鞣質(zhì)的分離和分析方法研究進(jìn)展

鞣質(zhì)的分離和分析方法研究進(jìn)展摘要：鞣質(zhì)又被稱(chēng)之為單寧，鞣質(zhì)是一種存在植物內(nèi)的結(jié)構(gòu)相對(duì)復(fù)雜的化合物，肉質(zhì)可以與動(dòng)物皮膚中的蛋白質(zhì)結(jié)合，形成穩(wěn)定性較強(qiáng)的皮革材料，因此，單寧被稱(chēng)為鞣質(zhì)，鞣質(zhì)多元化的化合結(jié)構(gòu)使得鞣質(zhì)具有特殊的化學(xué)性質(zhì)，以及很強(qiáng)的生物活性，鞣質(zhì)是一種價(jià)值較高的天然的化合物，隨著鞣質(zhì)分離研究的不斷深入，鞣質(zhì)分離的技術(shù)開(kāi)始得到人們的關(guān)注。引言近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，植物提取物在替代抗生素方面的研究取得了良好進(jìn)展，其作用主要包括抗微生物活性、免疫增強(qiáng)活性和抗氧化活性等方面的提高，且負(fù)面效應(yīng)甚微。1、鞣質(zhì)的提取方法鞣質(zhì)有多種提取方法，最為常用的一種提取方法就是溫水浸泡提取法，有機(jī)溶劑溶解提取法，創(chuàng)新后的提取方法有微波鞣質(zhì)提取法，超聲波鞣質(zhì)提取法，膜技術(shù)提取法，高壓水鞣質(zhì)提取法等，這些創(chuàng)新的鞣質(zhì)提取法將傳統(tǒng)與現(xiàn)代的方法結(jié)合，最大限度提高了鞣質(zhì)的提取效率，為鞣質(zhì)在現(xiàn)實(shí)世界的應(yīng)用提供了更加廣闊的前景。2、鞣質(zhì)的分離方法當(dāng)前研究的鞣質(zhì)分離方法也有很多種，包括分級(jí)沉淀分離鞣質(zhì)法，活性炭吸附分離鞣質(zhì)法，離子交換分離鞣質(zhì)法等。2.1分級(jí)沉淀法分級(jí)沉淀分離鞣質(zhì)法是基于鞣質(zhì)中不同物質(zhì)的溶解度有所差別，使用濃度不同的溶解劑，比如說(shuō)甲醇、乙醇等，可以達(dá)到分級(jí)分離鞣質(zhì)的目的，一般來(lái)說(shuō)都使用乙醇作為溶質(zhì)分級(jí)沉淀的溶解劑，先使用明膠將宗鞣質(zhì)沉淀，之后在沉淀物中加入丙酮溶液，將鞣質(zhì)釋放出來(lái)，可以初步將老鸛草提取液分離出來(lái)，明膠溶液可以?xún)?yōu)化鞣質(zhì)的沉淀分級(jí)工藝，有機(jī)溶液對(duì)于機(jī)械設(shè)備的要求也相對(duì)較低，成本也較低，但是這種方法分離的鞣質(zhì)不容易分離有害物質(zhì)，這種方法分離鞣質(zhì)的安全性還沒(méi)有完全得到認(rèn)可。2.2活性炭吸附活性炭是一種含碳的多孔物質(zhì)，活性炭的孔隙構(gòu)造高度發(fā)達(dá)，正是由于活性炭的孔隙構(gòu)造高度發(fā)達(dá)，使得活性炭可以為鞣質(zhì)分離提供大面積的平面，活性炭可以與鞣質(zhì)流體充分接觸，從而賦予活性炭更強(qiáng)的吸附功能，使得活性炭輕易將流體中的雜質(zhì)去除，使用活性炭可以去除鞣質(zhì)流體中的色素、樹(shù)膠等雜質(zhì)，可以一定程度上提高鞣質(zhì)提取的質(zhì)量，鞣質(zhì)的透射率顯著提高。2.3大孔樹(shù)脂吸附大孔樹(shù)脂的吸附法也有其優(yōu)勢(shì)所在，大孔樹(shù)脂吸附法可以進(jìn)一步分離和優(yōu)化鞣質(zhì)，一般非極性物質(zhì)在極性介質(zhì)(水)中容易被非極性樹(shù)脂吸附，極性物質(zhì)在非極性介質(zhì)中容易被極性樹(shù)脂吸附，具有較強(qiáng)極性基團(tuán)的吸附劑在非極性溶劑中可以很好的吸附極性化合物。聚苯乙烯樹(shù)脂一般適用于非極性和弱極性物質(zhì)的化合物，如皂甙和類(lèi)黃酮。聚丙烯酸樹(shù)脂一般有酯基或酰基氨基，它們能很好地吸附中等極性和極性化合物，如黃酮醇和酚類(lèi)。李青等采用D141大孔樹(shù)脂對(duì)藏邊大黃鞣質(zhì)進(jìn)行分離純化。D141大孔樹(shù)脂靜態(tài)吸附鞣制質(zhì)量為27.5mg/g。大孔樹(shù)脂具有吸附選擇性好、再生簡(jiǎn)單、解吸條件溫和、使用周期長(zhǎng)、易形成閉路、節(jié)約成本等優(yōu)點(diǎn)，可廣泛應(yīng)用于物質(zhì)的分離純化。2.4膜分離技術(shù)膜分離技術(shù)是選擇性地透過(guò)膜為分離介質(zhì),當(dāng)有一定的推力(如壓力差、濃度差和電位差)兩岸的膜,原料端組件根據(jù)分子大小選擇性地透過(guò)膜,以達(dá)到分離純化的目的。該方法具有效率高、幾乎無(wú)相變、常溫操作、工藝簡(jiǎn)單、操作方便、投資低等優(yōu)點(diǎn)。它已成為一種新型的綠色節(jié)能的澄清、分離、濃縮技術(shù)。杜云平等采用膜分離技術(shù)對(duì)板栗苞片單寧的純化工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，在最佳工藝條件下，緩凝液中單寧含量可達(dá)64%左右，濁度在0以下。8濁度單元(NTU)。該方法具有操作簡(jiǎn)單、效率高、節(jié)能環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)單寧生產(chǎn)工藝提供了技術(shù)參考。2.5離子交換技術(shù)離子交換技術(shù)是基于某些溶質(zhì)解出陽(yáng)離子或陰離子的特點(diǎn),使用離子交換劑和不同離子約束力的強(qiáng)度差異,暫時(shí)溶質(zhì)交換離子交換劑,然后溶質(zhì)離子與一個(gè)合適的洗脫液洗脫,分離和富集溶質(zhì)的解決方案或凈化技術(shù)。為了獲得高純度的多肽組分，先后采用離子交換層析和凝膠過(guò)濾純化，采用水酶法提取菜籽粗肽。經(jīng)離子交換層析純化后，糖和單寧含量明顯下降。2.6凝膠柱色譜凝膠柱色譜法是一種用多孔凝膠填料作為固定相，按分子大小將樣品的各組分分離的液相色譜法。sephadexhl-20是最常用的單寧分離凝膠。主要用于分離不同聚合度的單寧，分離受各單寧的吸附影響，不受凝膠過(guò)濾的影響。原花青素可以用SephadexLH-20柱層析法分離，先用乙醇洗脫非鞣質(zhì)成分，再用丙酮-水或乙醇-水洗脫原花青素。2.7液滴逆流色譜法和高速逆流色譜法近年來(lái)，液滴逆流色譜(DCCC)已被用來(lái)替代液相色譜法分離多酚類(lèi)物質(zhì)。優(yōu)點(diǎn)是操作條件溫和，樣品負(fù)荷高，分離能力強(qiáng)，不需要固體支撐，避免了因吸附各種物質(zhì)而造成單寧的損失。高速逆流色譜(HSCCC)是在DCCC的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的，彌補(bǔ)了DCCC發(fā)展時(shí)間長(zhǎng)的缺點(diǎn)。采用HSCCC分離花青素。溶劑體系為叔丁基甲基醚/正丁醇/乙腈/水(2∶2∶1∶5)，以三氟乙酸為溶劑。2.8高效液相色譜法高效液相色譜法(HPLC)已被廣泛應(yīng)用于多酚類(lèi)物質(zhì)的分離。正相高效液相色譜法可以根據(jù)聚合度對(duì)原花青素進(jìn)行分離，最高可達(dá)十聚體。用反相高效液相色譜法可以分離黃烷-3-醇類(lèi)單體和低聚物，特別是二聚體和三聚體，但洗脫的順序與聚合度無(wú)關(guān)。3、結(jié)語(yǔ)近年來(lái)，我國(guó)對(duì)單寧的研究十分活躍，各種分離和分析單寧的新方法不斷涌現(xiàn)，為單寧的研究提供了新的思路和方法。但目前單寧的提取、分離和含量測(cè)定方法多集中在總單寧上，對(duì)某一類(lèi)單寧較少，希望在今后的研究中更具針對(duì)性。我國(guó)對(duì)單寧的研究還處于起步階段，研究水平較低。參考文獻(xiàn)：[1]孟凡恒,李佳佳,董興童,等.仙鶴草中鞣質(zhì)類(lèi)成分的提取分離鑒定實(shí)驗(yàn)[J].山東化工,2019(13).[2]楊志剛,鄭文惠,張凱雪,等.沙棘葉中鞣質(zhì)類(lèi)成分及其抗炎和抗肥胖活性研究[J].中草藥,2019,50(12).[3]胡夢(mèng).百藥煎傳統(tǒng)炮制過(guò)程中微生物的分離、鑒定及降解鞣質(zhì)最佳菌種組合的篩選[D].2019.[4]李博,彭靜,郭立瑋,等.基于Her