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PAGEPAGE2微生物學(xué)教程緒論1.微生物是形體微小、單細(xì)胞或個(gè)體結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的多細(xì)胞、甚或無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的低等生物的通稱。2.微生物的特點(diǎn):個(gè)體微小、構(gòu)造簡(jiǎn)單、進(jìn)化地位低。3.微生物的分類:原核類、真核類、非細(xì)胞類。4.微生物學(xué)簡(jiǎn)史分期史前期初創(chuàng)期奠基期發(fā)展期成熟期時(shí)間/年約800年前-16761676-18611861-18971897-19531953-至今實(shí)質(zhì)朦朧階段形態(tài)描述階段生理水平研究階段生化水平研究階段分子生物學(xué)水平研究階段開(kāi)創(chuàng)者各國(guó)勞動(dòng)人民列文.虎克①巴斯德
②科赫E.BUCHNER-生物化學(xué)奠基人J.WATSON和F.CRICK-分子生物學(xué)奠基人特點(diǎn)①未見(jiàn)微生物個(gè)體②憑經(jīng)驗(yàn)利用微生物①觀察微生物個(gè)體
②形態(tài)描述①微生物學(xué)建立
②創(chuàng)立微生物學(xué)方法
③實(shí)踐-理論-實(shí)踐
④建立分支學(xué)科
⑤尋找病原菌①酵母菌
②代謝系統(tǒng)
③普通微生物學(xué)
④尋找有益代謝產(chǎn)物
⑤微生物工業(yè)化培養(yǎng)技術(shù)①微生物生命活動(dòng)規(guī)律
②發(fā)酵工程
③分支學(xué)科的發(fā)展
④基礎(chǔ)理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù)
⑤微生物基因組5.微生物的五大共性:①體積小,面積達(dá);②吸收多,轉(zhuǎn)化快;③生長(zhǎng)旺,繁殖快;④適應(yīng)強(qiáng),易變異;⑤分布廣,種類多。6.微生物學(xué):是一門在細(xì)胞、分子或群體水平上研究微生物的形態(tài)構(gòu)造、生理代謝、遺傳變異、生態(tài)分布和分類進(jìn)化等生命活動(dòng)基本規(guī)律,并將其應(yīng)用于工業(yè)發(fā)酵、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物工程和環(huán)境保護(hù)等實(shí)踐領(lǐng)域的科學(xué)。第一章原核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能1.原核生物:一大類細(xì)胞核無(wú)核膜包裹,只存在稱作核區(qū)的裸露DNA的原始單細(xì)胞生物。根據(jù)外表特征粗分為6種類型,即細(xì)菌、放線菌、藍(lán)細(xì)菌、支原體、立克次氏體和衣原體。2.細(xì)菌的形態(tài)極其簡(jiǎn)單,基本上只有球狀(球菌)、桿狀(桿菌)和螺旋狀(螺旋菌——弧菌、螺菌和螺旋體)。3.細(xì)菌的一般構(gòu)造包括細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核區(qū)等,特殊構(gòu)造主要是鞭毛、菌毛、性菌毛、糖被(包括微莢膜、莢膜和粘液層)和芽孢等。4.成分占細(xì)胞壁干重的%G+細(xì)菌G-細(xì)菌肽聚糖含量很高(50~90)含量很低(~10)磷壁酸含量較高(﹤50)無(wú)類脂質(zhì)一般無(wú)(﹤2)含量較高(~20)蛋白質(zhì)無(wú)含量較高5.G-細(xì)菌與G+細(xì)菌的肽聚糖的差別僅在于:1)四肽尾的底3個(gè)氨基酸不是L-lys,而是被一種只有在原核微生物細(xì)胞壁上才有的內(nèi)消二氨基庚二酸(m-DAP)所代替;2)沒(méi)有特殊的肽橋,其前后兩個(gè)單體間的連接僅通過(guò)甲四肽尾的第4個(gè)氨基酸——D-Ala的羧基與乙四肽尾的第3個(gè)氨基酸——m-DAP的氨基直接相連,因而只形成較為疏稀、機(jī)械強(qiáng)度較差的肽聚糖網(wǎng)套。6.革蘭氏染色法的機(jī)制Ⅰ結(jié)晶紫液初染和碘液媒染:在細(xì)菌的細(xì)胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。Ⅱ乙醇脫色:G+細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密且不含類脂,遇乙醇時(shí),因失水網(wǎng)孔縮小,把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其保持紫色;G-細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄和文聯(lián)度差,結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,細(xì)胞退成無(wú)色。
Ⅲ復(fù)染:G-細(xì)菌呈現(xiàn)紅色,而G+細(xì)菌則仍保留最初的紫色。凡是不能被乙醇脫色,呈藍(lán)紫色,稱為革蘭氏陽(yáng)性菌
G+,凡是經(jīng)乙醇脫色,呈復(fù)染劑顏色,稱為革蘭氏陰性菌
G-,結(jié)果不同主要是細(xì)胞壁組成及結(jié)構(gòu)差異造成的。重要性:革蘭氏染色有著十分重要的理論與實(shí)踐意義。通過(guò)這一染色,幾乎可把所有的細(xì)菌分成革蘭氏陽(yáng)性菌與革蘭氏陰性菌兩個(gè)大類,因此它是分類鑒定菌種時(shí)的重要指標(biāo)。又由于這兩大類細(xì)菌在細(xì)胞結(jié)構(gòu)、成分、形態(tài)、生理、生化、遺傳、免疫、生態(tài)和藥物敏感性等方面都呈現(xiàn)出明顯的差異,因此任何細(xì)菌只要通過(guò)簡(jiǎn)單的革蘭氏染色,就可提供不少其他重要的生物學(xué)特性方面的信息。7.細(xì)胞內(nèi)含物:①貯藏物:例1:聚-β—羥丁酸(PHB-是一種存在于許多細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)內(nèi)屬于類脂性質(zhì)的碳源類貯藏物,不溶于水而溶于氯仿,可用尼羅藍(lán)或蘇丹黑染色,具有貯藏能量,碳源和降低細(xì)胞內(nèi)滲透壓等作用。)、例2:異染粒;②磁小體;③羧酶體;④氣泡。8.糖被德成分一般是多糖,少數(shù)是蛋白質(zhì)或多肽,也有多糖與多肽復(fù)合型。9.鞭毛的長(zhǎng)約15-20μm,直徑為0.01-0.02μm。由于鞭毛過(guò)細(xì),通常只能用電鏡進(jìn)行觀察。原核生物的鞭毛由基體、鉤型鞘和鞭毛絲3部分組成。10.菌毛直接生于細(xì)胞質(zhì)膜上。11.芽孢:某些細(xì)菌在其生長(zhǎng)發(fā)育后期,在細(xì)胞內(nèi)形成的一個(gè)圓形或橢圓形、厚壁、含水量低、抗逆性強(qiáng)的休眠構(gòu)造。12.伴孢晶體:少數(shù)芽孢桿菌(如蘇云金芽孢桿菌)在形成芽孢的同時(shí),會(huì)在芽孢旁形成一顆菱形、方形或不規(guī)則形的堿溶性蛋白質(zhì)晶體。13.細(xì)菌的繁殖方式主要為裂殖(二分裂、三分裂和復(fù)分裂)和芽殖。14.菌落:在固體培養(yǎng)基上(內(nèi))以母細(xì)胞為中心的一堆肉眼可見(jiàn)的,由一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細(xì)胞集團(tuán)。15.菌苔:細(xì)菌在固體培養(yǎng)基接種線上由母細(xì)胞繁殖長(zhǎng)成的一片密集的、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)特征的細(xì)菌群落,是許多菌落連成一片形成的。16.放線菌成絲狀生長(zhǎng)和以孢子繁殖的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌。17.藍(lán)細(xì)菌是革蘭氏染色陰性、無(wú)鞭毛、含葉綠素a(但不形成葉綠體)、能進(jìn)行產(chǎn)氧光合作用的大型原核生物。18.支原體是一類無(wú)細(xì)胞壁、介于獨(dú)立生活和細(xì)胞內(nèi)寄生生活間的最小型原核生物。19.支原體的特點(diǎn):①細(xì)胞很??;②細(xì)胞膜含甾醇;③無(wú)細(xì)胞壁,呈G-且形態(tài)易變;④菌落小,呈“油煎蛋”狀;⑤以二分列和出芽等方式繁殖;⑥能在含血清、酵母膏和甾醇等營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上生長(zhǎng);⑦多數(shù)能以糖類作能源,能在有氧或無(wú)氧條件下進(jìn)行氧化型或發(fā)酵型產(chǎn)能代謝;⑧基因組很小。20.立克次氏體是一類專性計(jì)生于整核細(xì)胞內(nèi)的G-原核生物,有細(xì)胞壁和不能獨(dú)立生活。21.衣原體是一類在真核細(xì)胞內(nèi)營(yíng)專性能量寄生的小型G-原核生物。有細(xì)胞壁但缺肽聚糖。22.比較6個(gè)大類原核生物的主要特性:細(xì)菌放線菌藍(lán)細(xì)菌支原體立克次氏體衣原體直徑(um)0.2-0.50.5-13-100.2-0.250.2-0.50.2-0.3可見(jiàn)性光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡光鏡勉強(qiáng)可見(jiàn)光學(xué)顯微鏡光鏡勉強(qiáng)可見(jiàn)過(guò)濾性不能不能不能能不能能革蘭氏染色陽(yáng)性或陰性陽(yáng)性陰性陰性陰性陰性細(xì)胞壁有堅(jiān)韌的細(xì)胞壁有堅(jiān)韌的細(xì)胞壁有堅(jiān)韌的細(xì)胞壁缺壁有堅(jiān)韌的細(xì)胞壁有堅(jiān)韌的細(xì)胞壁繁殖方式二均分裂無(wú)性孢子和菌體斷裂二均分裂二均分裂二均分裂二均分裂培養(yǎng)方法人工培養(yǎng)人工培養(yǎng)人工培養(yǎng)人工培養(yǎng)宿主細(xì)胞宿主細(xì)胞核酸種類DNA和RNADNA和RNADNA和RNADNA和RNADNA和RNADNA和RNA核糖體有有有有有有大分子合成有有有有進(jìn)行進(jìn)行產(chǎn)生ATP系統(tǒng)有有有有有無(wú)增殖過(guò)程中結(jié)構(gòu)的完整性保持保持保持保持保持保持入侵方式多樣直接昆蟲(chóng)媒介不清楚對(duì)抗生素敏感敏感(青霉素除外)敏感敏感對(duì)干擾素某些菌敏感不敏感有的敏感有的敏感第二章真核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能1.原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的區(qū)別細(xì)胞大小原核生物較小,真核生物較大。細(xì)胞壁的主要成分原核生物多數(shù)為肽聚糖,真核生物為纖維素、幾丁質(zhì)等。核、核膜、染色體原核生物細(xì)胞沒(méi)有核膜,有一個(gè)明顯的核區(qū),這個(gè)核區(qū)上集中了它的主要遺傳物質(zhì),由一條與類組蛋白相聯(lián)系的雙鏈DNA構(gòu)成的染色體組成。真核生物細(xì)胞則是由一條或一條以上的雙鏈DNA與組蛋白等結(jié)合成的染色體,并由核膜包圍。代謝場(chǎng)所原核細(xì)胞沒(méi)有獨(dú)立的內(nèi)膜系統(tǒng),與代謝有關(guān)的酶如呼吸酶合成酶等位于細(xì)胞膜上,因此它的能量代謝在質(zhì)膜上進(jìn)行。真核細(xì)胞不僅有獨(dú)立的內(nèi)膜系統(tǒng),還有細(xì)胞骨架,呼吸酶在線粒體中,有專用的細(xì)胞器來(lái)完成各項(xiàng)生理功能,如線粒體、葉綠體。核糖體的大小和分布原核細(xì)胞的核糖體大小為70S,常以游離狀態(tài)或多聚體狀態(tài)分布于細(xì)胞質(zhì)中。真核細(xì)胞的核糖體大小為80S,可以游離狀態(tài)存在于細(xì)胞結(jié)合于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上。線粒體和葉綠體內(nèi)有各自在結(jié)構(gòu)上特殊的核糖體。2.酵母菌主要成份為“酵母纖維素”,它呈三明治狀——外層為甘露聚糖,內(nèi)層為葡聚糖,中間夾著一層蛋白質(zhì)。原生質(zhì)體的制備:用蝸牛消化酶水解細(xì)胞壁3.繁殖方式:⑴無(wú)性繁殖:①芽殖②裂殖③產(chǎn)生擲孢子等無(wú)性孢子
⑵有性繁殖——產(chǎn)生子囊及子囊孢子4.酵母菌的生活史分為①營(yíng)養(yǎng)體既能以單倍體也能以二倍體形式存在;②營(yíng)養(yǎng)體只能以單倍體形式存在;③營(yíng)養(yǎng)體只能以二倍體形式存在。5.霉菌的營(yíng)養(yǎng)菌絲和氣生菌絲1)營(yíng)養(yǎng)菌絲體:伸入培養(yǎng)基吸收營(yíng)養(yǎng);
2)氣生菌絲體:向空中生成,形成繁殖器官。
營(yíng)養(yǎng)菌絲的特化結(jié)構(gòu):①假根②吸器③附著枝附著胞⑤菌核⑥菌索⑦匍匐菌絲⑧菌環(huán)和菌網(wǎng);
氣生菌絲的特化結(jié)構(gòu):子實(shí)體。第三章病毒和亞病毒1.病毒的特性:①形體極其微??;②沒(méi)有細(xì)胞構(gòu)造;③每一種病毒只含有一種核酸,不是DNA就是RNA;④無(wú)產(chǎn)能酶系,無(wú)蛋白質(zhì)和核酸合成酶系,只能利用宿主活細(xì)胞內(nèi)現(xiàn)成代謝系統(tǒng)合成自身的核酸和蛋白質(zhì)組分;⑤以核酸和蛋白質(zhì)等“元件”的裝配實(shí)現(xiàn)其大量繁殖;⑥在離體條件下,能以無(wú)生命的生物大分子狀態(tài)存在,并可長(zhǎng)期保持其侵染活力;⑦對(duì)一般抗生素不敏感,但對(duì)干擾素敏感;⑧有些病毒的核酸還能整合到宿主的基因組中,并誘發(fā)潛伏性感染。2.病毒里的對(duì)稱體制3.噬菌體的繁殖分為五個(gè)階段,即吸附、侵入、增殖(復(fù)制與生物合成)、成熟(裝配)和裂解(釋放)。4.一步生長(zhǎng)曲線:定量描述烈性噬菌體增殖規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線稱作一步生長(zhǎng)曲線或一級(jí)生長(zhǎng)曲線。3個(gè)重要的特征參數(shù)——潛伏期、裂解期和裂解量。3期——潛伏期、裂解期和平穩(wěn)期。①潛伏期:從噬菌體吸附細(xì)菌細(xì)胞至細(xì)菌細(xì)胞釋放出新的噬菌體的最短時(shí)間。又可分為隱晦期和胞內(nèi)累積期。②裂解期:從被感染的第一個(gè)細(xì)胞裂解至最后一個(gè)細(xì)胞裂解完畢所經(jīng)歷的時(shí)間。③平穩(wěn)期:指被感染的宿主已全部裂解,溶液中噬菌體數(shù)達(dá)到最高點(diǎn)后的時(shí)期。裂解量:每個(gè)被感染的細(xì)菌釋放新的噬菌體的平均數(shù)5.病毒:是超顯微的,無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),專性活細(xì)胞內(nèi)寄生,在活細(xì)胞外具一般化學(xué)大分子特征,一旦進(jìn)入宿主細(xì)胞又具有生命特征。
真病毒:至少含有核酸和蛋白質(zhì)兩種組分的病毒。亞病毒:凡在核酸和蛋白質(zhì)兩種成分中,只含其中之一的分子病原體稱為亞病毒。類病毒:是一類只含RNA一種成分、專性寄生在活細(xì)胞內(nèi)的分子病原體。擬病毒:是指一類包裹在真病毒粒中的有缺陷的類病毒。朊病毒:是一類不含核酸的傳染性蛋白質(zhì)分子,因能引起宿主體內(nèi)現(xiàn)成的同類蛋白質(zhì)分子發(fā)生與其相似的構(gòu)象變化,從而使宿主治病。第四章微生物的營(yíng)養(yǎng)和培養(yǎng)基1.營(yíng)養(yǎng):是指生物體從外部環(huán)境中攝取對(duì)其生命活動(dòng)必需的能量和物質(zhì),以滿足正常生長(zhǎng)和繁殖需要的一種最基本的生理功能。2.微生物的6類營(yíng)養(yǎng)要素:碳源、氮源、能源、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和水。3.4.5.培養(yǎng)基:是指人工配制的、適合微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的混合營(yíng)養(yǎng)料。6.選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的4個(gè)原則:目的明確、營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)、理化適宜(pH、滲透壓和水活度)、經(jīng)濟(jì)節(jié)約。下表選擇幾條記:選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的4種方法:生態(tài)模擬、參閱文獻(xiàn)、精心設(shè)計(jì)、試驗(yàn)比較。7.培養(yǎng)基的分類:按對(duì)培養(yǎng)基成分的了解作分類:天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基、半組合培養(yǎng)基。按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)作分類:液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基。按培養(yǎng)基對(duì)微生物的功能作分類:選擇性培養(yǎng)基、鑒別性培養(yǎng)基。8.EMB(伊紅美藍(lán))在鑒別各種腸道桿菌中的作用概括如下:第五章微生物的新陳代謝1.底物脫氫的4條途徑:EMP途徑、HMP途徑、ED途徑、TCA循環(huán)。2.發(fā)酵:在無(wú)氧等外源氫受體的條件下,底物脫氫后所產(chǎn)生的還原力[H]未經(jīng)呼吸鏈傳遞而直接交某一內(nèi)源性中間代謝物接受,以實(shí)現(xiàn)底物水平磷酸化的一類生物氧化反應(yīng)。3.兩用代謝途徑:凡在分解代謝和合成代謝中均具有功能的代謝途徑。4.代謝物回補(bǔ)順序(代謝物補(bǔ)償途徑或添補(bǔ)途徑):是指能補(bǔ)充兩用代謝途徑中因合成代謝而消耗的中間代謝物的那些反應(yīng)。5.生物固氮反應(yīng)6要素:(1)ATP的供應(yīng);(2)還原力[H]及其傳遞載體;(3)固氮酶;(4)還原底物——N2;(5)鎂離子;(6)嚴(yán)格的厭氧微環(huán)境。第六章微生物的生長(zhǎng)及其控制1.生長(zhǎng):有機(jī)體的細(xì)胞組分與結(jié)構(gòu)在量方面的增加。分個(gè)體生長(zhǎng)和群體生長(zhǎng)兩類,個(gè)體生長(zhǎng)指微生物細(xì)胞因同化作用超過(guò)異化作用的速度,造成原生質(zhì)總量不斷增長(zhǎng)的現(xiàn)象;群體生長(zhǎng)是指某一微生物群體中因個(gè)體的生長(zhǎng)、繁殖而導(dǎo)致該群體的總重量、體積、個(gè)體濃度增長(zhǎng)的現(xiàn)象。2.繁殖:在各種細(xì)胞組份呈平衡增長(zhǎng)的情況下,個(gè)體的體積或重量達(dá)到某一限度時(shí),通過(guò)細(xì)胞分裂,引起個(gè)體數(shù)目增加的現(xiàn)象。3.測(cè)生長(zhǎng)量的方法:直接法、間接法(比濁法、生理指標(biāo)法)。4.微生物的典型生長(zhǎng)曲線粗分為4個(gè)時(shí)期:延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期。延滯期:特點(diǎn):第一,生長(zhǎng)速率常數(shù)為零;第二,細(xì)胞形態(tài)變大或增長(zhǎng);第三,細(xì)胞內(nèi)的RNA尤其是rRNA含量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性;第四,合成代謝旺盛;第五,對(duì)外界不良條件如NaC1溶液濃度、溫度和抗生素等理、化因素反應(yīng)敏感??s短延滯期:第一,用對(duì)數(shù)期的菌種接種;第二,接種量適量增大;第三,發(fā)酵培養(yǎng)基成分和種子培養(yǎng)基的成分盡量接近。指數(shù)期:特點(diǎn):第一,生長(zhǎng)速率常數(shù)最大;第二,細(xì)胞進(jìn)行平衡成長(zhǎng);第三,酶系活躍,代謝旺盛。應(yīng)用:是用作代謝、生理等研究的良好材料,是增殖噬菌體的最適宿主,也是發(fā)酵工業(yè)中用作種子的最佳材料。穩(wěn)定期:原因:1,微生物有害代謝產(chǎn)物的積累;2,營(yíng)養(yǎng)物尤其是生長(zhǎng)限制因子的耗盡;3,營(yíng)養(yǎng)物的比例失調(diào);4,pH、氧化還原勢(shì)等物理化學(xué)條件越來(lái)越不適宜。特點(diǎn):生長(zhǎng)速率常數(shù)等于零,這時(shí)菌體產(chǎn)量達(dá)到最高點(diǎn),而且菌體產(chǎn)量與營(yíng)養(yǎng)物的消耗間呈現(xiàn)出有規(guī)律的比例關(guān)系。衰亡期:出現(xiàn)"負(fù)生長(zhǎng)",有些細(xì)胞開(kāi)始自溶。5.影響延滯期長(zhǎng)短的因素很多,除菌種外,主要有3種:接種齡、接種量和培養(yǎng)基成分。6.影響微生物生長(zhǎng)的主要因素:溫度、pH和氧氣。7.8.9.調(diào)節(jié)pH的措施分“治標(biāo)”和“治本”兩大類?!爸螛?biāo)”是在培養(yǎng)基pH發(fā)生變酸或變堿后,用相應(yīng)的堿或酸進(jìn)行調(diào)節(jié);“治本”是在過(guò)酸時(shí)增加氮源和提高通氣量的方式進(jìn)行調(diào)節(jié),培養(yǎng)基過(guò)堿時(shí)用增加適當(dāng)碳源和降低通氣量的方式進(jìn)行調(diào)節(jié)。10.控制害菌的措施殺滅法:殺菌:徹底殺滅(一切微生物)——?dú)⒕⑷芫荆翰糠謿纾▋H殺滅病原菌)抑制法:防腐:抑制霉腐微生物化療:抑制宿主體內(nèi)的病原菌11.滅菌是指采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施。消毒是指采用較溫和的理化因素,僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體或動(dòng)、植物有害的病原菌而對(duì)被消毒對(duì)象基本無(wú)害的措施。防腐是指利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長(zhǎng)繁殖的措施。化療是指利用對(duì)病原菌具有高度毒力而對(duì)其宿主基本無(wú)毒的化學(xué)物質(zhì)來(lái)抑制宿主體體內(nèi)病原微生物的生長(zhǎng)繁殖,借以達(dá)到治療該宿主傳染病的一種措施。滅菌完全殺死微生物,而其它方法則是抑制微生物的生長(zhǎng)繁殖。12.影響加壓蒸氣滅菌效果的因素:滅菌物體含菌量、滅菌鍋內(nèi)空氣排除程度、滅菌對(duì)象的pH、滅菌對(duì)象的體積、加熱與散熱速度。13.若干重要抗生素及其作用機(jī)制:抑制細(xì)胞壁合成、引起細(xì)胞壁降解、干擾細(xì)胞膜、抑制蛋白質(zhì)合成(如:嘌呤霉素)、抑制DNA合成、抑制DNA復(fù)制、抑制RNA轉(zhuǎn)錄、抑制RNA合成。14.微生物產(chǎn)生抗藥性的原因有:⑴產(chǎn)生一種能使藥物失去活性的酶;⑵把藥物作用的靶位加以修飾和改變;⑶形成“救護(hù)途徑”;⑷使藥物不能透過(guò)細(xì)胞膜;⑸通過(guò)主動(dòng)外排系統(tǒng)把進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的藥物泵出細(xì)胞外。第七章微生物的遺傳變異和育種1.遺傳型(又稱基因型):指某一生物個(gè)體所含有的全部遺傳因子及基因組所攜帶的遺傳信息。遺傳型是一種內(nèi)在的可能性或潛力,其實(shí)質(zhì)是遺傳物質(zhì)上所負(fù)載的特定遺傳信息。2.3個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn):經(jīng)典轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(說(shuō)明以DNA為物質(zhì)基礎(chǔ)的遺傳物質(zhì))、噬菌體感染實(shí)驗(yàn)(在DNA中,存在和包括合成蛋白質(zhì)外殼在內(nèi)的整套遺傳信息)、植物病毒的重建實(shí)驗(yàn)(在RNA病毒中,遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)也是核酸)。共同結(jié)論:只有核酸才是負(fù)載遺傳信息的真正物質(zhì)基礎(chǔ)。3.質(zhì)粒:凡游離于緣何生物和基因組以外,具有獨(dú)立復(fù)制能力的小型共價(jià)閉合環(huán)狀的dsDNA分子,即cccDNA。4.營(yíng)養(yǎng)缺陷型:某一野生型菌株因發(fā)生基因突變而喪失合成一種或幾種生長(zhǎng)因子、堿基或氨基酸的能力,因而無(wú)法再在基本培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)繁殖的變異類型。5.抗性突變型:指野生型菌株因發(fā)生基因突變,而產(chǎn)生的對(duì)某化學(xué)藥物或致死物理因子的抗性變異類型。6.條件致死突變型:某菌株或病毒經(jīng)基因突變后,在某種條件下可正常地生長(zhǎng)、繁殖并呈現(xiàn)其固有的表型,而在另一種條件下卻無(wú)法生長(zhǎng)、繁殖,這種突變類型稱為條件致死突變型。7.基因突變的特點(diǎn):①自發(fā)性;②不對(duì)應(yīng)性;③稀有性;④獨(dú)立性;⑤可誘變性;⑥穩(wěn)定性;⑦可逆性。8.基因突變自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的實(shí)驗(yàn)證明——Luria等的變量試驗(yàn);Newcombe的涂布試驗(yàn);Lederberg等的影印平板培養(yǎng)法。用Newcombe的涂布試驗(yàn)說(shuō)明:先在12只培養(yǎng)皿平板上各涂以數(shù)目相等(5×104)的大量敏感于噬菌體T1的大腸桿菌,經(jīng)過(guò)5小時(shí)的培養(yǎng),它們約繁殖的了12.3代,于是在皿上長(zhǎng)出大量微菌落(約5100個(gè)細(xì)胞/菌落)。取其中6皿直接噴上T1噬菌體,另6皿則先用滅菌玻棒把上面的微菌落重新均勻涂布一次,然后同樣噴上T1。經(jīng)培養(yǎng)過(guò)夜后,計(jì)算這兩組培養(yǎng)皿上所形成的抗噬菌體菌落數(shù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在涂布過(guò)的一組中,共有抗性菌落353個(gè),要比未經(jīng)涂布過(guò)的(僅28個(gè)菌落)高得多。這也意味著該抗性突變發(fā)生在未接觸噬菌體前,噬菌體的加入只起甄別這類突變有否發(fā)生的作用,而不是誘導(dǎo)突變的因素。9.誘發(fā)突變(誘變):是指通過(guò)人為的方法,利用物理、化學(xué)或生物因素顯著提高基因子發(fā)突變頻率的手段。10.移碼突變:指誘變劑會(huì)使DNA序列中的一個(gè)或少數(shù)幾個(gè)核苷酸發(fā)生增添(插入)或缺失,從而使該處后面的全部遺傳密碼的閱讀框架發(fā)生改變,并進(jìn)一步引起轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯錯(cuò)誤的一類突變。11.染色體畸變:某些強(qiáng)烈理化因子所引起的染色體結(jié)構(gòu)上的缺失、重復(fù)、插入、易位和倒位,也包括染色體數(shù)目的變化。12.自發(fā)突變:是指生物體在無(wú)人工干預(yù)下自然發(fā)生的低頻率突變。13.轉(zhuǎn)化:受體菌直接吸收供體菌的DNA片段而獲得后者部分遺傳性狀的現(xiàn)象。14.感受態(tài):是指受體細(xì)胞最易接受外源DNA片斷并能實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化的一種生理狀態(tài)。15.轉(zhuǎn)化子:轉(zhuǎn)化后的受體菌。16.轉(zhuǎn)化過(guò)程:①供體菌的dsDNA片段與感受態(tài)受體菌細(xì)胞表面的膜連DNA結(jié)合蛋白相結(jié)合,其中一條鏈被核酸酶水解,另一條進(jìn)入細(xì)胞;②來(lái)自供體菌的ssDNA片段被細(xì)胞內(nèi)的特異蛋白R(shí)ecA結(jié)合,并使其與受體菌核染色體上的同源區(qū)段配對(duì)、重組,形成一小段雜合DNA區(qū)段;③受體菌染色體組進(jìn)行復(fù)制,于是雜合區(qū)也跟著得到復(fù)制;④細(xì)胞分裂后,形成一個(gè)轉(zhuǎn)化子和一個(gè)仍保持受體菌原來(lái)基因型的子代。17.轉(zhuǎn)染:指用提純的病毒核酸(DNA或RNA)去感染其宿主細(xì)胞或其原生質(zhì)體,可增殖出一群正常病毒后代的現(xiàn)象。18.轉(zhuǎn)導(dǎo):通過(guò)缺陷噬菌體的媒介,把供體細(xì)胞的小片段DNA攜帶到受體細(xì)胞中,通過(guò)交換與整合,使后者獲得前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象。19.普遍轉(zhuǎn)導(dǎo):通過(guò)極少數(shù)完全缺陷噬菌體對(duì)供體菌基因組上任何小片段DNA進(jìn)行“誤包”,而將其遺傳性狀傳遞給受體菌的現(xiàn)象。20.局限轉(zhuǎn)導(dǎo):指通過(guò)部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中,并與后者的基因組整合、重組,形成轉(zhuǎn)導(dǎo)子的現(xiàn)象。21.結(jié)合:供體菌通過(guò)性菌毛與受體菌直接接觸,把F質(zhì)?;蚱鋽y帶的不同長(zhǎng)度核基因組片段傳遞給后者,是后者獲得若干新遺傳性狀的現(xiàn)象。22.衰退:是指由于自發(fā)突變的結(jié)果,而使某吳重遠(yuǎn)有一系列生物學(xué)狀態(tài)發(fā)生量變或質(zhì)變的現(xiàn)象。23.復(fù)壯:對(duì)已衰退的菌種(群體)進(jìn)行純種分離和選擇性培養(yǎng),使其中未衰退的個(gè)體獲得大量繁殖,重新成為純種群體的措施。狹義的復(fù)壯是一消極措施,一般指對(duì)已衰退的菌種進(jìn)行復(fù)壯;廣義的復(fù)壯是一積極的措施,即在菌種的生產(chǎn)性狀未衰退前就不斷進(jìn)行純種分離和生產(chǎn)性狀測(cè)定,以在群體中獲得生產(chǎn)性狀更好的自發(fā)突變株。24.衰退的防止:控制傳代次數(shù)、創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件、利用不易衰退的細(xì)胞傳代、采用有效的菌種保藏方法。25.菌種的復(fù)壯:純種分離法、通過(guò)宿主體復(fù)壯、淘汰以衰退的個(gè)體。第八章微生物的生態(tài)1.互生:兩種可單獨(dú)生活的生物,當(dāng)它們?cè)谝黄饡r(shí),通過(guò)各自的代謝活動(dòng)而有利于對(duì)方,或偏利于一方的生活方式。2.共生:是指兩種生物共居在一起,相互分工合作、相
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