體外診斷試劑-基本概念與基礎(chǔ)知識

體外診斷試劑

----基本概念與基礎(chǔ)知識一、基本概念二、體外診斷試劑的分類與命名三、體外診斷試劑的性能與技術(shù)要求四、體外診斷試劑的說明書五、新技術(shù)在體外診斷試劑中的應用六、其他問題一、基本概念（一）法規(guī)依據(jù)

《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例》（國務院令第650號）

《體外診斷試劑注冊管理辦法》（總局局令第5號）

《醫(yī)療器械說明書和標簽管理規(guī)定》（總局令第6號）

《醫(yī)療器械生產(chǎn)監(jiān)督管理辦法》（總局令第7號）

《醫(yī)療器械經(jīng)營監(jiān)督管理辦法》（總局令第8號)《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則的通告》（總局通告2014年第16號）《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導原則的通告》（總局通告2014年第17號）

……一、基本概念（二）定義：

按照醫(yī)療器械管理的體外診斷試劑，包括在疾病的預測、預防、診斷、治療監(jiān)測、預后觀察和健康狀態(tài)評價的過程中，用于人體樣本體外檢測的試劑、試劑盒、校準品、質(zhì)控品等產(chǎn)品。可以單獨使用，也可以與儀器、器具、設(shè)備或者系統(tǒng)組合使用。

按照藥品管理的體外診斷試劑主要包括用于血源篩查的體外診斷試劑和采用放射性核素標記的體外診斷診斷試劑。一、基本概念體外診斷試劑：體外診斷試劑是醫(yī)療器械的一個類別；在臨床使用中不與患者接觸，風險的判斷方式與其他醫(yī)療器械不同；是臨床上重要的診療信息的來源；技術(shù)復雜，品種眾多；在突發(fā)公共衛(wèi)生事件中通常是診斷先行。一、基本概念檢測系統(tǒng)構(gòu)成的基本要素：

儀器：與試劑配合共同使用

試劑：通過各種形式存在

校準品：溯源性

質(zhì)控品：賦值準確

軟件：結(jié)果的判讀需要特殊的計算（如有）

操作程序：從樣本采集開始的所有過程一、基本概念產(chǎn)品的形式：

單一試劑或單一試劑盒（注冊管理辦法84條）。

校準品、質(zhì)控品可以與配合使用的體外診斷試劑合并申請注冊，也可以單獨申請注冊。（注冊管理辦法19條）二、體外診斷試劑的分類與命名（一）分類（總局5號令第17條）第一類產(chǎn)品

1.微生物培養(yǎng)基（不用于微生物鑒別和藥敏試驗）；

2.樣本處理用產(chǎn)品，如溶血劑、稀釋液、染色液等。第二類產(chǎn)品

除已明確為第一類、第三類的產(chǎn)品，其他為第二類產(chǎn)品，主要包括：

1.用于蛋白質(zhì)檢測的試劑；

2.用于糖類檢測的試劑；

3.用于激素檢測的試劑；

4.用于酶類檢測的試劑；

5.用于酯類檢測的試劑；

6.用于維生素檢測的試劑；

7.用于無機離子檢測的試劑；

8.用于藥物及藥物代謝物檢測的試劑；

9.用于自身抗體檢測的試劑；

10.用于微生物鑒別或者藥敏試驗的試劑；

11.用于其他生理、生化或者免疫功能指標檢測的試劑。

二、體外診斷試劑的分類與命名第三類產(chǎn)品

1.與致病性病原體抗原、抗體以及核酸等檢測相關(guān)的試劑；

2.與血型、組織配型相關(guān)的試劑；

3.與人類基因檢測相關(guān)的試劑；

4.與遺傳性疾病相關(guān)的試劑；

5.與麻醉藥品、精神藥品、醫(yī)療用毒性藥品檢測相關(guān)的試劑；

6.與治療藥物作用靶點檢測相關(guān)的試劑;

7.與腫瘤標志物檢測相關(guān)的試劑;

8.與變態(tài)反應（過敏原）相關(guān)的試劑。

二、體外診斷試劑的分類與命名體外診斷試劑的分類詳細可參考《體外診斷試劑分類子目錄》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號）特別注冊：1、校準、質(zhì)控的類確認2、與腫瘤、遺傳病相關(guān)3、特殊藥品按照目錄4、聯(lián)合檢測產(chǎn)品類別的確認

二、體外診斷試劑的分類與命名體外診斷試劑的分類：1、以風險為基礎(chǔ)----法規(guī)的分類方式2、以學科分類：臨床化學、毒理學、免疫學、微生物學、血液學、病理學3、以方法學分：生化、免疫、分子診斷等全自動儀器，模塊化組合，可同時完成多種不同類型的測試全自動病毒載量測定系統(tǒng)，配合相應的PCR熒光試劑，可對病原體做定量檢測，同時也可完成基因分型的檢測，如HPV分型試劑。生化試劑：快速檢測用：微生物鑒定與藥敏病理診斷分子診斷二、體外診斷試劑的分類與命名（二）體外診斷試劑的命名第一部分：被測物質(zhì)的名稱

第二部分：用途，如診斷血清、測定試劑盒、質(zhì)控品等

第三部分：方法或者原理，如酶聯(lián)免疫吸附法、膠體金法等二、體外診斷試劑的分類與命名體外診斷試劑的名稱：1、沒有統(tǒng)一的名稱，但要符合法規(guī)的命名規(guī)則。2、分類子目錄的名稱“不一定是相關(guān)產(chǎn)品申請注冊時的完全描述”。3、對免疫試劑來說，抗原類的檢測試劑通常不在產(chǎn)品名稱中體現(xiàn)“抗原”，但個別會有。4、樣本類型通常不在產(chǎn)品名稱中體現(xiàn)，但對特殊樣本類型會有體現(xiàn)（如唾液、尿液）二、體外診斷試劑的分類與命名舉例：與艾滋病的診斷試劑檢出（通常是定性）：HIVRNA核酸檢測HIVp24抗原檢測（酶聯(lián)免疫、化學發(fā)光）HIV抗體檢測（免疫層析、酶聯(lián)免疫、化學發(fā)光、時間分辨熒光等）

從樣本類型上看通常是血液（血清、血漿），但也有口腔唾液、尿液。確認：免疫跡實驗（WB）治療監(jiān)測：定量檢測耐藥基因突變HIV感染后免疫系統(tǒng)的檢測：流式細胞技術(shù)……三、體外診斷試劑性能與技術(shù)要求體外診斷試劑的性能主要體現(xiàn)在：

分析性能：主要包括精密度、準確度、靈敏度、特異性、線性范圍或測定范圍等項目

診斷性能：敏感性與特異性體外診斷試劑還需有：穩(wěn)定性：生產(chǎn)日期、失效期、有效期

在敏感性分析、敏感性診斷、特異性分析、特異性診斷、精確度、再現(xiàn)性方面。

還包括已知相關(guān)的干擾和檢查的局限。（98-79-EC）三、體外診斷試劑性能與技術(shù)要求分析性能：

體外診斷試劑分析性能評估與產(chǎn)品技術(shù)要求的關(guān)系。

體現(xiàn)在產(chǎn)品說明書中某些技術(shù)指標可能存在不完全一致的情況。三、體外診斷試劑性能與技術(shù)要求技術(shù)要求：1、產(chǎn)品型號/規(guī)格及其劃分說明2、性能指標3、檢驗方法4、術(shù)語附錄（僅限第三類體外診斷試劑）包括：原材料、工藝、半成品三、體外診斷試劑性能與技術(shù)要求關(guān)于原材料與工藝（三類產(chǎn)品）：1、體外診斷試劑的特點而制定相應的要求；2、2007年之前按照藥品管理時就有此項要求；3、可參照《生物制品規(guī)程》（2000版），但隨著技術(shù)的變化以及方法的多樣性，企業(yè)應當根據(jù)自身的實際情況而定；4、包括主要原材料的來源、質(zhì)量標準的建立、驗證數(shù)據(jù)、反應體系的選擇與驗證過程、工藝的確立（可以用流程圖）三、體外診斷試劑性能與技術(shù)要求主要原材料：

主要原材料來源通常是二種方式，一種是生產(chǎn)企業(yè)自行制備，另一種是外購于其他供應商。

企業(yè)自制的，應當明確制備原理，簡要描述制備過程以及質(zhì)量標準的確立，同時應當有驗證數(shù)據(jù)。如單抗應當說明生物源性與免疫原，核酸類產(chǎn)品應所有引物、探針的合成、純化、驗證及主要技術(shù)指標的要求。

外購的，應當有明確的供應商，一但確認不得隨意更改，要有明確的質(zhì)量要求及必要的驗證。三、體外診斷試劑性能與技術(shù)要求體外診斷試劑的主要生產(chǎn)工藝包括：

工作液的配制、分裝和凍干,固相載體的包被和組裝，顯色/發(fā)光系統(tǒng)等的描述等。主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝中每個生產(chǎn)步驟需滿足的條件（如：工作液的濃度、生產(chǎn)過程所需的溫度、濕度、反應時間、環(huán)境的潔凈程度等）及關(guān)鍵質(zhì)控環(huán)節(jié)。

三、體外診斷試劑性能與技術(shù)要求由原材料和工藝的改變可能產(chǎn)生的注冊許可事項的變更：

主要原材料供應商的改變；

反應體系和工藝的優(yōu)化；

其他影響產(chǎn)品安全有效的改變。

不屬于變更的：

原材料實質(zhì)性改變，如單抗變多抗、鼠抗變兔抗，核酸的引物、探針序列的改變等。

反應原理的改變。

其他重大改變。

三、體外診斷試劑性能與技術(shù)要求值得注意的是：1、原材料與工藝的要求是企業(yè)依據(jù)自身產(chǎn)品的特點來確定的，應當有明確的質(zhì)量要求，并且是經(jīng)過驗證的。2、同樣的產(chǎn)品不同的企業(yè)間是存在差異的。3、在確定的原材料及工藝條件下，最終產(chǎn)品的性能符合臨床使用要求。三、體外診斷試劑性能與技術(shù)要求目前情況：1、體外診斷試劑無強制性國家標準、行業(yè)標準。2、由中檢院負責提供的國家標準品/參考品數(shù)量有限。3、原材料的差異直接影響到產(chǎn)品最終的性能。4、溯源的差異，使得結(jié)果沒有直接的可比性。5、批次之間的差異的處理。三、體外診斷試劑性能與技術(shù)要求影響產(chǎn)品性能的主要因素：1、原材料2、工藝及反應體系的建立3、性能評估4、企業(yè)內(nèi)部參考品的確立5、臨床評價四、體外診斷試劑的說明書1、是注冊證的附件2、承載了產(chǎn)品的重要信息3、指導使用者正確操作4、為臨床提供重要的診斷信息四、體外診斷試劑的說明書1、產(chǎn)品名稱2、包裝規(guī)格3、預期用途4、檢驗原理5、主要組成成分6、儲存條件及有效期7、適用儀器8、樣本要求9、檢驗方法10、陽性判斷值或者參考區(qū)間11、檢驗結(jié)果的解釋12、檢驗方法的局限性13、產(chǎn)品性能指標14、注意事項15、標識的解釋16、參考文獻17、基本信息18、醫(yī)療器械注冊證（備案）編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號19、說明書核準及修改日期四、體外診斷試劑的說明書如何看體外診斷試劑說明書：

說明書中所承載的信息均是在產(chǎn)品注冊過程中進行過審核的，其結(jié)果是有數(shù)據(jù)支持的，操作程序是經(jīng)過驗證的，產(chǎn)品的剩余風險是有明確提示的，如果說明書中的內(nèi)容是引用文獻也應當注明參考文獻的來源。四、體外診斷試劑的說明書常見的問題：1、預期用途

“輔助診斷”與“診斷”、“早期診斷”

“篩查”

“治療監(jiān)測”

“個體化用藥”（伴隨診斷）四、體外診斷試劑的說明書2、適用機型及配套試劑

均是構(gòu)成檢測系統(tǒng)的基本要素，必須在批準范圍，否則不屬于批準的產(chǎn)品。

企業(yè)與使用者不應當擅自改變原有檢測系統(tǒng)。

也有試劑對檢測儀器無特殊要求，如手工操作，半手工操作五、新技術(shù)在體外診斷試劑中的應用（一）新一代基因測序技術(shù)（二代測序）

是基因檢測的一種方法，較傳統(tǒng)的測序技術(shù)（Sanger法）來說具有高能量、快速、費用低等優(yōu)勢。

基因檢測除測序的方法外還有其他的方法，如熒光PCR法、基因芯片法等。

全球各國監(jiān)管機構(gòu)對基于二代測序原理的體外診斷試劑在批準上均持審慎的態(tài)度，美國直到2013年11月才批準了首個用于二代測序技術(shù)的用于“囊性纖維化疾病”的診斷產(chǎn)品。我國于2014年批準第一個用于二代測序的產(chǎn)品“胎兒染色體非整倍體（T21、T18、T13）檢測試劑盒”及配套儀器。五、新技術(shù)在體外診斷試劑中的應用（二）精準醫(yī)療

美國總統(tǒng)奧巴馬2015年1月提出“精準醫(yī)療”的概念。“精準醫(yī)療”在醫(yī)學方面，主要是通過DNA測序和基因組測序來完成的。

“精準”是指“合適的病人、合適的時間、合適的治療”。六、其他問題1、體外診斷試劑，是醫(yī)療器械的一種，是以臨床使用為目的，并對診療活動有一定影響。

實驗室用的檢測試劑不一定都是“體外診斷試劑”

體外診斷試劑的上市應當進行科學的評價，以證明其安全有效、質(zhì)量可控。

體外診斷試劑與一般實驗室用檢測試劑的區(qū)別，以2013年禽流感試劑為例，說明當時國家CDC用的檢測試劑與擬批準上市的體外診斷試劑的區(qū)別：六、其他問題國家CDC有檢測試劑1、主要是對疫情的發(fā)生發(fā)展起監(jiān)測作用。2、組成不一樣，只提供特異性的檢測試劑，無通用試劑。3、未做完整、規(guī)范化的驗證。4、只在CDC系統(tǒng)內(nèi)使用，并且對人員、實驗室條件有特殊要求。擬批準上市的N7N9禽流感檢測試劑1、臨床上用于對N7N9禽流感的感染起輔助診斷作用。2、提供完成檢測