(高清版)GB 15982-2012 醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)2012-06-29發(fā)布I前言 12規(guī)范性引用文件 l3術(shù)語和定義 14醫(yī)院消毒衛(wèi)生要求 25醫(yī)院消毒管理要求 4附錄A(規(guī)范性附錄)采樣及檢查方法 6附錄B(規(guī)范性附錄)試劑和培養(yǎng)基 Ⅲ本標(biāo)準(zhǔn)的全部技術(shù)內(nèi)容為強(qiáng)制性。本標(biāo)準(zhǔn)代替GB15982—1995《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》。本標(biāo)準(zhǔn)與GB15982—1995比較，主要變化——修改了標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍(見第1章，1995年版的第1章);——修改了規(guī)范性引用文件(見第2章，1995年版的第2章);——修改了術(shù)語，增加了消毒產(chǎn)品，醫(yī)療器材和高度、中度、低度危險(xiǎn)性器材，滅菌和高水平、中水平、低水平消毒，多重耐藥菌的定義(見第3章，1995年版的第3章);——修改了各類環(huán)境空氣、物體表面、醫(yī)護(hù)人員手衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(見4.1和4.2,1995年版的4.1);——修改了醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(見4.3,1995年版的4.2);——修改了使用中消毒液衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(見4.6,1995年版的4.3);——?jiǎng)h除了無菌器械保存液衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(見1995年版的4.3.2);——增加了治療用水、防護(hù)用品、消毒劑和消毒器械、疫點(diǎn)(區(qū))消毒的衛(wèi)生要求(見4.4、4.5、4.6、4.7和4.9);——修改了污物處理衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)和污水排放標(biāo)準(zhǔn)(見4.8,1995年版的4.4和4.5);——增加了醫(yī)院消毒管理要求(見第5章);——修改了原附錄A“采樣及檢查方法”(見附錄A,1995年版的附錄A);——修改了空氣采樣及檢查方法(見A.2,1995年版的A.1);——修改了醫(yī)療用品采樣及檢查方法(見A.5,1995年版的A.5);——增加了治療用水、紫外線燈、消毒器械、醫(yī)院污水檢查方法、疫點(diǎn)(區(qū))消毒效果檢測(cè)方法和大腸菌群檢查方法(見A.7、A.8、A.9、A.10、A.11、A.12);——?jiǎng)h除了原附錄B“本標(biāo)準(zhǔn)用詞說明”(見1995年版的附錄B);——增加了新附錄B“試劑和培養(yǎng)基”(見附錄B)。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：浙江省疾病預(yù)防控制中心、北京市疾病預(yù)防控制中心、中國(guó)疾病預(yù)防控制中心、北京大學(xué)第一醫(yī)院、北京長(zhǎng)江脈醫(yī)藥科技有限公司、杭州朗索醫(yī)用消毒劑有限公司、上海利康消毒高科技有限公司、強(qiáng)生(上海)醫(yī)療器材有限公司、上海九譽(yù)生物科技有限公司、北京創(chuàng)新世紀(jì)生化科技發(fā)展有限公司、衛(wèi)生部衛(wèi)生監(jiān)督中心、上海市疾病預(yù)防控制中心、江蘇省疾病預(yù)防控制中心、武漢市疾病預(yù)防控制中心、福建省疾病預(yù)防控制中心、浙江興昌風(fēng)機(jī)有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為： 1醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、醫(yī)院消毒管理要求以及檢查方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各級(jí)各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)。各級(jí)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)和采供血機(jī)構(gòu)按照?qǐng)?zhí)行。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB4789.3食品微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)GB4789.4食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)GB/T4789.11食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)溶血性鏈球菌檢驗(yàn)GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB7918.4化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法綠膿桿菌GB7918.5化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法金黃色葡萄球菌GB18466醫(yī)療機(jī)構(gòu)水污染物排放標(biāo)準(zhǔn)GB19082醫(yī)用一次性防護(hù)服技術(shù)要求GB19083醫(yī)用防護(hù)口罩技術(shù)要求GB19193疫源地消毒總則GB19258紫外線殺菌燈GB50333醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范WS310.1醫(yī)院消毒供應(yīng)中心第1部分：管理規(guī)范WS310.2醫(yī)院消毒供應(yīng)中心第2部分：清洗消毒及滅菌技術(shù)操作規(guī)范WS310.3醫(yī)院消毒供應(yīng)中心第3部分：清洗消毒及滅菌效果監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T311醫(yī)院隔離技術(shù)規(guī)范WS/T313醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生規(guī)范YY0469醫(yī)用外科口罩技術(shù)要求YY0572血液透析和相關(guān)治療用水消毒技術(shù)規(guī)范衛(wèi)生部醫(yī)院污水處理技術(shù)指南國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局中華人民共和國(guó)藥典衛(wèi)生部醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法衛(wèi)生部3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。消毒產(chǎn)品disinfectionproduct納入衛(wèi)生部《消毒產(chǎn)品分類目錄》,用于醫(yī)院消毒的消毒劑、消毒器械和衛(wèi)生用品。2醫(yī)療器材medicaldevice/healthcareproduct高度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材、中度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材和低度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材。進(jìn)入正常無菌組織、脈管系統(tǒng)或有無菌體液(如血液)流過，一旦被微生物污染將導(dǎo)致極高感染危險(xiǎn)的器材。直接或間接接觸黏膜的器材。僅與完整皮膚接觸而不與黏膜接觸的器材。殺滅或清除醫(yī)療器材上一切微生物的處理。滅菌的無菌保證水平應(yīng)達(dá)到10-?。殺滅各種細(xì)菌繁殖體、病毒、真菌及其孢子和絕大多數(shù)細(xì)菌芽孢的消毒處理。殺滅除細(xì)菌芽孢以外的各種病原微生物的消毒處理。僅能殺滅細(xì)菌繁殖體(分枝桿菌除外)和親脂性病毒的消毒處理。多重耐藥菌multidrug-resistantorganism;MDRO對(duì)臨床使用的三類或三類以上抗菌藥物同時(shí)呈現(xiàn)耐藥的細(xì)菌。常見多重耐藥菌包括耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐萬古霉素腸球菌(VRE)、產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)細(xì)菌、耐碳青霉烯類抗菌藥物腸桿菌科細(xì)菌(CRE)(如產(chǎn)I型新德里金屬β-內(nèi)酰胺酶[NDM-1]或產(chǎn)碳青霉烯酶[KPC]的腸桿菌科細(xì)菌)、耐碳青霉烯類抗菌藥物鮑曼不動(dòng)桿菌(CR-AB)、多重耐藥/泛耐藥銅綠假單胞菌(MDR/PDR-PA)和多重耐藥結(jié)核分枝桿菌等。4醫(yī)院消毒衛(wèi)生要求4.1.1菌落總數(shù)應(yīng)符合表1要求。I類環(huán)境為采用空氣潔凈技術(shù)的診療場(chǎng)所，分潔凈手術(shù)部和其他潔凈場(chǎng)所。Ⅱ類環(huán)境為非潔凈手術(shù)部(室);產(chǎn)房；導(dǎo)管室；血液病病區(qū)、燒傷病區(qū)等保護(hù)性隔離病區(qū)；重癥監(jiān)護(hù)病區(qū)；新生兒室等。Ⅲ類環(huán)境為母嬰同室；消毒供應(yīng)中心的檢查包裝滅菌區(qū)和無菌物品存放區(qū)；血液透析中心(室);其他普通住院病區(qū)等。IV類環(huán)境為普通門(急)診及其檢查、治療室；感染性疾病科門診和病區(qū)。3表1各類環(huán)境空氣、物體表面菌落總數(shù)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境類別空氣平均菌落數(shù)物體表面平均菌落數(shù)CFU/cm2CFU/ⅢCFU/m3I類環(huán)境潔凈手術(shù)部符合GB50333要求其他潔凈場(chǎng)所≤4.0(30min)"Ⅱ類環(huán)境≤4.0(15min)Ⅲ類環(huán)境≤4.0(5min)—IV類環(huán)境≤4.0(5min)‘CFU/Ⅲ為平板暴露法，CFU/m3為空氣采樣器法?！逼桨灞┞斗z測(cè)時(shí)的平板暴露時(shí)間。4.1.2懷疑醫(yī)院感染暴發(fā)或疑似暴發(fā)與醫(yī)院環(huán)境有關(guān)時(shí)，應(yīng)進(jìn)行目標(biāo)微生物檢測(cè)。4.2醫(yī)務(wù)人員手4.2.1衛(wèi)生手消毒后醫(yī)務(wù)人員手表面的菌落總數(shù)應(yīng)≤10CFU/cm2。4.2.2外科手消毒后醫(yī)務(wù)人員手表面的菌落總數(shù)應(yīng)≤5CFU/cm2。4.3醫(yī)療器材4.3.1高度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材應(yīng)無菌。4.3.2中度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材的菌落總數(shù)應(yīng)≤20CFU/件(CFU/g或CFU/100cm2),不得檢出致病性微生物。4.3.3低度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材的菌落總數(shù)應(yīng)≤200CFU/件(CFU/g或CFU/100cm2),不得檢出致病性微生物。4.4治療用水血液透析相關(guān)治療用水應(yīng)符合YY0572要求；其他治療用水應(yīng)符合相應(yīng)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。4.5防護(hù)用品醫(yī)用防護(hù)口罩、外科口罩和一次性防護(hù)服等防護(hù)用品應(yīng)符合GB19083、YY0469和GB19082要求。4.6消毒劑4.6.1滅菌劑、皮膚黏膜消毒劑應(yīng)使用符合《中華人民共和國(guó)藥典》的純化水或無菌水配制，其他消毒劑的配制用水應(yīng)符合GB5749要求。4.6.2使用中消毒液的有效濃度應(yīng)符合使用要求；連續(xù)使用的消毒液每天使用前應(yīng)進(jìn)行有效濃度的監(jiān)測(cè)。4.6.3滅菌用消毒液的菌落總數(shù)應(yīng)為0CFU/mL;皮膚黏膜消毒液的菌落總數(shù)應(yīng)符合相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)要求；其他使用中消毒液的菌落總數(shù)應(yīng)≤100CFU/mL,不得檢出致病性微生物。4.7消毒器械4.7.1使用中消毒器械的殺菌因子強(qiáng)度應(yīng)符合使用要求。紫外線燈應(yīng)符合GB19258要求，使用中紫4外線燈(30W)的輻射照度值應(yīng)≥70μW/cm2。4.7.2工作環(huán)境中消毒器械產(chǎn)生的有害物濃度(強(qiáng)度)應(yīng)符合相關(guān)規(guī)定。產(chǎn)生臭氧的消毒器械的工作環(huán)境的臭氧濃度應(yīng)<0.16mg/m3。環(huán)氧乙烷滅菌器工作環(huán)境的環(huán)氧乙烷濃度應(yīng)<2mg/m3。4.8污水處理污水排放應(yīng)符合GB18466要求。4.9疫點(diǎn)(區(qū))消毒消毒效果應(yīng)符合GB19193要求。5醫(yī)院消毒管理要求5.1建筑布局和消毒隔離設(shè)施5.1.1建筑設(shè)計(jì)和工作流程應(yīng)符合傳染病防控和醫(yī)院感染控制需要，消毒隔離設(shè)施配置應(yīng)符合5.1.2感染性疾病科、消毒供應(yīng)中心(室)、手術(shù)部(室)、重癥監(jiān)護(hù)病區(qū)、血液透析中心(室)、新生兒室、內(nèi)鏡中心(室)和口腔科等重點(diǎn)部門的建筑布局和消毒隔離應(yīng)符合相關(guān)規(guī)定。5.1.3潔凈場(chǎng)所的設(shè)計(jì)、驗(yàn)收參照GB50333要求，竣工全性能監(jiān)測(cè)應(yīng)由有資質(zhì)的第三方單位完成。5.1.4Ⅱ類環(huán)境和門(急)診、病區(qū)等診療場(chǎng)所應(yīng)按WS/T313要求，配置合適的手衛(wèi)生設(shè)施，提供滿足需要的洗手清潔劑、手消毒劑以及干手設(shè)施等。5.2消毒產(chǎn)品使用管理5.2.1使用的消毒產(chǎn)品應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范等管理規(guī)定，并按照批準(zhǔn)或規(guī)定的范圍和方法使用。5.2.2含氯消毒液、過氧化氫消毒液等易揮發(fā)的消毒劑應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用；過氧乙酸、二氧化氯等二元、多元包裝的消毒液活化后應(yīng)立即使用。采用化學(xué)消毒、滅菌的醫(yī)療器材，使用前應(yīng)用無菌水(高水平消毒的內(nèi)鏡可使用經(jīng)過濾的生活飲用水)充分沖洗以去除殘留。不應(yīng)使用過期、失效的消毒劑。不應(yīng)采用甲醛自然熏蒸方法消毒醫(yī)療器材。不應(yīng)采用戊二醛熏蒸方法消毒、滅菌管腔類醫(yī)療器材。5.2.3滅菌器如需進(jìn)行滅菌效果驗(yàn)證，應(yīng)由省級(jí)以上衛(wèi)生行政部門認(rèn)定的消毒鑒定實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。滅菌物品的無菌檢查應(yīng)按《中華人民共和國(guó)藥典》“無菌檢查法”要求進(jìn)行。使用消毒器械滅菌的消毒員應(yīng)經(jīng)培訓(xùn)合格后方可上崗。5.3重復(fù)使用醫(yī)療器材的清洗清洗程序應(yīng)按WS310.2執(zhí)行。有特殊要求的傳染病病原體污染的醫(yī)療器材應(yīng)先消毒再清洗。5.4消毒滅菌方法選擇原則5.4.1高度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材使用前應(yīng)滅菌。中度危險(xiǎn)性醫(yī)療器材使用前應(yīng)選擇高水平消毒或中水平消毒。低度危險(xiǎn)性器材使用前可選擇中、低水平消毒或保持清潔。5.4.2耐濕、耐熱的醫(yī)療器材應(yīng)首選壓力蒸汽滅菌；帶管腔和(或)帶閥門的器材應(yīng)采用經(jīng)滅菌過程驗(yàn)證裝置(PCD)確認(rèn)的滅菌程序或外來器械供應(yīng)商提供的滅菌方法。5.4.3玻璃器材、油劑和干粉類物品等應(yīng)首選干熱滅菌；其他方法應(yīng)符合《消毒技術(shù)規(guī)范》規(guī)定。5.4.4不耐熱、不耐濕的醫(yī)療器材應(yīng)選擇經(jīng)國(guó)家衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)的低溫滅菌方法。5.4.5重復(fù)使用的氧氣濕化瓶、吸引瓶、嬰兒暖箱水瓶以及加溫加濕罐等宜采用高水平消毒。55.5環(huán)境、物體表面消毒5.5.1環(huán)境、物體表面應(yīng)保持清潔；當(dāng)受到肉眼可見污染時(shí)應(yīng)及時(shí)清潔、消毒。5.5.2對(duì)治療車、床欄、床頭柜、門把手、燈開關(guān)、水龍頭等頻繁接觸的物體表面應(yīng)每天清潔、消毒。5.5.3被病人血液、嘔吐物、排泄物或病原微生物污染時(shí)，應(yīng)根據(jù)具體情況，選擇中水平以上消毒方法。對(duì)于少量(<10mL)的濺污，可先清潔再消毒；對(duì)于大量(>10mL)血液或體液的濺污，應(yīng)先用吸濕材料去除可見的污染，然后再清潔和消毒。5.5.4人員流動(dòng)頻繁、擁擠的診療場(chǎng)所應(yīng)每天在工作結(jié)束后進(jìn)行清潔、消毒。感染性疾病科、重癥監(jiān)護(hù)病區(qū)、保護(hù)性隔離病區(qū)(如血液病病區(qū)、燒傷病區(qū))、耐藥菌及多重耐藥菌污染的診療場(chǎng)所應(yīng)做好隨時(shí)消毒和終末消毒。5.5.5拖布(頭)和抹布宜清洗、消毒，干燥后備用。推薦使用脫卸式拖頭。5.6通風(fēng)換氣和空氣消毒5.6.1應(yīng)采用自然通風(fēng)和(或)機(jī)械通風(fēng)保證診療場(chǎng)所的空氣流通和換氣次數(shù)；采用機(jī)械通風(fēng)時(shí)，重癥監(jiān)護(hù)病房等重點(diǎn)部門宜采用“頂送風(fēng)、下側(cè)回風(fēng)”,建立合理的氣流組織。5.6.2呼吸道發(fā)熱門診及其隔離留觀病室(區(qū))、呼吸道傳染病收治病區(qū)如采用集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)的，應(yīng)在通風(fēng)系統(tǒng)安裝空氣消毒裝置。未采用空氣潔凈技術(shù)的手術(shù)室、重癥監(jiān)護(hù)病區(qū)、保護(hù)性隔離病區(qū)(如血液病病區(qū)、燒傷病區(qū))等場(chǎng)所宜在通風(fēng)系統(tǒng)安裝空氣消毒裝置。5.6.3空氣消毒方法應(yīng)遵循《消毒技術(shù)規(guī)范》規(guī)定。不宜常規(guī)采用化學(xué)噴霧進(jìn)行空氣消毒。5.7消毒供應(yīng)中心(室)的管理消毒供應(yīng)中心(室)的建筑布局以及清洗、消毒滅菌和效果監(jiān)測(cè)應(yīng)執(zhí)行WS310要求。5.8污水污物處理5.8.1醫(yī)院污水處理設(shè)施的設(shè)計(jì)、建設(shè)和管理應(yīng)符合GB18466和《醫(yī)院污水處理技術(shù)指南》要求。5.8.2醫(yī)療廢物的管理應(yīng)符合《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》、《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》的要求。5.9疫點(diǎn)(區(qū))消毒應(yīng)符合GB19193要求。6(規(guī)范性附錄)采樣及檢查方法A.1采樣和檢查原則A.1.1采樣后應(yīng)盡快對(duì)樣品進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)的檢測(cè)，送檢時(shí)間不得超時(shí)，送檢時(shí)間不得超過24h。關(guān)時(shí)，進(jìn)行相應(yīng)物品的無菌檢查。常規(guī)監(jiān)督檢查可不進(jìn)行致病性微生物檢測(cè)，涉及疑似醫(yī)院感染暴發(fā)、醫(yī)院感染暴發(fā)調(diào)查或工作中懷疑微生物污染時(shí)，應(yīng)進(jìn)行目標(biāo)微生物的檢測(cè)。的監(jiān)督篩查；也可用于醫(yī)院清洗效果檢查和清洗程序的評(píng)價(jià)和驗(yàn)證。A.2空氣微生物污染檢查方法A.2.1采樣時(shí)間I類環(huán)境在潔凈系統(tǒng)自凈后與從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣；Ⅱ、Ⅲ、IV類環(huán)境在消毒或規(guī)定的通風(fēng)換氣后與從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣。A.2.2檢測(cè)方法范》要求進(jìn)行檢測(cè)。空氣采樣器法可選擇六級(jí)撞擊式空氣采樣器或其他經(jīng)驗(yàn)證的空氣采樣器。檢測(cè)時(shí)將采樣器置于室內(nèi)中央0.8m～1.5m高度，按采樣器使用說明書操作，每次采樣時(shí)間不應(yīng)超過30min。房間大于10m2者，每增加10m2增設(shè)一個(gè)采樣點(diǎn)。A.2.2.2Ⅱ、Ⅲ、IV類環(huán)境采用平板暴露法。室內(nèi)面積≤30m2,設(shè)內(nèi)、中、外對(duì)角線3點(diǎn)，內(nèi)、外點(diǎn)應(yīng)距墻壁1m處；室內(nèi)面積>30m2,設(shè)4角及中央5點(diǎn)，4角的布點(diǎn)部位應(yīng)距墻壁1m處。將普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿(φ90mm)放置各采樣點(diǎn)，采樣高度為距地面0.8m～1.5m;采樣時(shí)將平皿蓋打開，扣放于平皿旁，暴露規(guī)定時(shí)間(Ⅱ類環(huán)境暴露15min,Ⅲ、IV類環(huán)境暴露5min)后蓋上平皿蓋及時(shí)送檢。A.2.3結(jié)果計(jì)算A.2.3.1平板暴露法按平均每皿的菌落數(shù)報(bào)告：CFU/(皿·暴露時(shí)間)。A.3物體表面微生物污染檢查方法A.3.1采樣時(shí)間潛在污染區(qū)、污染區(qū)消毒后采樣。清潔區(qū)根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)情況確定。7GB15982—2012A.3.2采樣面積被采表面<100cm2,取全部表面；被采表面≥100cm2,取100cm2。A.3.3采樣方法用5cm×5cm滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有無菌0.03mol/L磷酸鹽緩沖液或生理鹽水采樣液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，連續(xù)采樣1～4個(gè)規(guī)格板面積，剪去手接觸部分，將棉拭子放入裝有10mL采樣液的試管中送檢。門把手等小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體采樣。若采樣物體表面有消毒劑殘留時(shí)，采樣液應(yīng)含相應(yīng)中和劑。A.3.4檢測(cè)方法把采樣管充分振蕩后，取不同稀釋倍數(shù)的洗脫液1.0mL接種平皿，將冷至40℃~45℃的熔化營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15mL～20mL,36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)，必要時(shí)分離致病性微生物。A.3.5結(jié)果計(jì)算[如式(A.2)]A.4醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生檢查方法A.4.1采樣時(shí)間采取手衛(wèi)生后，在接觸病人或從事醫(yī)療活動(dòng)前采樣。A.4.2采樣方法將浸有無菌0.03mol/L磷酸鹽緩沖液或生理鹽水采樣液的棉拭子一支在雙手指曲面從指跟到指端來回涂擦各兩次(一只手涂擦面積約30cm2),并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣棉拭子，剪去手接觸部位，將棉拭子放入裝有10mL采樣液的試管內(nèi)送檢。采樣面積按平方厘米(cm2)計(jì)算。若采樣時(shí)手上有消毒劑殘留，采樣液應(yīng)含相應(yīng)中和劑。A.4.3檢測(cè)方法把采樣管充分振蕩后，取不同稀釋倍數(shù)的洗脫液1.0mL接種平皿，將冷至40℃~45℃的熔化營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15mL～20mL,36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)，必要時(shí)分離致病性微生物。A.4.4結(jié)果計(jì)算[如式(A.3)]A.5醫(yī)療器材檢查方法A.5.1采樣時(shí)間在消毒或滅菌處理后，存放有效期內(nèi)采樣。8A.5.2滅菌醫(yī)療器材的檢查方法A.5.2.1可用破壞性方法取樣的，如一次性輸液(血)器、注射器和注射針等按照《中華人民共和國(guó)藥典》中“無菌檢查法”進(jìn)行。對(duì)不能用破壞性方法取樣的醫(yī)療器材，應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中，用浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭子在被檢物體表面涂抹，采樣取全部表面或不少于100cm2;然后將除去手接觸部分的棉拭子進(jìn)行無菌檢查。統(tǒng)中，將每支手機(jī)分別置于含20mL～25mL采樣液的無菌大試管(內(nèi)徑25mm)中，液面高度應(yīng)大于4.0cm,于旋渦混合器上洗滌震蕩30s以上，取洗脫液進(jìn)行無菌檢查。A.5.3消毒醫(yī)療器材的檢查方法A.5.3.1可整件放入無菌試管的，用洗脫液浸沒后震蕩30s以上，取洗脫液1.0mL接種平皿，將冷至40℃~45℃的熔化營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15mL～20mL,36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)(CFU/件),必要時(shí)分離致病性微生物。的試管內(nèi)進(jìn)行洗脫，取洗脫液1.0mL接種平皿，計(jì)數(shù)菌落數(shù)(CFU/g),必要時(shí)分離致病性微生物。對(duì)不能用破壞性方法取樣的醫(yī)療器材，在100級(jí)超凈工作臺(tái)，用浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭子在被檢物體表面涂抹采樣，被采表面<100cm2,取全部表面，被采表面≥100cm2,取100cm2,然后將除去手接觸部分的棉拭子進(jìn)行洗脫，取洗脫液1.0mL接種平皿，將冷至40℃~45℃的熔化營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15mL～20mL,36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)(CFU/cm2),必要時(shí)分離致病性微生物。A.5.3.3消毒后內(nèi)鏡：取清洗消毒后內(nèi)鏡，采用無菌注射器抽取50mL含相應(yīng)中和劑的洗脫液，從活檢口注入沖洗內(nèi)鏡管路，并全量收集(可使用蠕動(dòng)泵)送檢。將洗脫液充分混勻，取洗脫液1.0mL接種平皿，將冷至40℃~45℃的熔化營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15mL～20mL,36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)(CFU/件)。將剩余洗脫液在無菌條件下采用濾膜(0.45μm)過濾濃縮，將濾膜接種于凝固的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上(注意不要產(chǎn)生氣泡),置36℃±1℃溫箱培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)。當(dāng)濾膜法不可計(jì)數(shù)時(shí)：菌落總數(shù)(CFU/件)=m(CFU/平板)×50…………(A.4)Z兩平行平板的平均菌落數(shù)。當(dāng)濾膜法可計(jì)數(shù)時(shí)：菌落總數(shù)(CFU/件)=m(CFU/平板)+m(CFU/濾膜)…………(A.5)m——兩平行平板的平均菌落數(shù)；mq——濾膜上菌落數(shù)。A.6消毒劑檢查方法A.6.1消毒劑采樣采樣分庫(kù)存消毒劑和使用中消毒液。A.6.2消毒劑有效成分含量檢查方法庫(kù)存消毒劑的有效成分含量應(yīng)依照《消毒技術(shù)規(guī)范》或產(chǎn)品企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)；使用中消毒液的有9效濃度測(cè)定可用前述方法，也可使用經(jīng)國(guó)家衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)的消毒劑濃度試紙(卡)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。A.6.3使用中消毒液染菌量檢查方法A.6.3.1用無菌吸管按無菌操作方法吸取1.0mL被檢消毒液，加入9mL中和劑中混勻。醇類與酚類消毒劑用普通營(yíng)養(yǎng)肉湯中和，含氯消毒劑、含碘消毒劑和過氧化物消毒劑用含0.1%硫代硫酸鈉中和劑，洗必泰、季銨鹽類消毒劑用含0.3%吐溫80和0.3%卵磷脂中和劑，醛類消毒劑用含0.3%甘氨酸中和劑，含有表面活性劑的各種復(fù)方消毒劑可在中和劑中加入吐溫80至3%;也可使用該消毒劑消毒效果檢測(cè)的中和劑鑒定試驗(yàn)確定的中和劑。A.6.3.2用無菌吸管吸取一定稀釋比例的中和后混合液1.0mL接種平皿，將冷至40℃~45℃的熔化營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15mL～20mL,36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)72h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)；必要時(shí)分離致病性微生物。消毒液染菌量(CFU/mL)=平均每皿菌落數(shù)×10×稀釋倍數(shù)…………(A.6)A.7治療用水檢查方法血液透析相關(guān)治療用水按YY0572進(jìn)行檢測(cè)。其他治療用水按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。A.8紫外線燈檢查方法采樣分庫(kù)存紫外線燈和使用中紫外線燈。A.8.2庫(kù)存(新啟用)紫外線燈輻射照度值檢查方法按照GB19258進(jìn)行。A.8.3使用中紫外線燈輻射照度值檢查方法A.8.3.1儀器法。開啟紫外線燈5min后，將測(cè)定波長(zhǎng)為253.7nm的紫外線輻照計(jì)探頭置于被檢緊外線燈下垂直距離1m的中央處，待儀表穩(wěn)定后，所示數(shù)據(jù)即為該紫外線燈的輻射照度值。A.8.3.2指示卡法。開啟紫外線燈5min后，將指示卡置紫外燈下垂直距離1m處，有圖案一面朝上，照射1min,觀察指示卡色塊的顏色，將其與標(biāo)準(zhǔn)色塊比較。A.8.4注意事項(xiàng)紫外線輻照計(jì)應(yīng)在計(jì)量部門檢定的有效期內(nèi)使用；紫外線監(jiān)測(cè)指示卡應(yīng)取得國(guó)家衛(wèi)生行政部門的許可批件，并在產(chǎn)品有效期內(nèi)使用。A.10醫(yī)院污水檢查方法按GB18466規(guī)定進(jìn)行檢測(cè)。A.11疫點(diǎn)(區(qū))消毒效果檢測(cè)方法按GB19193規(guī)定進(jìn)行檢測(cè)。A.12大腸菌群檢查方法按照GB4789.3進(jìn)行檢測(cè)。按照GB4789.4進(jìn)行檢測(cè)。A.14乙型溶血性鏈球菌檢查方法按照GB/T4789.11進(jìn)行檢測(cè)。A.15銅綠假單胞菌檢查方法按照GB7918.4進(jìn)行檢測(cè)。A.16金黃色葡萄球菌檢查方法按照GB7918.5進(jìn)行檢測(cè)。A.17其他目標(biāo)微生物檢查方法按照相關(guān)檢測(cè)方法進(jìn)行。(規(guī)范性附錄)試劑和培養(yǎng)基稱取磷酸氫二鈉2.84g,磷酸二氫鉀1.36g,加入到1000mL蒸餾水中，待完全溶解后，調(diào)pH至7.2～7.4,于121℃壓力蒸汽滅菌20min。B.2洗脫液稱取蛋白胨10.00g,氯化鈉8.50g,吐溫-801.0mL,加入到1000mL0.03mol/L磷酸鹽緩沖液中，加熱溶解后調(diào)pH至7.2～7.4,于121℃壓力蒸汽滅菌20min.稱取氯化鈉8.50g,溶解于1000mL蒸餾水中，于121℃壓力蒸汽滅菌20min。B.4革蘭染色液及染色方法B.4.1結(jié)晶紫染色液：稱取結(jié)晶紫1.00g,溶解于20mL95%酒精中，然后與80mL1%草酸銨水溶液混合。加蒸餾水至300mL,混勻。a)將涂片在火焰上固定。b)滴加結(jié)晶紫染色液，作用1min,水洗。c)滴加革蘭碘液，作用1min,水洗。d)酒精脫色30s;或?qū)⒕凭螡M整個(gè)涂片，立即傾去，再用酒精滴滿整個(gè)涂片，脫色10s。e)水洗，滴沙黃復(fù)染液，作用1min,水洗。f)待干鏡檢。B.5人(兔)血漿取滅菌3.8%檸檬酸鈉1份，加人(兔)全血4份，混勻靜置，3000r/min離心5min,取上清，棄血球。B.6普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基于121℃壓力蒸汽滅菌20min。B.7