TSPPHN 004-2024 瓜類蔬菜病毒病綜合防控技術(shù)規(guī)程

ICS01.040.65CCSB15/19CodeofIntegralPreventionTechnologyoftheCucurbitsVegetableViralDiseases湖南省植物保護(hù)學(xué)會(huì)發(fā)布I本文件是根據(jù)GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由湖南省植物保護(hù)學(xué)會(huì)提出。本文件由湖南省植物保護(hù)學(xué)會(huì)歸口。本文件起草單位為湖南省植物保護(hù)研究所、廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所、全國(guó)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心\江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所、沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)、云南農(nóng)業(yè)大學(xué)。本文件主要起草人：劉勇、張松柏、張德詠、史曉斌、張卓、何自福、佘小漫，湯亞飛、燕飛、李方方、劉慧、吳元華、李凡。2瓜類蔬菜病毒病綜合防控技術(shù)規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了瓜類蔬菜病毒病的術(shù)語(yǔ)和定義、發(fā)生流行規(guī)律、病害診斷、檢測(cè)等技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于黃瓜、冬瓜、西葫蘆、南瓜等瓜類蔬菜病毒病的綜合防控。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4285農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)GB8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則GB16715.1瓜菜作物種子第1部分：瓜類NY/T393綠色食品農(nóng)藥使用準(zhǔn)則3術(shù)語(yǔ)和定義GB/T35333和界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1綠色防控技術(shù)Greencontroltechnology綠色防控是基于“預(yù)防為主、綜合防治”的植保方針和“公共植保、綠色植保”的植保理念，以確保農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量和農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境安全為目標(biāo)，以減少農(nóng)藥使用為目的，優(yōu)先采取生態(tài)調(diào)控、生物防治、物理防治和科學(xué)用藥等資源節(jié)約型、環(huán)境友好型技術(shù)來(lái)控制農(nóng)作物病蟲(chóng)害的植物保護(hù)措施。3.2葫蘆科蔬菜Cucurbitaceaevegetables瓜類蔬菜主要包括黃瓜、西葫蘆、南瓜、冬瓜等作物。3.3病毒病Viraldisease由植物病毒侵染引起的病害，具有寄生性、專一性或廣譜性等。植物病原病毒一般活體寄生，但某些病毒亦可在發(fā)病植株殘?bào)w中長(zhǎng)期存活；病毒在植物體內(nèi)進(jìn)行核酸（RNA或DNA）復(fù)制,然后進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和外殼蛋白等翻譯，組裝成新病毒粒子，粒子在植物細(xì)胞間和維管束中迅速移動(dòng)致使植物周身感染并發(fā)3病。4發(fā)生與流行規(guī)律瓜類蔬菜病毒病主要由小西葫蘆黃花葉病毒（Zucchiniyellowmosaicvirus,ZYMV）和黃瓜花葉病毒（Cucumbermosaicvirus,CMV）等侵染引起。ZYMV和CMV均主要是由蚜蟲(chóng)傳播為主。瓜類蔬菜病毒病的發(fā)生與蚜蟲(chóng)的發(fā)生密切相關(guān)。一般地，田間蚜蟲(chóng)發(fā)生早、種群量大，病毒病發(fā)生重；上一造或周邊種植瓜類作物上病毒病發(fā)生重，下一造病毒病發(fā)生早且嚴(yán)重。在溫室大棚內(nèi)，常年溫度較高，適合蚜蟲(chóng)生長(zhǎng)繁殖，可導(dǎo)致瓜類蔬菜病毒病周年均有發(fā)生，且發(fā)生較重。在露地栽培的瓜類蔬菜，一般在4月初進(jìn)行大田移栽、定植，由于溫度較低，不適合蚜蟲(chóng)生長(zhǎng)、繁殖，田間病毒病發(fā)生輕；5月底至6月初，田間開(kāi)始出現(xiàn)病毒病植株；隨著蚜蟲(chóng)種群不斷增大、田間操作頻繁，病毒病逐漸加重，并傳播擴(kuò)散。ZYMV和CMV也可以通過(guò)機(jī)械摩擦和種子帶毒傳播。田間整枝、打杈、搭架、施肥、除草、采果等農(nóng)事活動(dòng)，只要造成寄主微創(chuàng)口，即可導(dǎo)致病毒侵染與危害。ZYMV的寄主范圍廣，可侵染包括葫蘆科在內(nèi)的11個(gè)科植物，而CMV能夠侵染包括葫蘆科在內(nèi)的85科365屬1000多種單、雙子葉植物，是分布最廣和寄主最多的植物病毒之一，越冬寄主植物、病殘?bào)w及帶毒種子均可成為病毒病的初侵染源；田間田間管理粗放、瓜類蔬菜長(zhǎng)勢(shì)弱，病毒病發(fā)生重；此外，土壤瘠薄、黏重、板結(jié)、排水不良和偏施氮肥都會(huì)加重病情發(fā)展。5病害診斷5.1病害田間診斷瓜類蔬菜病毒病的危害癥狀主要為葉片花葉、黃化、泡狀突起、皺縮、畸形等癥狀（見(jiàn)附錄A圖5.2生物學(xué)檢測(cè)用于生物學(xué)檢測(cè)病毒的常用鑒別寄主植物有普通煙、莧色藜、南瓜、西葫蘆、黃瓜等。采用摩擦接種的方法,對(duì)疑似病毒病樣進(jìn)行接種檢測(cè)。具體方法和檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)附錄B圖B1、圖B2。5.3分子生物學(xué)檢測(cè)EasyPurePlantRNAKit（北京全式金生物技術(shù)有限公司）試劑盒抽提瓜類蔬菜病葉組織的總RNA。以提取的總RNA為模板，用隨機(jī)引物進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，合成cDNA鏈，以合成的cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳，電泳結(jié)束后，取出瓊脂糖凝膠，通過(guò)凝膠成像儀觀察結(jié)果并拍照記錄。擴(kuò)增片段與預(yù)期目標(biāo)條帶大小一致，則檢測(cè)結(jié)果判定為陽(yáng)性，即待檢測(cè)病樣中攜帶病毒（見(jiàn)附錄B圖B3）。6防治原則4本著“預(yù)防為主，綜合防治”的指導(dǎo)思想，根據(jù)瓜類蔬菜病毒病和傳毒媒介蚜蟲(chóng)的發(fā)生規(guī)律及危害特點(diǎn)，從保護(hù)生物多樣性，優(yōu)化生產(chǎn)環(huán)境，盡可能消滅和減少病毒來(lái)源，種植抗病優(yōu)質(zhì)品種，減少化學(xué)農(nóng)藥的使用角度開(kāi)展綜合防控，實(shí)現(xiàn)蔬菜生產(chǎn)安全、蔬菜生態(tài)環(huán)境安全和蔬菜產(chǎn)品質(zhì)量安全。7防治方法7.1種苗防治7.1.1選種選用抗病、優(yōu)質(zhì)、適合當(dāng)?shù)卦耘鄺l件的各類符合國(guó)家種子質(zhì)量的瓜類蔬菜品種。7.1.2種子消毒處理在瓜類蔬菜種子播種前，用50℃~55℃的熱水浸種10～15min，隨后用30℃溫開(kāi)水浸泡種子1～2h，搓去種子表面粘液；再用10%的磷酸三鈉溶液浸種20min，撈出后用清水沖洗干凈，然后催芽。7.1.3培育無(wú)病壯苗，防止苗期病蟲(chóng)害育苗前，徹底清除苗床枯枝殘葉和雜草，施入充分腐熟的有機(jī)肥和少量無(wú)機(jī)肥，深耕土壤30cm左右，邊耕邊撒上生石灰和百菌清進(jìn)行土壤消毒，并把土塊敲碎整理成高畦，然后播種。苗床采用50目以上的銀灰色防蟲(chóng)網(wǎng)進(jìn)行覆蓋，同時(shí)使用頻振式殺蟲(chóng)燈誘蟲(chóng)、掛黃色粘蟲(chóng)板誘殺蚜蟲(chóng)和煙粉虱、藍(lán)色粘蟲(chóng)板誘殺薊馬，預(yù)防苗期感染病毒病。加強(qiáng)育苗日常管理，及時(shí)拔除病苗、弱苗，從而培育出健康無(wú)病蟲(chóng)種苗。7.2農(nóng)業(yè)防治7.2.1合理輪作倒茬合理輪作，實(shí)行2~3年以上輪作倒茬，有條件地區(qū)實(shí)行與水稻輪作，不要連續(xù)兩年在同一塊田種植瓜類蔬菜。7.2.2選種無(wú)毒種苗嚴(yán)格選用無(wú)病蟲(chóng)健康的壯苗移栽到大田。7.2.3田園衛(wèi)生在定植前，結(jié)合整地，清除病殘?bào)w，鏟除田間及周邊雜草，除去病蟲(chóng)中間寄主。在瓜類蔬菜生長(zhǎng)期間，及時(shí)摘除病蟲(chóng)為害的葉片、果實(shí)或整株拔除，帶出田外深埋或燒毀，以減少毒源和傳播媒介昆蟲(chóng)。在進(jìn)行整枝、打杈、農(nóng)田除草或其他農(nóng)作時(shí)，應(yīng)減少對(duì)蔬菜植株的機(jī)械損傷，防止人為農(nóng)事操作傳播病毒病。7.2.4深耕耙耱，降低病蟲(chóng)基數(shù)通過(guò)深翻，可將土壤表面的蔬菜病殘?bào)w、落葉埋至土壤深層使其腐爛，也可將病原及地下害蟲(chóng)翻至地表，破壞病原和害蟲(chóng)賴以生存的環(huán)境，從而降低土壤病蟲(chóng)基數(shù)；同時(shí)深翻還可以使土壤疏松，有利于植物根系發(fā)育，提高植物的抗逆性。57.2.5肥水管理科學(xué)肥水管理。控制化學(xué)肥料的使用，在增施腐熟有機(jī)肥的基礎(chǔ)上，按氮、磷、鉀等養(yǎng)分進(jìn)行科學(xué)配方施肥，促進(jìn)植物健壯成長(zhǎng)，增加其對(duì)病蟲(chóng)害的抵抗力；葉面噴施鈣肥、硅肥等微量元素或在作物的不同生育期噴施300倍光合細(xì)菌菌劑，以誘導(dǎo)植物對(duì)病毒病的抗性，減少化學(xué)農(nóng)藥的使用次數(shù)和用量，降低農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的污染?？茖W(xué)管水，避免串灌、漫灌、減緩病蟲(chóng)傳播蔓延。7.3物理防治7.3.1燈光誘殺采用頻振式殺蟲(chóng)燈或太陽(yáng)能殺蟲(chóng)燈等誘殺傳毒媒介昆蟲(chóng)，主要是利用媒介昆蟲(chóng)的趨光、趨波、趨性信息素的特性。將光的波段、波的頻率設(shè)定在特定的范圍內(nèi)，近距離用光，遠(yuǎn)距離用波，加上媒介昆蟲(chóng)本身產(chǎn)生的性信息引誘成蟲(chóng)撲燈，燈外配以頻振高壓電網(wǎng)，害蟲(chóng)觸電死亡，達(dá)到誘殺成蟲(chóng)的目的。一般每30畝安裝1盞燈，安裝時(shí)燈底部距離地面1.20m，于蔬菜生長(zhǎng)季節(jié)開(kāi)始使用。7.3.2防蟲(chóng)網(wǎng)防治傳毒媒介昆蟲(chóng)在瓜類蔬菜育苗或田間種植時(shí)，用40目以上的防蟲(chóng)網(wǎng)，可防止媒介昆蟲(chóng)本身對(duì)瓜類蔬菜作物的危害，同時(shí)防止其傳播病毒。7.3.3色板誘殺利用蚜蟲(chóng)、粉虱、薊馬等成蟲(chóng)對(duì)黃色或藍(lán)色有較強(qiáng)趨性的特性，在田間放置30cm×40cm的黃色粘蟲(chóng)板或藍(lán)色粘蟲(chóng)板350-400塊/hm2，將粘蟲(chóng)板呈棋盤(pán)式均勻插置田間，粘蟲(chóng)板底部高出植株頂端10-20cm，粘蟲(chóng)板滿昆蟲(chóng)后及時(shí)更換。7.4生物防治7.4.1保護(hù)天敵保護(hù)田間有益昆蟲(chóng)，利用生物多樣性控制傳毒媒介昆蟲(chóng)。7.4.2田間釋放天敵控制傳毒媒介昆蟲(chóng)田間釋放瓢蟲(chóng)、草蛉等捕食性天敵和麗蚜小蜂等寄生性天敵，防治蚜蟲(chóng)、薊馬、煙粉虱等傳毒媒介7.5藥劑防治在黃瓜、節(jié)瓜等定植后（1~3）d，將25%噻蟲(chóng)嗪水分散粒劑稀釋至1000~1500倍，按每株50mL灌根處理，對(duì)傳毒媒介薊馬和粉虱進(jìn)行預(yù)防。在上述各種措施應(yīng)用的前提下，田間病毒病及其傳播媒介蚜蟲(chóng)、薊馬或粉虱等傳毒媒介昆蟲(chóng)仍有較重的發(fā)生和危害時(shí)，及時(shí)采用藥劑防治傳毒媒介昆蟲(chóng)，以切斷病毒病的傳播途徑。根據(jù)田間蟲(chóng)情，當(dāng)田間有蟲(chóng)株率達(dá)到5%（蚜蟲(chóng)）或10%（薊馬、粉虱）時(shí)開(kāi)始用藥，選用高效、低毒、低殘留、環(huán)境友好的藥劑，優(yōu)先采用植物源農(nóng)藥和生物農(nóng)藥,農(nóng)藥應(yīng)交替使用，相同有效成分農(nóng)藥不得連續(xù)施用2次及以上。農(nóng)藥使用應(yīng)符合國(guó)家綠色食品農(nóng)藥使用準(zhǔn)則和國(guó)家農(nóng)藥管理?xiàng)l例。防治蚜蟲(chóng)、薊馬和粉虱等傳毒媒介昆蟲(chóng)的常用藥劑及用法見(jiàn)附錄C。8加強(qiáng)病蟲(chóng)測(cè)報(bào)，實(shí)行統(tǒng)防統(tǒng)治采用定點(diǎn)系統(tǒng)調(diào)查和普查相結(jié)合方法，監(jiān)測(cè)田間瓜類蔬菜病毒病及傳毒媒介昆蟲(chóng)發(fā)生情況，結(jié)合氣象因素，進(jìn)行預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)。當(dāng)病蟲(chóng)害達(dá)到影響經(jīng)濟(jì)閥值時(shí)，當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)主管部門應(yīng)組織種植戶對(duì)整片瓜類蔬菜作物病毒病及其傳播媒介昆蟲(chóng)開(kāi)展統(tǒng)防統(tǒng)治。9建立防控檔案每次防治前,對(duì)田間瓜類蔬菜病毒病發(fā)生、前茬作物、防治等信息進(jìn)行調(diào)查與登記，具體調(diào)查內(nèi)容見(jiàn)附錄D。7附錄A(資料性附錄)泡狀突起89(1)反轉(zhuǎn)錄第一步配制反應(yīng)混合液(表B1)將上述反應(yīng)混合液65℃孵育5min,冰上迅速冷卻。第三步：配制反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液（表B2）表B2反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液反應(yīng)混合液5×PrimeScriptIIBuffer4μLRNaseInhibitor(40U/μL)0.5μLPrimeScriptIIRTase(200U/μL)ddH2O4.5μL總體積20μL第四步：反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)將反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液在42℃處理1h后，95℃處理3min終止反應(yīng)。反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液保存于-20℃。（2）反應(yīng)引物ZYMV的特異性RT-PCR引物見(jiàn)表B3。表B3ZYMV的特異性RT-PCR引物病毒名稱引物序列（5ˊ→3ˊ)片段長(zhǎng)度ZYMVCPF1：GTACAACACACGAGCGTCTC511bp430bpCPR：AGTGTGCCGTTCAGTGTCTTCGCPF2：GATGGGAGTTGTAATGAATGG（3）反應(yīng)體系ZYMV的特異性RT-PCR反應(yīng)體系見(jiàn)表B4表B4ZYMV特異性RT-PCR反應(yīng)體系試劑體積PremixExTaqVersion2.0CPF1（10μM）CPF2（10μM）CPR（10μM）cDNA(反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液10倍稀釋液)ddH2O總體積25(4)反應(yīng)程序（規(guī)范性附錄）防治瓜類蔬菜上傳毒媒介昆蟲(chóng)主要農(nóng)藥一覽表表C1防治瓜類蔬菜上傳毒媒介昆蟲(chóng)主要農(nóng)藥一覽表媒介昆蟲(chóng)防治農(nóng)藥瓜類蔬菜施用方法防治時(shí)期蚜蟲(chóng)40%、70%啶蟲(chóng)脒水分散粒劑黃瓜噴霧蟲(chóng)株率≧5%40%啶蟲(chóng)脒可溶粉劑黃瓜噴霧100克/升順式氯氰菊酯乳油黃瓜噴霧35%高氯·礦物油乳油黃瓜噴霧36%噻蟲(chóng)啉水分散粒劑黃瓜噴霧1.5%苦參堿可溶液劑黃瓜、苦瓜、西葫蘆噴霧10%氟啶蟲(chóng)酰胺水分散粒劑黃瓜噴霧10%溴氰蟲(chóng)酰胺可分散油懸浮劑黃瓜噴霧10%溴氰蟲(chóng)酰胺懸浮劑黃瓜噴霧10%異丙威煙劑黃瓜（保護(hù)地）點(diǎn)燃放煙薊馬19%溴氰蟲(chóng)酰胺懸浮劑黃瓜噴霧蟲(chóng)株率≧10%20%呋蟲(chóng)胺可溶粒劑黃瓜（保護(hù)地）噴霧25%噻蟲(chóng)嗪水分散粒劑節(jié)瓜噴霧5%多殺霉素