土壤芳基硫酸酯酶（Solid-arylsulfataseS-ASF）試劑盒說(shuō)明書(shū)

第第頁(yè)土壤芳基硫酸酯酶（Solid-arylsulfatase，S-ASF）試劑盒說(shuō)明書(shū)土壤芳基硫酸酯酶（Solidarylsulfatase，SASF）試劑盒說(shuō)明書(shū)微量法100管/48樣注意：正式測(cè)定前務(wù)必取23個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：土壤芳基硫酸酯酶來(lái)自于土壤微生物，能酶促土壤有機(jī)硫化物轉(zhuǎn)化為植物可吸收的無(wú)機(jī)態(tài)硫，在硫素的生物化學(xué)循環(huán)和植物的硫營(yíng)養(yǎng)代謝中具有重要的作用，是反映土壤質(zhì)量的一個(gè)重要生物學(xué)指標(biāo)。測(cè)定原理：SASF能夠催化對(duì)硝基苯硫酸鉀生成對(duì)硝基苯酚，后者在410nm有特征光吸收。自備用品：可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。試劑組成和配制：試劑一：甲苯5mL×1瓶，4℃保存（自備）；試劑二：液體20mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×2支，20℃保存；臨用前加入1.25mL蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍20℃保存;試劑四：液體5mL×1瓶，4℃保存；試劑五：液體20mL×1瓶，4℃保存；樣品處理：新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干，過(guò)30~50目篩。測(cè)定步驟：試劑名稱測(cè)定管對(duì)照管風(fēng)干土樣（g）0.050.05試劑一（μL）12.512.5振蕩混勻，使土樣全部濕潤(rùn)，室溫放置15min試劑二（μL）200200試劑三（μL）50蒸餾水（μL）50混勻，37℃水浴1h后試劑四（μL）5050試劑五（μL）200200充分混勻，室溫靜置2min后，10000g25℃離心10min，取200μL上清液于410nm處測(cè)定吸光值A(chǔ)，計(jì)算ΔA=A測(cè)定管A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。SASF活力計(jì)算：a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y=0.0066x0.013；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/L），y為吸光值。單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1μmol對(duì)硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。SASF活力（μmol/d/g土樣）＝(ΔA+0.013)÷0.0066×V反總÷W÷T=19.09×(ΔA+0.013)T：反應(yīng)時(shí)間，1h=1/24d；V反總：反應(yīng)體系總體積：2.625×104L；W：樣本質(zhì)量，0.05g。b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y=0.0033x0.013；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/L），y為吸光值。單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1μmol對(duì)硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。SASF活力（μmol/d/g土樣）＝(ΔA+0.013)÷0.0033×V反總÷W÷T=38.19×(ΔA+0.