山東省藁城市第一中學2025屆生物高三上期末質量跟蹤監(jiān)視模擬試題含解析

山東省藁城市第一中學2025屆生物高三上期末質量跟蹤監(jiān)視模擬試題考生請注意：1．答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內，不得在試卷上作任何標記。2．第一部分選擇題每小題選出答案后，需將答案寫在試卷指定的括號內，第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3．考生必須保證答題卡的整潔?？荚嚱Y束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．人體成熟紅細胞由骨髓中造血干細胞增殖分化形成，富含血紅蛋白，用來運輸氧氣。下列有關敘述錯誤的是（）A．血紅蛋白不屬于內環(huán)境成分B．人體成熟紅細胞與造血干細胞的遺傳物質相同C．人體成熟紅細胞吸收葡萄糖的速率不受氧氣濃度的影響D．溫度升高會影響鉀離子進入紅細胞的速率2．下列關于生物技術在生活中應用的說法，錯誤的是（）A．利用發(fā)酵技術，在鮮奶中加入乳酸菌可制成酸奶B．制作泡菜的壇子加水密封是為了抑制乳酸菌繁殖C．制葡萄酒時，要將溫度控制在18～25℃D．變酸果酒表面的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的3．各種育種方式，為人類的生產(chǎn)實踐提供了豐富的材料，下列關于育種的敘述，正確的是（）A．黑農5號大豆和轉基因抗蟲棉的育種原理分別是染色體變異和基因重組B．三倍體無籽西瓜有機物含量高且高度不育，但仍屬可遺傳變異C．利用誘變育種，誘發(fā)家蠶常染色體基因移到性染色體上，其原理是基因突變D．單倍體育種可通過對花藥離體培養(yǎng)獲得的單倍體種子進行秋水仙素處理以獲得穩(wěn)定遺傳的后代4．“海底黑煙囪”是指海底富含硫化物的高溫熱液活動區(qū)，其熱液噴出時形似“黑煙”。此區(qū)域是高溫、高壓、沒有陽光和缺乏氧氣的極端環(huán)境，卻發(fā)現(xiàn)了許多前所未見的生物，包括大得出奇的紅蛤、海蟹、血紅色的管蟲、形狀類似蒲公英的水螅生物、蠕蟲及硫細菌（類似硝化細菌）等許多生物。下列說法正確的是（）A．該生態(tài)系統(tǒng)的能量輸入是這里特殊的生產(chǎn)者固定的太陽能B．當前科學家利用該區(qū)域的某些生物研制耐熱酶，體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值C．“海底黑煙囪”生態(tài)系統(tǒng)中的生物種間關系包括捕食、競爭等D．“海底黑煙囪”中的細菌若移到地面實驗室富氧環(huán)境里，其數(shù)量會呈“S”型增長5．中華文明傳承五千多年，積淀了豐富的生態(tài)智慧。如“天人合一”的基本內涵就是人與自然的和諧共處。根據(jù)這一思想和生態(tài)學知識，下列說法不正確的是（）A．適時、有計劃地采伐、捕撈有利于保護生態(tài)系統(tǒng)，體現(xiàn)了人與自然和諧共處B．生物多樣性對維持生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性具有重要作用，體現(xiàn)了其間接價值C．人類應以保持生態(tài)系統(tǒng)相對穩(wěn)定為原則，確定自己的消耗標準D．若“天人合一”，農業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中物質便可自我循環(huán)，但能量需系統(tǒng)外提供6．生物科學是一門實驗科學，下列有關生物學實驗的敘述正確的是（）A．番茄汁和胡蘿卜汁是檢測還原糖是否存在的良好材料B．取菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮觀察葉綠體的原因是此處的葉肉細胞中的葉綠體多而大C．制作人的口腔上皮細胞臨時裝片觀察線粒體時，需在潔凈載玻片中央滴一滴生理鹽水D．由于菠菜葉肉細胞的原生質層呈現(xiàn)綠色，所以可以用它作材料觀察質壁分離現(xiàn)象7．下列有關細胞的結構和功能的敘述，正確的是（）A．載體蛋白是鑲在細胞膜內外表面的蛋白質B．細胞識別與糖蛋白中蛋白質有關，與糖鏈無關C．線粒體DNA位于線粒體外膜上，編碼參與呼吸作用的酶D．細胞產(chǎn)生的激素與靶細胞膜上相應受體的結合可實現(xiàn)細胞間的信息傳遞8．（10分）下列發(fā)生在高等植物細胞內的化學反應，只能在細胞器中進行的是（）A．CO2的生成 B．肽鏈的形成C．RNA的合成 D．葡萄糖的分解二、非選擇題9．（10分）CAR-T細胞療法是通過設計CAR基因，并導入癌癥患者的T細胞中，使其轉化為CAR-T細胞，CAR-T細胞膜上的CAR蛋白與癌細胞表面抗原特異結合后，激活CAR-T細胞使其增殖、分化，從而實現(xiàn)對癌細胞的特異性殺傷和記憶，主要過程如下圖。請回答：(1)過程①中，需要先要用____切割不同的DNA片段形成黏性末端，再利用____連接形成CAR基因。(2)將CAR基因導入患者T細胞前，必須先完成過程②，一是因為CAR基因片段小，在細胞中容易丟失;二是因為缺少____，CAR基因在T細胞中不能復制。(3)完成過程③常用方法是____。此外，還可以先將CAR基因整合到逆轉錄病毒載體中，再利用病毒的____性導入并將CAR基因整合到T細胞的____上。(4)根據(jù)圖示，CAR-T細胞對癌細胞的特異性殺傷主要取決于CAR蛋白____區(qū)。CAR-T細胞療法具有持久性是因為CAR-T細胞能夠在體內____。10．（14分）下表是某微生物培養(yǎng)基的配方。請分析回答下列問題：編號①②③④⑤成分（NH2）2SO2KH2PO2FeSO2CaCl2H2O含量1．2g2．1g1．5g1．5g111mL（1）培養(yǎng)基的配方是要根據(jù)微生物的營養(yǎng)需求而設定的，從培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分看，此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)的微生物同化作用類型是_________。利用該培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時，微生物所需要的碳源來自_____。為防止雜菌污染，常用____________________的方法對培養(yǎng)基滅菌。（2）若要觀察微生物的菌落的特點，培養(yǎng)基中還應添加的成分是_____。鑒定菌種時，可根據(jù)菌落的_________（至少答兩點）等方面的特征。菌落計數(shù)時，一般選取菌落數(shù)為_________之間的平板，該方法統(tǒng)計的菌落數(shù)量比實際活菌數(shù)目少，原因是_____________。（3）如果在上面的配方中加入一定的纖維素，就可以富集培養(yǎng)_________微生物，在篩選該菌種的過程中，通常用_____染色法，這種方法能夠通過顏色反應直接對該菌種進行篩選。為了長期保存該菌種，可以采用_____的方法。11．（14分）下圖是某基因工程中構建重組質粒的過程示意圖，載體質粒P0具有四環(huán)素抗性基因（tetr）和氨芐青霉素抗性基因（ampr）。請回答下列問題：（1）EcoRⅤ酶切位點為，EcoRⅤ酶切出來的線性載體P1為_______末端。（2）用TaqDNA聚合酶進行PCR擴增獲得目的基因片段，其兩端各自帶有一個腺嘌呤脫氧核苷酸，載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個堿基為_______的脫氧核苷酸，形成P2，P2和目的基因片段在_______酶作用下，形成重組質粒P3。PCR技術中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內的DNA聚合酶，其最主要的特點是_____________________________________。

（3）PCR技術可以臨床用于診斷感染性疾病、腫瘤及遺傳病等，它是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，其標準步驟為_______、退火、__________。（4）重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了___________________。若該目的基因是從cDNA文庫中分離獲取的蔗糖轉運蛋白基因，將重組質粒導入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體中，然后在_______為唯一含碳營養(yǎng)物質的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測。12．以下是生態(tài)系統(tǒng)相關問題，請回答：（1）野外的成年華南虎通常將尿液噴灑在樹枝上作為確定它們領地的一種標志，這是一種______信息。虎能夠依據(jù)獵物留下的氣味去獵捕后者，獵物同樣也能夠依據(jù)虎的氣味或行為特征躲避獵捕，這體現(xiàn)了信息的作用為___________________________。（2）圖是能量流經(jīng)華南虎種群的示意圖，其中A表示華南虎的攝入量。那么，B、C分別表示華南虎的__________、____________。若要確保華南虎的能量需求，按能量傳遞效率10%計算，其生存領地的相關植物所固定的能量至少應達到B的_________倍。（3）生態(tài)系統(tǒng)自我調節(jié)能力的基礎是__________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

哺乳動物成熟的紅細胞無細胞核和細胞器，其吸收葡萄糖的方式為協(xié)助擴散，需要載體，不消耗能量。內環(huán)境由組織液、血漿和淋巴組成，凡是存在于上述溶液中的物質或反應都屬于內環(huán)境中的成分和反應?！驹斀狻緼、內環(huán)境是指細胞外液，血紅蛋白存在于紅細胞內，不屬于內環(huán)境成分，A正確；B、人體成熟紅細胞無細胞核和眾多細胞器，無遺傳物質，而骨髓中造血干細胞含有遺傳物質，B錯誤；C、葡萄糖進入人體成熟紅細胞的方式是協(xié)助擴散，不消耗能量，與細胞內氧氣濃度無關，C正確；D、溫度升高會影響細胞膜的流動性，從而影響鉀離子進入紅細胞的速率，D正確。故選B。【點睛】理解哺乳動物成熟紅細胞的結構特點、吸收葡萄糖的運輸方式是解題的關鍵點。2、B【解析】

1、果酒和果醋的制作：果酒制作需要的微生物是酵母菌，屬于兼性厭氧菌，生長的最適溫度為18～25℃，因此發(fā)酵時一般將溫度控制在該范圍內。果醋發(fā)酵的微生物是醋酸桿菌，屬于好氧型微生物，生長是最適溫度為30～35℃，因此發(fā)酵時控制在該溫度范圍內，利用發(fā)酵的果酒通入氧氣和升高溫度可以進行果醋的發(fā)酵，酒精發(fā)酵為乙酸。2、制作泡菜和酸奶的過程中發(fā)酵的微生物主要是乳酸菌，屬于厭氧菌，因此發(fā)酵過程要采取一定的措施保證厭氧的條件，利用乳酸菌的發(fā)酵。【詳解】A、制酸奶要用到乳酸菌，乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸，使得酸奶有一種特殊的酸味，A正確；B、乳酸菌屬于厭氧菌，制作泡菜時要密封，創(chuàng)造無氧環(huán)境，利于乳酸菌的繁殖，B錯誤；C、根據(jù)以上分析可知，由于酵母菌適宜生長的溫度是18～25℃，因此制葡萄酒時，要將溫度控制在18～25℃，C正確；D、在變酸的果酒表面觀察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖形成的，D正確。故選B。3、B【解析】

四種育種方法的比較如下表：雜交育種誘變育種單倍體育種多倍體育種方法雜交→自交→選優(yōu)輻射誘變、激光誘變、化學藥劑處理花藥離體培養(yǎng)、秋水仙素誘導加倍秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗原理基因重組基因突變染色體變異（染色體組先成倍減少，再加倍，得到純種）染色體變異（染色體組成倍增加）【詳解】A、黑農5號大豆是誘變育種的結果，其育種原理為基因突變；轉基因抗蟲棉是基因工程育種的結果，其育種原理是基因重組，A錯誤；

B、三倍體無籽西瓜有機物含量高且高度不育，其原理是染色體數(shù)目變異，所以仍屬可遺傳變異，B正確；

C、利用誘變育種，誘發(fā)家蠶常染色體基因移到性染色體上，其原理是染色體結構變異，C錯誤；

D、由于單倍體高度不育，不能結種子，所以單倍體育種可通過對花藥離體培養(yǎng)獲得的單倍體幼苗進行秋水仙素處理以獲得穩(wěn)定遺傳的后代，D錯誤。

故選B?！军c睛】本題考查育種的相關知識，要求考生識記幾種育種方法的原理、方法、優(yōu)點、缺點及實例，能結合所學的知識準確判斷各選項。4、C【解析】

分析：“海底黑煙囪"是高溫、高壓、沒有陽光和缺乏氧氣的極端環(huán)境，與地表環(huán)境有很大不同，其能源是來自于地熱和硫化氫的氧化，其中生活的紅蛤、海蟹、管蟲、水螅生物、蠕蟲及硫細菌等生物之間也存在著復雜的種間關系。【詳解】A、該生態(tài)系統(tǒng)的能量輸入是這里特殊的生產(chǎn)者通過化能合成作用獲得的能量，A錯誤；B、利用該生態(tài)系統(tǒng)中的生物研制耐熱酶，體現(xiàn)的是生物多樣性的直接價值，B錯誤；C、“海底黑煙囪”生態(tài)系統(tǒng)中的生物如紅蛤、海蟹、管蟲、水螅生物、蠕蟲及硫細菌等生物種間存在捕食、競爭等關系，C正確；D、“海底黑煙囪”是高溫、高壓、沒有陽光和缺乏氧氣的極端環(huán)境，將其中的細菌移到地面實驗室富氧環(huán)境里，細菌會死亡，D錯誤。故選C。5、D【解析】

1.生物多樣性的價值：（1）直接價值：對人類有食用、藥用和工業(yè)原料等使用意義，以及有旅游觀賞、科學研究和文學藝術創(chuàng)作等非實用意義的。（2）間接價值：對生態(tài)系統(tǒng)起重要調節(jié)作用的價值（生態(tài)功能）。（3）潛在價值：目前人類不清楚的價值。2.生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性具有相對性，當受到大規(guī)模干擾或外界壓力超過該生態(tài)系統(tǒng)自身更新和自我調節(jié)能力時，便可導致生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的破壞、甚至引發(fā)系統(tǒng)崩潰。3.可持續(xù)發(fā)展的含義：在不犧牲未來幾代人需要的情況下，滿足我們這代人的需求，它追求的是自然、經(jīng)濟、社會的持久而協(xié)調的發(fā)展?！驹斀狻緼、適時、有計劃地采伐、捕撈有利于生態(tài)系統(tǒng)的保護，體現(xiàn)了人與自然和諧共生，A正確；B、生物多樣性對維持生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性具有重要作用，這屬于生態(tài)功能，體現(xiàn)了其間接價值，B正確；C、人類應以保持生態(tài)系統(tǒng)相對穩(wěn)定為原則，確定自己的消耗標準，C正確；D、農業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中，由于生態(tài)系統(tǒng)中的物質以產(chǎn)品形式不斷輸出，因此仍然依賴于系統(tǒng)外的供應，D錯誤。故選D。6、D【解析】

1、斐林試劑可用于鑒定還原糖，在水浴加熱的條件下，溶液的顏色變化為磚紅色（沉淀）。2、葉綠體主要分布于綠色植物的葉肉細胞，呈綠色，扁平的橢球形或球形，散布于細胞質中，可用高倍顯微鏡觀察其形態(tài)和分布。3、健那綠染液能專一性地使活細胞中的線粒體呈現(xiàn)藍綠色，而細胞質接近無色。通過染色，可在高倍顯微鏡下觀察到生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)和分布。【詳解】A、番茄汁呈紅色，胡蘿卜汁呈橙色，會影響還原糖的檢測中磚紅色沉淀的觀察，因此不適宜做還原糖的檢測，A錯誤；B、取菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮觀察葉綠體的原因是此處的葉肉細胞中的葉綠體少而大，B錯誤；C、制作人的口腔上皮細胞臨時裝片觀察線粒體時，必需先在潔凈的載玻片中央滴一滴健那綠染液，C錯誤；D、由于菠菜葉肉細胞的原生質層呈現(xiàn)綠色，所以可以用它作材料觀察質壁分離現(xiàn)象，D正確。故選D。7、D【解析】

本題考查了細胞膜以及線粒體的結構和功能。細胞膜主要由脂質與蛋白質構成，還含有少量的糖類。在細胞膜的外表面，有一層由蛋白質和糖類結合形成的糖蛋白，也叫糖被。它在細胞的生命活動中具有重要功能，如保護、潤滑、識別等作用。激素與靶細胞膜上相應受體的結合屬于細胞之間交流中的間接信息交流。線粒體是具有雙層膜的半自主性細胞器，其遺傳物質DNA位于基質中。【詳解】A、載體蛋白都是跨膜蛋白，它貫穿在整個磷脂雙分子層中，A錯誤；B、細胞識別與細胞膜外側的糖蛋白有關，而糖蛋白由蛋白質和多糖組成，B錯誤；C、線粒體DNA位于線粒體的基質中，C錯誤；D、細胞產(chǎn)生的激素作用于靶細胞膜上相應受體，實現(xiàn)細胞間的信息傳遞，D正確。故選D。8、B【解析】

各種細胞器的結構、功能：細胞器分布形態(tài)結構功能線粒體動植物細胞雙層膜結構有氧呼吸的主要場所，細胞的“動力車間”葉綠體植物葉肉細胞雙層膜結構植物細胞進行光合作用的場所；植物細胞的“養(yǎng)料制造車間”和“能量轉換站”。內質網(wǎng)動植物細胞單層膜形成的網(wǎng)狀結構細胞內蛋白質的合成和加工，以及脂質合成的“車間”高爾基體動植物細胞單層膜構成的囊狀結構對來自內質網(wǎng)的蛋白質進行加工、分類和包裝的“車間”及“發(fā)送站”（動物細胞高爾基體與分泌有關；植物則參與細胞壁形成）核糖體動植物細胞無膜結構，有的附著在內質網(wǎng)上，有的游離在細胞質中合成蛋白質的場所，“生產(chǎn)蛋白質的機器”溶酶體動植物細胞單層膜形成的泡狀結構“消化車間”，內含多種水解酶，能分解衰老、損傷的細胞器，吞噬并且殺死侵入細胞的病毒和細菌。液泡成熟植物細胞單層膜形成的泡狀結構；內含細胞液（有機酸、糖類、無機鹽、色素和蛋白質等）調節(jié)植物細胞內的環(huán)境，充盈的液泡使植物細胞保持堅挺中心體動物或某些低等植物細胞無膜結構；由兩個互相垂直的中心粒及其周圍物質組成與細胞的有絲分裂有關【詳解】A、CO2可以在植物細胞無氧呼吸過程中產(chǎn)生，場所是細胞質基質，A錯誤；B、肽鏈的形成在核糖體上完成，B正確；C、RNA的合成主要在細胞核中，C錯誤；D、葡萄糖的分解發(fā)生在細胞質基質中，D錯誤。故選B?！军c睛】此題考查細胞中幾種重要代謝活動的場所，側重考查理解能力。二、非選擇題9、限制性內切酶DNA連接酶復制原點顯微注射侵染染色體DNA胞外結合形成記憶細胞【解析】

根據(jù)題意可得，CAR-T細胞療法實際為通過基因工程改變患者T細胞的基因，使其能夠產(chǎn)生CAR蛋白以特異性殺傷癌細胞。過程①表示獲取目的基因，過程②表示獲得重組DNA分子，過程③表示將重組DNA分子轉入受體細胞；過程④表示對癌細胞的特異性殺傷和記憶?！驹斀狻浚?）過程①獲取目的基因時，需要的工具酶為限制性核酸內切酶和DNA連接酶，用限制性核酸內切酶切割不同的DNA片段，再利用DNA連接酶形成CAR基因；（2）基因的復制需要復制原點，過程①獲得的CAR基因不包含復制原點，所以需要與pCDH質粒結合，由pCDH質粒提供復制原點；（3）受體細胞為動物細胞時，常用的將重組DNA分子導入受體細胞的方式為顯微注射法；病毒為寄生生物，因此可利用病毒的侵染性將CAR基因整合到受體細胞的染色體DNA上；（4）根據(jù)題圖分析，CAR-T細胞對癌細胞的特異性殺傷是通過與癌細胞特異性結合再使癌細胞裂解，故起主要作用的是CAR蛋白的胞外結合區(qū)，CAR-T細胞療法具有持久性是因為CAR-T細胞與細胞免疫相似，能夠在體內形成記憶細胞。【點睛】重組DNA分子根據(jù)受體細胞的不同需要選擇不同的方式進行導入，動物細胞常采用顯微注射法，植物細胞采用農桿菌轉化法，微生物采用氯化鈣處理。答題時需要結合題目信息判斷受體細胞類型，選擇適當?shù)膶敕椒ā?0、自養(yǎng)型空氣中的二氧化碳高壓蒸汽滅菌瓊脂形狀、大小、隆起程度、顏色、透明度31-311統(tǒng)計的一個菌落可能來自兩個或兩個以上細胞分解纖維素剛果紅甘油管藏【解析】

培養(yǎng)基為微生物提供生長、繁殖和積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)物質；營養(yǎng)物質歸納為碳源、氮源、生長因子、無機鹽和水；根據(jù)化學成分分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基等根據(jù)用途分選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基；根據(jù)性質分為液體、半固體和固體培養(yǎng)基?！驹斀狻浚?）據(jù)表分析，該培養(yǎng)基的配方中主要的營養(yǎng)物質有氮源硫酸銨、無機鹽和水，缺少碳源，所以此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)的微生物同化作用類型是自養(yǎng)型；該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物的碳源來自于空氣中的二氧化碳；對微生物培養(yǎng)基滅菌通常用高壓蒸汽滅菌。（2）微生物的菌落需要在固體培養(yǎng)基的表面生長，因此培養(yǎng)基中需要添加凝固劑—瓊脂，使液體培養(yǎng)基凝固成固體培養(yǎng)基；鑒定菌種時，可根據(jù)菌落形狀、大小、隆起程度、顏色、透明度特征進行鑒定；菌落計數(shù)時，常用稀釋涂布平板，一般選取菌落數(shù)為31-311之間的平板；用該方法統(tǒng)計時，由于一個菌落可能來自兩個或兩個以上細胞繁殖而成，所以統(tǒng)計的菌落數(shù)量往往比活菌的實際數(shù)量少。（3）可以根據(jù)微生物對營養(yǎng)物質的需求，選擇培養(yǎng)特定的微生物，所以在上面的配方中加入一定的纖維素，就可以富集培養(yǎng)分解纖維素的微生物；通常利用剛果紅染色法來篩選纖維素分解菌，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物；長期保存菌種，可以采用甘油管藏的方法，即將菌液轉移到甘油中，與甘油充分混合后，放在-21℃的冷藏箱中保存?！军c睛】解答此題要求考生識記無菌技術，掌握微生物培養(yǎng)的一般條件和分離微生物的方法，能結合所學的知識準確答題。11、平胸腺嘧啶（T）DNA連接酶耐高溫變性延伸鑒別和篩選含目的基因的細胞蔗糖【解析】

1、基因表達載體的基本結構包括復制原點、目的基因、標記基因、啟動子、終止子等。其中標記基因的作用是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來，常用的標記基因是抗生素抗性基因。根據(jù)題干信息和圖形分析，P0是載體質粒，其含有的氨芐青霉素抗性基因（ampr）和四環(huán)素抗性基因（tetr）都屬于標記基因，可以用檢測目的基因是否導入受體細胞；EcoRV酶為限制酶，其切割質粒后悔破壞了四環(huán)素抗性基因（tetr）。2、PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應做準備；②模板DNA與引物的退火(復性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合；③引物的延伸：DNA模板--引物結合物在Taq酶的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈?！驹斀狻浚?）根據(jù)題意分析，EcoRV酶識別的序列是-GATATC-，并且兩條鏈都在識別序列的堿基的中軸線T與A之間進行切割，因此其切出來的線性載體P1為平末端。（2）據(jù)圖分析，目的基因兩側為粘性末端，且漏出的堿基為A，則在載體P1的兩端需要個加一個胸腺嘧啶堿基T形成具有粘性末端的載體P2，再用DNA連接酶將P2與目的基因連接起來形成重組質粒P3。由于在PCR擴增技術中采用高溫使其變形解旋，因此需要使用的DNA聚合酶具有耐高溫的特點。（3）根據(jù)以上分析可知，PCR技術的標準步驟包括變性、退火、延伸。（4）根據(jù)以上分析可知，重組質粒中抗生素抗性基因屬于標記基因，其作用是鑒別和篩選含目的基因的細胞。根據(jù)題意可知，該目的基因是從cDNA文庫