DB1310T 345-2024平菇液體菌種制備技術(shù)規(guī)范

1310本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定平菇液體菌種制備技術(shù)規(guī)范GB/T4789.28食品微生物學(xué)檢驗(yàn)培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3.1在生物發(fā)酵罐中通過深層培養(yǎng)(液體發(fā)酵)技術(shù)生產(chǎn)的液體形態(tài)的食用菌菌3.2經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，以玻璃試管為培養(yǎng)容器和3.33.43.53.6單位時(shí)間通入發(fā)酵罐中無菌空氣體積與發(fā)酵罐體3.74基本要求4.2場(chǎng)所要求4.3廠房及設(shè)施要求廠房設(shè)計(jì)應(yīng)符合NY/T528要求。潔凈車間應(yīng)設(shè)有多功能實(shí)驗(yàn)室、菌種保藏室、無菌接種室、搖瓶4,4生產(chǎn)設(shè)備要求5.3.1容器5.3.4滅菌將分裝好的搖瓶放入滅菌鍋內(nèi)，采用高壓滅菌，滅菌溫度控制在121℃~122℃,維持25min～305.3.5接種接種結(jié)束后封口，放入恒溫箱中23℃~25℃靜置培養(yǎng)24h，然后置于搖床上震蕩培養(yǎng)，搖床溫度體積不低于整個(gè)培養(yǎng)液體積的80%，均勻懸浮于液體培養(yǎng)基中5.4發(fā)酵罐液體菌種生產(chǎn)生產(chǎn)用水應(yīng)符合GB5749要求，培養(yǎng)基質(zhì)應(yīng)符合NY/T528要求，玉米粉過30目篩。其中，培養(yǎng)基配），用溫水把玉米粉等原料攪拌均勻，混合后加入罐體，裝液量為罐體容量的60%～70%，加入0.4‰泡敵做為消泡劑，通入空氣鼓氣攪拌1min～2min，混合均勻，擰緊上料口蓋。發(fā)酵罐通入蒸汽加熱。待罐壓達(dá)到0.05MPa時(shí)，緩慢打開排氣閥降壓至0MPa排凈冷空氣，關(guān)閉排氣其他與外界有流通的閥門開口如取樣口、排污口、接種口等均要通蒸汽5.4.5冷卻滅菌結(jié)束，關(guān)閉空氣過濾器滅菌閥與排氣閥，緩慢打開空氣過濾器排水閥降壓至0MPa，夾層通入冷水降溫；同時(shí)緩慢打開發(fā)酵罐排氣閥降壓，待壓力接近0.01MPa時(shí)通過空氣過濾器向培養(yǎng)層內(nèi)通入無5.4.6接種的火焰圈套在接種口上，使發(fā)酵罐壓力為0.01MPa，并有氣體排出。點(diǎn)燃火焰圈，在火焰保護(hù)下將菌種倒入發(fā)酵罐接種口，蓋上接種口蓋子，去掉火焰圈，罐壓0.03MPa～0.05MPa，培養(yǎng)溫度控制在23℃~25℃,培養(yǎng)6d～7d。培養(yǎng)液澄清透明，菌絲球、菌絲片段均勻懸浮于液體中，不分層，直徑小于3.5mm有平菇液體培養(yǎng)時(shí)特有的香氣，無酸、臭等異味，發(fā)酵罐排氣口氣可見平菇菌種液體培養(yǎng)中特有的菌絲形態(tài)，菌絲粗無無——形態(tài)學(xué)觀察：主要是通過肉眼觀察菌球形態(tài)，包括菌液色澤、菌液形態(tài)、通過鼻嗅檢測(cè)菌液min，稱重。——霉菌檢驗(yàn)：按照無菌操作從取樣閥取少量疑有霉菌污染的培養(yǎng)液，接種于GB/T4789.28中規(guī)定的PDA培養(yǎng)基中，置于35℃~37℃恒溫培養(yǎng)48h，采用顯微鏡和感官觀察菌絲生長(zhǎng)狀況和有無雜菌污染；若出現(xiàn)白色以外的雜色者，或有異味者為霉菌污染物，必要時(shí)進(jìn)行——細(xì)菌檢驗(yàn)：按照無菌操作從取樣閥取少量疑有細(xì)菌污染的培養(yǎng)液，接種于GB/T4789.