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ICS65.020.20CCSICS65.020.20CCSB05吉 林 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB22/T3635—2024番茄晚疫病診斷與防治技術(shù)規(guī)程Technicalcodeofpracticefordiagnosisandintegratedmanagenmentoftomatolateblight2024202442520240601吉林省市場(chǎng)監(jiān)督管理廳發(fā)布DB22/T3635—2024DB22/T3635—2024前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由吉林省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件由吉林省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳組織實(shí)施。本文件起草單位:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)。IIDB22/T3635—2024DB22/T3635—2024DB22/T3635—2024DB22/T3635—2024番茄晚疫病診斷與防治技術(shù)規(guī)程范圍本文件適用于番茄晚疫病的病害診斷及其綜合防治。(GB/T8321(所有部分)農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則NY/T1276農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則DB22/T3495—2023露地辣椒疫病診斷與防治技術(shù)規(guī)程下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。番茄晚疫病tomatolateblightPhytophthorainfestans(Mont.)deBarypolymerasechainreaction,PCRDNA4診斷與防治流程番茄晚疫病診斷與防治流程見圖1。1圖1番茄晚疫病診斷與防治流程5病害診斷采集具有典型癥狀的發(fā)病植株,用于癥狀識(shí)別與病原菌鑒定。整個(gè)生育期均可發(fā)病,主要危害成株期的葉、莖和果實(shí)。具體如下:A.1;A.2;2A.3。按以下步驟制作徒手切片:鏡檢3根~52B.1。(22.5μm~40μm~22.5B.2。75%30s,再用3菌2min~3min35mm2~10mm2取4(PDA)253d~5dPDAB.3。DNA按DB22/T3495—2023中C.1的規(guī)定提取病原菌基因組DNA。PCRITS以病菌基因組DNA為模板,采用通用引物ITS4/ITS5(ITS4:5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’/ITS5:5’-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3’)擴(kuò)增ITS區(qū)域,PCR反應(yīng)體系和參數(shù)按C.1的要求進(jìn)行。經(jīng)檢測(cè)得到ITS序列長(zhǎng)度為750bp~760bp。檢測(cè)結(jié)果見圖C.1。將PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序,測(cè)序結(jié)果在GenBank中進(jìn)行BLAST比對(duì)分析,同源性達(dá)95%以上,確定為番茄致病疫霉菌,其ITS序列長(zhǎng)度為754bp。詳細(xì)序列見附錄C.3。3病害防治應(yīng)采取“預(yù)防為主,綜合防治”的原則,在優(yōu)先選用抗病品種的基礎(chǔ)上,加強(qiáng)栽培管理,結(jié)合生態(tài)防控,科學(xué)使用化學(xué)農(nóng)藥。選用抗、耐晚疫病且綜合性狀優(yōu)良的番茄品種。與非茄科作物進(jìn)行3年以上輪作。定植前徹底清理前茬作物的殘枝爛葉,以及雜草等。對(duì)土壤采用生石灰消毒,用量80kg/667m2~100kg/667m2,整地施肥時(shí)深翻入土,澆透水,一周后可以定植栽培。偏堿性土壤不宜采用此方法。合理施肥,施足基肥,避免偏施氮肥,增施磷鉀肥。番茄坐果后及時(shí)去除殘留的花瓣;及時(shí)疏花疏合理施肥,施足基肥,避免偏施氮肥,增施磷鉀肥。番茄坐果后及時(shí)去除殘留的花瓣;及時(shí)疏花疏果、整枝打杈。60%85%以白天溫度控制在25℃~28℃,夜間溫度保持在13℃~18℃,地溫不低于13℃。農(nóng)藥選擇和使用應(yīng)符合GB/T8321(所有部分)和NY/T1276的規(guī)定,藥劑管理按附錄E要求執(zhí)行。煙霧法設(shè)施番茄晚疫病發(fā)生前,用12.5%甲霜?百菌清煙劑,用藥量340g/667m2~400g/667m2,將其點(diǎn)燃,插掛于大棚內(nèi)適當(dāng)位置,熄滅明火發(fā)煙,封棚一夜,次日放煙。每季最多用藥次數(shù)3次。弱苗及小拱棚不宜使用。46.2.4.2.2噴霧法發(fā)病前或發(fā)病初期,采用噴霧法均勻施藥。每7d~10d噴灑1次,噴2次~3次。主要農(nóng)藥制劑種類、使用時(shí)期、施藥量參見表D.1。2年,做到可追溯。55附錄A(資料性)番茄晚疫病典型癥狀圖片番茄晚疫病典型癥狀見圖A.1至圖A.3。圖A.1葉部癥狀圖A.2莖部癥狀圖A.2莖部癥狀圖A.3果實(shí)癥狀6附錄B(資料性)番茄晚疫病病原菌顯微形態(tài)及菌落形態(tài)B.1病原菌顯微形態(tài)顯微形態(tài)見圖B.1和圖B.2。 圖A.4病原菌游動(dòng)孢子囊梗(顯微鏡倍數(shù)40×10)圖A.5圖A.540×10)B.2病原菌菌落形態(tài)在PDA培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)見圖B.3。圖A.6PDA培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)(左:正面右:反面)7附錄C()PCRITS4和TIS5引物各加0.5μL,PCRmix5μL,DNA模板1μL,ddH2O3μL,合計(jì)10μL。C.1.2.194℃預(yù)變性3min;94℃變性30s,55℃退火50s,72℃延伸1min,共35個(gè)循環(huán);72℃延伸10min;4℃保存。PCR產(chǎn)物檢測(cè)使用1%的瓊脂糖凝膠,用0.5×TBE電泳緩沖液,100V電泳30min~40min。50ng/μL。C.2C.2PCR凝膠成像檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,經(jīng)檢測(cè)得到病原菌ITS序列長(zhǎng)度為750bp~760bp。檢測(cè)結(jié)果見圖C.1。M樣本圖B.1ITS序列PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳檢測(cè)對(duì)照?qǐng)D8C.3番茄晚疫病原菌ITS全序列將PCR產(chǎn)物純化后測(cè)序,測(cè)試結(jié)果顯示番茄晚疫病疫霉菌ITS序列片段長(zhǎng)度為754bp。序列如下:1AACCGTTTCAACCCAATAGTTGGGGGTCTTACTTGGCGGCGGCTGCTGGCTTTATTGCTG61GCGGCTACTGCTGGGCGAGCCCTATCAAAAGGCGAGCGTTTGGACTTCGGTCTGAGCTAG121TAGCTTTTTTATTTTAAACCCTTTACTTAATACTGATTATACTGTGGGGACGAAAGTCTC181TGCTTTTAACTAGATAGCAACTTTCAGCAGTGGATGTCTAGGCTCGCACATCGATGAAGA241ACGCTGCGAACTGCGATACGTAATGCGAATTGCAGGATTCAGTGAGTCATCGAAATTTTG301AACGCATATTGCACTTCCGGGTTAGTCCTGGAAGTATGCCTGTATCAGTGTCCGTACAAC361AAACTTGGCTTTCTTCCTTCCGTGTAGTCGGTGGAGGAGATGCCAGATGTGAAGTGTCTT421GCGGTTGGTTTTCGGACCGACTGCGAGTCCTTTTAAATGTACTAAACTGTACTTCTCTTT481GCTCCAAAAGTGGTGGCATTGCTGGTTGTGGACGCTGCTATTGTAGCGAGTTGGCGACCG541GTTTGTCTGCTGCGGCGTTAATGGAGAAATGCTCGATTCGTGGTATGGTTGGCTTCGGCT601GAACAATGCGCTTATTGGGTGATTTTCCTGCTGTGGCGTGATGGACTGGTGAACCATGGC661TCTTTAGCTTGGCATTTGAATCGGCTTTGCTGTTGCGAAGTAGAGTGGCGGCTTCGGCTG721CCGAGGGTCGATCCATTTGGGAAATGTTGTGTAC99附錄D(資料性)防治番茄晚疫病藥劑具體藥劑及使用方法參見表D.1。表D.1藥劑種類及使用方法序號(hào)藥劑名稱及劑型使用時(shí)期施藥量(畝)150%烯酰嗎啉可濕性粉劑發(fā)病前或發(fā)病初期33g~40g270%丙森鋅可濕性粉劑發(fā)病前或發(fā)病初期180g~270g350%丙森·霜脲氰可濕性粉劑發(fā)病前或發(fā)病初期170g~230g440%精甲·丙森鋅可濕性粉劑發(fā)病初期80g~100g570%嘧菌·丙森鋅可濕性粉劑發(fā)病前或發(fā)病初期60g~120g636%霜脲·百菌清可濕性粉劑發(fā)病初期100g~117g725%甲霜·霜霉威可濕性粉劑發(fā)病初期84g~125g850%烯?!ゅi鋅可濕性粉劑發(fā)病初期162g~186g950%錳鋅·氟嗎啉可濕性粉劑發(fā)病初期67g~100g1060%唑醚·代森聯(lián)可濕性粉劑發(fā)病初期40g~60g1150%氟啶·霜脲氰水分散粒劑發(fā)病初期40g~50g1275%代森錳鋅水分散粒劑發(fā)病前或發(fā)病初期175g~200g1368%精甲霜·錳鋅水分散粒劑發(fā)病前或發(fā)病初期100g~1

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