假病毒真本領助力疫苗開發(fā)、病毒學研究、中和抗體篩選

假病毒真本領，助力疫苗開發(fā)、病毒學研究、中和抗體篩選許多能夠引起人類疾病的病毒屬于包膜病毒，如新冠病毒、猴痘病毒、流感病毒、埃博拉病毒、狂犬病毒、基孔肯雅病毒等。這些病毒株的獲得是一個復雜耗時的過程，且危險性高，需要在生物安全3級或4級實驗室進行，嚴重限制了研究、預防和治療效率。假病毒（Pseudovirus）技術的出現(xiàn)解決了這些難題。假病毒基于包膜蛋白構(gòu)建，不需要分離培養(yǎng)活病毒，且只能復制一次，可在BSL-2實驗室操作。假病毒含有報告基因，能夠模擬天然包膜病毒的表面特征，易于定量分析。根據(jù)核心基因組來源，假病毒可以分為3類：HIV-1基因組、VSV基因組和MLV基因組。假病毒在體外完成核心基因組和包膜蛋白的組裝，通過質(zhì)?；蚍€(wěn)定表達的細胞系表達包膜蛋白，用于感染靶細胞，模擬活病毒感染過程。不同假病毒獲取示意圖（源自文獻：doi:10.1016/j.micres.2022.126993）假病毒已成為病毒學研究中的重要工具之一。義翹神州已成功開發(fā)一系列高品質(zhì)假病毒產(chǎn)品，覆蓋SARS-CoV-2、MERS、流感等多種病毒，廣泛應用于病毒感染機制研究、血清中和抗體檢測以及疫苗效價評估、抗病毒藥物篩選和評價等研究。01病毒感染機制研究眾所周知，ACE2是SARS-COV-2的關鍵受體。但是在不表達ACE2的器官中也能檢測到該病毒，表明可能存在其他受體或共受體介導病毒感染。中國科學院昆明動物研究所賴仞團隊聯(lián)合多個研究團隊發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（TfR）直接與病毒刺突蛋白高親和力結(jié)合，是另一種介導SARS-COV-2感染的受體。Omicron假病毒證實過表達TfR和ACE2的細胞感染率更高。用SARS-COV-2原始毒株和Omicron突變假病毒（貨號：PSV017）感染過表達人TfR和ACE2的BHK-21細胞，結(jié)果顯示Omicron感染率更高。（源自文獻：doi:10.1073/pnas.2317026121）02中和抗體檢測清華大學向宇研究團隊通過對RBD的核酸適配體進行修飾，篩選獲得一種阻斷RBD-ACE2結(jié)合的共價化合物。此化合物通過與RBD形成共價鍵來中和SRAS-COV-2假病毒感染，使假病毒中和效應比對照高25倍以上。研究證實利用共價抑制機制開發(fā)新冠抑制劑抗病毒藥物潛力巨大。單克隆抗體和共價核酸適配體6C3-7SF、6C3、6C3-7PS的假病毒（貨號：PSV001）中和活性檢測結(jié)果（源自文獻：doi:10.26434/chemrxiv-2021-nd0r2-v2）03疫苗免疫效果的評價上海交通大學崔大祥團隊為提高亞單位疫苗免疫原性，研制了一種新型疫苗佐劑體系，獲得氧化石墨烯復合佐劑納米疫苗（GCR）及微針貼片疫苗（MGCR）。假病毒（貨號：PSV001）中和血清檢測數(shù)據(jù)顯示接種第2針疫苗后，GCR新型疫苗中和效果更好。接種GCR疫苗小鼠血清的假病毒中和活性（源自文獻：doi:10.7150/thno.83390）04抗病毒藥物篩選徐州醫(yī)科大學的鄭駿年、白津團隊首次發(fā)現(xiàn)PRMT5特異性抑制劑GSK3368595（全球臨床研究已進入Ⅱ期）能夠明顯抑制新冠病毒刺突蛋白與ACE2受體結(jié)合，抑制病毒感染宿主細胞。本研究通過設置抑制劑濃度、敲低或過表達PRMT5，檢測新冠假病毒（貨號：PSV001）感染過表達ACE2的HEK-293T或A549細胞，結(jié)果顯示GSK3368595能夠抑制新冠假病毒感染。GSK3368595抑制假病毒感染的實驗結(jié)果圖（源自文獻：doi:10.1002/jmv.28158）義翹神州假病毒產(chǎn)品及中和檢測服務產(chǎn)品優(yōu)勢★滴度高：≥105TCID50/mL，侵染細胞后Luciferase發(fā)光值達106RLU★真實性好：采用HIV-1框架，表面表達病毒入侵細胞關鍵蛋白，可模擬真病毒侵染細胞機制★安全性強：僅可一次性感染細胞，無自主復制能力、無致病性★驗證全：多樣本驗證（血清、中和抗體），與真病毒檢測結(jié)果吻合度高★穩(wěn)定性強：質(zhì)控方法可靠，批次間穩(wěn)定，可以長期穩(wěn)定制備和供應?客戶評價客戶使用產(chǎn)品：客戶使用產(chǎn)品信息SARS-CoV-2(D614G)SpikePseudovirus(Cat#:PSV005)SARS-CoV-2(B.1.351)SpikePseudovirus(Cat#:PSV008)SARS-CoV-2(B.1.617.2)SpikePseudovirus(Cat#:PSV011)SARS-CoV-2(B.1.1.529)SpikePseudovirus(Cat#:PSV016)應用：>報告基因?qū)嶒灒翰煌局甑募俨《靖腥痉€(wěn)定表達ACE2的293T細胞。>假病毒中和實驗：Con.EVs和PM-ACE2-EVs對不同毒株假病毒的中和效果。使用評價：假病毒在穩(wěn)定表達ACE2的293T細胞中感染，使用前一定要小量分裝，避免反復凍融，保證病毒效價，實驗結(jié)果穩(wěn)定可靠?？蛻籼峤坏募俨《靖腥窘Y(jié)果圖?義翹神州假病毒產(chǎn)品列表貨號產(chǎn)品名稱PSV030SARS-CoV-2XBB.1.5(Omicron)SpikePseudovirusPSV038SARS-CoV-2EG.5.1(Omicron)SpikePseudovirusPSV039SARS-CoV-2JN.1(Omicron)SpikePseudovirusPSV004InfluenzaAH3N2(A/Panama/2007/1999)PseudovirusPSV036InfluenzaB(B/Austria/1359417/2021)Pseudovirus免責聲明：義翹神州內(nèi)容團隊僅是分享和解讀公開的研究論文及其發(fā)現(xiàn)，專注于介紹全球生物醫(yī)藥研究新進展。本文僅作信息交流用，文中觀點不代表義翹神州立場。隨著對疾病機制研究的深入，新的實驗結(jié)果或結(jié)論可能會修改或推翻文中的描述，還請大家理解。本文不屬于治療方案推薦，如需獲得治療方案指導，請前往正規(guī)醫(yī)院就診。【參考文獻】1.QiXiang,etal.Applicationofpseudovirussysteminthedevelopmentofvaccine,antiviral-drugs,andneutralizingantibodies.MicrobiologicalResearch,2022./10.1016/j.micres.2022.1269932.ZhiyiLiao,etal.HumantransferrinreceptorcanmediateSARS-CoV-2infection.PNAS,2024./10.1073/pnas.23170261213.ZichenQin,YiyingZhuandYuXiang,CovalentBondingAptamerwithEnhancedSARS-CoV-2RBD-ACE2BlockingandPseudovirusNeutralizationActivities.ChemRxiv,2021.doi:10.26434/chemrxiv-2021-nd0r2-v24.AngGao,etal.DevelopinganefficientMGCRmicroneedlenanovaccinepatchforelicitingTh1cellularresponseagainsttheSARS-CoV-2infection.Theranostics,2023.doi:10.7150/thno.833905.ZhongweiLi,etal.GSK