艾氏腹水癌小鼠拓喜（羥基喜樹堿）時(shí)辰給藥的血象變化

1/1艾氏腹水癌小鼠拓喜（羥基喜樹堿）時(shí)辰給藥的血象變化艾氏腹水癌小鼠拓喜（羥基喜樹堿）時(shí)辰給藥的血象變化作者：

吳江袁志敏林運(yùn)政鄒麗宜林曉輝余海清張嵐【摘要】目的探討拓喜（羥基喜樹堿）時(shí)辰用藥除了對(duì)艾氏腹水癌小鼠的療效有差異外，有無(wú)血象的變化。

方法160只艾氏腹水癌移植瘤小鼠模型按時(shí)間段分為給藥組和對(duì)照組，給藥組荷瘤小鼠在8個(gè)不同時(shí)辰段（00：

00、03：

00、06：

00、09：

00、12：

00、15：

00、18：

00、21：

00），腹腔內(nèi)注射拓喜5.0mg/kg，對(duì)照組荷瘤小鼠也在8個(gè)不同的時(shí)辰段注射同量生理鹽水，連續(xù)給藥10天，10天后檢測(cè)各組小鼠的WBC、RBC、PLT，然后剝?nèi)∧[瘤并計(jì)算各組抑瘤率。

結(jié)果在09：

00給藥抑瘤率最大，與其他組比較差異有顯著性(Plt;0.05)；09：

00組給藥后10天WBC數(shù)與第1、2、3組比較差異有顯著性(Plt;0.01)，高于第5、6、7、8組，但Pgt;0.05。

結(jié)論拓喜（羥基喜樹堿）除了對(duì)小鼠艾氏腹水癌移植瘤抑制作用有明顯的時(shí)辰差異外，對(duì)WBC的影響也有時(shí)辰的變化。

【關(guān)鍵詞】羥基喜樹堿時(shí)間治療學(xué)艾氏腹水癌小鼠移植性腫瘤白細(xì)胞ThebloodchangesofhydroxycamptothecinonchronotherapyinEACmice【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectandbloodchangesofHydroxycamptothecininEACmice.Methods160EACmicewererandomlydividedinto16groups.8Groupswerecontrol，theother8groupswereinjectedwithhydroxycamptothecinonceadayatdoseof5.0mg/kginabdominalcavityon00：

00，03：

00，06：

00，09：

00，12：

00，15：

00，18：

00，21：

00.Allthemicewerekilledafter10daysandexaminedthechangesofWBC，RBCandPLT，thetumorweightweretocounttherateoftumorrestrain.ResultsTherateoftumorrestrainon09：

00washighestthantheothers（Plt;0.05）；theWBCon09：

00wasalsohighestthanthatothers.ConclusionTheeffectandWBCchangeofhydroxycamptothecinonchronotherapyinEACmicehadchrono-effectandchanges.【Keywords】HydroxycamptothecinchronotherapyEACmicetransplantedtumorWBC羥基喜樹堿(10-Hydroxycamptothecin，HCPT)為我國(guó)特有的珙垌科植物喜樹中分離得到的純天然生物堿抗腫瘤藥物，本文研究在艾氏腹水癌小鼠移植瘤模型上用拓喜（羥基喜樹堿凍干粉針）在不同時(shí)間腹腔內(nèi)給藥，觀察其療效及有無(wú)WBC、Hb、PLT的變化。

1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)昆明種小鼠160只，體重25～30g，雌雄兼有，由廣東醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供（廣東省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)合格證：

2002A014）。

1.2實(shí)驗(yàn)藥物拓喜（HCPT，羥基喜樹堿凍干粉針，批號(hào)：

0208H1，深圳萬(wàn)樂(lè)藥業(yè)有限公司產(chǎn)品）。

生理鹽水(批號(hào)：

E030520，四川科倫大藥廠有限公司產(chǎn)品)。

1.3動(dòng)物分組160只清潔級(jí)小鼠右腋窩下接種艾氏腹水癌（皮下型，由中山大學(xué)腫瘤防治中心傳代保株和提供，瘤株計(jì)數(shù)為3105，0.2ml/只）后隨機(jī)分為16組，即羥基喜樹堿（拓喜）和生理鹽水對(duì)照8對(duì)時(shí)辰給藥組，每組10只，每對(duì)時(shí)辰給藥組分別于00：

00、03：

00、06：

00、09：

00、12：

00、15：

00、18：

00、21：

00等8個(gè)時(shí)間段腹腔注射拓喜和生理鹽水。

1.4實(shí)驗(yàn)方法所有動(dòng)物分組后分籠飼養(yǎng)觀察1天后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，每天按上述時(shí)間段分組在規(guī)定的時(shí)間給藥，藥物治療組予拓喜（羥基喜樹堿）5.0mg/kg，對(duì)照組予生理鹽水，連續(xù)10天。

10天后行摘眼球取血檢測(cè)WBC、Hb、PLT后，徹底剝離瘤塊稱瘤重并計(jì)算抑癌率，藥物治療組和生理鹽水組兩兩比較用t檢驗(yàn)，不同時(shí)間給藥組間比較行方差分析。

2結(jié)果見表1、2。

Tab.1ThechangeandcomparisonofWBC、Hb、PLTintreatmentgroupsandcontrolgroups注：

給藥組與對(duì)照組比較，WBC有明顯差異，*P＜0.01。

在給藥組中第4（09：

00）組WBC數(shù)最高，與第1、2、3組比較差異有顯著性，P＜0.01，雖高于第5、6、7、8組，但P＞0.05，差異無(wú)顯著性。

而Hb和PLT在給藥組與對(duì)照組以及給藥組之間均未見明顯下降和差異性Tab.2Comparisonofaverageweighttomorandinhibitoryratein8groupsofEACmiceonhydrocamptothecinchronotherapy注：

**第4組（09：

00給藥）腫瘤重量最小，抑癌率最大，除6組（15：

00）和7組（18：

00）外，與其他5組比較，差異有顯著性（Plt;0.05）3討論抗癌藥物在不同時(shí)間應(yīng)用，其療效和毒性是隨著生物日周期節(jié)律的改變而波動(dòng)，其范圍可達(dá)50％或更多，這稱為時(shí)辰耐受性和時(shí)辰效力（Chrono-telerenceandefficence）［1～4］。

研究發(fā)現(xiàn)烷化劑、鉑類、蒽環(huán)類、嘧啶拮抗劑等細(xì)胞毒藥物的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)可隨給藥時(shí)間的不同而發(fā)生這種波動(dòng)，法國(guó)LeviF等將上述幾類藥物的特性引入臨床開展時(shí)辰化療并取得頗為滿意的效果［5～8］。

羥基喜樹堿為我國(guó)特有的珙桐科植物喜樹（Camptothecaauminatadecaisne）中分離得到的純天然生物堿抗腫瘤藥物，主要作用于S期細(xì)胞，作用靶點(diǎn)是DNA拓樸異構(gòu)酶I（TOPOI），參與調(diào)節(jié)DNA的拓樸構(gòu)象，涉及DNA復(fù)制、修復(fù)及RNA轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致雙鏈DNA斷裂和不可逆的DNA復(fù)制停滯，最后致細(xì)胞死亡。

在抗癌活性方面，羥基喜樹堿有很寬的抗癌譜，對(duì)多種癌細(xì)胞株及移植性動(dòng)物腫瘤有較高的抑制率；近來(lái)研究其作用機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn)羥基喜樹堿能使HL160細(xì)胞產(chǎn)生典型的凋亡變化，還能促進(jìn)HL160細(xì)胞和U937細(xì)胞向成熟方向分化，說(shuō)明羥基喜樹堿對(duì)癌細(xì)胞有誘導(dǎo)分化作用，由于具有獨(dú)特的作用位點(diǎn)，有廣譜抗癌作用，不產(chǎn)生多藥抗藥性，與鉑類、鬼臼類、嘧啶拮抗劑、阿霉素、TOPOII抑制劑和細(xì)胞因子聯(lián)合應(yīng)用有增加療效的協(xié)同作用，臨床得到廣泛應(yīng)用，但因?qū)撬枰种戚^明顯，白細(xì)胞下降造成臨床應(yīng)用上的劑量限制性，影響療效的提高，同時(shí)若和上述藥物在同一時(shí)間給藥卻無(wú)協(xié)同作用甚至相反而產(chǎn)生拮抗作用，療效降低［9，10］。

隨著時(shí)辰化療的研究和開展，不同的化療藥物在其治愈率高峰值時(shí)間給藥可提高療效，毒副反應(yīng)降低。

鉑類、阿霉素、5-氟脲嘧啶等在已知的峰值濃度時(shí)間用藥，劑量與常規(guī)或與在谷值濃度時(shí)間相同，但療效提高，毒性降低。

如環(huán)磷酰胺分別在治愈率峰值時(shí)間（18：

00）和谷值時(shí)間（09：

00）給藥其療效相差近5倍（34％：

7％），藥物治愈率/毒死率相差12倍（1.74：

0.14）。

可見藥物的治療指數(shù)在一天中是有差別的，在治愈率峰值時(shí)間或毒死率谷值時(shí)間給藥可以獲得最好的效果，而且毒副作用降低［11］；因此時(shí)辰化療是目前腫瘤治療的一個(gè)熱點(diǎn)課題，法國(guó)LeviF應(yīng)用5-Fu、草酸鉑治療晚期大腸癌使療效提高20％多，毒性降低5.4倍，顯示了令人興奮的前景。

拓喜為羥基喜樹堿凍干粉針，經(jīng)HPLC檢測(cè)，其純度明顯高于水針劑，達(dá)98％以上，同時(shí)具有更高的穩(wěn)定性，它的最佳給藥時(shí)間以及時(shí)間用藥對(duì)惡性腫瘤的療效，已在艾氏腹水癌移植瘤小鼠模型上觀察到呈現(xiàn)時(shí)辰效力，09：

00給藥時(shí)，艾氏腹水癌移植瘤小鼠的腫瘤抑癌率為最大［12］。

本實(shí)驗(yàn)在此基礎(chǔ)上了解時(shí)辰給藥對(duì)血細(xì)胞的影響，結(jié)果顯示與對(duì)照組與給藥組的WBC有明顯差異，給藥組的WBC明顯低于對(duì)照組(P＜0.01)。

在給藥組之間，第4組（09：

00）WBC數(shù)最高，與第1、2、3組比較差異有顯著性(P＜0.01)，雖高于第5、6、7、8組，但P＞0.05，差異無(wú)顯著性。

而Hb和PLT在給藥組與對(duì)照組以及給藥組之間均未見明顯下降和差異性。

可見拓喜（羥基喜樹堿）除了對(duì)小鼠艾氏腹水癌移植瘤抑制作用有明顯的時(shí)辰差異外，對(duì)WBC的影響也有時(shí)辰的變化。

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