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玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗科文件編號:JYK-3-SH-009版本/修訂號:C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書生效日期:20110701第4頁共5頁編寫制定日期審核審核日期:核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2013-08-01李永臣2013-08-01章林華2013-08-01血清-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1檢驗申請單獨(dú)檢驗項目申請:血清-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測定(縮寫GGT);組合項目申請:血生化中肝功能測定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗申請。2標(biāo)本采集與處理2.1標(biāo)本采集2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml,不抗凝,置普通試管中?;虿捎煤蛛x膠的真空采血管。2.1.2檢驗申請單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識符。2.1.3急診標(biāo)本應(yīng)記錄采集時間、送檢時間、接收時間。2.1.4標(biāo)本采集后與檢驗申請單一起及時運(yùn)送至檢驗科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài),對不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1標(biāo)本量不足:少于0.3ml的全血標(biāo)本,或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2對反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本,包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3無法確認(rèn)標(biāo)本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4其他如標(biāo)識涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.2標(biāo)本保存2.2.1接收標(biāo)本后在30min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.2標(biāo)本保存時間:室溫(15~25℃)下可穩(wěn)定48h,普通冰箱中(2~8℃)穩(wěn)定7天。-202.2.3已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號,置4~8℃2.3標(biāo)本采集的注意事項2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛、避免劇烈活動,和12h以上禁食空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.2可以使用EDTA、枸櫞酸鹽、草酸鹽抗凝的血液標(biāo)本,但肝素抗凝劑可引起反應(yīng)液混濁。3方法原理谷氨酰-3羧基-對硝基苯胺+雙甘肽……對-硝基苯胺+谷氨酰雙甘肽,反應(yīng)中生成的對-硝基胺的顏色深淺與谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶的含量成正比,在405nm測定反應(yīng)前后吸光度的變化,可以計算出谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶的活力。4試劑及其他用品4.1試劑:-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒,北京利德曼公司出品。4.2試劑盒保存:未啟封試劑盒在2~8℃保存,可儲存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉冰箱內(nèi)穩(wěn)定30天。開蓋后避免污染。4.3試劑盒準(zhǔn)備:液態(tài)雙試劑型,即開即用,無特殊準(zhǔn)備。4.4試劑盒主要成分:甘氨酰甘氨酸150mmol/L,-谷氨?;徬趸桨?.4mmol/L。含有穩(wěn)定劑與保護(hù)劑。5校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式校準(zhǔn)品:不使用校準(zhǔn)品,以鄰硝基苯胺的雙波長(410/470nm)毫摩爾消光系數(shù)計算GGT活性。6質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1質(zhì)控品采用由Beckman-Coulter公司提供的兩個不同水平未定值質(zhì)控血清。6.2質(zhì)控液重建方法:液態(tài)質(zhì)控血清,即開即用,無需特殊準(zhǔn)備。6.3質(zhì)控品測定:在每一批標(biāo)本中測定兩個水平質(zhì)控血清各一次。6.4質(zhì)控規(guī)則:采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則,由計算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。7適用儀器適用AEROSET和C16000全自動生化分析儀器。8標(biāo)本檢測步驟裝載試劑→進(jìn)行校準(zhǔn)→進(jìn)行質(zhì)控→輸入標(biāo)本檢測項目→加載標(biāo)本→標(biāo)本測定→結(jié)果復(fù)核→報告。9主要分析參數(shù)參見說明書。10結(jié)果計算公式中ΔA/min即單位時間中吸光度增高的值,VT為總反應(yīng)體積ml(試劑總量+標(biāo)本量),Vs為標(biāo)本體積ml,l為比色皿光徑cm,ε為鄰硝基苯胺的410/470nm波長的毫摩爾消光系數(shù)。K值即因子。儀器根據(jù)此公式自動給出每個標(biāo)本測定結(jié)果。11檢驗結(jié)果的報告及范圍11.1結(jié)果的報告11.1.1結(jié)果經(jīng)審核后,確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報告。11.1.2報告單上標(biāo)明結(jié)果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名,并有與申請單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報告單上指出。11.2報告范圍:5-3000U/L,超過此范圍的結(jié)果報告時必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明,例如:系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)測定的結(jié)果。12操作性能12.1精密度:批內(nèi)CV約為3.5%;總CV約為5.25%。12.2線性范圍:5-750U/L(FLEX:550-3000)12.3方法的有限性及干擾因素:膽紅素濃度752μmol/L,血紅蛋白濃度2g/L,甘油三酯濃度20.5mmol/L沒有明顯干擾。13參考值及醫(yī)學(xué)決定水平男性:10-60U/L;女性:7-45U/L。 14臨床意義14.1血清GGT主要來自肝臟,急性與慢性肝炎、淤膽型肝炎,脂肪肝,肝炎后肝硬化、肝內(nèi)膽汁淤積、肝外膽道阻塞、肝癌,心臟病伴肝臟慢性充血時,血清GGT均有不同程度升高。14.2某些藥物如抗驚厥藥物誘導(dǎo)GGT合成,致使血清GGT單獨(dú)升高,可高于參考值上限3倍以上。14.3嗜酒者的血清GGT常升高。15結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗結(jié)果的審核。15.2認(rèn)真審核每一個測定結(jié)果,審核者對發(fā)出報告結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性負(fù)責(zé),并在報告單的審核者處簽名。15.3相關(guān)項目:審核與肝功能組合中其他項目的關(guān)系。如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況,應(yīng)分析與查找原因。16威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定暫無規(guī)定。17有關(guān)引用程序與文件17.1Abbott自動生化分析儀儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。17.2生化檢驗室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。17.3檢驗結(jié)果審核程序
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