免疫增殖性疾病及其免疫檢測課件

第一節(jié)免疫增生性疾病的概念及分類

一、概念

免疫增殖?。╥mmunoproliferativediseases，IPD）主要是指免疫器官、免疫組織或免疫細胞（淋巴細胞、單核-巨噬細胞）異常增生（良性或惡性）所引起的疾病，多屬于血液病范圍。這類疾病的表現有免疫功能異常及免疫球蛋白質和量的變化。2024/8/271檢驗本科二、分類㈠IPD包括良性和惡性增殖兩大類。㈡目前主要是按增殖細胞表面標志分類1、漿細胞增生：免疫球蛋白異常增生性疾病2、淋巴細胞惡性增生：淋巴細胞白血病和淋巴瘤3、網質細胞異常增殖：何杰金氏病2024/8/272檢驗本科

免疫球蛋白異常增生性疾病是指由于漿細胞的異常增殖而導致的免疫球蛋白異常增生造成機體病理損傷的一組疾病。⑴免疫球蛋白多克隆增殖：指血清中兩個克隆以上的漿細胞同時增生，體內多種Ig異常增高和/或尿中出現游離輕鏈或重鏈的病理現象。多為良性反應性增殖或繼發(fā)某一疾病。2024/8/273檢驗本科⑵免疫球蛋白的單克隆增殖：是由單株漿細增殖所引起的理化性質十分均一的Ig增高所致的疾病。多呈惡性發(fā)展趨勢，故免疫球蛋白異常增生性疾病多專指單克隆免疫球蛋白異常增生的疾病。2024/8/274檢驗本科第二節(jié)免疫增生性疾病的免疫損傷機制

一、漿細胞異常增殖

漿細胞異常增殖通常是指單克隆漿細胞異常增生并伴有單克隆免疫球蛋白或其多肽鏈亞單位合成異常。漿細胞異常增殖是內因與外因相互作用的結果。2024/8/275檢驗本科二、正常體液免疫抑制IL-4——啟動休止期B細胞進入DNA合成期；IL-5——促進B細胞繼續(xù)增殖IL-6——促進B細胞分化為漿細胞。抑制漿細胞瘤患者體內IL-6水平異常增高，可抑制IL-4的產生，從而抑制了整個體液免疫反應過程。

2024/8/276檢驗本科另外，漿細胞瘤細胞可以分泌大量的無抗體活性的免疫球蛋白，封閉細胞表面的Fc受體，影響對其他生物信息的接收，并可阻斷B細胞的增殖，發(fā)育和影響抗原提呈。2024/8/277檢驗本科三、異常免疫球蛋白增生所造成的病理損傷

大量產生無正常免疫功能的單克隆型免疫球蛋白或其片段，可以沉積于組織，造成組織變性和淋巴細胞浸潤，導致相應器官的功能障礙；因其血漿濃度過高而導致血液粘稠度增加，產生一系列直接或間接的病理損害。2024/8/278檢驗本科四、溶骨性病變

漿細胞瘤大多伴有溶骨性破壞，所以也稱骨髓瘤。溶骨性破壞是由于骨質形成細胞調節(jié)功能紊亂的結果?；颊唧w內原發(fā)性的高水平IL-6是使破骨細胞數量增多和功能亢進的重要因子。2024/8/279檢驗本科第三節(jié)單克隆免疫球蛋白增殖病

該病突出的特點是患者血清中存在異常增多的單克隆蛋白（M蛋白），其在類別、亞類、H鏈、L鏈抗原結構等方面完全相同，但多無免疫活性，又稱副蛋白。本周蛋白（Bence-Jonesprotein）——為過量合成的κ或λ型輕鏈，游離存在于血清中，可從患者尿中排出。2024/8/2710檢驗本科一、多發(fā)性骨髓瘤

多發(fā)性骨髓瘤是漿細胞異常增生的惡性腫瘤，也稱漿細胞瘤，因其引起骨破壞而得名，還經常伴有貧血，腎功能損害和免疫功能障礙。㈠發(fā)病機制：不明2024/8/2711檢驗本科㈡臨床特征（預后不良）1、骨質破壞：骨髓瘤C增生、浸潤破壞骨組織→骨質疏松、溶骨改變→骨痛、骨折；2、貧血：骨髓損害→貧血、粒C和血小板↓，出血；3、感染；4、腎功能損害；5、其他組織損害（NS）。2024/8/2712檢驗本科㈢免疫學特征1、血清中有大量的M蛋白，IgG≥30g／L、IgA≥10g／L、IgM≥10g／L、IgD≥2.0g／L、IgE≥2.0g／L或尿中有本周蛋白（＞2.0g／24h尿）；2、骨髓中有大量不成熟的漿細胞（＞15%），組織活檢證實有漿細胞瘤；3、正常的Ig水平明顯↓。2024/8/2713檢驗本科㈣診斷標準免疫學特征3項中具備2項即可診斷；但IgM或IgD除具備免疫學特征1、2項外，還須有多處溶骨性損害。確診為多發(fā)性骨髓瘤后，還要進一步作免疫學檢查分型。㈤MM不同類型發(fā)生率IgG型最常見（＞50%）、IgA型次之（約20~25%）、IgD型少見（約1~2%）、IgE型、IgM型罕見。2024/8/2714檢驗本科二、巨球蛋白血癥

以分泌IgM的漿細胞惡性增殖為病理基礎的疾病，病因不明。㈠臨床特征1、老年發(fā)??；2、淋巴結-肝-脾腫大為其特征；3、有不明原因貧血及出血傾向；4、粘滯過高綜合征。

2024/8/2715檢驗本科㈡免疫學特征1、血清中有單克隆IgM含量↑，一般＞10g/L，為其特點；2、紅細胞正色素性貧血、白細胞和血小板減少；3、骨髓中有淋巴細胞樣漿細胞浸潤；4、血清相對粘度↑，＞4；5、本周蛋白尿（10～30%患者可有，常為κ）。2024/8/2716檢驗本科三、重鏈病是由于漿細胞發(fā)生突變和異常增生，致使血清和尿中出現大量游離的無免疫功能的免疫球蛋白重鏈所導致的疾病。根據重鏈的不同可進一步進行免疫分型，以γ、α、μ型為多見。2024/8/2717檢驗本科四、輕鏈病是突變的單克隆漿細胞產生大量輕鏈，血漿中輕鏈含量異常增加，增加的輕鏈從腎臟排泄或沉積于腎臟和其他內臟組織引起淀粉樣變性。㈠臨床特點1、發(fā)病的年齡輕；2、以發(fā)熱、貧血，嚴重腎功能損害（λ型）為特點；3、多數有溶骨性損害。4、有淀粉樣變性。2024/8/2718檢驗本科㈡免疫學特征1、血清中異常輕鏈水平↑，輕鏈蛋白κ/λ型比值明顯異常，正常Ig水平↓或明顯↓；2、尿中和血清中可檢出同類型的輕鏈片段；3、本周蛋白尿。2024/8/2719檢驗本科表1四種漿細胞疾病的比較疾病多發(fā)性骨髓瘤巨球蛋白血癥重鏈病輕鏈病性別男60%男80%男100%男50%視力障礙＋＋＋－＋淋巴結腫大少見多見多見多見肝脾腫大少見多見多見少見溶骨性改變多見少見不見少見肝功能損害＋＋＋－＋＋M蛋白種類IgG、A、D或EIgM重鏈輕鏈診斷后平均生存期2年4年＜1年Κ＞2年λ＜1年2024/8/2720檢驗本科五、良性單克隆丙種球蛋白血癥

是指血清中出現高Ig水平，但無臨床癥狀，往往因其他疾病就診時發(fā)現血中有M蛋白，但其并不呈進行性增加。約有1／4左右的良性單克隆丙種球蛋白血癥在10年左右的時間里轉變成惡性單克隆丙種球蛋白增多疾病，如果血中或尿中出現本周蛋白很可能是危險信號。2024/8/2721檢驗本科表2惡性與良性單克隆丙球病的鑒別診斷惡性單克隆丙種球蛋白病良性單克隆丙種球蛋白病癥狀骨髓瘤或淋巴瘤的癥狀無癥狀或原有基礎疾病的癥狀貧血幾乎都出現一般無，但可因其他疾病而伴發(fā)骨損害溶骨性損害很普遍除轉移性骨疾病外不常見骨髓象漿細胞＞10％，形態(tài)正?；虍惓{細胞＜10％，形態(tài)一般正常M蛋白常高于20g/dl，隨病情而增高低于20g/dl，較穩(wěn)定正常Ig降低增高或正常游離輕鏈常出現在血清和尿中一般呈陰性2024/8/2722檢驗本科第四節(jié)免疫球蛋白異常增生常用的免疫檢測包括定性實驗和定量實驗，實驗結果對于臨床診斷與鑒別診斷、觀察治療效果和判斷預后具有重要的臨床價值。2024/8/2723檢驗本科一、血清區(qū)帶電泳

是測定M蛋白的一種定性實驗，常采用乙酸纖維素膜和瓊脂糖電泳兩種方法。M蛋白在電泳后出現于α-γ區(qū)帶中，不同類型的M蛋白電泳后所處位置不同。2024/8/2724檢驗本科正常人血清γ區(qū)帶較寬而且著色較淡，掃描圖顯示一低矮蛋白峰。（圖1-A）單克隆丙種球蛋白增高時常在γ區(qū)，呈現濃密狹窄的蛋白帶，經掃描顯示為高尖蛋白峰（高：寬＞2：1）。（圖1-B、C）多克隆丙種球蛋白增高時，γ區(qū)帶寬而濃密，掃描圖顯示為寬大的蛋白峰。（圖1-D）低丙種球蛋白血癥時γ區(qū)無區(qū)帶。（圖1-E）2024/8/2725檢驗本科注意區(qū)別：1、溶血標本：血紅蛋白形成的β位區(qū)帶。2、陳舊血清：聚合IgG形成的近原位窄區(qū)帶。3、含類風濕因子的血清：位于γ區(qū)中間的細區(qū)帶。遇可疑情況應做免疫電泳等分析加以區(qū)別。2024/8/2726檢驗本科二、免疫電泳免疫電泳是將區(qū)帶電泳和免疫雙向擴散相結合的一項技術。血清標本先行區(qū)帶電泳分成區(qū)帶，繼而用特定的抗血清進行免疫擴散，陽性樣本的M蛋白將在適當的部位形成異常沉淀弧，根據抗血清的種類、電泳位置及沉淀弧的形狀可以對M蛋白的免疫球蛋白類型和其輕鏈作出判定。2024/8/2727檢驗本科

一般多用抗IgG、IgM、IgA、κ和λ輕鏈等5種抗血清進行實驗，用抗正常人血清作為對照。M蛋白所形成的沉淀線或沉淀弧較寬，呈凸現出的弓形或船形。（圖2）（圖3）2024/8/2728檢驗本科注意：1、抗原（血清）濃度過高，沉淀弧帶靠近抗體槽，影響分析。2、M蛋白的四級結構影響輕鏈抗原決定簇與抗體結合：在血清中加入2-巰基乙醇（10μl／ml）處理。3、輕鏈分子量小，擴散快，應每隔10分鐘觀察一次結果。2024/8/2729檢驗本科三、免疫固定電泳是血清區(qū)帶電泳加免疫沉淀反應的一項定性實驗。是一種分類鑒定方法。血清行區(qū)帶電泳后，分別在電泳條上加入不同類型的單克隆抗體，相應的抗原將與抗體在某一區(qū)帶形成抗原抗體復合物，經漂洗和染色可清晰地顯示出抗原抗體反應帶。（圖4）2024/8/2730檢驗本科四、血清免疫球蛋白定量

對免疫球蛋白及輕鏈作定量分析?？捎脝蜗蛎庖邤U散法（RID）、免疫比濁法或ELISA法。若某一類型免疫球蛋白明顯高出正常值，應考慮血清中有M蛋白的存在，應進一步作亞型分析及輕鏈檢測。2024/8/2731檢驗本科五、尿中輕鏈蛋白的檢測

即本周蛋白。1、加熱沉淀法：PH5.0，40-60℃時發(fā)生沉淀，90-100℃時沉淀溶解。2、免疫電泳常用方法為直接定量測定，可對尿中κ和λ鏈作定量分析。2024/8/2732檢驗本科六、免疫球蛋白增生性疾病的

實驗檢測應用原則當臨床上懷疑漿細胞惡性病變時，按下列程序進行控制：1、血清區(qū)帶電泳分析發(fā)現異常球蛋白區(qū)帶；2、Ig定量檢測或尿本周蛋白定性檢測，為初篩試驗；3、對陽性者宜作免疫電泳或免疫固定電泳作分類鑒定；2024/8/2733檢驗本科4、進一步作Ig的亞型定量測定和血清及尿中輕鏈定量及比值計算等測定作為確證試驗；5、良性與惡性區(qū)別：良性免疫球蛋白增生者，其輕鏈含量↑與重鏈一同↑，為1:1，比值無明顯異常；惡性增生者輕鏈與重鏈比不一致，輕鏈比值也可發(fā)生異常改變；6、還要結合骨髓和影像學、病理學檢測作出正確診斷。2024/8/2734檢驗本科掌握：⑴免疫增殖病的概念及分類；⑵免疫球蛋白病常用的檢測方法（血清蛋白區(qū)帶電泳、免疫球蛋白定量測