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文檔簡介
1、基因工程又叫做_______或__________?;蚱唇蛹夹gDNA重組技術2、基本工具:“分子手術刀”:“分子縫合針”:基因進入受體細胞的載體:3、基本操作步驟:運載體DNA連接酶限制性核酸內(nèi)切酶1、目的基因的獲取2、基因表達載體的構建(核心)3、將目的基因?qū)胧荏w細胞4、目的基因的檢測與鑒定2021/5/91黏性末端黏性末端
1.限制性核酸內(nèi)切酶一種限制性內(nèi)切酶只能識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(切割DNA分子)來源:主要從原核細胞分離作用:
作用結果:EcoRI重難點剖析:基因工程的“專用工具”形成平未端(SmaI)及黏性未端(EcoRI)2021/5/921)、種類:2)、作用部位:E·coliDNA連接酶(黏性末端)T4DNA連接酶
(黏性末端和平末端)磷酸二酯鍵
DNA連接酶可把平未端或黏性末端之間的縫隙“縫合”起來,即相當于把梯子兩邊的扶手的斷口連接起來,這樣一個重組DNA分子就形成了。
2.DNA連接酶——“分子縫合針”2021/5/933.分子運載車——運載體(1)作用:將目的基因送入受體細胞(2)具備的條件:a.能自我復制.b.具有一個或多個酶切位點.c.有標記基因.d.對受體細胞無害.質(zhì)粒、噬菌體、動植物病毒(3)種類:質(zhì)?!毦鷶M核DNA之外結構簡單、能自主復制的很小的環(huán)狀DNA分子。2021/5/94(一)目的基因的提取目的基因:主要是指___________________。獲取方法:1、____________中獲取目的基因2、人工合成法:化學方法合成DNA片段(反轉(zhuǎn)錄法、直接合成法)3、PCR反應擴增DNA基本操作步驟從基因文庫編碼蛋白質(zhì)的結構基因
原理:DNA復制過程:加熱DNA解鏈冷卻引物結合到互補DNA鏈互補鏈合成條件:耐高溫DNA聚合酶
2021/5/95(二)基因表達載體構建1、基因表達載體由________、________________、_____四部分組成。目的基因啟動子標記基因終止子2、啟動子作用:3、標記基因的作用:RNA聚合酶識別和結合的位點,啟動轉(zhuǎn)錄的“開關”。鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從普通細胞中篩選出含目的基因的受體細胞2021/5/96(1)用一定的_________切割質(zhì)粒,使其出現(xiàn)一個切口,露出____________。(2)用_______________切斷目的基因,使其產(chǎn)生
____________。(3)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的______處,再加入適量___________,形成了一個重組DNA分子(重組質(zhì)粒)限制酶黏性末端同一種限制酶相同的黏性末端切口DNA連接酶重組質(zhì)粒形成過程:2021/5/97導入植物細胞:(三)將目的基因?qū)胧荏w細胞導入動物細胞:導入微生物細胞:受體細胞導入方法體細胞受精卵受精卵
顯微注射法Ca2+處理法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法2021/5/98將目的基因?qū)胛⑸锛毎?/p>
原核生物繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少,故早期常作為受體細胞。大腸桿菌細胞用Ca2+處理感受態(tài)細胞重組表達載體DNA溶于緩沖液混合導入2021/5/99目的基因是否插入轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上(四)目的基因的檢測與鑒定目的基因是否表達:目的基因是否轉(zhuǎn)錄:方法:DNA分子雜交方法:核酸分子雜交方法:抗原抗體雜交個體水平鑒定——抗蟲性鑒定、抗病性鑒定、生物活性鑒定等(生理、性狀水平的檢測)檢測2021/5/910
轉(zhuǎn)基因生物
轉(zhuǎn)基因生物是指利用
技術導入
培育出的能夠?qū)⑿滦誀罘€(wěn)定地
給后代的基因工程生物?;蚬こ掏庠椿蜻z傳優(yōu)點:
打破了常規(guī)育種難以突破的
的改變了生物的遺傳性狀.物種之間的界限(生殖隔離)定向2021/5/9111.抗蟲轉(zhuǎn)基因植物(一)植物基因工程2.抗病轉(zhuǎn)基因生物3.抗逆轉(zhuǎn)基因作物基因工程的應用4.利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)
方法:2021/5/912利用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物--動物乳腺生物反應器獲取目的基因(藥用蛋白基因)構建基因表達載體(在藥用蛋白基因前加乳腺蛋白基因的啟動子)顯微注射導入哺乳動物受精卵中形成早期胚胎將胚胎送入母體動物發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動物(只有在產(chǎn)下的雌性動物個體中,轉(zhuǎn)入的基因才能表達)(二)動物基因工程2021/5/913
用轉(zhuǎn)基因動物作器官移植的供體供體動物:存在的難題:解決方法:豬免疫排斥將供體基因組導入某種基因調(diào)節(jié)因子,以抑制抗原決定基因的表達,或設法除去抗原決定基因,再結合克隆技術,培育出沒有免疫排斥反應的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。(三)、基因工程藥品:
工程菌:用基因工程的方法,使外源基因得到高效率表達的菌類細胞株系。
我國已生產(chǎn)的產(chǎn)品:白細胞介素-2、干擾素、乙肝疫苗等2021/5/914(四)基因診斷與基因治療:
基因診斷:用放射性同位素等標記的“DNA探針”檢測肝炎病毒等病毒感染及遺傳缺陷,不但準確而且迅速?;蛑委煟喊呀】档耐庠椿?qū)胗谢蛉毕莸募毎?,達到治療疾病的目的。體外基因治療體內(nèi)基因治療基因治療的類型2021/5/915比較:基因工程和蛋白質(zhì)工程基因工程蛋白質(zhì)工程相同點都要改造基因,都屬于分子水平產(chǎn)生新的基因型,無新基因基因(型)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)原有的可以是新的聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是以基因工程為基礎,是基因工程的應用和延伸;前者可為后者修飾、改造酶2021/5/916蛋白質(zhì)工程流程圖從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)設計預期的蛋白質(zhì)結構推測應有的氨基酸序列找到相應的脫氧核苷酸序列(即基因)板書:用干擾素例子,反推過程。第4步后接著做什么?基因DNAmRNA氨基酸序列多肽鏈
蛋白質(zhì)三維結構轉(zhuǎn)錄翻譯折疊生物功能預期功能分子設計DNA合成以中心法則為原理和線索
蛋白質(zhì)工程2021/5/917
專題二、細胞工程
1、概念:應用的原理和方法研究的水平研究的目的細胞生物學和分子生物學細胞整體水平或細胞器水平按照人們的意愿來改變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細胞產(chǎn)品2、分類植物細胞工程動物細胞工程微生物工程2021/5/918所采用技術的理論基礎
植物細胞工程通常采用的技術手段
植物組織培養(yǎng)
植物體細胞雜交植物細胞的全能性一、植物細胞工程
2021/5/919(離體的植物
器官、組織或細胞)脫分化再分化愈傷組織根、芽(胚狀體)植物體
培養(yǎng)條件:離體、含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的PH、適合的光照等外植體舉例:花藥離體培養(yǎng);基因工程培育的抗棉鈴蟲的棉花植株;細胞工程中培育的“番茄-馬鈴薯”雜種植株等。1、植物組織培養(yǎng)
擴大培養(yǎng)2021/5/920植物A細胞植物B細胞加酶去壁原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合融合細胞再生壁雜種細胞脫分化去壁的常用方法:酶解法(纖維素酶、果膠酶等)誘導原生質(zhì)體融合方法:物理方法:離心、振動、電刺激等化學方法:聚乙二醇(PEG)融合成功的標志人工誘導篩選愈傷組織雜種植株再分化2、植物體細胞雜交的過程2021/5/921(1)植物繁殖的新途徑1)微型繁殖(快速繁殖)2)作物脫毒3)神奇的人工種子(2)作物新品種的培育1)單倍體育種2)突變體的利用3)轉(zhuǎn)基因植物的培育
(3)細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)3、植物細胞工程的實際應用2021/5/922二、動物細胞工程植物細胞工程常用的技術手段:植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交等強調(diào):
是其他動物細胞工程技術的基礎。動物細胞培養(yǎng)
動物細胞核移植
動物細胞融合
單克隆抗體制備等動物細胞培養(yǎng)技術常用的技術手段:2021/5/923動物胚胎或幼齡動物的組織、器官胰蛋白酶剪碎單個細胞加培養(yǎng)液制成細胞懸浮液去掉組織間蛋白10代細胞50代細胞無限傳代原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)部分細胞遺傳物質(zhì)改變動物細胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成動物體隨細胞增多,細胞就會停止分裂增殖1.動物細胞培養(yǎng):
2021/5/924植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較項目培養(yǎng)基結果應用植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)均需適宜的外界條件:PH,溫度,營養(yǎng)及“無菌、無毒環(huán)境”等。固體、營養(yǎng)物質(zhì)、蔗糖、植物激素培養(yǎng)成植株液體、營養(yǎng)物質(zhì)、葡萄糖、動物血清培育成細胞系或細胞株1.生產(chǎn)蛋白質(zhì)制品
(如病毒疫苗、干擾素、
單克隆抗體、動物激素)2.用于某些器官移植1.試管苗的快速繁殖2.無病毒植物的培育3.生產(chǎn)藥物等4.人工種子5.轉(zhuǎn)基因植物的培育2021/5/925細胞A細胞B雜種細胞物理法、化學法滅活的仙臺病毒
2、動物細胞融合過程
誘導動物細胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理和方法是否基本相同?
思考?制備單克隆抗體:不具有繁殖性
但具有抗原性2021/5/926獲得雜種植株用途物理、化學方法(同左)生物:滅活的病毒物理(離心、振蕩、電刺激)化學(PEG)誘導方法使細胞分散后誘導細胞融合去除細胞壁后誘導原生質(zhì)體融合細胞融合的方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性、植物細胞全能性原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目植物體細胞雜交、動物細胞融合的比較主要用于制備單克隆抗體2021/5/927卵細胞A母綿羊B母綿羊乳腺細胞細胞質(zhì)細胞核細胞核移植早期胚胎卵裂C母綿羊子宮胚胎移植多莉羊分娩妊娠多莉羊的培育過程融合后的卵細胞3.核移植與克隆動物:動物細胞核有全能性2021/5/928
抗原動物體內(nèi)刺激
效應B
抗體特點:產(chǎn)量低、特異性差、純度低、反應不夠靈敏4、單克隆抗體1、常規(guī)抗體制備:一個B淋巴細胞:只分泌一種特異性抗體2、單克隆抗體制備:雜交瘤細胞小鼠骨髓瘤細胞:能無限增殖融合單克隆抗體
培養(yǎng)2021/5/929抗原注入小鼠體內(nèi)已免疫的B淋巴細胞骨髓瘤細胞篩選出雜交瘤細胞篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群體外培養(yǎng)體內(nèi)培養(yǎng)從培養(yǎng)液中提取從小鼠腹水中提取單克隆抗體細胞融合動物細胞培養(yǎng)單克隆抗體的制備(特定的選擇培養(yǎng)基)2021/5/930主要用于疾病的診斷、治療和預防。若在單抗上帶上抗癌藥物制成“生物導彈”,將藥物定向帶到癌細胞所在部位,既消滅了癌細胞又不會傷害健康細胞。特點:與常規(guī)抗體相比,具有特異性強、靈敏度高、化學性質(zhì)單一的優(yōu)點。單克隆抗體的應用:單克隆抗體是指:雜交瘤細胞產(chǎn)生的單一抗體2021/5/931例.(06江蘇)下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。(1)_______________技術是單克隆抗體技術的基礎。(2)根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類,圖中HAT培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。(3)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比,最大的優(yōu)越性是________________。(4)動物細胞融合除了采用植物細胞原生質(zhì)體融合常用的誘導劑外,還可以采用________________。(5)選出的雜交瘤細胞既具備骨髓瘤細胞的_______________特點,又具備淋巴細胞的_______________特點。(6)淋巴細胞是由動物體_________中的______________細胞分化、發(fā)育而來。(7)雜交瘤細胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是____________。動物細胞培養(yǎng)選擇特異性強,靈敏度高滅活的病毒在體外大量增殖分泌特異性抗體骨髓造血干細胞主動運輸2021/5/9326、基因型為AaBb的水稻(具有24條染色體)的花粉通過無菌操作,接入試管后,在一定條件下形成試管苗的育種過程。(1)愈傷組織是花粉細胞不斷分裂后的形成的不規(guī)則細胞團,愈傷組織形成中,必須從培養(yǎng)基中獲得__________。(2)要促進花粉細胞分裂生長,培養(yǎng)基中應有______和__
_____兩類激素。(3)愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根,再由芽發(fā)育成葉和莖。這一過程必須給予光照,其原因是_____________利用光照制造有機物,供試管苗生長。(4)試管苗的細胞核中含有___________條脫氧核苷酸鏈。(5)培養(yǎng)出的試管基因型有
。如果要獲得育種需要的植株,并能繁殖新品種,后面的育種步驟是_________________。
各種營養(yǎng)(水、無機鹽、蔗糖等能量物質(zhì))和小分子有機物生長素細胞分裂素葉綠體24AB、Ab、ab、aB用一定濃度的秋水仙素處理組織培養(yǎng)獲得的幼苗2021/5/933二中新校張志鵬2021/5/9341、胚胎工程的概念操作的對象早期胚胎或配子技術手段胚胎干細胞培養(yǎng)、胚胎分割、胚胎移植、體外受精等最后結果產(chǎn)生動物個體,滿足人類需求2021/5/935體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育2021/5/936一、精子的發(fā)生1、場所:2、時期:3、過程:精子的發(fā)生是在睪丸的曲細精管內(nèi)完成的從初情期開始直到生殖功能衰退發(fā)生的過程大體可分為三個階段曲細精管2021/5/937第二階段:
精原細胞經(jīng)過數(shù)次有絲分裂,產(chǎn)生大量的精原細胞,其中一部分經(jīng)過染色體復制等活動,進一步形成初級精母細胞。每一個初級精母細胞經(jīng)減數(shù)分裂形成四個含有單倍染色體的精子細胞。第一階段:初級精母細胞的形成第二階段:精子細胞的形成2021/5/938第三階段
精子變形2021/5/939______變?yōu)榫宇^部的主要部分;_______發(fā)育為頭部的頂體;_______演變?yōu)榫拥奈?;_______形成線粒體鞘膜;其它物質(zhì)濃縮成_______(球形)。第三階段:精子變形細胞核高爾基體中心體線粒體原生質(zhì)滴2021/5/9404、精子的形態(tài):(1)外形似蝌蚪,分__、__、__、三大部分。(2)不同種動物精子的形態(tài)____,大小略有____,與動物的體形大小___。頭頸尾相似不同無關2021/5/941二、卵子的發(fā)生1.場所:2.時期:
卵子的發(fā)生是在卵巢內(nèi)完成的(卵巢有產(chǎn)卵與排卵、分泌多種激素這二大功能)。性別分化以后(放射冠)2021/5/9423、過程:
雌性胎兒卵巢內(nèi)的卵原細胞,通過有絲分裂增加其數(shù)量,并演變?yōu)槌跫壜涯讣毎?,被卵泡細胞包?形成卵泡。初級卵母細胞經(jīng)過減數(shù)分裂變?yōu)槌墒斓穆炎印?/p>
減數(shù)第一次分裂的時間是在雌性動物排卵前后完成的,結果是產(chǎn)生1個次級卵母細胞和1個第一極體(暫不分離),進入輸卵管,準備與精子受精。
減數(shù)第二次分裂時間是在精子和卵子結合的過程中,結果是產(chǎn)生1個成熟卵子和3個第二極體。2021/5/943三、精子與卵子的發(fā)生比較場所開始時間細胞增殖方式子細胞數(shù)目是否變形重要區(qū)別精子卵子場所開始時間細胞增殖方式子細胞數(shù)目是否變形重要區(qū)別精子睪丸初情期以后先有絲分裂后減數(shù)分裂(連續(xù)完成)
4個精子細胞變形哺乳動物卵泡的形成和在卵巢內(nèi)的儲備是在出生前完成的;而精子是從初情期開始的卵子卵巢輸卵管性別分化以后(較早)先有絲分裂后減數(shù)分裂(不連續(xù)完成)
1個卵細胞
3個極體不變形2021/5/944四、受精作用1、概念:3、場所:1、概念:指精子和卵子結合形成合子
(即受精卵)的過程。2、受精的標志:在卵黃膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個極體時;
受精完成的標志:雌雄原核的融合。3、場所:受精是在輸卵管內(nèi)完成的。2021/5/9454、過程受精前的準備階段受精階段準備階段1:精子獲能準備階段2:卵子的準備2021/5/946準備階段1:精子獲能即精子必須在雌性動物生殖道內(nèi)發(fā)生相應生理變化后,才能獲得受精能力的現(xiàn)象。準備階段2:卵子的準備即卵子在輸卵管內(nèi)成熟到減數(shù)第二分裂中期(MⅡ)時,才具備受精能力。2021/5/947受精階段包括精子穿越放射冠和透明帶、進入卵黃膜、雌雄原核形成和精卵結合等內(nèi)容。2021/5/948精、卵相遇頂體反應頂體酶釋放頂體酶溶解透明帶接觸透明帶穿越放射冠溶解卵丘細胞(放射冠)穿越透明帶接觸卵黃膜產(chǎn)生透明帶反應形成第一道屏障(作用)精子被微絨毛抱合精子外膜與卵黃膜融合精子進入卵2021/5/949精子進入卵后變化①變化②變化③產(chǎn)生卵黃膜封閉作用形成第二道屏障(作用?)尾部脫離核膜破裂形成雄原核形成雌原核激活卵子完成減數(shù)第二次分裂,排出第二極體發(fā)育移動接觸合并形成受精卵2021/5/950受精作用的特點和實質(zhì)特點:1、只有一個精子與一個卵細胞結合,形成一個受精卵。2、進入卵細胞的只是精子的頭部(細胞核)3、受精卵的細胞質(zhì)幾乎都只來自卵細胞。實質(zhì):雄原核與雌原核的融合。2021/5/951五、胚胎發(fā)育1、卵裂期的特點:細胞分裂方式為_______細胞數(shù)目____胚胎總體積_____或略有___每個細胞體積_____,DNA總量_____但___________________
有絲分裂增加不增加縮小減小增加每個細胞DNA含量不變2021/5/9522021/5/9532、早期胚胎發(fā)育的幾個階段桑椹胚:囊胚:原腸胚:桑椹胚:細胞均屬于全能細胞。
細胞開始分化;內(nèi)細胞團將來發(fā)育成各種組織,滋養(yǎng)層將來發(fā)育成胎膜、胎盤;出現(xiàn)囊胚腔后,進一步擴大會導致孵化。原腸胚:內(nèi)細胞團表皮的細胞形成外胚層,下方的細胞形成內(nèi)胚層,出現(xiàn)原腸腔。2021/5/954§3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng)專題3:胚胎工程2021/5/9551.試管動物技術
是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后,再經(jīng)胚胎移植(到受體母親體內(nèi))產(chǎn)生后代的技術。2021/5/956采集良種母牛的卵母細胞卵母細胞的體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎早期培養(yǎng)胚胎移植受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場采集卵巢中的卵母細胞“試管?!惫S化生產(chǎn)的技術流程圖2021/5/957體外受精1.卵母細胞的收集和培養(yǎng)對不同動物,采取卵母細胞的方法不同2021/5/9582021/5/9592.精子的收集和獲能
1)收集的方法:假陰道法,手握法和電刺激等2)獲能處理:培養(yǎng)法:嚙齒動物、家兔和豬化學法:牛、羊2021/5/9603.受精在獲能溶液或?qū)S玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程2021/5/961胚胎的早期培養(yǎng)一般比較復雜培養(yǎng)液:水、無機鹽、有機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及動物血清等.●培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時,可將其取出向受體移植或冷動保存.2021/5/9622.胚胎移植1).概念:
將雌性動物的早期胚胎,或經(jīng)體外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi),使之發(fā)育為新個體的技術。一胚胎移植2021/5/9632).胚胎移植的現(xiàn)狀和意義(1)加速育種工作和品種改良;(2)大量節(jié)省購買種畜的費用;(3)一胎多產(chǎn);(4)保存品種資源和瀕危物種;(5)可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛力,縮短繁殖周期,增加一生繁殖的后代數(shù)量。2021/5/9643).胚胎移植的生理學基礎(1).供體和受體具相同的生理環(huán)境;(2).早期胚胎處于游離狀態(tài),為胚胎的收集提供了可能;(3).受體對移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥;(4).胚胎與受體能建立正常的組織聯(lián)系,但遺傳物質(zhì)沒有改變。2021/5/9654)、胚胎移植的基本程序(1)供體、受體的選擇和同期發(fā)情處理(2)配種或進行人工受精(3)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存(4)胚胎移植(5)移植后是否妊娠的檢查2021/5/966(1).對供體、受體進行選擇供體:
遺傳性能和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的個體;受體:
健康和正常繁殖能力的個體處理:
同期發(fā)情具體做法:
注射促性腺激素。2021/5/967(2).采集卵母細胞方法:
超數(shù)排卵具體做法:
注射促性腺激素2021/5/968(2).配種或人工受精精子來源:
同種優(yōu)良的雄性動物。2021/5/969(3).胚胎的收集
在配種或輸精后第7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來。
2021/5/970(3).對胚胎進行質(zhì)量檢查
2021/5/971(3).胚胎的保存或移植
2021/5/972(4).胚胎的移植方法一:手術法具體做法:引出受體子宮和卵巢,將胚胎注入子宮角,縫合創(chuàng)口。方法二:非手術法將裝有胚胎的移植管送入受體母牛子宮的相應部位,注入胚胎。2021/5/973(5).對受體母牛進行是否妊娠的檢查(第二次檢查)2021/5/974(6).受體母牛產(chǎn)下胚胎移植的犢牛2021/5/975選擇供體母牛受體母?!诎l(fā)情處理……超數(shù)排卵供體公牛配種沖卵(胚胎)胚胎質(zhì)量檢查、培養(yǎng)胚胎移植妊娠檢查分娩(胚胎移植的犢牛)總結:2021/5/9763、胚胎分割(1)胚胎分割的概念(2)胚胎分割特點(3)胚胎分割的理論基礎(4)胚胎分割操作過程2021/5/9771).概念:
采用顯微手術(機械方法)的方法將早期胚胎分割成2分胚,4分胚或8分胚,經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng)后植入受體,以得到同卵雙胎或同卵多胎的技術。2021/5/9782).特點:后代具有相同的遺傳物質(zhì),因此胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。3)、理論基礎:動物胚胎細胞的全能性。所以胚胎分割的時期為:
囊胚或桑椹胚。2021/5/9794)、選擇的胚胎:發(fā)育良好的,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。5)、使用的主要儀器:
實體顯微鏡和顯微操作儀。6)、具體操作用分割針或分割刀片將胚胎切開,吸出其中的半個胚胎,注入預先準備好的空透明帶中,或直接將裸半胚移植給受體。2021/5/980
胚胎分割移植的顯微操作2021/5/9817)、操作注意事項:①對囊胚階段的胚胎進行分割時,要將內(nèi)細胞團均等分割。原因:內(nèi)細胞團一般到囊胚階段才出現(xiàn),它是發(fā)育為胚胎本身的基礎細胞,其他細胞為滋養(yǎng)細胞,只為胚胎和胎兒發(fā)育提供營養(yǎng)。若分割時不能將內(nèi)細胞團均等分割,會出現(xiàn)含內(nèi)細胞團多的部分正常發(fā)育的能力強,少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良,甚至不能發(fā)育等問題。2021/5/9827)、操作注意事項:
②胚胎分割的份數(shù)越多,操作的難度會越大,移植的成功率也越低。早期胚胎的體積很小,只有在顯微鏡下才能看到;再者,細胞數(shù)目是有限的。分割的份數(shù)越多,不但難以做到均等分割,每一份的細胞數(shù)會越少,而且作為囊胚期的胚胎內(nèi)細胞團細胞所受的影響會更大。因此,分割的份數(shù)越多,技術的難度會越大,移植后的恢復和發(fā)育的難度會越大,移植成功率自然會降低。2021/5/9834.胚胎干細胞(1)什么是胚胎干細胞?簡稱是什么?(2)胚胎干細胞的來源。(3)胚胎干細胞的特性。(4)胚胎干細胞的應用。2021/5/9841).概念:
簡稱ES或EK細胞,是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞。
2021/5/985
2).特點:(1)形態(tài):體積小,細胞核大,核仁明顯;(2)功能:具有發(fā)育的全能性,可經(jīng)誘導分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞;
(3)在體外培養(yǎng)的條件下,ES細胞可以增殖而不發(fā)生分化。對它可以進行冷凍保存,也可以進行遺傳改造。2021/5/986
3).主要用途
2021/5/987(1).治療人類的某些頑癥利用ES細胞可以誘導分化形成新的組織細胞的特性,移植ES細胞可使壞死或退化的部位得以修復并恢復正常功能。目前,在動物實驗方面,用ES細胞誘導分化出的某些組織細胞已成功地治愈糖尿病、肝衰竭、心衰竭和成骨不良等疑難病癥。2021/5/988(2).培育出人造組織器官,用于器官移植。
隨著組織工程技術的發(fā)展,通過ES細胞體外誘導分化,還可以培育出人造組織器官,解決目前臨床上存在的供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題。2021/5/989(3).ES細胞也是理論上研究體外細胞分化的理想材料。
ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上,或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中,能夠維持不分化的狀態(tài)。在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子,就可以誘導ES細胞向不同類型的組織細胞分化.2021/5/990專題5生態(tài)工程
干裂的土地,赤紅的荒山,意味著不斷惡化的
,幼苗的上方是蔚藍的地球,地球似乎化作一滴甘露,滋潤著大地;幼苗又可寓意為____工程,雖然柔弱,卻頑強地支撐著地球;地球和幼苗組合和諧,象征著希望。生態(tài)環(huán)境生態(tài)2021/5/991生態(tài)工程的概念:人類應用生態(tài)學、工程學、系統(tǒng)學、經(jīng)濟學等學科的基本原理和方法,通過系統(tǒng)設計、調(diào)控和技術組裝,對已破壞的生態(tài)環(huán)境進行修復、重建,對造成環(huán)境污染和破壞的傳統(tǒng)生產(chǎn)方式進行改善,并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力,從而促進人類社會和自然環(huán)境和諧發(fā)展。注意:1.學科知識:
;2.技術手段:
;3.最終目的:
。生態(tài)學、工程學、系統(tǒng)學、經(jīng)濟學系統(tǒng)設計、調(diào)控和技術組裝促進人類社會和自然環(huán)境的和諧發(fā)展2021/5/992§5.1生態(tài)工程的基本原理生態(tài)工程建設目的:
遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律,充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力,防止環(huán)境污染,達到經(jīng)濟效益和生態(tài)效益的同步發(fā)展。優(yōu)點:與傳統(tǒng)的工程相比,生態(tài)工程是一類少消耗、多效益、可持續(xù)的工程體系。2021/5/993傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)模式―石油農(nóng)業(yè)
弊端:不注重生態(tài)環(huán)境的保護,沒有考慮成本,經(jīng)濟的發(fā)展以巨大的生態(tài)環(huán)境破壞為代價。模式內(nèi)容:大量使用化肥、農(nóng)藥、機械的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方式。2021/5/994生態(tài)工程與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)的比較生態(tài)工程傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)基本原理生態(tài)學、工程學工程學調(diào)節(jié)機制人為輔助下的自我調(diào)節(jié)人為調(diào)控與環(huán)境的關系協(xié)調(diào)破壞主要能源太陽能化石能生物多樣性保護減少2021/5/995主要是通過實行“循環(huán)經(jīng)濟”原則,使一個系統(tǒng)產(chǎn)生出的污染物,能夠成為本系統(tǒng)或者另一個系統(tǒng)的生產(chǎn)原料,從而實現(xiàn)廢棄物的資源化,而實現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟最重要的手段之一是生態(tài)工程。生態(tài)經(jīng)濟(循環(huán)經(jīng)濟)模式:實現(xiàn)原料→產(chǎn)品→原料→產(chǎn)品的生產(chǎn)體系,實現(xiàn)廢棄物的資源化。2021/5/996地球以有限的空間和資源,長久維持著眾多生物的生存、繁衍和發(fā)展,奧秘就在于物質(zhì)能夠在各類生態(tài)系統(tǒng)中,進行區(qū)域小循環(huán)和全球地質(zhì)大循環(huán),循環(huán)往復,分層分級利用,從而達到取之不盡、用之不竭的效果。而沒有物質(zhì)循環(huán)的系統(tǒng),就會產(chǎn)生廢棄物,造成環(huán)境污染,并最終影響到系統(tǒng)的穩(wěn)定和發(fā)展1.物質(zhì)循環(huán)再生原理二、生態(tài)工程所遵循的基本原理2021/5/997二、生態(tài)工程所遵循的基本原理遇蟲害而死的樟子松珊瑚礁1.為什么樟子松林的松毛蟲會肆虐,幾十億株楊樹會毀于一旦?而珊瑚礁區(qū)卻能夠在養(yǎng)分稀少的深海中,保持著很高的生物多樣性?討論:2.從上面正面和反面的實例,你能得出怎樣的結論?你認為生物多樣性的破壞有人為因素嗎?2021/5/998
純樟子松林、楊
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