2023-2024學年天津市部分區(qū)高二下學期期中考試生物試題（解析版）

高級中學名校試卷PAGEPAGE2天津市部分區(qū)2023-2024學年高二下學期期中考試試題本試卷分為第1卷（選擇題）和第IⅡ卷（非選擇題）兩部分共100分練習用時60分鐘第I卷一、選擇題：共12題，每題4分，共48分。在每題給出的四個選項中，只有一項是最符合題目要求的。1.中國的許多傳統(tǒng)美食制作過程蘊含了生物發(fā)酵技術。下列敘述正確的是（）A.腐乳制作過程中，起主要作用的是曲霉B.酸奶制作過程中，密封處理不利于乳酸菌發(fā)酵C.饅頭制作過程中，酵母菌進行呼吸作用產(chǎn)生CO2D.泡菜制作過程中，密封處理有利于醋酸菌的生長〖答案〗C〖祥解〗1、參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。2、參與泡菜制作的微生物是乳酸菌，泡菜制作的原理：（1）乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的過程中會引起亞硝酸鹽的含量的變化?！驹斘觥緼、腐乳制作過程中，起主要作用的是毛霉，A錯誤；B、制作酸奶利用的是乳酸菌，乳酸菌為厭氧型細菌，所以密封處理有利于乳酸菌發(fā)酵，B錯誤；C、酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸均能產(chǎn)生CO2，饅頭制作過程中，酵母菌進行呼吸作用產(chǎn)生CO2，CO2遇熱膨脹而形成小孔，使得饅頭暄軟多孔，C正確；D、制作泡菜利用的是乳酸菌，并非醋酸菌，D錯誤。故選C。2.與傳統(tǒng)發(fā)酵技術相比，發(fā)酵工程的產(chǎn)品種類更加豐富，產(chǎn)量和質(zhì)量明顯提高。判斷下列相關表述正確的是（）A.通過發(fā)酵工程可以從微生物細胞中提取單細胞蛋白B.發(fā)酵工程的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身C.發(fā)酵工程與傳統(tǒng)發(fā)酵技術最大的區(qū)別就是前者可以利用微生物來進行發(fā)酵D.在發(fā)酵工程的發(fā)酵環(huán)節(jié)中，發(fā)酵條件變化會影響微生物的生長繁殖，不會影響微生物的代謝途徑〖答案〗B〖祥解〗1、發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。2、產(chǎn)品不同，分離提純的方法一般不同。（1）如果產(chǎn)品是菌體，可采用過濾，沉淀等方法將菌體從培養(yǎng)液中分離出來；（2）如果產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，可用萃取、蒸餾、離子交換等方法進行提取。3、發(fā)酵過程中要嚴格控制溫度、pH、溶氧、通氣量與轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件。4、發(fā)酵過程一般來說都是在常溫常壓下進行，條件溫和、反應安全，原料簡單、污染小，反應專一性強，因而可以得到較為專一的產(chǎn)物。【詳析】A、單細胞蛋白是指利用發(fā)酵工程獲得的大量的微生物菌體，不是從微生物細胞中提取單細胞蛋白，A錯誤；B、發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身，B正確；C、發(fā)酵工程與傳統(tǒng)發(fā)酵技術都需要利用微生物來進行發(fā)酵，C錯誤；D、在發(fā)酵工程發(fā)酵環(huán)節(jié)中，發(fā)酵條件不僅影響微生物的生長繁殖，也會通過影響酶的活性影響微生物的代謝途徑，D錯誤。故選B。3.下圖為實驗室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，說法錯誤的是（）A.步驟①②③操作時需要在酒精燈火焰旁進行B.步驟①中，待倒入的培養(yǎng)基冷卻后，再蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋C.步驟③中，每次劃線前后都需對接種環(huán)進行滅菌處理D.步驟④中，經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落〖答案〗B〖祥解〗平板劃線法純化大腸桿菌時不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同：（1）第一次操作：殺死接種環(huán)上原有的微生物。（2）每次劃線之前：殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端。（3）劃線結束后：殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者?！驹斘觥緼、①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行，防止被雜菌污染，A正確；B、步驟①倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿，冷卻后將平板倒過來放置，B錯誤；C、接種環(huán)在每次接種前和接種結束后都要通過灼燒來滅菌，接種前灼燒，是為了殺死接種環(huán)上原有的微生物，每次劃線之前灼燒，是為了殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，劃線結束后灼燒是為了殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者，所以在操作③過程中，每次劃線前后都需要對接種環(huán)進行灼燒滅菌處理，C正確；D、平板劃線操作中，通過連續(xù)劃線，可將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面，經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落，D正確。故選B。4.飲用被細菌污染的水后，細菌在消化道內(nèi)會繁殖并產(chǎn)生毒素，引起急性腸胃炎、某同學利用圖1所示方法，檢測飲用水中的細菌含量，圖2為不同稀釋度下得到的若干個平板。下列相關敘述正確的是（）A.配制圖1所示固體培養(yǎng)基時，需要先滅菌，再調(diào)整到適宜的pHB.圖1中①~③三個培養(yǎng)皿上菌落數(shù)的平均值乘以稀釋倍數(shù)即為每毫升樣品中的細菌數(shù)C.圖2所示的平板中，a和c的計數(shù)結果不適合用于計算樣品中的細菌數(shù)D.若圖2所示為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，則生長的細菌一定是大腸桿菌〖答案〗C〖祥解〗稀釋涂布平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細胞。計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在(否則一個菌落就不只是代表一個細胞)，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。經(jīng)培養(yǎng)后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計菌落數(shù)目，即可計算出樣品中的含菌數(shù)。【詳析】A、配制圖1所示固體培養(yǎng)基時，需要先調(diào)整到適宜的pH、分裝再滅菌，A錯誤；B、圖1中①~③三個培養(yǎng)皿菌落數(shù)的平均值乘以稀釋倍數(shù)再除以0.1mL，即為每毫升樣品中的細菌數(shù)，B錯誤；C、圖2所示的平板中，a中菌落太多，c中菌落太少，a和c的計數(shù)結果不適合用于計算樣品中的細菌數(shù)，一般為30-300個之間較適宜，C正確；D、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基適合細菌生長，但不一定是大腸桿菌，D錯誤。故選C。5.將Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞后。置于培養(yǎng)胚胎干細胞（ES細胞）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。2~3周后，細胞會呈現(xiàn)出與ES細胞類似的形態(tài)和活躍分裂能力，這樣的細胞稱為誘導多能干細胞（iPS細胞）。下列說法錯誤的是（）A.逆轉(zhuǎn)錄病毒充當了將目的基因?qū)氤衫w維細胞的載體B.從獲取途徑看，iPS細胞的應用前景優(yōu)于胚胎干細胞C.體細胞經(jīng)誘導產(chǎn)生iPS細胞后，細胞的全能性下降D.欲驗證iPS細胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用，應設置不轉(zhuǎn)入外源基因的對照組〖答案〗C〖祥解〗胚胎干細胞具有胚胎細胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造。【詳析】A、由題意可知，Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因能通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞，說明逆轉(zhuǎn)錄病毒充當了將目的基因?qū)氤衫w維細胞的載體，A正確；B、由于iPS細胞具有活躍的分裂能力，故iPS細胞的應用前景優(yōu)于胚胎干細胞，B正確；C、體細胞分化程度高，全能性低，體細胞被誘導為iPS細胞后，可重新分化為其他細胞，故體細胞經(jīng)誘導產(chǎn)生iPS細胞后，細胞的全能性升高，C錯誤；D、欲驗證iPS細胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用，自變量為是否含有外源基因，應設置不轉(zhuǎn)入外源基因的對照組，D正確。故選C。6.質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，它存在于許多細菌體內(nèi)。質(zhì)粒上有標記基因如圖所示，通過標記基因可以推知外源基因（目的基因）是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同，細菌在培養(yǎng)基上的生長情況不同，如圖表示外源基因插入位置（插入點有a、b、c），請根據(jù)表中提供細菌的生長情況，推測①②③三種重組后細菌的外源基因插入點，正確的一組是（）細菌在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長情況細菌在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長情況①能生長能生長②能生長不能生長③不能生長能生長A.①是c；②是b；③是a B.①是a和b；②是a；③是bC.①是a和b；②是b；③是a D.①是c；②是a；③是b〖答案〗A〖祥解〗分析圖形可知：（1）a是抗氨芐青霉素基因，如果外源基因插入到a中，此基因結構被破壞，細菌無抗氨芐青霉素能力。將細菌放入含有氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長，則會死亡；相反，會存活。（2）b是抗四環(huán)素基因，如果外源基因插入到b中，抗四環(huán)素基因結構被破壞，細菌無抗四環(huán)素能力。將細菌放入含有四環(huán)素培養(yǎng)基上生長，則會死亡；相反，會存活?！驹斘觥康冖俳M：細胞能在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長，說明抗氨芐青霉素基因沒有被破壞；細菌能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上的生長，說明抗四環(huán)素基因沒有被破壞。由此可知，外源基因插入的位置不是a、b，而是c；第②組：細胞能在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長，說明抗氨芐青霉素基因沒有被破壞；細菌不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上的生長，說明抗四環(huán)素基因被破壞。說明了外源基因插入位置是b，不是a；第③組：細胞不能在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長，能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上的生長，說明抗氨芐青霉素基因被破壞，抗四環(huán)素基因沒有被破壞，由此可知，外源基因插入的位置是a，而不是b。綜上所述，A正確，BCD錯誤。故選A。7.孤獨癥譜系障礙與基因S的變異有關，科研人員對獼猴的基因S進行編輯，首次獲得孤獨癥模型猴，然后再通過動物細胞工程和胚胎工程技術獲得更多克隆猴，下列敘述正確的是（）A.在克隆模型猴時，利用囊胚細胞核移植比體細胞核移植更有優(yōu)勢B.培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)基中需要有糖類、氨基酸等營養(yǎng)條件，但無需提供氣體環(huán)境C.胚胎移植的過程中，需要選擇具有優(yōu)良遺傳性狀的雌性個體作為受體D.為獲得更多克隆猴，可以采用胰蛋白酶或膠原蛋白酶對早期胚胎進行分割，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎〖答案〗A〖祥解〗胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體；用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應發(fā)育到桑葚胚或囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查?！驹斘觥緼、囊胚細胞的分化程度低于體細胞，囊胚細胞的全能性高于體細胞，在克隆模型猴時，利用囊胚細胞核移植比體細胞核移植更有優(yōu)勢，A正確；B、培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)基中需要有糖類、氨基酸等營養(yǎng)條件，同時也需提供氣體環(huán)境：95％空氣和5％CO2，B錯誤；C、胎移植的過程中，需要選擇有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的個體作為受體，C錯誤；D、為獲得更多克隆猴，可以采用分割針或分割刀對早期胚胎進行分割，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎，D錯誤。故選A。8.在下列選項中，不需要采用植物組織培養(yǎng)技術的是（）A.單倍體育種B.得到“番茄一馬鈴薯”雜種植株C.利用基因工程培育抗棉鈴蟲的植株D.利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，獲得多倍體植株〖答案〗D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)技術的應用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、單倍體育種過程中，利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株時需要采用植物組織培養(yǎng)技術，A不符合題意；B、利用細胞工程技術培養(yǎng)“番茄—馬鈴薯”雜種植株時需要采用植物組織培養(yǎng)技術將雜種細胞培育成雜種植株，B不符合題意；C、抗棉鈴蟲的植株是通過轉(zhuǎn)基因技術形成的，將轉(zhuǎn)基因植物細胞培育成抗棉鈴蟲的植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術，C不符合題意；D、利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，得到染色體數(shù)目加倍的植株，這屬于多倍體育種，不需要采用植物組織培養(yǎng)技術，D符合題意。故選D。9.快速、準確地確定蛋白質(zhì)的三維空間結構，一直是生命科學領域的研究熱點和難點。人工智能程序AlphaFold2對大部分蛋白質(zhì)結構的預測極為精準，接近真實的蛋白質(zhì)結構，達到了人類利用冷凍電鏡等復雜儀器觀察預測的水平。下列相關敘述不正確的是（）A.蛋白質(zhì)的氨基酸序列是預測其空間結構的重要基礎B.預測、設計并制造新蛋白質(zhì)的技術屬于蛋白質(zhì)工程C.結構預測能幫助揭示蛋白質(zhì)分子間相互作用的機制D.依據(jù)新蛋白質(zhì)的氨基酸序列能推出唯一的基因序列〖答案〗D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程的基本流程：根據(jù)中心法則逆推以確定目的基因的堿基序列：預期蛋白質(zhì)功能→設計預期的蛋白質(zhì)結構→推測應有氨基酸序列→據(jù)氨基酸序列推出脫氧核苷酸序列（基因）→DNA合成，最終還是回到基因工程上來解決蛋白質(zhì)的合成?！驹斘觥緼、蛋白質(zhì)多樣性與組成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類、數(shù)目、排列順序及肽鏈盤曲折疊形成的蛋白質(zhì)的空間結構不同有關，因此蛋白質(zhì)的氨基酸序列是預測其空間結構的重要基礎，A正確；B、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結構規(guī)律及其生物功能的關系作為基礎，通過化學、物理和分子生物學的手段進行基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類對生產(chǎn)和生活的需求，因此預測、設計并制造新蛋白質(zhì)的技術屬于蛋白質(zhì)工程，B正確；C、結構決定功能，結構預測能幫助揭示蛋白質(zhì)分子間相互作用的機制，C正確；D、一個氨基酸的密碼子可能有多個，因此依據(jù)新蛋白質(zhì)的氨基酸序列能推出多個基因序列，D錯誤。故選D。10.如表列舉了幾種限制酶的識別序列及其切割位點（箭頭表示相關酶的切割位點）。如圖是酶切后產(chǎn)生的幾種末端。下列說法正確的是（）限制酶AluⅠBamHⅠSmaⅠSau3AⅠ識別序列切割位點AG↓CTTC↑GAG↓GATCCCCTAG↑GCCC↓GGGGGG↑CCC↓GATCCTAG↑A.②④⑤對應的識別序列均能被Sau3AI識別并切割B.Sau3AⅠ和BamHⅠ切割產(chǎn)生的片段能夠相連，但連接后的片段兩者都不能再切割C.BamHⅠ切割的是氫鍵，AluⅠ切割的是磷酸二酯鍵D.T4DNA連接酶即能連接①③，也能連接②⑤，但后者連接效率低〖答案〗A〖祥解〗限制性內(nèi)切核酸酶，簡稱限制酶：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來；（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（3）結果：形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、②④⑤對應的識別序列都存在GATC，都能被Sau3AⅠ識別并切割，A正確；B、BamHⅠ切割G↓GATCC，Sau3AⅠ切割↓GATC，故二者切割后產(chǎn)生的黏性末端是相同的，因此二者切割后產(chǎn)生的黏性末端能夠相連，連接后仍然存在GATC的序列，能被Sau3AⅠ切割，但是BamHⅠ不一定能切割，B錯誤；C、BamHⅠ與AluⅠ切割的均是磷酸二酯鍵，C錯誤；D、T4DNA連接酶既可以連接黏性末端也可以連接平末端，而圖中①、③屬于平末端，②⑤是黏性末端，T4DNA連接酶連接平末端時效率較低，D錯誤。故選A。11.為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學以小鼠甲為實驗材料設計了以下實驗流程。下列說法錯誤的是（）A.圖中篩選1和篩選2所依據(jù)的基本原理是相同的B.可將小鼠甲脾臟剪碎并用胰蛋白酶等處理后加培養(yǎng)液制成單細胞懸液C.實驗前必須給小鼠甲注射病毒A以獲得產(chǎn)生相應抗體的B淋巴細胞D.雜交瘤細胞需要在含95%空氣和5%CO2的混合氣體培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)〖答案〗A〖祥解〗1、單克隆抗體的制備：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾臟內(nèi)獲得相應的B淋巴細胞；（2）獲得雜交瘤細胞：①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體；（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；（4）將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；（5）提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。2、單克隆抗體的應用：①作為診斷試劑，具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點；②用于治療疾病和運載藥物?！驹斘觥緼、為了得到能產(chǎn)生抗病毒A單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選。第一次篩選用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞(“BB”細胞、“瘤瘤”細胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞(“B瘤”細胞)才能生長，第二次篩選用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群，該過程用到抗原抗體雜交，故篩選所依據(jù)的基本原理是抗原與抗體的反應具有特異性或抗原與抗體的特異性結合，所以二者原理是不同的，A錯誤；B、以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟：取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個細胞，加入培養(yǎng)液制成單細胞懸液，B正確；C、該實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是誘導小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞，C正確；D、雜交瘤細胞體外培養(yǎng)的條件需要無菌、無毒的環(huán)境、合適的營養(yǎng)、適宜的溫度、通入含有95％空氣和5％CO2混合氣體（維持培養(yǎng)液的pH)，D正確。故選A。12.下列關于“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述，錯誤的是（）A.粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)B.可利用DNA在酒精中溶解度較大的特點來提取DNAC.用二苯胺試劑鑒定DNA時，沸水浴加熱后呈藍色D.提取的DNA可溶解在2molL的NaCl溶液中〖答案〗B〖祥解〗DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色?！驹斘觥緼、粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、糖類等，A正確；B、DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步的分離，B錯誤；C、在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色，C正確；D、在DNA粗提取時，用2mol/L的NaCl溶液可以溶解DNA，D正確。故選B。第Ⅱ卷二、非選擇題：共5題，共52分13.營養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘變或自發(fā)突變后，微生物細胞代謝調(diào)節(jié)機制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應不能進行的菌株。這種菌株在基本培養(yǎng)基中不能生長，但能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產(chǎn)物，為工業(yè)生產(chǎn)提供大量原料。以下是實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。（1）培養(yǎng)基滅菌常用的方法是_____。過程①的接種方法為_____圖中基本培養(yǎng)基與完全培養(yǎng)基存在差異的成分是_____。（2）進行過程②培養(yǎng)時，應先將絲絨布轉(zhuǎn)印至_____（填“基本”或“完全”）培養(yǎng)基上，原因是_____。（3）利用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點是不同培養(yǎng)基中同種菌株的接種位置相同，所以，挑取_____（填“菌落A”或“菌落B”）即為所需的氨基酸缺陷型菌株。（4）分離計數(shù)土壤中自然突變的氨基酸缺陷型菌株的過程步驟①取5g土壤加入45mL無菌水中充分震蕩得到土壤懸液。步驟②中，將1mL土壤懸液進行梯度稀釋，每種稀釋度經(jīng)過步驟③各在3個平板上接種（每個平板的接種量為0.2mL），經(jīng)適當培養(yǎng)后，在稀釋倍數(shù)為103和104兩組平板上的菌落數(shù)分別為49、47、48和2、7、6．據(jù)此可得出每毫升土壤懸液中的活菌數(shù)為_____個。接種后的平板應_____，以防止冷凝水滴落造成污染?！即鸢浮剑?）①.高壓蒸汽滅菌法（或濕熱法）②.稀釋涂布平板法③.氨基酸（2）①.基本②.防止將特定營養(yǎng)成分從完全培養(yǎng)基帶入基本培養(yǎng)基（3）菌落A（4）①.2.4×105②.倒置〖祥解〗微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。用稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。（1）培養(yǎng)基需要有一定的水分，對培養(yǎng)基進行滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌法；由圖觀察可知，過程①的接種方法形成的菌落均勻分布，為稀釋涂布平板法；完全培養(yǎng)基是一種在基本培養(yǎng)基內(nèi)加入一些富含氨基酸、維生素和堿基之類的天然物質(zhì)，即加入生長因子而制成的各種營養(yǎng)基，可用來滿足微生物的各種營養(yǎng)缺陷型菌株的生長需要，故圖中基本培養(yǎng)基與完全培養(yǎng)基存在差異的成分是氨基酸。（2）進行過程②培養(yǎng)時，為了防止將特定營養(yǎng)成分從完全培養(yǎng)基帶入基本培養(yǎng)基，應先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上。（3）在基本培養(yǎng)基中，氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，利用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點是不同培養(yǎng)基中同種菌株的接種位置相同，所以，挑取菌落A即為所需的氨基酸缺陷型菌株。（4）每克樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M，為了保證計數(shù)結果準確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，故選擇稀釋倍數(shù)是103的，據(jù)此可得出每毫升土壤懸液中的活菌數(shù)為（49+47+48）÷3÷0.2×103=2.4×105個；接種后的平板應倒置，以防止冷凝水滴落造成污染，同時還能防止培養(yǎng)基中水分過快蒸發(fā)。14.下圖表示利用青菜（2N=20）與油菜（2N=38）培育種間雜種的過程。請據(jù)圖回答：（胚軸發(fā)育為連接莖和根的部分）（1）將采集到的青菜花粉和剪碎的油菜胚軸分別置于含有_____酶的溶液中，攪拌并保溫一段時間后，過濾、離心，獲得兩種原生質(zhì)體。（2）取兩種原生質(zhì)體混合液，滴加到含有_____（化學物質(zhì)）的融合液中，靜置、保溫一段時間，以誘導原生質(zhì)體融合。再轉(zhuǎn)移至液體淺層培養(yǎng)基中培養(yǎng)，通過_____過程形成愈傷組織，誘導分化出芽后，再轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中誘導生根。（3）研究發(fā)現(xiàn)花粉原生質(zhì)體及其自身融合體不能形成植株，且其大小與油菜胚軸原生質(zhì)體差異顯著。通常，在將兩種原生質(zhì)體混合前，需用異硫氰酸熒光素活染花粉原生質(zhì)體，其主要目的是便于利用顯微鏡鑒別出_____。（4）實驗人員取兩種形態(tài)特征有明顯差異的雜種植株甲、乙，分別利用其根尖細胞制作臨時裝片，觀察其正常體細胞分裂中期染色體數(shù)分別是48、58，若多個細胞可以融合，據(jù)此，可推測甲是_____倍體，產(chǎn)生乙植株的原因最可能是_____?！即鸢浮剑?）纖維素酶和果膠（2）①.聚乙二醇（PEG）②.脫分化（3）雜種原生質(zhì)體（4）①.三②.兩個（花粉）原生質(zhì)體A與一個原生質(zhì)體B融合形成〖祥解〗原生質(zhì)體的制備要用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁，常用聚乙二醇誘導原生質(zhì)體融合，體現(xiàn)了生物膜具有一定的流動性。將雜種細胞培養(yǎng)成完整植株的過程是植物組織培養(yǎng)，經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，再分化形成完整植株。（1）植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，若要獲得原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，故將采集到的青菜花粉和剪碎的油菜胚軸分別置于含有纖維素酶和果膠酶的溶液中，攪拌并保溫一段時間后，過濾、離心，獲得兩種原生質(zhì)體。（2）誘導原生質(zhì)體融合常用化學試劑聚乙二醇（PEG），故取兩種原生質(zhì)體混合液，滴加到含有聚乙二醇（PEG）融合液中，以誘導原生質(zhì)體融合。想要獲得愈傷組織（具有再度分化成其他組織細胞能力的薄壁細胞）必須經(jīng)過脫分化。（3）由于青菜花粉和油菜胚軸的原生質(zhì)體大小差異顯著，故兩者融合后和油菜胚軸原生質(zhì)體大小幾乎無差異，無法鑒別，當用異硫氰酸熒光素染色后，則容易從大小差異不大的兩者之間鑒別出雜種原生質(zhì)體，因此在將兩種原生質(zhì)體混合前，需用異硫氰酸熒光素活染花粉原生質(zhì)體。（4）青菜是二倍體，含20條染色體，青菜花粉是生殖細胞，染色體數(shù)目是體細胞一半，即10條，與油菜胚軸(二倍體38條染色體)結合后，形成三倍體48條染色體，也就是甲植株；58條染色體可能是兩個青菜花粉（原生質(zhì)體A）與一個油菜胚軸（原生質(zhì)體B）融合形成四倍體58條染色體，也就是乙植株，為四倍體。即產(chǎn)生乙植株的原因最可能是兩個（花粉）原生質(zhì)體A與一個原生質(zhì)體B融合形成。15.動物器官的體外培養(yǎng)技術對于研究器官的生理、病理過程及其機制意義重大。下圖是一個幼齡小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請回答下列問題。（1）肝臟小塊取自幼齡鼠是因為幼齡鼠的肝臟分裂能力強，分化程度_____（填“高”或“低”），肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細胞吸收營養(yǎng)物質(zhì)和排出_____。（2）培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)種類主要包含葡萄糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素等，并按照所需量嚴格配制而成。這樣的培養(yǎng)基稱為_____培養(yǎng)基。使用此種類的培養(yǎng)基，通常需要加入_____等一些天然成分。（3）有機物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具，探究肝臟小塊對有機物X是否具有解毒作用。材料用具：肝臟小塊，外周血淋巴細胞，淋巴細胞培養(yǎng)液，植物凝集素（刺激淋巴細胞分裂）；顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，滴管；吉姆薩染液（使染色體著色），有機物X溶液等。實驗過程：①在淋巴細胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細胞，取4等份，備用。②利用甲、乙、丙、丁4組上圖所示裝置，按下表步驟操作（“√”表示已完成的步驟）。甲乙丙丁步驟一：加入肝臟培養(yǎng)液√√√√步驟二：加入有機物X溶液√√步驟三：放置肝臟小塊√√③培養(yǎng)一段時間后，取4組裝置中的等量培養(yǎng)液，分別添加到4份備用的淋巴細胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。④一段時間后取淋巴細胞分別染色、制片。顯微鏡下觀察_____，并對比分析。若觀察到_____，則說明肝臟小塊對有機物X具有解毒作用。（4）分析實驗操作步驟，實驗中設置甲、乙兩組的目的是排除_____對實驗結果的影響?！即鸢浮剑?）①.低②.代謝廢物（2）①.合成②.血清（3）①.染色體形態(tài)和數(shù)量②.丙組淋巴細胞染色體出現(xiàn)異常，而丁組（或者甲、乙、丁組）的淋巴細胞正常（4）肝臟培養(yǎng)液、肝臟小塊（獨自）〖祥解〗動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應進行無菌處理，通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度和pH：哺乳動物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。（1）幼齡鼠的肝臟分裂能力強，分化程度低，更容易培養(yǎng)。肝臟切成小薄片可以增大與外界環(huán)境的接觸面積，因此肝臟小片放在培養(yǎng)基中就可以擴大與培養(yǎng)基的接觸面積，利于吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)，排出代謝廢物。（2）這種將細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴格配制而成的培養(yǎng)基，稱為合成培養(yǎng)基。因為合成培養(yǎng)基中可能缺少細胞生長所需要的一些物質(zhì)，通常需要加入一些天然的血清、血漿。（3）由題目中吉姆薩染液（使染色體著色），可知實驗應在顯微鏡下觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目。因為有機物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂，因此加入物質(zhì)X后，淋巴細胞內(nèi)的染色體會出現(xiàn)斷裂，即丙組淋巴細胞染色體出現(xiàn)異常，若肝臟小塊對有機物X具有解毒作用，則丁組（或者甲、乙、丁組）的淋巴細胞染色體正常，因此若丙組淋巴細胞染色體出現(xiàn)異常，而丁組（或者甲、乙、丁組）的淋巴細胞正常，則說明肝臟小塊對有機物X具有解毒作用。（4）由表格可知，甲組只含有肝臟培養(yǎng)液，乙組加入了肝臟小塊，甲、乙設置對照的目的是排除肝臟培養(yǎng)液、肝臟小塊（獨自）對實驗結果的影響。16.心肌長期負荷過重引起的心肌細胞肥大、間質(zhì)纖維化等過程稱為心臟重塑，與基因Snhg5相關。Snhg5轉(zhuǎn)錄出的RNA并不翻譯產(chǎn)生蛋白質(zhì)，而是以RNA的形式發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術建立了心肌細胞特異性Snhg5轉(zhuǎn)基因小鼠。（1）Snhg5轉(zhuǎn)錄所需的原料是__________。（2）研究人員利用PCR技術獲得了Snhg5基因，有關該過程正確的是__________。A.需要了解Sngh5基因的全部堿基序列 B.新鏈的合成只能從3′→5′C.反應體系加入的酶需要具有熱穩(wěn)定性 D.需要構建兩種不同的引物（3）通過PCR獲得的目的基因Snhg5和質(zhì)粒能用相應的酶切割、連接形成重組質(zhì)粒（圖1）。研究人員在構建重組質(zhì)粒時得到6株可能含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌，分別提取各菌株中的質(zhì)粒，使用限制性內(nèi)切核酸酶SalⅠ和HindⅢ切割后，經(jīng)DNA凝膠電泳技術檢測得到結果如圖2所示，其中含有重組質(zhì)粒的菌株編號是__________。（4）根據(jù)圖1，為獲得α-MHC-Snhg5-hGH轉(zhuǎn)基因片段，研究人員應使用限制性酶KpnⅠ和__________切割Snhg5重組質(zhì)粒。（5）將α-MHC-Snhg5-hGH片段導入小鼠受精卵中可以構建α-MHC-Snhg5-hGH轉(zhuǎn)基因小鼠。結合題干信息，以下說法合理的是__________。A.可以使用激素使雌鼠超數(shù)排卵B.可以用顯微注射法將α-MHC-Snhg5-hGH片段導入小鼠受精卵中C.轉(zhuǎn)基因小鼠可以成功表達出Snhg5蛋白D.一般需要多次雜交才可以獲得純合的轉(zhuǎn)基因小鼠〖答案〗（1）4種核糖核苷酸（2）CD（3）1、3、4、6（4）SacⅡ（5）ABD〖祥解〗1、轉(zhuǎn)錄是以DNA一條鏈為模板，合成RNA的過程，產(chǎn)物是RNA，所以所需的原料為4種核糖核苷酸。2、PCR技術的原理是模擬生物體內(nèi)DNA分子復制的過程，利用DNA分子熱變形原理，通過控制溫度控制DNA分子的解聚和結合，DNA分子體內(nèi)復制過程DNA的解旋是在解旋酶的作用下實現(xiàn)的；PCR擴增DNA片段過程最高經(jīng)過n次擴增，形成的DNA分子數(shù)是2n個，其中只有2條單鏈不含有引物。3、構建基因表達載體：在構建基因表達載體時常要用到限制酶、DNA連接酶兩種工具酶。如果目的基因要在乳腺細胞中表達，基因表達載體構建時要將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動子、標記基因和終止子等組件重組在一起，標記基因具有鑒定目的基因是否導入受體細胞并將含有目的基因的細胞篩選出來。（1）轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板，合成RNA的過程，產(chǎn)物是RNA，所以所需的原料為4種核糖核苷酸。（2）A、只需了解Sngh5基因的部分堿基序列，用于合成引物即可，A錯誤；B、新鏈的合成只能從5′→3′，B錯誤；C、PCR是利用了DNA分子熱變形原理，反應體系加入的酶需要具有熱穩(wěn)定性，C正確；D、PCR過程需要構建兩種不同的引物，使其與DNA的雙鏈分別配對，D正確。故選CD。（3）由圖1可見，重組質(zhì)粒中含有限制性內(nèi)切核酸酶SalⅠ和HindⅢ的切點，所以，分別提取各菌株中的質(zhì)粒，使用限制性內(nèi)切核酸酶SalⅠ和HindⅢ切割后，若含有重組質(zhì)粒，則會被切成兩端，電泳后應含有兩個條帶，其中含有重組質(zhì)粒的菌株編號是1、3、4、6。（4）由圖1可見，重組質(zhì)粒中α-MHC-Snhg5-hGH轉(zhuǎn)基因片段的兩端分別為限制性內(nèi)切核酸酶KpnⅠ和SacⅡ的切點，所以用KpnⅠ和SacⅡ切割Snhg5重組質(zhì)?？色@得α-MHC-Snhg5-hGH轉(zhuǎn)基因片段。（5）A、為了獲得足夠數(shù)量的受精卵，先利用促性腺激素刺激供體雌性鼠超數(shù)排卵，雌鼠經(jīng)過交配，將受精卵從輸卵管中取出，A正確；B、通常采用顯微注射技術將目的基因?qū)胧芫?，B正確；C、轉(zhuǎn)基因小鼠不一定能成功表達出Snhg5蛋白，需要篩選和鑒定，C錯誤；D、目的基因?qū)氲奈恢檬遣淮_定的，所以一般需要多次雜交才可以獲得純合的轉(zhuǎn)基因小鼠，D正確。故選ABD。17.染料廢水是一種難處理的工業(yè)廢水。研究發(fā)現(xiàn)，活性污泥中能篩選出對藍色的2BLN染料廢水具有高效脫色能力的菌株，它們通過降解具有生物毒性的分散藍2BLN而降低廢水危害，圖1表示目標菌株GN-1的篩選和脫色試驗流程，圖2表示GN-1菌株接種量對脫色效果影響的實驗結果。（1）向含分散藍2BLN的LB固體培養(yǎng)基中進行接種后，培養(yǎng)結果如圖1所示，在菌落①至④中，目標菌株GN-1應從菌落_____中挑取。（2）無菌技術是防止純種微生物被其他微生物污染，且自身也不污染操作環(huán)境的技術。以下過程需要使用無菌技術的是_____。A.接種 B.富集培養(yǎng) C.分離、純化（3）根據(jù)圖2所示結果，綜合考慮脫色效果（6d脫色率達90%以上為合格）和經(jīng)濟效益，GN-1菌株的最佳接種量為_____%。（4）隨著染料初始濃度的持續(xù)增加，GN-1菌株的脫色能力可能會產(chǎn)生變化，這是由于高濃度的染料對GN-1菌株起了_____作用，脫色能力_____（填“強”或“弱”）的菌株被選擇出來?！即鸢浮剑?）③（2）ABC（3）15%（4）①.選擇②.強〖祥解〗獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染。無菌技術應圍繞著如何避免雜菌的污染展開，主要包括消毒和滅菌。消毒是指使用較為溫和的物理、化學或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。滅菌則是指使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。消毒和滅菌工作主要包括兩個方面：對操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌。常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒等；滅菌方法有濕熱滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌等。（1）透明圈越大說明該菌落中的菌株分散2BLN的能力越強，故應該選取菌落③。（2）獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染，接種、微生物的培養(yǎng)、分離純化的過程都涉及無菌技術，因此接種、富集培養(yǎng)和分離、純化過程都需要使用無菌技術，即ABC正確，D錯誤。故選ABC。（3）根據(jù)圖2，6d脫色率達90%以上為合格，15%和20%效果幾乎相同且最佳，以節(jié)約的原則考慮，最佳接種量為15%。（4）GN-1菌株具有脫色能力，該菌株自然條件下可發(fā)生變異，變異是不定向的，可能出現(xiàn)脫色能力更強的菌株，隨著染料初始濃度的持續(xù)增加，高濃度的染料對菌株起到了選擇作用，脫色能力強的菌株被選擇出來，有利變異積累，基因頻率發(fā)生變化，故GN-1菌株的脫色能力可能會增強。天津市部分區(qū)2023-2024學年高二下學期期中考試試題本試卷分為第1卷（選擇題）和第IⅡ卷（非選擇題）兩部分共100分練習用時60分鐘第I卷一、選擇題：共12題，每題4分，共48分。在每題給出的四個選項中，只有一項是最符合題目要求的。1.中國的許多傳統(tǒng)美食制作過程蘊含了生物發(fā)酵技術。下列敘述正確的是（）A.腐乳制作過程中，起主要作用的是曲霉B.酸奶制作過程中，密封處理不利于乳酸菌發(fā)酵C.饅頭制作過程中，酵母菌進行呼吸作用產(chǎn)生CO2D.泡菜制作過程中，密封處理有利于醋酸菌的生長〖答案〗C〖祥解〗1、參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。2、參與泡菜制作的微生物是乳酸菌，泡菜制作的原理：（1）乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的過程中會引起亞硝酸鹽的含量的變化?！驹斘觥緼、腐乳制作過程中，起主要作用的是毛霉，A錯誤；B、制作酸奶利用的是乳酸菌，乳酸菌為厭氧型細菌，所以密封處理有利于乳酸菌發(fā)酵，B錯誤；C、酵母菌有氧呼吸和無氧呼吸均能產(chǎn)生CO2，饅頭制作過程中，酵母菌進行呼吸作用產(chǎn)生CO2，CO2遇熱膨脹而形成小孔，使得饅頭暄軟多孔，C正確；D、制作泡菜利用的是乳酸菌，并非醋酸菌，D錯誤。故選C。2.與傳統(tǒng)發(fā)酵技術相比，發(fā)酵工程的產(chǎn)品種類更加豐富，產(chǎn)量和質(zhì)量明顯提高。判斷下列相關表述正確的是（）A.通過發(fā)酵工程可以從微生物細胞中提取單細胞蛋白B.發(fā)酵工程的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身C.發(fā)酵工程與傳統(tǒng)發(fā)酵技術最大的區(qū)別就是前者可以利用微生物來進行發(fā)酵D.在發(fā)酵工程的發(fā)酵環(huán)節(jié)中，發(fā)酵條件變化會影響微生物的生長繁殖，不會影響微生物的代謝途徑〖答案〗B〖祥解〗1、發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。2、產(chǎn)品不同，分離提純的方法一般不同。（1）如果產(chǎn)品是菌體，可采用過濾，沉淀等方法將菌體從培養(yǎng)液中分離出來；（2）如果產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，可用萃取、蒸餾、離子交換等方法進行提取。3、發(fā)酵過程中要嚴格控制溫度、pH、溶氧、通氣量與轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件。4、發(fā)酵過程一般來說都是在常溫常壓下進行，條件溫和、反應安全，原料簡單、污染小，反應專一性強，因而可以得到較為專一的產(chǎn)物?！驹斘觥緼、單細胞蛋白是指利用發(fā)酵工程獲得的大量的微生物菌體，不是從微生物細胞中提取單細胞蛋白，A錯誤；B、發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身，B正確；C、發(fā)酵工程與傳統(tǒng)發(fā)酵技術都需要利用微生物來進行發(fā)酵，C錯誤；D、在發(fā)酵工程發(fā)酵環(huán)節(jié)中，發(fā)酵條件不僅影響微生物的生長繁殖，也會通過影響酶的活性影響微生物的代謝途徑，D錯誤。故選B。3.下圖為實驗室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，說法錯誤的是（）A.步驟①②③操作時需要在酒精燈火焰旁進行B.步驟①中，待倒入的培養(yǎng)基冷卻后，再蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋C.步驟③中，每次劃線前后都需對接種環(huán)進行滅菌處理D.步驟④中，經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落〖答案〗B〖祥解〗平板劃線法純化大腸桿菌時不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同：（1）第一次操作：殺死接種環(huán)上原有的微生物。（2）每次劃線之前：殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端。（3）劃線結束后：殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者?！驹斘觥緼、①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行，防止被雜菌污染，A正確；B、步驟①倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿，冷卻后將平板倒過來放置，B錯誤；C、接種環(huán)在每次接種前和接種結束后都要通過灼燒來滅菌，接種前灼燒，是為了殺死接種環(huán)上原有的微生物，每次劃線之前灼燒，是為了殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，劃線結束后灼燒是為了殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者，所以在操作③過程中，每次劃線前后都需要對接種環(huán)進行灼燒滅菌處理，C正確；D、平板劃線操作中，通過連續(xù)劃線，可將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面，經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落，D正確。故選B。4.飲用被細菌污染的水后，細菌在消化道內(nèi)會繁殖并產(chǎn)生毒素，引起急性腸胃炎、某同學利用圖1所示方法，檢測飲用水中的細菌含量，圖2為不同稀釋度下得到的若干個平板。下列相關敘述正確的是（）A.配制圖1所示固體培養(yǎng)基時，需要先滅菌，再調(diào)整到適宜的pHB.圖1中①~③三個培養(yǎng)皿上菌落數(shù)的平均值乘以稀釋倍數(shù)即為每毫升樣品中的細菌數(shù)C.圖2所示的平板中，a和c的計數(shù)結果不適合用于計算樣品中的細菌數(shù)D.若圖2所示為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，則生長的細菌一定是大腸桿菌〖答案〗C〖祥解〗稀釋涂布平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細胞。計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在(否則一個菌落就不只是代表一個細胞)，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。經(jīng)培養(yǎng)后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計菌落數(shù)目，即可計算出樣品中的含菌數(shù)?！驹斘觥緼、配制圖1所示固體培養(yǎng)基時，需要先調(diào)整到適宜的pH、分裝再滅菌，A錯誤；B、圖1中①~③三個培養(yǎng)皿菌落數(shù)的平均值乘以稀釋倍數(shù)再除以0.1mL，即為每毫升樣品中的細菌數(shù)，B錯誤；C、圖2所示的平板中，a中菌落太多，c中菌落太少，a和c的計數(shù)結果不適合用于計算樣品中的細菌數(shù)，一般為30-300個之間較適宜，C正確；D、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基適合細菌生長，但不一定是大腸桿菌，D錯誤。故選C。5.將Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞后。置于培養(yǎng)胚胎干細胞（ES細胞）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。2~3周后，細胞會呈現(xiàn)出與ES細胞類似的形態(tài)和活躍分裂能力，這樣的細胞稱為誘導多能干細胞（iPS細胞）。下列說法錯誤的是（）A.逆轉(zhuǎn)錄病毒充當了將目的基因?qū)氤衫w維細胞的載體B.從獲取途徑看，iPS細胞的應用前景優(yōu)于胚胎干細胞C.體細胞經(jīng)誘導產(chǎn)生iPS細胞后，細胞的全能性下降D.欲驗證iPS細胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用，應設置不轉(zhuǎn)入外源基因的對照組〖答案〗C〖祥解〗胚胎干細胞具有胚胎細胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造?！驹斘觥緼、由題意可知，Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因能通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞，說明逆轉(zhuǎn)錄病毒充當了將目的基因?qū)氤衫w維細胞的載體，A正確；B、由于iPS細胞具有活躍的分裂能力，故iPS細胞的應用前景優(yōu)于胚胎干細胞，B正確；C、體細胞分化程度高，全能性低，體細胞被誘導為iPS細胞后，可重新分化為其他細胞，故體細胞經(jīng)誘導產(chǎn)生iPS細胞后，細胞的全能性升高，C錯誤；D、欲驗證iPS細胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用，自變量為是否含有外源基因，應設置不轉(zhuǎn)入外源基因的對照組，D正確。故選C。6.質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，它存在于許多細菌體內(nèi)。質(zhì)粒上有標記基因如圖所示，通過標記基因可以推知外源基因（目的基因）是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同，細菌在培養(yǎng)基上的生長情況不同，如圖表示外源基因插入位置（插入點有a、b、c），請根據(jù)表中提供細菌的生長情況，推測①②③三種重組后細菌的外源基因插入點，正確的一組是（）細菌在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長情況細菌在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長情況①能生長能生長②能生長不能生長③不能生長能生長A.①是c；②是b；③是a B.①是a和b；②是a；③是bC.①是a和b；②是b；③是a D.①是c；②是a；③是b〖答案〗A〖祥解〗分析圖形可知：（1）a是抗氨芐青霉素基因，如果外源基因插入到a中，此基因結構被破壞，細菌無抗氨芐青霉素能力。將細菌放入含有氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長，則會死亡；相反，會存活。（2）b是抗四環(huán)素基因，如果外源基因插入到b中，抗四環(huán)素基因結構被破壞，細菌無抗四環(huán)素能力。將細菌放入含有四環(huán)素培養(yǎng)基上生長，則會死亡；相反，會存活?！驹斘觥康冖俳M：細胞能在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長，說明抗氨芐青霉素基因沒有被破壞；細菌能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上的生長，說明抗四環(huán)素基因沒有被破壞。由此可知，外源基因插入的位置不是a、b，而是c；第②組：細胞能在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長，說明抗氨芐青霉素基因沒有被破壞；細菌不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上的生長，說明抗四環(huán)素基因被破壞。說明了外源基因插入位置是b，不是a；第③組：細胞不能在含氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長，能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上的生長，說明抗氨芐青霉素基因被破壞，抗四環(huán)素基因沒有被破壞，由此可知，外源基因插入的位置是a，而不是b。綜上所述，A正確，BCD錯誤。故選A。7.孤獨癥譜系障礙與基因S的變異有關，科研人員對獼猴的基因S進行編輯，首次獲得孤獨癥模型猴，然后再通過動物細胞工程和胚胎工程技術獲得更多克隆猴，下列敘述正確的是（）A.在克隆模型猴時，利用囊胚細胞核移植比體細胞核移植更有優(yōu)勢B.培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)基中需要有糖類、氨基酸等營養(yǎng)條件，但無需提供氣體環(huán)境C.胚胎移植的過程中，需要選擇具有優(yōu)良遺傳性狀的雌性個體作為受體D.為獲得更多克隆猴，可以采用胰蛋白酶或膠原蛋白酶對早期胚胎進行分割，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎〖答案〗A〖祥解〗胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體；用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應發(fā)育到桑葚胚或囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查?！驹斘觥緼、囊胚細胞的分化程度低于體細胞，囊胚細胞的全能性高于體細胞，在克隆模型猴時，利用囊胚細胞核移植比體細胞核移植更有優(yōu)勢，A正確；B、培養(yǎng)早期胚胎的培養(yǎng)基中需要有糖類、氨基酸等營養(yǎng)條件，同時也需提供氣體環(huán)境：95％空氣和5％CO2，B錯誤；C、胎移植的過程中，需要選擇有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的個體作為受體，C錯誤；D、為獲得更多克隆猴，可以采用分割針或分割刀對早期胚胎進行分割，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎，D錯誤。故選A。8.在下列選項中，不需要采用植物組織培養(yǎng)技術的是（）A.單倍體育種B.得到“番茄一馬鈴薯”雜種植株C.利用基因工程培育抗棉鈴蟲的植株D.利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，獲得多倍體植株〖答案〗D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)技術的應用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、單倍體育種過程中，利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株時需要采用植物組織培養(yǎng)技術，A不符合題意；B、利用細胞工程技術培養(yǎng)“番茄—馬鈴薯”雜種植株時需要采用植物組織培養(yǎng)技術將雜種細胞培育成雜種植株，B不符合題意；C、抗棉鈴蟲的植株是通過轉(zhuǎn)基因技術形成的，將轉(zhuǎn)基因植物細胞培育成抗棉鈴蟲的植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術，C不符合題意；D、利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，得到染色體數(shù)目加倍的植株，這屬于多倍體育種，不需要采用植物組織培養(yǎng)技術，D符合題意。故選D。9.快速、準確地確定蛋白質(zhì)的三維空間結構，一直是生命科學領域的研究熱點和難點。人工智能程序AlphaFold2對大部分蛋白質(zhì)結構的預測極為精準，接近真實的蛋白質(zhì)結構，達到了人類利用冷凍電鏡等復雜儀器觀察預測的水平。下列相關敘述不正確的是（）A.蛋白質(zhì)的氨基酸序列是預測其空間結構的重要基礎B.預測、設計并制造新蛋白質(zhì)的技術屬于蛋白質(zhì)工程C.結構預測能幫助揭示蛋白質(zhì)分子間相互作用的機制D.依據(jù)新蛋白質(zhì)的氨基酸序列能推出唯一的基因序列〖答案〗D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程的基本流程：根據(jù)中心法則逆推以確定目的基因的堿基序列：預期蛋白質(zhì)功能→設計預期的蛋白質(zhì)結構→推測應有氨基酸序列→據(jù)氨基酸序列推出脫氧核苷酸序列（基因）→DNA合成，最終還是回到基因工程上來解決蛋白質(zhì)的合成?！驹斘觥緼、蛋白質(zhì)多樣性與組成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類、數(shù)目、排列順序及肽鏈盤曲折疊形成的蛋白質(zhì)的空間結構不同有關，因此蛋白質(zhì)的氨基酸序列是預測其空間結構的重要基礎，A正確；B、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結構規(guī)律及其生物功能的關系作為基礎，通過化學、物理和分子生物學的手段進行基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類對生產(chǎn)和生活的需求，因此預測、設計并制造新蛋白質(zhì)的技術屬于蛋白質(zhì)工程，B正確；C、結構決定功能，結構預測能幫助揭示蛋白質(zhì)分子間相互作用的機制，C正確；D、一個氨基酸的密碼子可能有多個，因此依據(jù)新蛋白質(zhì)的氨基酸序列能推出多個基因序列，D錯誤。故選D。10.如表列舉了幾種限制酶的識別序列及其切割位點（箭頭表示相關酶的切割位點）。如圖是酶切后產(chǎn)生的幾種末端。下列說法正確的是（）限制酶AluⅠBamHⅠSmaⅠSau3AⅠ識別序列切割位點AG↓CTTC↑GAG↓GATCCCCTAG↑GCCC↓GGGGGG↑CCC↓GATCCTAG↑A.②④⑤對應的識別序列均能被Sau3AI識別并切割B.Sau3AⅠ和BamHⅠ切割產(chǎn)生的片段能夠相連，但連接后的片段兩者都不能再切割C.BamHⅠ切割的是氫鍵，AluⅠ切割的是磷酸二酯鍵D.T4DNA連接酶即能連接①③，也能連接②⑤，但后者連接效率低〖答案〗A〖祥解〗限制性內(nèi)切核酸酶，簡稱限制酶：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來；（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（3）結果：形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、②④⑤對應的識別序列都存在GATC，都能被Sau3AⅠ識別并切割，A正確；B、BamHⅠ切割G↓GATCC，Sau3AⅠ切割↓GATC，故二者切割后產(chǎn)生的黏性末端是相同的，因此二者切割后產(chǎn)生的黏性末端能夠相連，連接后仍然存在GATC的序列，能被Sau3AⅠ切割，但是BamHⅠ不一定能切割，B錯誤；C、BamHⅠ與AluⅠ切割的均是磷酸二酯鍵，C錯誤；D、T4DNA連接酶既可以連接黏性末端也可以連接平末端，而圖中①、③屬于平末端，②⑤是黏性末端，T4DNA連接酶連接平末端時效率較低，D錯誤。故選A。11.為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學以小鼠甲為實驗材料設計了以下實驗流程。下列說法錯誤的是（）A.圖中篩選1和篩選2所依據(jù)的基本原理是相同的B.可將小鼠甲脾臟剪碎并用胰蛋白酶等處理后加培養(yǎng)液制成單細胞懸液C.實驗前必須給小鼠甲注射病毒A以獲得產(chǎn)生相應抗體的B淋巴細胞D.雜交瘤細胞需要在含95%空氣和5%CO2的混合氣體培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)〖答案〗A〖祥解〗1、單克隆抗體的制備：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾臟內(nèi)獲得相應的B淋巴細胞；（2）獲得雜交瘤細胞：①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體；（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；（4）將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；（5）提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。2、單克隆抗體的應用：①作為診斷試劑，具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點；②用于治療疾病和運載藥物?！驹斘觥緼、為了得到能產(chǎn)生抗病毒A單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選。第一次篩選用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞(“BB”細胞、“瘤瘤”細胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞(“B瘤”細胞)才能生長，第二次篩選用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群，該過程用到抗原抗體雜交，故篩選所依據(jù)的基本原理是抗原與抗體的反應具有特異性或抗原與抗體的特異性結合，所以二者原理是不同的，A錯誤；B、以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟：取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個細胞，加入培養(yǎng)液制成單細胞懸液，B正確；C、該實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是誘導小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞，C正確；D、雜交瘤細胞體外培養(yǎng)的條件需要無菌、無毒的環(huán)境、合適的營養(yǎng)、適宜的溫度、通入含有95％空氣和5％CO2混合氣體（維持培養(yǎng)液的pH)，D正確。故選A。12.下列關于“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述，錯誤的是（）A.粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)B.可利用DNA在酒精中溶解度較大的特點來提取DNAC.用二苯胺試劑鑒定DNA時，沸水浴加熱后呈藍色D.提取的DNA可溶解在2molL的NaCl溶液中〖答案〗B〖祥解〗DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色?！驹斘觥緼、粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、糖類等，A正確；B、DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步的分離，B錯誤；C、在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色，C正確；D、在DNA粗提取時，用2mol/L的NaCl溶液可以溶解DNA，D正確。故選B。第Ⅱ卷二、非選擇題：共5題，共52分13.營養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘變或自發(fā)突變后，微生物細胞代謝調(diào)節(jié)機制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應不能進行的菌株。這種菌株在基本培養(yǎng)基中不能生長，但能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產(chǎn)物，為工業(yè)生產(chǎn)提供大量原料。以下是實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。（1）培養(yǎng)基滅菌常用的方法是_____。過程①的接種方法為_____圖中基本培養(yǎng)基與完全培養(yǎng)基存在差異的成分是_____。（2）進行過程②培養(yǎng)時，應先將絲絨布轉(zhuǎn)印至_____（填“基本”或“完全”）培養(yǎng)基上，原因是_____。（3）利用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點是不同培養(yǎng)基中同種菌株的接種位置相同，所以，挑取_____（填“菌落A”或“菌落B”）即為所需的氨基酸缺陷型菌株。（4）分離計數(shù)土壤中自然突變的氨基酸缺陷型菌株的過程步驟①取5g土壤加入45mL無菌水中充分震蕩得到土壤懸液。步驟②中，將1mL土壤懸液進行梯度稀釋，每種稀釋度經(jīng)過步驟③各在3個平板上接種（每個平板的接種量為0.2mL），經(jīng)適當培養(yǎng)后，在稀釋倍數(shù)為103和104兩組平板上的菌落數(shù)分別為49、47、48和2、7、6．據(jù)此可得出每毫升土壤懸液中的活菌數(shù)為_____個。接種后的平板應_____，以防止冷凝水滴落造成污染?！即鸢浮剑?）①.高壓蒸汽滅菌法（或濕熱法）②.稀釋涂布平板法③.氨基酸（2）①.基本②.防止將特定營養(yǎng)成分從完全培養(yǎng)基帶入基本培養(yǎng)基（3）菌落A（4）①.2.4×105②.倒置〖祥解〗微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。用稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。（1）培養(yǎng)基需要有一定的水分，對培養(yǎng)基進行滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌法；由圖觀察可知，過程①的接種方法形成的菌落均勻分布，為稀釋涂布平板法；完全培養(yǎng)基是一種在基本培養(yǎng)基內(nèi)加入一些富含氨基酸、維生素和堿基之類的天然物質(zhì)，即加入生長因子而制成的各種營養(yǎng)基，可用來滿足微生物的各種營養(yǎng)缺陷型菌株的生長需要，故圖中基本培養(yǎng)基與完全培養(yǎng)基存在差異的成分是氨基酸。（2）進行過程②培養(yǎng)時，為了防止將特定營養(yǎng)成分從完全培養(yǎng)基帶入基本培養(yǎng)基，應先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上。（3）在基本培養(yǎng)基中，氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，利用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點是不同培養(yǎng)基中同種菌株的接種位置相同，所以，挑取菌落A即為所需的氨基酸缺陷型菌株。（4）每克樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M，為了保證計數(shù)結果準確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，故選擇稀釋倍數(shù)是103的，據(jù)此可得出每毫升土壤懸液中的活菌數(shù)為（49+47+48）÷3÷0.2×103=2.4×105個；接種后的平板應倒置，以防止冷凝水滴落造成污染，同時還能防止培養(yǎng)基中水分過快蒸發(fā)。14.下圖表示利用青菜（2N=20）與油菜（2N=38）培育種間雜種的過程。請據(jù)圖回答：（胚軸發(fā)育為連接莖和根的部分）（1）將采集到的青菜花粉和剪碎的油菜胚軸分別置于含有_____酶的溶液中，攪拌并保溫一段時間后，過濾、離心，獲得兩種原生質(zhì)體。（2）取兩種原生質(zhì)體混合液，滴加到含有_____（化學物質(zhì)）的融合液中，靜置、保溫一段時間，以誘導原生質(zhì)體融合。再轉(zhuǎn)移至液體淺層培養(yǎng)基中培養(yǎng)，通過_____過程形成愈傷組織，誘導分化出芽后，再轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基中誘導生根。（3）研究發(fā)現(xiàn)花粉原生質(zhì)體及其自身融合體不能形成植株，且其大小與油菜胚軸原生質(zhì)體差異顯著。通常，在將兩種原生質(zhì)體混合前，需用異硫氰酸熒光素活染花粉原生質(zhì)體，其主要目的是便于利用顯微鏡鑒別出_____。（4）實驗人員取兩種形態(tài)特征有明顯差異的雜種植株甲、乙，分別利用其根尖細胞制作臨時裝片，觀察其正常體細胞分裂中期染色體數(shù)分別是48、58，若多個細胞可以融合，據(jù)此，可推測甲是_____倍體，產(chǎn)生乙植株的原因最可能是_____?！即鸢浮剑?）纖維素酶和果膠（2）①.聚乙二醇（PEG）②.脫分化（3）雜種原生質(zhì)體（4）①.三②.兩個（花粉）原生質(zhì)體A與一個原生質(zhì)體B融合形成〖祥解〗原生質(zhì)體的制備要用纖維素酶和果膠酶去掉植物細胞的細胞壁，常用聚乙二醇誘導原生質(zhì)體融合，體現(xiàn)了生物膜具有一定的流動性。將雜種細胞培養(yǎng)成完整植株的過程是植物組織培養(yǎng)，經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，再分化形成完整植株。（1）植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，若要獲得原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，故將采集到的青菜花粉和剪碎的油菜胚軸分別置于含有纖維素酶和果膠酶的溶液中，攪拌并保溫一段時間后，過濾、離心，獲得兩種原生質(zhì)體。（2）誘導原生質(zhì)體融合常用化學試劑聚乙二醇（PEG），故取兩種原生質(zhì)體混合液，滴加到含有聚乙二醇（PEG）融合液中，以誘導原生質(zhì)體融合。想要獲得愈傷組織（具有再度分化成其他組織細胞能力的薄壁細胞）必須經(jīng)過脫分化。（3）由于青菜花粉和油菜胚軸的原生質(zhì)體大小差異顯著，故兩者融合后和油菜胚軸原生質(zhì)體大小幾乎無差異，無法鑒別，當用異硫氰酸熒光素染色后，則容易從大小差異不大的兩者之間鑒別出雜種原生質(zhì)體，因此在將兩種原生質(zhì)體混合前，需用異硫氰酸熒光素活染花粉原生質(zhì)體。（4）青菜是二倍體，含20條染色體，青菜花粉是生殖細胞，染色體數(shù)目是體細胞一半，即10條，與油菜胚軸(二倍體38條染色體)結合后，形成三倍體48條染色體，也就是甲植株；58條染色體可能是兩個青菜花粉（原生質(zhì)體A）與一個油菜胚軸（原生質(zhì)體B）融合形成四倍體58條染色體，也就是乙植株，為四倍體。即產(chǎn)生乙植株的原因最可能是兩個（花粉）原生質(zhì)體A與一個原生質(zhì)體B融合形成。15.動物器官的體外培養(yǎng)技術對于研究器官的生理、病理過程及其機制意義重大。下圖是一個幼齡小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請回答下列問題。（1）肝臟小塊取自幼齡鼠是因為幼齡鼠的肝臟分裂能力強，分化程度_____（填“高”或“低”），肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細胞吸收營養(yǎng)物質(zhì)和排出_____。（2）培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)種類主要包含葡萄糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素等，并按照所需量嚴格配制而成。這樣的培養(yǎng)基稱為_____培養(yǎng)基。使用此種類的培養(yǎng)基，通常需要加入_____等一些天然成分。（3）有機物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具，探究肝臟小塊對有機物X是否具有解毒作用。材料用具：肝臟小塊，外周血淋巴細胞，淋巴細胞培養(yǎng)液，植物凝集素（刺激淋巴細胞分裂）；顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，滴管；吉姆薩染液（使染色體著色），有機物X溶液等。實驗過程：①在淋巴細胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細胞，取4等份，備用。②利用甲、乙、丙、丁4組上圖所示裝置，按下表步驟操作（“√”表示已完成的步驟）。甲乙丙丁步驟一：加入肝臟培養(yǎng)液√√√√步驟二：加入有機物X溶液√√步驟三：放置肝臟小塊√√③培養(yǎng)一段時間后，取4組裝置中的等量培養(yǎng)液，分別添加到4份備用的淋巴細胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。④一段時間后取淋巴細胞分別染色、制片。顯微鏡下觀察_____，并對比分析。若觀察到_____，則說明肝臟小塊對有機物X具有解毒作用。（4）分析實驗操作步驟，實驗中設置甲、乙兩組的目的是排除_____對實驗結果的影響?！即鸢浮剑?）①.低②.代謝廢物（2）①.合成②.血清（3）①.染色體形態(tài)和數(shù)量②.丙組淋巴細胞染色體出現(xiàn)異常，而丁組（或者甲、乙、丁組）的淋巴細胞正常（4）肝臟培養(yǎng)液、肝臟小塊（獨自）〖祥解〗動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應進行無菌處理，通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度和pH：哺乳動物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。（1）幼齡鼠的肝臟分裂能力強，分化程度低，更容易培養(yǎng)。肝臟切成小薄片可以增大與外界環(huán)境的接觸面積，因此肝臟小片放在培養(yǎng)基中就可以擴大與培養(yǎng)基的接觸面積，利于吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)，排出代謝廢物。（2）這種將細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴格配制而成的培養(yǎng)基，稱為合成培養(yǎng)基。因為合成培養(yǎng)基中可能缺少細胞生長所需要的一些物質(zhì)，通常需要加入一些天然的血清、血漿。（3）由題目中吉姆薩染液（使染色體著色），可知實驗應在顯微鏡下觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目。因為有機物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂，因此加入物質(zhì)X后，淋巴細胞內(nèi)的染色體會出現(xiàn)斷裂，即丙組淋巴細胞染色體出現(xiàn)異常，若肝臟小塊對有機物X具有解毒作用，則丁組（或者甲、乙、丁組）的淋巴細胞染色體正常，因此若丙