常用pH緩沖液配置方法及注意事項(xiàng)

常用pH緩沖溶液的配制和pH值序號(hào)溶液名稱配制方法pH值1氯化鉀-鹽酸13.0ml0.2mol/LHCl與25.0ml0.2mol/LKCl混合均勻后，加水稀釋至100ml1.72氨基乙酸-鹽酸在500ml水中溶解氨基乙酸150g，加480ml濃鹽酸，再加水稀釋至1L2.33一氯乙酸-氫氧化鈉在200ml水中溶解2g一氯乙酸后，加40gNaOH，溶解完全后再加水稀釋至1L2.84鄰苯二甲酸氫鉀-鹽酸把25.0ml0.2mol/L的鄰苯二甲酸氫鉀溶液與6.0ml0.1mol/LHCl混合均勻，加水稀釋至100ml3.65鄰苯二甲酸氫鉀-氫氧化鈉把25.0ml0.2mol/L的鄰苯二甲酸氫鉀溶液與17.5ml0.1mol/LNaOH混合均勻，加水稀釋至100ml4.86六亞甲基四胺-鹽酸在200ml水中溶解六亞甲基四胺40g，加濃HCl10ml，再加水稀釋至1L5.47磷酸二氫鉀-氫氧化鈉把25.0ml0.2mol/L的磷酸二氫鉀與23.6ml0.1mol/LNaOH混合均勻，加水稀釋至100ml6.88硼酸-氯化鉀-氫氧化鈉把25.0ml0.2mol/L的硼酸-氯化鉀與4.0ml0.1mol/LNaOH混合均勻，加水稀釋至100ml8.09氯化銨-氨水把0.1mol/L氯化銨與0.1mol/L氨水以2：1比例混合均勻9.110硼酸-氯化鉀-氫氧化鈉把25.0ml0.2mol/L的硼酸-氯化鉀與43.9ml0.1mol/LNaOH混合均勻，加水稀釋至100ml10.011氨基乙酸-氯化鈉-氫氧化鈉把49.0ml0.1mol/L氨基乙酸-氯化鈉與51.0ml0.1mol/LNaOH混合均勻11.612磷酸氫二鈉-氫氧化鈉把50.0ml0.05mol/LNa2HPO4與26.9ml0.1mol/LNaOH混合均勻，加水稀釋至100ml12.013氯化鉀-氫氧化鈉把25.0ml0.2mol/LKCl與66.0ml0.2mol/LNaOH混合均勻，加水稀釋至100ml13.0一、常用溶液的配制（一）溶液配制注意事項(xiàng)1．藥品要有較好的質(zhì)量試劑分為優(yōu)級(jí)純（保證試劑，Guaranteedreagent，G．R．）、分析試劑（Antalyticalreagent，A．R．）化學(xué)純（Chemicalpure，C．P．）和實(shí)驗(yàn)試劑（Laboratoryreagent，L．R．）等等。工業(yè)用的化學(xué)試劑，雜質(zhì)較多，只在個(gè)別情況下應(yīng)用，如配洗液用的硫酸、配干燥劑的氯化鈣等。2．藥品稱量要精確。3．配制試劑用水應(yīng)用新鮮的去離子水或雙蒸餾水，比電阻值在50萬(wàn)歐姆以上，pH在5.5~7.0之間才可應(yīng)用，在組織培養(yǎng)等特殊用途時(shí)應(yīng)注意此項(xiàng)要求，配制一般化驗(yàn)用溶液只要求用雙蒸餾水或去離子水。４．配好后的溶液，應(yīng)立即除菌處理（如高壓滅菌、抽濾或加抑菌物質(zhì)），以防雜菌生長(zhǎng)。（二）0.067（1/15）Mol/L磷酸緩沖液1．1/15Mol/L磷酸二氫鉀溶液的配制：稱取磷酸二氫鉀（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸餾水溶解后，傾入1000ml容量瓶?jī)?nèi)，再稀釋至刻度（1000ml）。2．1/15Mol/L磷酸二氫鈉溶液的配制：稱取無(wú)水磷酸氫二鈉（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O11.87g）用蒸餾水溶解后，放入1000ml容量瓶?jī)?nèi)，再加蒸餾水稀釋至刻度（1000ml）。3．按附表的比例，配制成不同pH值的緩沖溶液。附表1磷酸鹽緩沖液配制法（單位：毫升）pH1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH2PO4pH1/15Mol/LNa2HPO41/15Mol/LKH2PO45.88.092.07.166.623.45.99.990.17.272.028.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.380.819.26.218.681.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37.789.410.66.531.868.27.891.58.56.637.562.57.993.26.86.743.556.58.894.75.36.849.650.48.195.84.26.955.444.68.297.03.07.061.138.98.498.02.0（三）0.15Mol/LPB液附表20.15Mol/LPB液配制法pH0.15Mol/LNa2HPO4（ml）0.15Mol/LNaH2PO4（ml）6.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.00.1NNaH2PO45.50ml混合即可2．9份甘油與1份pH8.0磷酸緩沖液混合，即為甘油磷酸緩沖液。用途：用于免疫熒光試驗(yàn)。（十二）Hank’s液1．貯存液NaCl80.00gKCl4.00gNa2HPO4·12H2O1.52gKH2PO40.60g葡萄糖4.00g0.4％酚紅液50.00ml雙餾水加至100.00ml115℃高壓滅菌15min，冰凍保存。2．工作液貯存液1份雙餾水9份115℃高壓滅菌15min。臨用時(shí)用滅菌的5.6％NaHCO3液調(diào)pH值至7.2左右（溶液呈橙紅色）。（十三）萘（鈉）氏試劑（Nessler’sreagent）配方1：氯化汞6.0g碘化鉀12.4g20％NaOH30ml加蒸餾水至100ml配方2：碘化汞11.5g碘化鉀8g蒸餾水50ml（完全溶解后）過(guò)濾，加20％NaOH50ml。用途：檢測(cè)溶液中氨離子。（十四）阿氏（Alsever’s）液葡萄糖2.05g檸檬酸鈉0.80g氯化鈉0.42g蒸餾水100ml溶解后，以10%檸檬酸調(diào)節(jié)pH至6.1，過(guò)濾，分裝，10磅10min滅菌，4℃保存。（十五）青、鏈霉素混合液（簡(jiǎn)稱S．P．液或雙抗液）青霉素（40萬(wàn)U）5支鏈霉素（200萬(wàn)μg）1支分別溶于100ml滅菌無(wú)離子水中或共同溶于200ml滅菌無(wú)離子水中，混合后分裝小瓶，置-10℃~-20℃冰箱保存?zhèn)溆茫?萬(wàn)單位μg/ml）。臨用時(shí)，按1%的量加入營(yíng)養(yǎng)液或其他溶液中，最后濃度是青霉素100U/ml，鏈霉素100ug/ml。（十六）洗液（清潔液）配方1：重鉻酸鉀150g蒸餾水300ml濃硫酸3000ml將重鉻酸鉀加入蒸餾水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在大坩堝中加熱溶解，然后慢慢加入濃硫酸，邊加邊攪拌，見(jiàn)發(fā)熱過(guò)劇則稍停，冷卻后再繼續(xù)加。此為強(qiáng)洗液。盛清潔液的容器要堅(jiān)固，上加厚玻璃蓋，操作時(shí)要穿橡皮圍裙、長(zhǎng)統(tǒng)膠靴、戴上眼鏡和厚膠皮手套，以保安全。洗液一旦變綠，表示鉻酸已經(jīng)還原，失去了氧化能力，不宜再用。如將這樣洗液加熱，再加適量