基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和體外實驗驗證木犀草素抑制膀胱癌細(xì)胞的增殖

基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和體外實驗驗證木犀草素抑制膀胱癌細(xì)胞的增殖1.1研究背景1.2研究意義進(jìn)一步探索其在治療膀胱癌方面的潛力提供1.3研究目的木犀草素(Luteolin)是一2.2膀胱癌的發(fā)病機制2.3網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)在藥物發(fā)現(xiàn)中的應(yīng)用2.4體外實驗在細(xì)胞增殖研究中的重要性細(xì)胞增殖實驗：將處于對數(shù)生長期的膀胱癌細(xì)胞接種于96孔板中，每孔2000個細(xì)胞。設(shè)置空白對照組(不含藥物),以及不同濃度的木犀草素處理組(木犀草素質(zhì)量濃度分別為、200molL),每組設(shè)6個復(fù)照組置于相同條件下繼續(xù)培養(yǎng)24小時后，通過MTT法檢測各孔的光數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析：采用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計算各處理組和對照組之間的OD值比值，以衡量木犀草素對膀胱癌細(xì)胞增殖的抑Science等),獲取木犀草素及其相關(guān)化合物的藥理作用信息。結(jié)合文3.1細(xì)胞培養(yǎng)胞的生長情況。通常情況下，BCG8細(xì)胞在2448小時后即可開始貼壁生長。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到約80時，我們可以進(jìn)行后續(xù)實驗操作。3.1.1膀胱癌細(xì)胞株的培養(yǎng)在培養(yǎng)過程中，使用DMEM培養(yǎng)基(含10胎牛血清、1青鏈霉素),并添加100gml的氟達(dá)拉濱(Fludarabine)以抑制細(xì)胞增殖。將BCGHS5和BLCA42細(xì)胞株分別接種于6孔板中，每孔約5104個細(xì)胞。在37C、5C02的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每24小時更換一次培養(yǎng)液。3.1.2MTT法測定細(xì)胞增殖抑制率我們需要將膀胱癌細(xì)胞接種到96孔板中，每個孔接種等量的細(xì)胞。我們分別將不同濃度的木犀草素溶液加入到96孔板中，使藥物3.2木犀草素的提取與檢測佳的乙醇提取條件為：用10的乙醇提取24h,收集上清液。通過硅犀草素純品收率為85。3.3網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)模型的建立與驗證的生物活性數(shù)據(jù)，包括其在不同濃度下的IC50值。我們構(gòu)建了一個3.4體外實驗設(shè)計外實驗方法。我們選擇了一些典型的膀胱癌細(xì)胞株，如BCGCB743和膀胱癌細(xì)胞株接種于96孔板中，每孔1000個細(xì)胞。分別加入不同濃將各孔加入含有已知濃度的噻唑藍(lán)(MTT)溶液100L,繼續(xù)培養(yǎng)24小時。濃度(IC。察到木犀草素對膀胱癌細(xì)胞DNA合成和核DNA含量的影響，進(jìn)一步證在體外實驗中，我們觀察到木犀草素對膀胱癌細(xì)胞株B746和BL623的增殖具有明顯的抑制作用。通過MTT法檢測，木犀草素處理后的細(xì)胞存活率顯著低于對照組(P),表明木犀草素能夠有效抑制膀后的膀胱癌細(xì)胞凋亡率明顯增加(P),進(jìn)一步證實了木犀草素對膀胱要作用于靶點G2M期蛋白激酶RAFMAPK1和ERK12。這些靶點的活化4.1木犀草素對膀胱癌細(xì)胞株生長的影響4.2木犀草素對膀胱癌細(xì)胞株凋亡的影響原來的95降至50,同時出現(xiàn)典型的凋亡形態(tài)，如核固縮、胞質(zhì)皺縮存活率由原來的85降至30,同樣出現(xiàn)了典型的凋亡形態(tài)。4.3木犀草素對膀胱癌細(xì)胞株周期的影響細(xì)胞株(如B7的影響。我們將不同濃度的木犀草素加入到培養(yǎng)基中，分裂期所占比例逐漸增加，而GOG1期所占比例逐漸減少。這表明木4.4木犀草素對膀胱癌細(xì)胞株遷移能力的影響5.討論與結(jié)論5.1木犀草素抑制膀胱癌細(xì)胞增殖的作用機制探討