜儀：配有二極管陣列檢測器。

6.2分析天平：感量0.001g和0.0001g。

6.3漩渦振蕩器。

6.4超聲波清洗儀：工作頻率不低于40kHz。

6.5離心機(jī)：最高轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。

7試驗步驟

7.1試樣處理

稱取1g（精確至0.001g）試樣，置于50mL離心管中，準(zhǔn)確加入20mL10%甲醇溶液（5.5），渦

旋混合混勻，超聲5min。然后加入10mL正己烷溶液（5.4），渦旋振蕩1min，4000r/min離心5min，下

層清液經(jīng)濾膜過濾后供高效液相色譜儀測定。

7.2測定

7.2.1液相色譜參考工作條件

液相色譜參考工作條件如下：

a)色譜柱：AQC18柱，5μm，250mm×4.6mm，或性能相當(dāng)者；

b)流動相：甲醇（5.2）：水=9：1；

c)流速：0.8mL/min；

d)柱溫：25℃；

e)波長：287nm；

f)進(jìn)樣量：10μL。

7.2.2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制

用10%甲醇溶液（5.5）逐級稀釋標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液（5.7），得到0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、

5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按色譜條件（7.2.1）進(jìn)行測定，以色譜

峰的峰面積為縱坐標(biāo)，與其對應(yīng)的溶液濃度為橫坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品溶液的高效液相色譜圖見附錄B圖B.1。

7.2.3試樣測定

按色譜條件測定試樣溶液（7.1），如果檢出目標(biāo)物質(zhì)的色譜峰的保留時間與標(biāo)準(zhǔn)品一致，且紫外吸

收光譜圖與標(biāo)準(zhǔn)品一致，可認(rèn)定樣品中存在目標(biāo)物質(zhì)，記錄色譜峰的峰面積，以外標(biāo)法定量。試樣溶液

中被測物的響應(yīng)值均應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍之內(nèi)，超出線性范圍的試樣溶液可用10%甲醇溶液（5.5）

適當(dāng)稀釋后進(jìn)行測定。

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品溶液的紫外吸收光譜圖見附錄B圖B.2。

7.3空白試驗

除不稱取試樣外，均按7.1～7.2步驟進(jìn)行測定。

8結(jié)果計算

3

GB/TXXXXX—XXXX

二氨基嘧啶氧化物含量按公式（1）計算：

()ccV?

Xk=i0（1）

im10000

式中：

Xi——試樣中被測組分的含量，單位為百分比(%)；

ci——從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的試樣溶液中被測組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)；

c0——從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的空白樣品溶液中被測組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)；

V——加入10%甲醇溶液的體積，單位為毫升(mL)；

m——試樣質(zhì)量，單位為克(g)；

k——超線性范圍的稀釋倍數(shù)。

計算結(jié)果大于或等于1.0%時，結(jié)果保留三位有效數(shù)字；結(jié)果小于1.0%時，保留兩位有效數(shù)字。

9回收率

在添加濃度為0.001%~1%范圍內(nèi)，回收率在80%~110%之間。

10精密度

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不應(yīng)超過算術(shù)平均值的10％。

4

GB/TXXXXX—XXXX

附錄A

（資料性）

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品的信息

二氨基嘧啶氧化物的中文名稱、英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量及化學(xué)結(jié)構(gòu)式見表A.1。

表A.1二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品的信息

序號中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子質(zhì)量化學(xué)結(jié)構(gòu)式

二氨基嘧啶2,4-Diamino-pyr

174638-76-9C4H6N4O126.12

氧化物imidine-3-oxide

5

GB/TXXXXX—XXXX

附錄B

（資料性）

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖和光譜圖

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)溶液的高效液相色譜圖見圖B.1

圖B.1二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)溶液的高效液相色譜圖

圖B.2二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)溶液的光譜圖

_________________________________

6

GB/TXXXXX—XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起

草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由輕工業(yè)聯(lián)合會提出。

本文件由全國香料香精化妝品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會（SAC/TC257）歸口。

本文件起草單位：***。

本文件主要起草人：***。

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化妝品中限用組分二氨基嘧啶氧化物的測定高效液相色譜法

1警示——使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗。本文件并未指出所有可能的安全問題。

使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關(guān)規(guī)定的條件。范圍

本文件描述了化妝品中二氨基嘧啶氧化物的高效液相色譜測定方法的原理、試劑和材料、儀器設(shè)備、

試驗步驟、結(jié)果計算、回收率和精密度、允許差等內(nèi)容。

本文件適用于化妝品中二氨基嘧啶氧化物的測定。

本文件方法檢出限和定量限：方法檢出限為3.0mg/kg，方法定量限為10.0mg/kg。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4原理

試樣用10%甲醇溶液分散提取；提取液經(jīng)離心、過濾后，用高效液相色譜儀測定。根據(jù)保留時間和光

譜圖定性，外標(biāo)法定量。

5試劑和材料

除另有說明外，所用試劑均為分析純。

5.1水：GB/T6682，一級。

5.2甲醇：色譜純。

5.3乙腈：色譜純。

5.4正己烷：色譜純。

5.510%甲醇溶液：準(zhǔn)確量取10mL甲醇（5.2）和90mL水，混勻后備用。

5.6標(biāo)準(zhǔn)品：二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品的中文名稱、英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量及化學(xué)

結(jié)構(gòu)式見附錄A表A.1，純度不小于98%。

5.7標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液：分別準(zhǔn)確稱取適量標(biāo)準(zhǔn)品（5.6）（精確至0.1mg），用甲醇（5.2）配制成質(zhì)

量濃度為1000μg/mL的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)貯備液（于4℃避光保存，可保存6個月）。準(zhǔn)確移取單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲備液

1.0mL，置于10mL棕色容量瓶中，用甲醇（5.2）定容，制得標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液（100μg/mL，現(xiàn)配現(xiàn)用）。

5.8濾膜：孔徑為0.45μm的有機(jī)系濾膜。

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GB/TXXXXX—XXXX

6儀器設(shè)備

6.1高效液相色譜儀：配有二極管陣列檢測器。

6.2分析天平：感量0.001g和0.0001g。

6.3漩渦振蕩器。

6.4超聲波清洗儀：工作頻率不低于40kHz。

6.5離心機(jī)：最高轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。

7試驗步驟

7.1試樣處理

稱取1g（精確至0.001g）試樣，置于50mL離心管中，準(zhǔn)確加入20mL10%甲醇溶液（5.5），渦

旋混合混勻，超聲5min。然后加入10mL正己烷溶液（5.4），渦旋振蕩1min，4000r/min離心5min，下

層清液經(jīng)濾膜過濾后供高效液相色譜儀測定。

7.2測定

7.2.1液相色譜參考工作條件

液相色譜參考工作條件如下：

a)色譜柱：AQC18柱，5μm，250mm×4.6mm，或性能相當(dāng)者；

b)流動相：甲醇（5.2）：水=9：1；

c)流速：0.8mL/min；

d)柱溫：25℃；

e)波長：287nm；

f)進(jìn)樣量：10μL。

7.2.2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制

用10%甲醇溶液（5.5）逐級稀釋標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液（5.7），得到0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、

5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按色譜條件（7.2.1）進(jìn)行測定，以色譜

峰的峰面積為縱坐標(biāo)，與其對應(yīng)的溶液濃度為橫坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品溶液的高效液相色譜圖見附錄B圖B.1。

7.2.3試樣測定

按色譜條件測定試樣溶液（7.1），如果檢出目標(biāo)物質(zhì)的色譜峰的保留時間與標(biāo)準(zhǔn)品一致，且紫外吸

收光譜圖與標(biāo)準(zhǔn)品一致，可認(rèn)定樣品中存在目標(biāo)物質(zhì)，記錄色譜峰的峰面積，以外標(biāo)法定量。試樣溶液

中被測物的響應(yīng)值均應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍之內(nèi)，超出線性范圍的試樣溶液可用10%甲醇溶液（5.5）

適當(dāng)稀釋后進(jìn)行測定。

二氨基嘧啶氧化物標(biāo)準(zhǔn)品溶液的紫外吸收光譜圖見附錄B圖B.2。

7.3空白試驗

除不稱取試樣外，均按7.1～7.2步驟進(jìn)行測定。

8結(jié)果