超敏反應(yīng)性疾病及其免疫檢測醫(yī)學(xué)

超敏反應(yīng)/變態(tài)反應(yīng)

Hypersensitivity/Allergy

定義：機(jī)體接觸到某種抗原并且致敏后，再次受到相同抗原刺激時，出現(xiàn)生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷的異常適應(yīng)性免疫應(yīng)答。變應(yīng)原(Allergen):引起超敏反應(yīng)的抗原1精品課件超敏反應(yīng)分為四型

（依發(fā)生機(jī)制和臨床特點(diǎn)）：Ⅰ型超敏反應(yīng)(速發(fā)型超敏反應(yīng))Ⅱ型超敏反應(yīng)(細(xì)胞溶解型或細(xì)胞毒型)Ⅲ型超敏反應(yīng)(免疫復(fù)合物型或血管炎型)Ⅳ型超敏反應(yīng)(遲發(fā)型超敏反應(yīng))

2精品課件

Ⅰ型超敏反應(yīng)

特點(diǎn)：發(fā)生快，恢復(fù)快；常引起生理功能紊亂，一般無組織損傷；由IgE介導(dǎo)，肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞參與有明顯的個體差異和遺傳背景。3精品課件

Ⅰ型超敏反應(yīng)一.參與Ⅰ型超敏反應(yīng)的成分(一)變應(yīng)原★藥物或化學(xué)物質(zhì)---青霉素、磺胺等

★

吸入性變應(yīng)原---花粉、屋塵(塵螨、皮屑、真菌的孢子等

★食物變應(yīng)原---魚、蝦、肉、蛋、牛奶等

★接觸性變應(yīng)原---工業(yè)產(chǎn)品及合成物4精品課件

Ⅰ型超敏反應(yīng)(二)抗體IgE(三)細(xì)胞肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞IgEFc受體嗜酸性粒細(xì)胞

5精品課件6精品課件

預(yù)先存在的介質(zhì)（脫顆粒）組織胺(histamine)趨化因子激肽原酶蛋白水解酶白三烯（Leucotrienes，LTs）前列腺素（PGD2）即刻\早期晚期I型超敏反應(yīng)發(fā)生的機(jī)制

血小板活化因子（Plateletactivityfactor，PAF）

新合成的介質(zhì)7精品課件Ⅰ型超敏反應(yīng)的常見疾病

（一）過敏性休克藥物過敏性休克血清過敏性休克（二）呼吸道過敏反應(yīng)過敏性鼻炎(枯草熱)、支氣管哮喘（三）消化道過敏反應(yīng)（四）皮膚過敏反應(yīng)蕁麻疹、濕疹、血管神經(jīng)性水腫。

8精品課件

蕁麻疹

濕疹9精品課件結(jié)膜炎哮喘病10精品課件

I型超敏反應(yīng)免疫學(xué)檢測項(xiàng)目11精品課件皮膚試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理：變應(yīng)原致敏者皮膚Ag+IgE（M、B)皮膚挑刺、劃痕皮內(nèi)注射釋放生物活性介質(zhì)20-30m局部皮膚出現(xiàn)紅暈、紅斑、風(fēng)團(tuán)

陽性12精品課件皮膚試驗(yàn)皮內(nèi)試驗(yàn)方法皮膚消毒→變應(yīng)原提取液注入前臂內(nèi)側(cè)皮內(nèi)（0.01-0.02ml）→2-3mm的皮丘→兩種間距2.2-5.0cm→15-25分鐘觀察結(jié)果陰性對照--生理鹽水陽性對照--鹽酸組胺13精品課件皮膚試驗(yàn)假陽性原因變應(yīng)原稀釋液偏酸或偏堿患者有皮膚劃痕癥抗原不純和被污染抗原量注射過多假陰性原因變應(yīng)原抗原性喪失或濃度過低患者皮膚反應(yīng)較低受試者正使用抗組胺類藥或激素類藥注射部位過深或注射量太少

14精品課件Ⅰ型超敏反應(yīng)臨床意義尋找變應(yīng)原預(yù)防藥物或疫苗過敏應(yīng)用評價(jià)過敏原有限食物過敏與皮膚試驗(yàn)相關(guān)性較差選擇過敏原應(yīng)結(jié)合實(shí)際情況15精品課件Ⅰ型超敏反應(yīng)血清總IgE檢測常用方法：免疫比濁法化學(xué)發(fā)光免疫法酶聯(lián)免疫吸附法---適用于中小實(shí)驗(yàn)室臨床意義：升高見于Ⅰ型超敏反應(yīng)性疾病，寄生蟲感染，

IgE型多發(fā)性骨髓瘤應(yīng)用評價(jià)：應(yīng)建立當(dāng)?shù)厝巳篒gE水平的參考區(qū)間

臨床實(shí)驗(yàn)室常用16精品課件Ⅰ型超敏反應(yīng)特異性IgE檢測（sIgE）放射變應(yīng)原吸附試驗(yàn)免疫印跡測定法17精品課件

斑點(diǎn)酶免疫印跡法實(shí)驗(yàn)原理

用NC膜作為固相支持物，檢測區(qū)的不同區(qū)域包被有特異性的過敏原。檢測時將稀釋的病人血清加入反應(yīng)槽內(nèi)，血清中的sIgE與NC膜上的相應(yīng)過敏原結(jié)合，再加入酶標(biāo)記的抗人IgE抗體，此抗體會與檢測區(qū)NC膜上的sIgE結(jié)合，然后加入底物顯色。通過顯色區(qū)帶確定血清中含有哪種sIgE，進(jìn)而判斷待檢者對哪種過敏原過敏。18精品課件19精品課件稀釋好的洗液將檢測條要充分浸透，放在搖床上搖10分鐘倒掉洗液，加入稀釋好的測試者血清，放于搖床室溫反應(yīng)1.5小時倒掉小槽中的血清，依次加入洗液，震蕩10分鐘，重復(fù)三次

每槽加入堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgE，放于搖床上室溫反應(yīng)30分鐘將堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人IgE倒掉，用洗液洗三次，每次10分鐘

加入堿性磷酸酶底物，放于搖床，避光反應(yīng)約10分鐘去掉底物溶液，用純水洗三次，每次5分鐘操作步驟將檢測條放在干燥紙上，等檢測條完全干燥后判定檢測結(jié)果20精品課件結(jié)果分析通過顯色區(qū)帶確定血清中含有哪種sIgE，進(jìn)而判斷待檢者對哪種過敏原過敏。臨床意義

slgE測定是體外檢測變應(yīng)原的重要手段，主要用于Ⅰ型超敏反應(yīng)的診斷。該檢測條包被有多種特異性過敏原，通過檢測血漿（血清）中過敏原slgE，篩查待檢者對何種過敏原過敏，為臨床進(jìn)行脫敏治療奠定基礎(chǔ)。21精品課件

II型超敏反應(yīng)定義：

II型超敏反應(yīng)又稱細(xì)胞毒型（cytotoxictype）或細(xì)胞溶解型（cytolytictype）超敏反應(yīng)，它是由靶細(xì)胞表面的抗原與相應(yīng)IgG或IgM類抗體結(jié)合后，在補(bǔ)體、巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞參與下，引起的以細(xì)胞溶解或組織損傷為主的病理性免疫反應(yīng)。22精品課件

II型超敏反應(yīng)特點(diǎn)：1.直接或間接與細(xì)胞有關(guān)2.IgG或IgM介導(dǎo)3.補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞、NK細(xì)胞參與4.造成細(xì)胞溶解或功能紊亂23精品課件

II型超敏反應(yīng)靶細(xì)胞：正常組織細(xì)胞、改變的自身組織細(xì)胞、修飾的自身組織細(xì)胞抗原：同種異型抗原、共同抗原、變性自身抗原、外來抗原抗體：IgG和IgM類抗體參與細(xì)胞損傷的物質(zhì)：補(bǔ)體、吞噬細(xì)胞、NK細(xì)胞24精品課件25精品課件變應(yīng)原26精品課件輸血反應(yīng)（transfusionreaction）新生兒溶血（hemolyticofthenewborn）自身免疫性溶血性貧血（autoimmunehemolyticanemia）藥物過敏性血細(xì)胞減少甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)（Gravesdisease）鏈球菌感染后腎小球腎炎TypeIIHypersensitivityReactions:ExamplesofDiseases27精品課件28精品課件甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)(Grave’s病)

29精品課件530精品課件II型超敏反應(yīng)免疫學(xué)檢測項(xiàng)目31精品課件＋患者紅細(xì)胞Coombs試劑檢測紅細(xì)胞上不完全抗體直接Coombs試驗(yàn)32精品課件試管法操作步驟用生理鹽水配5%紅細(xì)胞懸液取潔凈小試管2支，1管加1滴5%紅細(xì)胞懸液，另一管加生理鹽水作對照

在生理鹽水和5%紅細(xì)胞懸液中分別加入診斷試劑一滴，使其混勻，室溫稍待片刻1000r離心1min或3000r離心15s。

取出試管先以肉眼觀察有無溶血，再輕輕搖動試管，如有凝集，則為陽性結(jié)果；如無凝集，應(yīng)在室溫延長15~30min的反應(yīng)時間，再離心看結(jié)果。33精品課件結(jié)果分析

生理鹽水對照不應(yīng)發(fā)生凝集，為均勻渾濁的乳狀液。在紅細(xì)胞懸液中，如紅細(xì)胞凝集成片狀，邊緣皺褶如花邊狀或邊緣松散為陽性。如與對照相同，為陰性。34精品課件

臨床意義

直接Coombs試驗(yàn)用于檢測患者紅細(xì)胞上不完全抗體，Coombs試驗(yàn)陽性可見于自身免疫性溶血性貧血、冷凝集素綜合征、藥物誘發(fā)的免疫性溶血性貧血、新生兒同種免疫性溶血病、某些高球蛋白血癥患者，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕、惡性腫瘤等。35精品課件患者血清靶紅細(xì)胞致敏紅細(xì)胞Coombs試劑檢測血清中的抗紅細(xì)胞抗體間接Coombs試驗(yàn)36精品課件微柱法操作步驟撕開微柱凝膠卡密封紙，標(biāo)記加1%篩選紅細(xì)胞50μl及受檢者血清25μl37℃孵育15min離心機(jī)離心10min，1000r/min

觀察結(jié)果，如紅細(xì)胞懸浮在反應(yīng)管頂部或凝膠中，則為陽性結(jié)果；反之，如紅細(xì)胞沉于凝膠底部（管底尖部），則為陰性結(jié)果。37精品課件結(jié)果分析

-100%的紅細(xì)胞沉在微管的底部+/-100%的紅細(xì)胞沉在微管的下端1/3之內(nèi)1+80%的紅細(xì)胞沉在微管的下端2/3之內(nèi)2+80%的紅細(xì)胞沉在微管的上端2/3之內(nèi)3+80%的紅細(xì)胞沉在微管的上端1/3之內(nèi)4+凝集的細(xì)胞全部處于微管的頂部d.p.雙群Hemo.溶血反應(yīng)格局及判斷標(biāo)準(zhǔn)38精品課件

臨床意義

間接Coombs試驗(yàn)用于檢測患者游離血清中的不完全抗體。此實(shí)驗(yàn)多用于檢測母體Rh（D）抗體，以便及早發(fā)現(xiàn)和避免新生兒溶血癥的發(fā)生，亦可對紅細(xì)胞不相容的輸血所產(chǎn)生的血型抗體進(jìn)行檢測。39精品課件

III型超敏反應(yīng)

定義：

III型超敏反應(yīng)是指由可溶性免疫復(fù)合物沉積于局部或全身多處毛細(xì)血管基底膜，通過激活補(bǔ)體,并在血小板、嗜堿性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等的參與下，引起的以充血水腫、局部壞死和中性粒細(xì)胞浸潤為主要特征的炎癥反應(yīng)和組織損傷。40精品課件BloodcellantigenAdsorbeddrugorDrugmetaboliteAntibodytodrugcomplementLysis藥物過敏性血細(xì)胞減少41精品課件

III型超敏反應(yīng)

特點(diǎn)：1.形成中等大?。?06Da）、可溶性（19s）復(fù)合物（IC)，IC沉積在血管基底膜上2.IgG,IgM或IgA介導(dǎo)3.補(bǔ)體、中性粒細(xì)胞參與4.造成血管及周圍組織炎癥42精品課件

免疫復(fù)合物易于形成與沉積的因素1.抗原成分在體內(nèi)長期滯留2.血管通透性增強(qiáng)3.組織的解剖學(xué)及血流動力學(xué)

免疫復(fù)合物易沉積于靜脈壓較高及形成渦流的毛細(xì)血管迂回處，如腎小球基底膜及關(guān)節(jié)滑膜、肝、脾、血管等部位。4.免疫復(fù)合物的性質(zhì)

中等大小，可溶性免疫復(fù)合物組織內(nèi)沉積。

III型超敏反應(yīng)43精品課件44精品課件Arthus反應(yīng)及類Arthus反應(yīng)(局部免疫復(fù)合物病)血清?。╯erumsickness）鏈球菌感染后腎小球腎炎類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoidarthritis）系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）等臨床常見的III型超敏反應(yīng)性疾病

III型超敏反應(yīng)45精品課件

RA患者手指關(guān)節(jié)實(shí)質(zhì)性損傷46精品課件III型超敏反應(yīng)免疫學(xué)檢測項(xiàng)目47精品課件

PEG比濁法實(shí)驗(yàn)原理

本試驗(yàn)是檢測抗原非特異性循環(huán)免疫復(fù)合物的一種方法。PEG是環(huán)氧乙烷和水的多聚物，為一種不帶電荷的直鏈大分子多糖。終濃度為3%～4%的PEG能相對選擇性地沉淀CIC。用分光光度計(jì)測定濁度，反應(yīng)沉淀物含量。48精品課件

臨床意義

循環(huán)免疫復(fù)合物（Circulationimmunecomplex，CIC）又稱可溶性免疫復(fù)合物，分子量為50萬～100萬，沉降系數(shù)8.8～19S，它不易被吞噬細(xì)胞吞噬，又不能經(jīng)腎小球排出，可較長時間在血液中循環(huán)，一旦大量循環(huán)免疫復(fù)合物沉積于組織中，則引起組織損傷及相關(guān)的免疫復(fù)合物病。CIC陽性常見于：1.部分自身免疫性疾病，如SLE，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等；2.膜增殖性腎炎，鏈球菌感染后腎炎；3.傳染病，如慢性乙型肝炎，瘧疾，麻風(fēng)等；4.惡性腫瘤。49精品課件

IV型超敏反應(yīng)主要以T細(xì)胞介導(dǎo)--CD4＋Th1(主要)和CD8＋CTL細(xì)胞以單個核細(xì)胞浸潤為主的炎癥反應(yīng)；遲發(fā)，常在再次接觸抗原后24－72小時發(fā)生50精品課件51精品課件52精品課件臨床常見遲發(fā)型超敏反應(yīng)疾病1、傳染性遲發(fā)型超敏反應(yīng)性疾病：如結(jié)核、麻風(fēng)及某些原蟲感染等。2、接觸性