GBT 39993-2021 化妝品中限用防腐劑二甲基噁唑烷、7-乙基雙環(huán)噁唑烷和5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷的測定(正式版)

化妝品中限用防腐劑二甲基噁唑烷、國家市場監(jiān)督管理總局國家標準化管理委員會GB/T39993—2021本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標準由中國輕工業(yè)聯(lián)合會提出。本標準由全國香料香精化妝品標準化技術(shù)委員會(SAC/TC257)歸口。本標準起草單位：蘇州世譜檢測技術(shù)有限公司、蘇州質(zhì)量檢測科學研究院、江蘇隆力奇生物科技股州質(zhì)量監(jiān)督檢測研究院、上海市日用化學工業(yè)研究所、歐詩漫生物股份有限公司、上海相宜本草化妝品股份有限公司、汕頭市蓮娜姬護膚品有限公司、嘉文麗(福建)化妝品有限公司、無限極(中國)有限公司、廣州市嬌蘭化妝品有限公司、強生(中國)有限公司、江蘇省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院、江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院、昆山市藥品監(jiān)督管理所、江蘇省藥品監(jiān)督管理局蘇州檢查分局、河北省食品檢驗研究盧劍。I1GB/T39993—2021化妝品中限用防腐劑二甲基噁唑烷、警示——使用本標準的人員應有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗。本標準并未指出所有可能的安全問題。使用者有責任采取適當?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關規(guī)定的條件。1范圍本標準規(guī)定了化妝品中二甲基噁唑烷、7-乙基雙環(huán)噁唑烷和5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷的氣相色譜-許差等內(nèi)容。本標準適用于水劑類、水包油類和油包水類化妝品中二甲基噁唑烷、7-乙基雙環(huán)噁唑烷和5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷的測定。其中，第一法適用于水劑類、水包油類和油包水類化妝品中7-乙基雙環(huán)噁唑烷和5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷的測定，以及油包水膏霜類化妝品中二甲基噁唑烷的測定；第二法適用于水劑類、水包油類和油包水類化妝品中二甲基噁唑烷的測定。本標準的方法檢出限和定量限：第一法的方法檢出限均為15.0mg/kg,定量限均為50.0mg/kg;第二法的方法檢出限為15.0mg/kg,定量限為50.0mg/kg。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3第一法氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法3.1原理試樣中的待測物經(jīng)四氫呋喃提取，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定；采用選擇離子監(jiān)測(SIM)模式掃3.2試劑或材料3.2.3無水硫酸鈉：分析純，于650℃灼燒4h,儲存于密閉干燥器中。際化妝品原料名稱(INCI名稱)、化學文摘登記號(CAS號)、分子式、相對分子質(zhì)量及化學結(jié)構(gòu)式參見附錄A中表A.1,純度均不應小于95%。3.2.5混合標準工作溶液：分別準確稱取適量標準物質(zhì)(3.2.4)(精確至0.0001g),用丙酮(3.2.2)配制成質(zhì)量濃度為1000mg/L的單標標準貯備液(于4℃避光保存，宜保存3個月)。取相應的空白樣品，2GB/T39993—2021按照3.4.1進行處理，得到基質(zhì)溶液。準確移取適量各單標標準貯備液，用基質(zhì)溶液逐級度為2.50mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、50.0mg/L、100mg/L的系列混合標準工作溶液3.3儀器設備3.3.4渦旋振蕩器：最高轉(zhuǎn)速不低于3000r/min。3.3.5離心機：最高轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。稱取試樣0.5g(精確至0.001g)于50mL具塞離心管中，準確加入10.0mL四氫呋喃(3.2.1),加3.4.2測定條件a)色譜柱：5%苯基-95%甲基聚硅氧烷石英毛細管色譜柱(30m×250μm×0.25pm),或相b)進樣口溫度：220℃;d)升溫程序：初始溫度60℃,保持6min,以10℃/min升溫至200℃,再以15℃/min升溫至280℃,保持5min;e)進樣方式：分流進樣，分流比為5:1;j)離子源溫度：230℃;l)待測化合物的保留時間、特征選擇離子及豐度比見表1?；衔锉Ａ魰r間/min碎片離子(豐度比)7-乙基雙環(huán)噁唑烷55:83:113#:143(40:50:100:30)5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷85:107:135?:137(29二甲基噁唑烷58:70:71#:86(46:38:100:62)“定量離子。3GB/T39993—20213.4.3標準工作曲線繪制3種防腐劑標準物質(zhì)的氣相色譜-質(zhì)譜總離子流圖參見附錄B中圖B.1。在測定條件(3.4.2)下，試樣溶液A和標準工作溶液的特征選擇離子色譜峰在相同保留時間處(±0.5%)出現(xiàn)，且試樣溶液A的特征離子相對離子豐度與濃度相當?shù)臉藴使ぷ饕旱奶卣麟x子相對離子豐度的相對偏差不超過表2規(guī)定的范圍，則可判定試樣中存在相關目標化合物。表2定性確證時特征離子相對離子豐度和最大允許偏差k>5050≥k>2020≥k>10k≤10允許的最大偏差/%士10士20本標準采用外標校準曲線法定量測定。以各待測物定量離子色譜峰的峰面積為縱坐標，對應的標準溶液濃度為橫坐標，繪制標準曲線。以試樣中待測化合物的定量離子色譜峰的峰面積與標準曲線比較定量。試樣溶液A中待測化合物的響應值均應在標準曲線的線性范圍之內(nèi)，超出線性范圍的試樣溶液A可適當稀釋后進行測定。3.5結(jié)果計算試樣中待測化合物的含量按式(1)進行計算： (1)式中：w——試樣中待測化合物的含量，單位為毫克每千克(mg/kg);p——試樣溶液A(3.4.1)中待測化合物峰面積對應的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L);V——四氫呋喃的體積，單位為毫升(mL);m——試樣質(zhì)量，單位為克(g)。計算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。3.6回收率和精密度在添加濃度為50.0mg/kg～500mg/kg范圍內(nèi)，回收率為80%～110%。相對標準偏差小3.7允許差在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不大于這兩個測定值的算術(shù)平均值的10%。4GB/T39993—20214第二法高效液相色譜法試樣中的二甲基噁唑烷經(jīng)50%(體積分數(shù))乙腈溶液提取，提取液經(jīng)正己烷凈化、離心、9-芴甲氧羰4.2試劑和材料4.2.4四硼酸鈉(Na?B?O?·10H?O):優(yōu)級純。4.2.59-芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl):純度不小于99%。4.2.99-芴甲氧羰酰氯溶液(10.0g/L):準確稱取9-芴甲氧羰酰氯(4.2.5)0.50g,溶于20mL乙腈的標準儲備液(于4℃避光保存，宜保存3個月)。準確移取適量的標準儲備液，用50%乙腈溶液(4.2.6)逐級稀釋成質(zhì)量濃度為2.50mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、50.0mg/L、100mg/L的標準工作溶液(宜現(xiàn)配現(xiàn)用)。4.3.3渦旋振蕩器：最高轉(zhuǎn)速不低于30004.4試驗步驟4.4.1試樣處理旋振蕩1min,超聲提取10min,冷卻至室溫，使用50%乙腈溶液(4.2.6)定容至10mL,混勻，取5mL氯溶液(4.2.9),室溫反應10min,衍生液經(jīng)濾膜過濾后得到試樣溶液B,供高效液相色譜儀測定。5GB/T39993—20214.4.2測定條件高效液相色譜參考工作條件如下：相當者；d)柱溫：30℃;表3高效液相色譜梯度洗脫條件時間/min乙腈/%水/%4.4.3標準工作曲線繪制0.2mL9-芴甲氧羰酰氯溶液(4.2.9),室溫反應10min,衍生液經(jīng)濾膜過濾后按高效液相色譜參考工作條件(4.4.2)進行測定，以色譜峰的峰面積為縱坐標，與其對應的溶液濃度為橫坐標作圖，繪制標準工作曲線。二甲基噁唑烷標準物質(zhì)衍生物的液相色譜圖參見附錄C中圖C.1,二甲基噁唑烷標準物質(zhì)衍生物的光譜圖參見圖C.2。4.4.4試樣測定按高效液相色譜參考工作條件(4.4.2)測定試樣溶液B(4.4.1),如果檢出的色譜峰的保留時間與標準物質(zhì)的一致，并且在扣除背景后的樣品色譜圖中，該物質(zhì)的光譜圖與標準物質(zhì)的一致，則可初步確定樣品為陽性樣品，記錄色譜峰的峰面積，以外標法定量。試樣溶液B中被測物的響應值應在標準工作曲線的線性范圍之內(nèi)。超出線性范圍的試樣溶液B,應將試樣處理中未衍生的下層清液用50%乙腈溶液(4.2.6)適當稀釋并重新衍生后進行測定。4.4.5空白試驗4.5結(jié)果計算試樣中待測化合物的含量按式(2)進行計算：…………6GB/T39993—2021式中：w——試樣中被測組分的含量，單位為毫克每千克(mg/kg);p——從標準曲線得到的試樣溶液(4.4.1)中被測組分的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L);V——試樣溶液定容體積，單位為毫升(mL);結(jié)果保留三位有效數(shù)字。在添加濃度為50.0mg/kg～500mg/kg范圍內(nèi)，回收率為80%～110%,相對標準偏差小于10%。在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不大于這兩個測定值的算術(shù)平均值的10%。7GB/T39993—2021(資料性附錄)3種限用防腐劑標準物質(zhì)的信息子質(zhì)量及化學結(jié)構(gòu)式見表A.1。中文名稱英文名稱INCI名稱分子式相對分子質(zhì)量化學結(jié)構(gòu)式二甲基噁唑烷4,4-Dimethyl-1,3-oxazolidineDimethyloxazolidine51200-87-4C;H?NOHN-07-乙基雙環(huán)噁唑烷5-Ethyl-3,7-dioxa-1-azabicyclo[3.3.0]octane7-Ethylbicyclooxazolidine7747-35-5C,H?NO?5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷5-Bromo-5-nitro-1,3-dioxane5-Bromo-5-nitro-1,3-dioxane30007-47-7C?H?BrNO?212.00心二乙心二乙Br08GB/T(資料性附錄)3種防腐劑標準物質(zhì)的氣相色譜-質(zhì)譜總離子流圖3種限用防腐劑標準物質(zhì)的氣相色譜-質(zhì)譜總離子流圖見圖B.1。328.0×1044.0×10+時間/min說明：1——二甲基噁唑烷；2——7-乙基雙環(huán)噁唑烷；3——5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷。3種