GBT 39999-2021 化妝品中恩諾沙星等15種禁用喹諾酮類抗生素的測定 液相色譜-串聯(lián)質譜法(正式版)

化妝品中恩諾沙星等15種禁用喹諾酮類抗生素的測定液相色譜-串聯(lián)質譜法國家市場監(jiān)督管理總局國家標準化管理委員會I本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標準由中國輕工業(yè)聯(lián)合會提出。本標準由全國香料香精化妝品標準化技術委員會(SAC/TC257)歸口。本標準起草單位：江蘇省產品質量監(jiān)督檢驗研究院、嘉文麗(福建)化妝品有限公司、無限極(中國)質量監(jiān)督檢測研究院、上海市日用化學工業(yè)研究所、上海相宜本草化妝品股份有限公司、歐詩漫生物股份有限公司、廣州市嬌蘭化妝品有限公司、完美(廣東)日用品有限公司、江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院、常州市食品藥品監(jiān)督檢驗中心、河北省食ⅡGB/T39999—2021禁用物質是指不能作為化妝品生產原料即組分添加到化妝品中的物質?！痘瘖y品安全技術規(guī)范1GB/T39999—2021化妝品中恩諾沙星等15種禁用喹諾酮類抗生素的測定液相色譜-串聯(lián)質譜法1范圍本標準規(guī)定了化妝品中15種禁用喹諾酮類抗生素的液相色譜-串聯(lián)質譜測定方法的原理、試劑或本標準不適用于粉類化妝品中喹諾酮類抗生素的測定。本標準15種喹諾酮類抗生素的方法檢出限均為0.15mg/kg,定量限均為0.50mg/kg。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3原理4試劑或材料4.50.1%甲酸乙腈溶液：準確量取1.0mL甲酸(4.3)至1000m4.60.1%甲酸溶液：準確量取1.0m4.9標準物質：純度均不小于98%,15種喹諾酮類抗生素標準物質的中文名稱、英文名稱、CAS號、分4.10混合標準工作溶液：分別準確稱取適量標準物質(4.9)(精確至0.1mg),用乙腈(4.2)配制成質量濃度為1000μg/mL的單標標準貯備液(于4℃避光保存，可保存3個月)。準確移取各單標標準貯備26試驗步驟稱取試樣1.0g(精確至0.001g),置于15mL乙腈溶液(4.5)重復提取一次，合并上清液，用0.1%甲酸乙腈溶液(4.5)定容至25mL。準確移取見表1;3GB/T39999—2021時間/minA/%表215種喹諾酮類抗生素的質譜參數(shù)化合物保留時間/min母離子m/3子離子m/2去簇電壓/V碰撞電壓/V碰撞室出口電壓/V依諾沙星麻保沙星諾氟沙星氧氟沙星99氟羅沙星培氟沙星環(huán)丙沙星洛美沙星4GB/T39999—2021表2(續(xù))化合物保留時間/min母離子m/≈子離子m/z去簇電壓/V碰撞電壓/V碰撞室出口電壓/V丹諾沙星恩諾沙星9奧比沙星沙拉沙星司帕沙星雙氟沙星400.3莫西沙星402.5定量離子。6.2.3標準工作曲線繪制將混合標準工作溶液(4.10),按高效液相色譜和質譜參考工作條件(6.2.1和6.2.2)進行測定，以定量離子色譜峰的峰面積為縱坐標，與其對應的溶液濃度為橫坐標作圖，繪制標準工作曲線。15種喹諾酮類抗生素標準物質的多反應監(jiān)測色譜圖參見附錄B中圖B.1。按高效液相色譜和質譜參考工作條件(6.2.1和6.2.2)測定試樣溶液(6.1)。如果試樣中待測物質的色譜峰保留時間與標準溶液的一致，并且在扣除背景后的試樣質譜圖中，所選擇的離子均出現(xiàn)，而且選擇離子的相對豐度與標準物質的進行比較，相對偏差不超過表3規(guī)定的范圍，可判定為試樣中含有對應的待測物。記錄定量離子色譜峰的峰面積，以外標法定量。試樣溶液中被測物的響應值均應在標準曲線的線性范圍之內，超出線性范圍的試樣溶液可用定容液(4.7)適當稀釋后進行測定。表3定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差k>5050≥k>2020≥k>10k≤10士20士25士30士50除不稱取試樣外，均按6.1～6.2進行測定。5GB/T39999—20217試驗數(shù)據(jù)處理試樣中恩諾沙星等15種喹諾酮類抗生素的含量按式(1)計算： (1)式中：X;——試樣中被測組分的含量，單位為毫克每千克(mg/kg);p;——從標準曲線得到的試樣溶液中被測組分的質量濃度，單位為微克每升(μg/L);po——從標準曲線得到的空白樣品溶液中被測組分的質量濃度，單位為微克每升(μg/L);V——試樣溶液首次定容體積，單位為毫升(mL);m——試樣質量，單位為克(g);f——稀釋倍數(shù)。計算結果保留兩位有效數(shù)字。8回收率和精密度在添加濃度為0.50mg/kg～5.0mg/kg范圍內，回收率為80%～110%,相對標準偏差小于10%。9允許差在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不應超過算術平均值的10%。615種喹諾酮類抗生素的中文名稱、英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質量及化學結構式見中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子質量化學結構式依諾沙星麻保沙星Marbofloxacin諾氟沙星Norfloxacin氧氟沙星氟羅沙星培氟沙星7表A.1(續(xù))中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子質量化學結構式環(huán)丙沙星洛美沙星丹諾沙星Danofloxacin恩諾沙星奧比沙星沙拉沙星N司帕沙星NH8表A.1(續(xù))中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子質量化學結構式雙氟沙星莫西沙星Moxifloxacin9強度/eps強度/eps度強強度/eps強度/eps強度/15種喹諾酮類抗生素標準物質的多反應監(jiān)測色譜圖15種喹諾酮類抗生素標準物質的多反應監(jiān)測色譜圖見圖B.1。依諾沙星時間/min麻保沙星強度/強度/2.0e4-時間/min諾氟沙星4.45時間/m1時間/mn時間/mn培氟沙星時間/min環(huán)內沙星時問/min濟美沙星圖B.115種喹諾酮類抗生素標準物質的多反應監(jiān)測色譜圖強度/cps強度/cps4.0e4-2.0c4-月諾沙星