2025年江蘇省睢寧縣高級中學(xué)三校高三聯(lián)合考試生物試題含解析

2025年江蘇省睢寧縣菁華高級中學(xué)三校高三聯(lián)合考試生物試題注意事項1．考生要認(rèn)真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．如圖為一種植物扦插枝條經(jīng)不同濃度IAA浸泡30min后的生根結(jié)果(新生根粗細(xì)相近)，對照組為不加IAA的清水。下列敘述正確的是A．對照組生根數(shù)量少是因為枝條中沒有IAAB．四組實驗中，300mg/LIAA誘導(dǎo)莖細(xì)胞分化出根原基最有效C．100與300mg/LIAA處理獲得的根生物量相近D．本實驗結(jié)果體現(xiàn)了IAA對根生長作用的兩重性2．在培養(yǎng)基中加入青霉素培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，并逐漸提高青霉素濃度，可得到抗藥性不斷增強(qiáng)的金黃色葡萄球菌品系。下列敘述正確的是（）A．金黃色葡萄球菌的抗藥性受多對等位基因控制B．全部抗藥性基因構(gòu)成了金黃色葡萄球菌品系的基因庫C．青霉素使金黃色葡萄球菌的抗藥性基因不斷突變加強(qiáng)D．金黃色葡萄球菌抗藥性增強(qiáng)過程發(fā)生了多個突變基因的重組3．下列關(guān)于光合作用的敘述，錯誤的是A．魯賓和卡門用同位素標(biāo)記法證明了光合作用釋放的氧氣來自水B．一般情況下，光合作用所利用的光都是可見光C．在暗反應(yīng)階段，C3可被[H]還原為C5和糖類D．溫度的變化不會影響光合作用的光反應(yīng)階段4．下列有關(guān)細(xì)胞共性的敘述，正確的是A．都具有細(xì)胞膜但不一定具有磷脂雙分子層B．都具有細(xì)胞核但遺傳物質(zhì)不一定是DNAC．都能進(jìn)行細(xì)胞呼吸但不一定發(fā)生在線粒體中D．都能合成蛋白質(zhì)但合成場所不一定是核糖體5．下列與葉綠體相關(guān)的敘述，錯誤的是（）A．用高倍顯微鏡觀察葉綠體時不需要對葉綠體進(jìn)行染色B．胡蘿卜素在層析液中溶解度最小，隨層析液擴(kuò)散的速度最快C．恩格爾曼用實驗證明了葉綠體主要吸收紅光和藍(lán)紫光D．可用差速離心法將葉肉細(xì)胞中的葉綠體分離出來6．下列關(guān)于高中生物教材實驗的敘述正確的是（）A．花生子葉薄片用蘇丹Ⅲ染液染色前，需用50%的酒精洗去雜質(zhì)B．探究酶的專一性實驗中，自變量可以是酶的種類或底物的種類C．光合色素提取實驗中，葉片研磨時應(yīng)加入二氧化硅以防止色素被破壞D．驗證活細(xì)胞吸收物質(zhì)的選擇性實驗中，未煮過的玉米籽粒不會被紅墨水染色二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）圖1為興趣小組探究a、b、c三種不同濃度的生長素溶液對葡萄莖段側(cè)芽生長影響的實驗結(jié)果。圖2為該小組探究某種南瓜矮生突變體屬于激素合成缺陷型突變體還是激素不敏感型突變體的實驗結(jié)果，請回答下列問題：（1）為得到某濃度生長素處理的實驗數(shù)據(jù)，需要測量每個葡萄莖段______長度，并由此計算出生長量，而且需要取每組多個葡萄莖段生長量的平均量作為該組的實驗結(jié)果，這樣做的目的是為了______。（2）若選用帶頂芽的葡萄莖段作實驗材料，要對其進(jìn)行______處理。（3）圖1實驗設(shè)計存在缺陷，還應(yīng)增加______組，該組實驗的處理是______。（4）由圖2可知，生長素對正常南瓜莖生長有______作用。噴施生長素______（填“能”或“不能”）使矮生南瓜的莖恢復(fù)至正常，由此可推測：該矮生南瓜屬于______突變體。8．（10分）2019年澳大利亞的大火導(dǎo)致森林大面積被毀，給全球氣候和生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性帶來消極影響?；卮鹩嘘P(guān)問題：（1）生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性是指_____________________。（2）大火之后，森林中種群密度降低，但是許多種子萌發(fā)能迅速長成新植株，從無機(jī)環(huán)境角度分析原因是____________________。要完全恢復(fù)到發(fā)生大火之前的森林狀態(tài)，需要時間較長，原因是_________________。（3）如果沒有外界因素的持續(xù)干擾，被大火燒過的區(qū)域物種豐富度可用圖中的____（填序號）曲線表示。9．（10分）煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（NAMPT）是一種蛋白質(zhì)類物質(zhì)，它普遍存在于哺乳動物體內(nèi)，對延緩細(xì)胞衰老有重要作用（1）對哺乳動物而言，細(xì)胞衰老與個體衰老并不是一回事，二者的關(guān)系是___________。細(xì)胞衰老是細(xì)胞的生理狀態(tài)和化學(xué)反應(yīng)發(fā)生復(fù)雜變化的過程，最終細(xì)胞核會表現(xiàn)出___________的特征。（1）研究發(fā)現(xiàn)，衰老細(xì)胞中NAD+的含量明顯降低。通常情況下，哺乳動物細(xì)胞的___________（填場所）中可通過有氧呼吸將NAD+轉(zhuǎn)化成NADH。NAMPT是NAD+合成的關(guān)鍵限速酶（指整條代謝通路中催化反應(yīng)速度最慢的酶），其可決定代謝中NAD+的水平。為探究細(xì)胞衰老與NAMPT之間的關(guān)系，研究小組選取了兩組健康的小鼠，甲組注射___________補(bǔ)充劑，乙組注射等量生理鹽水，結(jié)果發(fā)現(xiàn)甲組小鼠的平均壽命約為1．8年，乙組小鼠的平均壽命約為1．4年；且與乙組相比較，甲組小鼠的脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞等處均檢測出了高水平的NAD+。由此推測NAMPT延緩細(xì)胞衰老的機(jī)制是___________。（3）NAMPT合成后分泌到細(xì)胞外的方式是___________。NAMPT在血液中運輸時需包裹在囊泡中，若脫去囊泡則會失去活性。試推測NAMPT在血液中運輸時脫掉囊泡會失去活性的原因是___________。10．（10分）VNN1基因（1542bp）與炎癥相關(guān)性疾病有關(guān)，GFP基因（4735bp）控制綠色熒光蛋白的合成，該蛋白可在相應(yīng)波長的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。某研究小組進(jìn)行鼠源GFP-VNNI重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其功能研究，回答下列問題：（l）為構(gòu)建重組質(zhì)粒，研究小組從數(shù)據(jù)庫查找到VNNl的DNA序列，并設(shè)計引物。上游引物：5?-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3?下劃線為HindⅢ酶切位點），下游引物：5?-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3?（下劃線為BamHI酶切位點），之后進(jìn)行PCR擴(kuò)增，PCR的原理是________。擴(kuò)增后的VNNI基因要與含GFP基因的載體連接，需用________（填具體酶）切割VNNI基因和含GFP基因的載體，再用________酶處理，構(gòu)建重組質(zhì)粒。（2）GFP基因在重組質(zhì)粒中可作為________________，其作用是________。用之前相同的限制酶對GFP-VNNI重組質(zhì)粒切割后，進(jìn)行電泳鑒定時得到如圖1所示的部分條帶，結(jié)果表明________。（3）IL-6為體內(nèi)重要的炎癥因子，能與相應(yīng)的受體結(jié)合，激活炎癥反應(yīng)。圖2為GFP-VNNI重組質(zhì)粒對細(xì)胞分泌IL-6的影響，由此說明________________，同時發(fā)現(xiàn)與正常組比較，空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達(dá)有輕微升高，造成這種現(xiàn)象的可能原因是________________________。11．（15分）圖甲為某魚塘能量流動圖（c、d、f為不同魚種，能量單位是J·m-2·a-1）。圖乙為某同學(xué)探究溫度對該魚塘小魚種群密度增長影響的實驗結(jié)果。據(jù)圖回答：（1）第一營養(yǎng)級到第二營養(yǎng)級的能量傳遞效率是__________________（保留一位小數(shù)）。（2）由圖乙可知，在30℃時，小魚種群數(shù)量呈“___________”型增長，第15天左右達(dá)到____________。實驗結(jié)果表明_____________是獲得較大種群數(shù)量的良好溫度。（3）如果市場行情有較大變化，中魚d經(jīng)濟(jì)價值劇增，若要使魚塘獲得較大的經(jīng)濟(jì)價值，其措施是_________________________________________________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

據(jù)圖分析，該實驗的自變量是IAA的濃度，因變量是平均生根數(shù)和平均根長；與對照組相比，隨著IAA濃度的增加，平均生根數(shù)先增加后減少，平均根長先增加后略有減少?！驹斀狻繉φ战M生根數(shù)量少是因為枝條中IAA較少，A錯誤；據(jù)圖分析可知，四組實驗中，300mg/L的IAA濃度下平均生根數(shù)最多，說明誘導(dǎo)莖細(xì)胞分化出根原基最有效，B正確；圖中顯示，100與300mg/L處理獲得的根的長度相近，但是數(shù)量不相等，因此兩者獲得的根的生物量不相等，C錯誤；與對照組相比，高濃度下沒有體現(xiàn)抑制生根數(shù)和根長的現(xiàn)象，因此不能體現(xiàn)出IAA對根生長作用的兩重性，D錯誤。解答本題的關(guān)鍵是對于柱狀圖的分析，找出實驗的自變量和因變量，并與對照組相比得出平均生根數(shù)和平均根長隨IAA濃度的變化規(guī)律。2、D【解析】

金黃色葡萄球菌屬于原核生物，沒有染色體，不能進(jìn)行有性生殖和減數(shù)分裂，所以其抗藥性差異的主要來源是基因突變；金黃色葡萄球菌存在著各種各樣的基因突變，青霉素對金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的抗藥性變異進(jìn)行選擇，最終得到抗藥性不斷增強(qiáng)的金黃色葡萄球菌品系?！驹斀狻緼、等位基因位于同源染色體的同一位置上，而金黃色葡萄球菌沒有染色體，A錯誤；B、金黃色葡萄球菌品系的基因庫包括其含有的抗藥性基因在內(nèi)的所有基因，B錯誤；C、青霉素對金黃色葡萄球菌突變產(chǎn)生的抗藥性基因進(jìn)行選擇，C錯誤；D、金黃色葡萄球菌抗藥性增強(qiáng)過程發(fā)生了多個突變基因的重組，D正確。故選D。3、D【解析】

A、魯賓和卡門用同位素標(biāo)記法標(biāo)記水中的氧和二氧化碳中的氧，證明了光合作用釋放的氧氣來自水，A正確；B、一般情況下，光合作用所利用的光都是可見光，B正確；C、根據(jù)光合作用過程，在暗反應(yīng)階段，C3可被[H]還原為C5和糖類，C正確；D、光合作用的光反應(yīng)階段需要酶的參與，溫度會通過影響酶的活性，從而影響光合作用的光反應(yīng)階段，D錯誤。故選D。學(xué)生對葉綠體中的色素及色素的吸收光譜理解不清葉綠體中的色素及色素的吸收光譜由圖可以看出：(1)葉綠體中的色素只吸收可見光，而對紅外光和紫外光等不吸收。(2)葉綠素對紅光和藍(lán)紫光的吸收量大，類胡蘿卜素對藍(lán)紫光的吸收量大，對其他波段的光并非不吸收，只是吸收量較少。4、C【解析】細(xì)胞根據(jù)有無成形的細(xì)胞核，分為原核細(xì)胞和真核細(xì)胞，不論是原核細(xì)胞還是真核細(xì)胞，細(xì)胞膜的主要成分都是磷脂和蛋白質(zhì)，A錯誤；原核細(xì)胞無細(xì)胞核，且具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物的遺傳物質(zhì)都是DNA，B錯誤；原核細(xì)胞無線粒體，但也能進(jìn)行有氧呼吸，如藍(lán)藻，真核細(xì)胞有氧呼吸的主要場所在線粒體，C正確；原核細(xì)胞和真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成場所都是核糖體，D錯誤。【考點定位】原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上的異同【名師點睛】解答本題的關(guān)鍵在于對于原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的共性的理解，原核細(xì)胞與真核細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上都具有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核糖體以及遺傳物質(zhì)都是DNA，雖然原核細(xì)胞不具有真核細(xì)胞的某些結(jié)構(gòu)，但也能進(jìn)行相應(yīng)的生理功能，如藍(lán)藻無線粒體，但含有與有氧呼吸有關(guān)的酶，也能進(jìn)行有氧呼吸，對于這樣的特例，需重點掌握，也是高考的重點。5、B【解析】

葉綠體是光合作用的場所，存在于能進(jìn)行光合作用的植物細(xì)胞中，葉綠體是具有雙膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，葉綠體的類囊體膜上含有能吸收光能的光合色素，光合色素包括葉綠素a、葉綠素b、葉黃素、胡蘿卜素，不同色素在層析液中的溶解度不同，隨層析液在濾紙條上擴(kuò)散速率不同，因此可以用紙層析法將不同的光合色素分離；葉綠素主要吸收紅光和藍(lán)紫光，葉黃素和胡蘿卜素主要吸收藍(lán)紫光?！驹斀狻緼、葉綠體本身呈現(xiàn)綠色，觀察葉綠體時不需要對其染色，A正確；B、胡蘿卜素在層析液中溶解度最大，隨層析液擴(kuò)散速度最快，B錯誤；C、恩格爾曼用透過三棱鏡的光照射水綿臨時裝片，好氧性細(xì)菌聚集在紅光和藍(lán)紫光區(qū)，說明葉綠體主要吸收紅光和藍(lán)紫光，C正確；D、分離各種細(xì)胞器的方法是差速離心法，D正確。故選B。6、B【解析】

1、脂肪需要使用蘇丹Ⅲ（蘇丹Ⅳ）染色，使用酒精洗去浮色以后在顯微鏡下觀察，可以看到橘黃色（紅色）的脂肪顆粒。2、提取綠葉中色素時，需要加入無水乙醇（丙酮）、SiO2、CaCO3，其中無水乙醇（丙酮）的作用是提取色素，SiO2的作用是使研磨更充分，CaCO3的作用是防止色素被破壞?！驹斀狻緼、花生子葉薄片用蘇丹Ⅲ染液染色后，需用50%的酒精洗去雜質(zhì)，A錯誤；B、探究酶的專一性實驗中，自變量可以是酶的種類也可以是底物的種類，B正確；C、光合色素提取實驗中，葉片研磨時應(yīng)加入碳酸鈣以防止色素被破壞，C錯誤；D、先縱切玉米籽粒，在用紅墨水染色，沖洗后觀察其顏色變化，胚乳細(xì)胞是死細(xì)胞，煮過的玉米胚乳與未煮過的均被染成紅色，D錯誤。故選B。二、綜合題：本大題共4小題7、處理前后側(cè)芽避免偶然性，減小實驗的誤差去除頂芽空白對照用等量的蒸餾水代替生長素溶液進(jìn)行實驗促進(jìn)或抑制作用（或兩重性）不能激素不敏感型【解析】

1、分析圖1：a、b、c三種不同濃度的生長素對葡萄莖段側(cè)芽生長的影響與空白對照相比較，b、c濃度的側(cè)芽生長速度比空白對照組快，即具有促進(jìn)作用，a濃度的生長速度比空白對照組慢，即具有抑制作用．根據(jù)生長素作用的兩重性可知，a濃度最高。2、題干實驗的目的是驗證酸能促進(jìn)細(xì)胞伸長，實驗設(shè)計要遵循對照原則和單一變量原則，為了實驗結(jié)果更加準(zhǔn)確，還需遵循平行重復(fù)原則。本實驗的單一變量是pH，因變量是胚芽鞘的生長情況，可通過測量胚芽鞘的長度來判斷。【詳解】（1）為得到某濃度生長素處理后的實驗數(shù)據(jù)，需要測量每個葡萄莖段處理前后側(cè)芽長度，并計算出生長量；而且需要取每組多個葡萄莖段生長量的平均值作為該組的實驗結(jié)果，目的是避免偶然性，減小實驗的誤差。

（2）本實驗的目的是探究a、b、c三種不同濃度的NAA對葡萄莖段側(cè)芽生長的影響，而頂芽能產(chǎn)生生長素，因此用帶頂芽的葡萄莖段實驗時，要去除頂芽，避免頂芽產(chǎn)生的生長素對側(cè)芽的生長造成影響，排除對實驗結(jié)果的干擾。

（3）圖1實驗設(shè)計存在缺陷，還應(yīng)增加空白對照組，該組實驗的處理是用等量的蒸餾水代替生長素溶液進(jìn)行實驗。

（4）圖2正常南瓜莖伸長量隨生長素濃度的增加先上升后下降，說明生長素對正常南瓜莖生長有兩重性；噴施生長素不能使矮生南瓜的莖恢復(fù)至正常，說明激素對矮生南瓜的莖不起作用，由此可推測：該矮生南瓜屬于激素不敏感型突變體。本題結(jié)合曲線圖，考查生長素的作用及作用的兩重性、探究實驗，要求考生識記生長素的作用，掌握生長素作用的兩重性，能根據(jù)曲線圖中信息判斷濃度高低；明確探究實驗的目的，能結(jié)合所學(xué)的知識合理解釋實驗中的相關(guān)操作，屬于考綱理解和應(yīng)用層次的考查。8、生態(tài)系統(tǒng)所具有的保持或恢復(fù)自身結(jié)構(gòu)和功能相對穩(wěn)定的能力光照更加充足、土壤中無機(jī)養(yǎng)料增多森林生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，恢復(fù)力穩(wěn)定性較弱③【解析】

生態(tài)系統(tǒng)生物種類越多，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)越復(fù)雜，自我調(diào)節(jié)能力越大，抵抗力穩(wěn)定性越大，恢復(fù)力穩(wěn)定性越小?！驹斀狻浚?）生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性是指生態(tài)系統(tǒng)所具有的保持或恢復(fù)自身結(jié)構(gòu)和功能相對穩(wěn)定的能力。（2）大火燒過的森林，土壤無機(jī)鹽變得更加充足，加之沒有喬木層、灌木層的遮光，使地表陽光充沛，此時土壤中未被燒死的種子或繁殖體能快速長成新植株。但是森林生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，抵抗力穩(wěn)定性強(qiáng)，恢復(fù)力穩(wěn)定性弱，恢復(fù)到大火之前的狀態(tài)，所需時間較長。（3）大火之后的森林中群落演替屬于次生演替，物種豐富度起始點大于零。且隨著演替的進(jìn)行，豐富度不會無限增大。故③曲線符合。本題考查生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性及影響因素、群落演替等生態(tài)系統(tǒng)相關(guān)基礎(chǔ)概念。以題干中所給材料為背景，主要考查學(xué)生對所學(xué)知識要點的記憶、理解和綜合應(yīng)用能力，和最近幾年高考命題特點接軌，考查學(xué)生對一些基本概念的掌握。9、個體衰老的過程是細(xì)胞普遍衰老的過程體積增大、核膜內(nèi)折、染色質(zhì)收縮（染色加深）細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體基質(zhì)NAMPTNAMPT通過促進(jìn)NAD+的合成來延緩細(xì)胞衰老胞吐血液中的pH等影響了蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)【解析】

衰老細(xì)胞的特征：（1）細(xì)胞內(nèi)水分減少，細(xì)胞萎縮，體積變小，但細(xì)胞核體積增大，染色質(zhì)固縮，染色加深；（1）細(xì)胞膜通透性功能改變，物質(zhì)運輸功能降低；（3）細(xì)胞色素隨著細(xì)胞衰老逐漸累積；（4）有些酶的活性降低；（5）呼吸速度減慢，新陳代謝減慢。【詳解】（1）對哺乳動物而言，個體衰老的過程是細(xì)胞普遍衰老的過程。衰老的細(xì)胞中細(xì)胞核體積增大、核膜內(nèi)折、染色質(zhì)收縮。（1）哺乳動物細(xì)胞有氧呼吸的第一和第二階段會將NAD+轉(zhuǎn)化成NADH，場所為細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體基質(zhì)。要探究細(xì)胞衰老與NAMPT之間的關(guān)系，實驗的自變量應(yīng)該是是否注射NAMPT，因變量是小鼠的平均壽命，兩組健康的小鼠，甲組注射NAMPT補(bǔ)充劑，乙組注射等量生理鹽水，結(jié)果發(fā)現(xiàn)甲組小鼠的平均壽命約為1.8年，乙組小鼠的平均壽命約為1.4年；且與乙組相比較，甲組小鼠的脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞等處均檢測出了高水平的NAD+。由此推測NAMPT通過促進(jìn)NAD+的合成來延緩細(xì)胞衰老。（3）NAMPT是大分子物質(zhì)，其合成后通過胞吐分泌到細(xì)胞外。NAMPT在血液中運輸時需包裹在囊泡中，若脫去囊泡則會失去活性?？赡苁茄褐械膒H等影響了蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，進(jìn)而導(dǎo)致NAMPT在血液中運輸時脫掉囊泡會失去活性。有氧呼吸的第一、第二階段產(chǎn)生NADH，第三階段消耗NADH。10、DNA雙鏈復(fù)制HindⅢ酶和BamHⅠ酶DNA連接標(biāo)記基因鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細(xì)胞篩選出來VNN1基因已插入到含GFP基因的載體中（合理即可）VNN1基因表達(dá)產(chǎn)物能促進(jìn)細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6操作過程中對細(xì)胞的損傷（或用到的化學(xué)試劑對細(xì)胞具有一定的毒性作用），可以激活相應(yīng)細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6【解析】

基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲?。涸嘶虿扇≈苯臃蛛x獲得，真核基因是人工合成，人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：先用Ca2+處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。第四步：目的基因的檢測和表達(dá)。【詳解】（1）PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制，為防止切割的質(zhì)粒環(huán)化，通常選擇兩種的限制酶進(jìn)行切割，同時需要用相同的限制酶對目的基因進(jìn)行處理，所以選擇HindⅢ酶和BamHI切割VNNI基因和含GFP基因的載體，再用DNA連接酶處理形成重組質(zhì)粒。（2）GFP基因（473