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2021年高考生物二輪復(fù)習(xí)：選修一核心考點(diǎn)復(fù)習(xí)提綱精編版

專(zhuān)題1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

課題1果酒和果醋的制作

1、果酒制作的菌種是？其代謝類(lèi)型（同化作用和異化作用）和生殖方式是什么？

菌種：酵母菌（單細(xì)胞真菌、真核生物）

代謝類(lèi)型：異養(yǎng)兼性厭氧性同化作用類(lèi)型:異養(yǎng)異化作用類(lèi)型：兼性厭氧型

生殖方式：無(wú)性生殖（出芽生殖、抱子生殖、分裂生殖）

2、菌種進(jìn)行有氧呼吸的目的？其方程式是？并寫(xiě)出酒精發(fā)酵的方程式：

在有氧條件下，醵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖。反應(yīng)式：C6Hl2。6+602+6H2O->6CO2+12H2O

在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。反應(yīng)式：C6Hl2O6-2C2H5OH+2c02

3、是酵母菌發(fā)酵和生長(zhǎng)的重要條件？繁殖和發(fā)酵時(shí)應(yīng)將其控制在什么范圍內(nèi)？

溫度是酵母菌發(fā)酵和生長(zhǎng)的重要條件。20℃左右最適合醵母菌繁殖，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在

18—25℃O

4、什么在葡萄酒的自然發(fā)酵中其主要作用？（附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。）

5,為什么葡萄酒呈深紅色？

在發(fā)酵過(guò)程中，隨著酒精度數(shù)的提高，紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)醵液，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色。

6、在發(fā)酵過(guò)程中，為什么不需要另行消毒或滅菌？

在缺氧、呈酸性的發(fā)醵液中，醵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而

受到抑制。

7、果醋制作的菌種是？其代謝類(lèi)型（同化作用和異化作用）和生殖方式是？

菌種：醋酸菌（單細(xì)胞細(xì)菌、原核生物）

代謝類(lèi)型:異養(yǎng)需氧型同化作用類(lèi)型：異養(yǎng)異化作用類(lèi)型：需氧型

生殖方式：二分裂

8、為什么密封不嚴(yán)的酒會(huì)變酸？在變酸的酒的表面為什么會(huì)出現(xiàn)一層白色的膜？

醋酸菌在有氧條件下，將乙醇氧化成醋酸。

在變酸的酒的表面觀(guān)察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。

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9、為什么醋酸發(fā)酵需要充足的氧氣？

醋酸菌是好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。醋酸菌對(duì)氧氣的含量特別敏感，

當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會(huì)引起醋酸菌死亡。

10、果醋制作的實(shí)驗(yàn)原理是什么？（相關(guān)的反應(yīng)式）

當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；

當(dāng)氧氣充足、缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。（反?yīng)式如下）

C2H50H+02-CH3coOH+H20

n、醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為？（30-35℃）

12、制作果酒果醋的實(shí)驗(yàn)流程是什么？挑選葡萄T沖洗T榨汁一酒精發(fā)酵T果酒（T醋酸發(fā)酵T果醋）

13、用帶蓋的瓶子制葡萄酒時(shí)，在發(fā)酵過(guò)程中每隔12h將瓶蓋擰松一次，目的是什么？為什么不能打

開(kāi)瓶蓋？

放出C02,防止CO2過(guò)多導(dǎo)致發(fā)酵瓶爆裂。不打開(kāi)瓶蓋的目的：防止。2和其他雜菌進(jìn)入。

14、P4頁(yè)圖l-4b的發(fā)酵裝置，充氣口、排氣口和出料口分別有什么作用？為什么排氣口要通過(guò)一個(gè)

長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接？

充氣口：在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣。

排氣口：排出酒精發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生的C02。

出料口：用來(lái)取樣。

與瓶身相連的長(zhǎng)而彎曲的膠管：防止空氣中微生物的污染。

15、制果酒時(shí)，充氣口應(yīng)該如何操作？制果醋呢？

制果酒時(shí)，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制果醋時(shí)，應(yīng)將充氣口連接充氣泵進(jìn)行充氣。

16、沖洗葡萄的目的為？能否反復(fù)沖洗？為什么？

沖洗1一2遍除去污物，不能反復(fù)沖洗，防止菌種流失。

17、先沖洗葡萄還是先出去枝梗？簡(jiǎn)述原因：

先沖洗，然后再除去技梗，以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。

18、應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？

榨汁機(jī)和發(fā)醵瓶要清洗干凈，且發(fā)酵瓶要用70%的酒精進(jìn)行消毒；

清洗葡萄時(shí)要先清洗后除枝梗；

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發(fā)酵瓶排氣管用曲頸管不用直管。

19、葡萄汁裝入發(fā)酵瓶中，為什么要留大約1\3的空間？

①先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，耗盡。2后再進(jìn)行酒精發(fā)醵；

②防止發(fā)醵過(guò)程中產(chǎn)生的C02造成發(fā)酵液溢出。

20、制葡萄酒時(shí)，為什么要將溫度控制在？制葡萄醋時(shí)，為什么要將溫度控制在30-350C?

溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件。18-250C是醵母菌生長(zhǎng)和繁殖的最適溫度；而醋酸菌是嗜熱

菌，30-35℃有利于醋酸菌的繁殖和醋酸發(fā)酵。

21、檢測(cè)果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，用什么來(lái)檢驗(yàn)？在什么條件下？有什么顏色變化？

用重珞酸鉀來(lái)檢驗(yàn)。在酸性條件下，重鋁酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入發(fā)酵液2mL,

再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L的H2s043滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽和的重珞酸鉀溶液3

滴，振蕩試管，觀(guān)察顏色。

22、為提高果酒品質(zhì)，更好地抑制其他微生物的生長(zhǎng)，可直接在果汁中加入什么？

加入人工培養(yǎng)的酵母菌。

23、制作葡萄醋時(shí)為什么要適時(shí)通入空氣？

（醋酸菌是好氧細(xì)菌。）

24、果酒發(fā)酵裝置發(fā)酵后期能否產(chǎn)生大量的果醋？原因是？

果酒發(fā)酵裝置發(fā)酵后期不能產(chǎn)生大量的果醋，原因是：①醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為30-35℃,而醋

酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為18-25℃;②果酒發(fā)醵后期裝置內(nèi)缺氧，而醋酸菌是好氧細(xì)菌，沒(méi)有氧氣無(wú)法

生活。

課題2:腐乳的制作

1、為什么腐乳經(jīng)過(guò)微生物的發(fā)酵，味道會(huì)很鮮美且易于消化和吸收？

豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的肽和氨基酸，味道鮮美，易于消化和吸收。

2、多種微生物參與了腐乳的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉，其中起主要作用的是毛霉。

3、毛霉（一種絲狀真菌）屬于真核（"原核"或"真核"）生物，代謝類(lèi)型為異養(yǎng)需養(yǎng)型。

生長(zhǎng)迅速，具有發(fā)達(dá)的白色菌絲；以抱子生殖為主。

4、豆腐長(zhǎng)白毛是怎么回事？（毛霉的白色菌絲。）

5、制作腐乳的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂

肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。

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6、挑選什么樣的豆腐？理由是什么？

所用豆腐的含水量為70%左右，水分過(guò)多則腐乳不易成形。含水量過(guò)低，不利于毛霉的生長(zhǎng)繁殖。

7、腐乳外部有一層致密的皮，這層皮是怎樣形成的？對(duì)人體有害嗎？作用是什么？

“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲（匍匐菌絲），對(duì)人體無(wú)害。它能形成腐乳的“體”，使

腐乳成形。

8、傳統(tǒng)生產(chǎn)腐乳的毛霉來(lái)自于哪里？現(xiàn)代工藝生產(chǎn)呢？

傳統(tǒng)生產(chǎn)腐乳的毛霉來(lái)自空氣中的毛霉抱子；現(xiàn)代工藝生產(chǎn)：直接接種優(yōu)良毛霉菌種。

9、在腐乳制作的過(guò)程中應(yīng)該怎么加鹽？加鹽的目的是什么？

加鹽腌制：將長(zhǎng)滿(mǎn)毛霉的豆腐塊分層整齊地?cái)[放在瓶中，同時(shí)逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高而增加鹽量，

接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時(shí)間約為8天左右。

食鹽的作用：①抑制微生物的生長(zhǎng)，避免腐敗變質(zhì)；②析出水分，使豆腐變硬，在后期制作過(guò)程中不

易酥爛。

10、在腐乳制作的過(guò)程中鹽的濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致什么問(wèn)題？過(guò)低呢？

用鹽腌制時(shí)，注意控制鹽的用量：鹽的濃度過(guò)低，不足以抑制微生物的生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；

鹽的濃度過(guò)高會(huì)影晌腐乳的口味。

11、鹵湯由什么組成？香辛料的作用？

配制鹵湯：鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。

香辛料的作用：①調(diào)制腐乳的風(fēng)味；②具有防腐殺菌的作用.

12、酒的含量為多少？加酒的作用有哪些？濃度過(guò)高和過(guò)低分別會(huì)導(dǎo)致什么？

酒的含量一般控制在12%左右.

酒的作用：①抑制微生物的生長(zhǎng)；②使腐乳具有獨(dú)特的香味。

酒精含量過(guò)高，對(duì)蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長(zhǎng)；酒精含量過(guò)低，不足于抑制微生

物生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。

13、腌制腐乳時(shí)，為什么要隨著豆腐層的加高而增加鹽的用量？

越接近瓶口，被雜菌污染的可能性越大。

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14、為什么在接近瓶口的表面要將鹽鋪厚一些？（防止雜菌污染。）

15、用來(lái)腌制腐乳的玻璃瓶可通過(guò)什么方式來(lái)處理?目的是什么？

用來(lái)腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒.目的是方式雜菌污染。

16、裝瓶時(shí)，要怎樣處理瓶口？

裝瓶時(shí)，操作要迅速小心。整齊地?cái)[放好豆腐、加入鹵湯后，要用膠條將瓶口密封。封瓶時(shí)，最好

將瓶口通過(guò)酒精燈的火焰，防止瓶口被污染。

17、腐乳制作的流程：

讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉T加鹽腌制一加鹵湯裝瓶—密封腌制

18、毛霉生長(zhǎng)溫度應(yīng)該控制在多少？為什么控制到該溫度？

15~18℃,并保持一定的濕度。因?yàn)?5~18P是毛霉生長(zhǎng)繁殖的最適溫度。

19、哪些因素可以影響腐乳的風(fēng)味？請(qǐng)舉例論述。

①水的控制：豆腐含水量70%,含水量過(guò)高，腐乳不易成形；含水量過(guò)低，不利于毛霉的生長(zhǎng)。②

溫度的控制：15~18℃O③鹽量的控制：鹽濃度過(guò)低，不足于抑制微生物生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變

質(zhì)；鹽濃度過(guò)高，會(huì)影響腐乳的口味。④酒含量的控制：酒精含量過(guò)高，腐乳成熟的時(shí)間將會(huì)延長(zhǎng)；酒

精含量過(guò)低，不足于抑制微生物生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆腐腐敗。⑤發(fā)酵時(shí)間的控制：發(fā)酵時(shí)間短，蛋白質(zhì)未

完全水解，加鹽后蛋白質(zhì)變性，豆腐變硬；發(fā)醵時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，豆腐會(huì)軟化，不易成形。

課題3:泡菜的制作

1、在泡菜腌制過(guò)程中，我們需要檢測(cè)什么的含量？（亞硝酸鹽。）

2、制作泡菜需要什么菌種？其代謝類(lèi)型是？

乳酸菌（單細(xì)胞原核生物）

代謝類(lèi)型：異養(yǎng)厭氧型同化作用類(lèi)型：異養(yǎng)異化作用類(lèi)型：厭氧

3、制作泡菜的原理是什么？

在無(wú)氧條件下，乳酸菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸將葡萄糖糖分解為乳酸,反應(yīng)式為：C6Hl206T2c3H6。3

4、常見(jiàn)的乳酸菌有哪兩類(lèi)？常用于生產(chǎn)的酸奶的是什么？

常見(jiàn)的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產(chǎn)酸奶。

5、為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶？

抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌的生長(zhǎng)。

6、亞硝酸鹽的攝入量達(dá)到多少引起中毒？多少引起死亡？

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達(dá)到0.3—0.5g時(shí)，會(huì)引起中毒；達(dá)到3g時(shí)會(huì)引起死亡。

7、亞硝酸鹽會(huì)在人體內(nèi)積累嗎？會(huì)轉(zhuǎn)變成什么致癌物質(zhì)？

亞硝酸鹽被吸收后隨尿液排出體外，不會(huì)再人體內(nèi)積累，但在適宜pH、溫度和一定微生物作用下

會(huì)形成致癌物質(zhì)亞硝胺。

8、為什么不宜多吃腌制食品？

人體攝入亞硝酸鹽含量達(dá)到0.3—0.5g時(shí)，會(huì)引起中毒；達(dá)到3g時(shí)會(huì)引起死亡。并且在適宜pH、

溫度和一定微生物作用下形成致癌物質(zhì)亞硝胺。

9、泡菜的制作流程？

選擇泡菜壇——選擇原■——原料處理——配制鹽水一^壇——封壇發(fā)醵——成品

10、制作泡菜時(shí)，鹽和清水的比例是多少？（清水：鹽=4:1）

11、將鹽水煮沸冷卻的目的是？

煮沸的作用：一是除去水中。2,二是殺滅鹽水中的其他細(xì)菌。

冷卻的目的：防止高溫殺死乳酸菌。

12、為什么要向壇蓋邊緣的水槽中注滿(mǎn)水？

以保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無(wú)氧環(huán)境。

13、測(cè)定亞硝酸含量的原理是什么？測(cè)定亞硝酸鹽含量的方法是什么？

測(cè)定亞硝酸鹽含量的方法是：比色法

原理是：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-蔡基乙二胺鹽酸

鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液目測(cè)比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。

14、應(yīng)選擇什么樣的泡菜壇?（選擇氣密性好的以創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境，有利于乳酸菌發(fā)酵防止蔬菜腐爛。）

15、如何檢測(cè)泡菜壇的氣密性？（將壇口向上壓入水中，看壇內(nèi)有無(wú)滲水現(xiàn)象。）

16、腌制過(guò)程中，哪些因素會(huì)造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加？

在泡菜的腌制過(guò)程中，要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量。溫度過(guò)高、食鹽用量過(guò)低、腌制

時(shí)間過(guò)短，容易滋生細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。

①溫度：溫度過(guò)高，不利于乳酸菌生長(zhǎng)，容易滋生雜菌，亞硝酸鹽含量增加；溫度過(guò)低，則發(fā)酵時(shí)間延

長(zhǎng)。

②食鹽：食鹽用量過(guò)低，不足于抑制其他微生物的生長(zhǎng)，容易滋生雜菌，亞硝酸鹽含量增加；食鹽用量

過(guò)高，則抑制乳酸菌生長(zhǎng)，導(dǎo)致泡菜"咸而不酸”。

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③腌制時(shí)間：腌制時(shí)間過(guò)短，產(chǎn)生的乳酸少，容易滋生雜菌，亞硝酸含量增加；腌制時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，產(chǎn)生的

乳酸多，影響泡菜的風(fēng)味。

17、一般在腌制幾天后，亞硝酸鹽的含量開(kāi)始下降？（一般在腌制10d后，亞硝酸鹽含量開(kāi)始下降。）

18、導(dǎo)致泡菜"咸而不酸"的原因是什么？（食鹽用量過(guò)高，抑制了乳酸菌的生長(zhǎng)。）

19、在制作泡菜的過(guò)程中，有機(jī)物的干重如何變化？泡菜壇內(nèi)有機(jī)物的種類(lèi)如何變化？

干重減少（因?yàn)槿樗峋M(jìn)行無(wú)氧呼吸消耗葡萄糖）；有機(jī)物種類(lèi)增加（因?yàn)樵谌樗岚l(fā)酵的過(guò)程中產(chǎn)生

了丙酮酸等中間產(chǎn)物，及乳酸）

20、為什么在泡菜制作過(guò)程中會(huì)加入陳泡菜水？（增加乳酸菌的數(shù)量。）

21、為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)候會(huì)長(zhǎng)一層白膜？你認(rèn)為這層白膜是怎樣形成的？

產(chǎn)膜醵母的繁殖。醵母菌是兼性厭氧微生物，泡菜發(fā)酵液營(yíng)養(yǎng)豐富，其表面氧氣含量豐富，適合酵母

菌繁殖。

22、檢測(cè)亞硝酸鹽含量的操作步驟依次有哪些？

配制溶液——制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液——制備樣品處理液——比色

23、制備樣品處理液時(shí)，加入氫氧化鋁乳液的目的？（吸附雜質(zhì)，使泡菜濾液脫色變澄清。）

24、畫(huà)出亞硝酸鹽含量、乳酸菌含量、乳酸含量隨時(shí)間的變化趨勢(shì)圖，并解釋其原因。

乳酸菌乳酸亞硝酸鹽

發(fā)酵少（有。2,乳酸菌活動(dòng)受到抑制）少增多（乳酸含量少，亞硝酸還原菌大量

初期繁殖）

發(fā)酵最多（乳酸抑制其他雜菌活動(dòng)）增加，PH下降減少（乳酸含量增加，抑制了亞硝酸還

中期原菌）

此時(shí)乳酸菌數(shù)量增加，雜菌數(shù)量減

少的原因：乳酸菌比雜菌更耐酸

發(fā)酵減少（乳酸繼續(xù)積累，PH下降，繼續(xù)熠多，PH減少至相對(duì)穩(wěn)定（亞硝酸還原菌被完全

后期抑制了乳酸菌的活動(dòng)）繼續(xù)下降抑制）

乳酸含量的變化：增加PH的變化：下降

乳酸菌含量的變化：先增加后減少亞硝酸鹽含量的變化：先熠加后減少

25、在整個(gè)泡菜制作過(guò)程中，如何防止泡菜被污染？

每次取樣用具要洗凈，取樣后迅速封壇，防止泡菜被污染。

專(zhuān)題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

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課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

1、研究和應(yīng)用微生物的前提是什么？（防止雜菌入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物。）

2、實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物需要注意哪兩方面？

一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供合適的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件

另一方面需要確保無(wú)處不在的其他微生物無(wú)法混入。

3、什么叫做培養(yǎng)基？

培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。

4、瓊脂是什么？性質(zhì)有哪些？

瓊脂是一種從紅藻中提取的多糖。瓊脂在98℃以上熔化,在440c以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)

固態(tài)。

5、培養(yǎng)基的種類(lèi)，按物理性質(zhì)可分為哪些？他們各自有哪些作用？

培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。

液體培養(yǎng)基（不含凝固劑）：配制成的液體狀態(tài)的基質(zhì)。

固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生

長(zhǎng)，可以形成肉眼可見(jiàn)的菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。

用途：液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn)，常用來(lái)擴(kuò)大培養(yǎng)微生物數(shù)量；固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生物的

分離和鑒定；半固體培養(yǎng)基則常用于觀(guān)察微生物的運(yùn)動(dòng)及菌種保藏等。

6、培養(yǎng)基的種類(lèi)，按功能可以分為哪些？請(qǐng)舉例說(shuō)明。

按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。

選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物的

生長(zhǎng)。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成的，用以鑒別

不同類(lèi)別的微生物。

7、培養(yǎng)基的成分主要有哪些？

水、碳;原、氮源、無(wú)機(jī)鹽。

碳源：能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如82、NaHCCh等無(wú)機(jī)碳源；糖類(lèi)、石油、花生餅

等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。

氮源：能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如N2、NH3、NO%、NH4+等無(wú)機(jī)氮源；蛋白質(zhì)、

氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白陳等有機(jī)氮源。只有固氮微生物才能利用

N2O

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8、培養(yǎng)基除滿(mǎn)足幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，還需要滿(mǎn)足什么條件？

滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)PH、溫度、氧氣以及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求。

9、培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，還需要在培養(yǎng)基中添加什么？霉菌呢？厭氧微生物呢？

培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素；培養(yǎng)霉菌時(shí)須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性；培養(yǎng)細(xì)菌是

需要將pH調(diào)至中性或微堿性；培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無(wú)氧的條件。

10、牛肉膏和蛋白陳主要能提供哪些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)？（碳源和氮源。）

11、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是？（防止外來(lái)雜菌的入侵。）

12、無(wú)菌技術(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手要進(jìn)行什么操作？（清潔和消毒。）

13、無(wú)菌技術(shù)對(duì)用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基要進(jìn)行什么操作？（滅菌。）

14、實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在什么附近進(jìn)行？（酒精燈火焰。）

15、無(wú)菌技術(shù)的目的？（①防止培養(yǎng)物被污染；②防止污染環(huán)境；③避免感染操作者。）

16、消毒和滅菌的定義是什么？

消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包括芽抱和抱子X(jué)

滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽抱和抱子。

比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽抱和抱子能否被消滅

消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能

滅菌強(qiáng)烈全部微生物能

17、實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法有哪些？常用的滅菌方法有哪些？

消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（對(duì)于一些不耐高溫的液體）還有化學(xué)藥劑（如酒精、氯氣、

石炭酸等）消毒、紫外線(xiàn)消毒。

滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。

18、煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒、紫外線(xiàn)消毒法的方法操作及適用對(duì)象？

方法操作適用對(duì)象

煮沸消毒法100℃煮沸5—6min耐高溫的日常用品

巴氏消毒法75℃煮30min或在80℃煮15min不耐高溫的液體，如牛奶

化學(xué)藥劑消毒法酒精、氯氣、石炭酸、煤酚皂溶液等消如用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源

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毒液

紫外線(xiàn)消毒法紫外線(xiàn)照射接種室、接種箱、超凈工作臺(tái)

19、灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌的方法操作及適用對(duì)象？

方法操作適用對(duì)象

灼燒滅菌酒精燈火焰上灼燒接種環(huán)、接種針或其他金屬用具

干熱滅菌干熱滅菌箱內(nèi),在160-170℃加熱1耐高溫的、需要保持干燥的物品，如

—2h玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用

具

高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，壓力為lOOkPa,培養(yǎng)基

溫度為，維持15—30min

20、高壓蒸汽滅菌為達(dá)到良好的滅菌效果，壓力為多少？溫度為多少？維持多長(zhǎng)時(shí)間？

壓力為lOOkPa,溫度為1210c，維持15—30min

21、高壓蒸汽滅菌中把鍋內(nèi)的水加熱煮沸的原因是什么？（排除冷空氣。）

22、紫外線(xiàn)消毒，在照射前噴灑什么可以加強(qiáng)消毒效果？（石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液。）

23、培養(yǎng)基丟棄前要做什么操作？為什么？（滅菌，防止培養(yǎng)基上滋生細(xì)菌污染環(huán)境。）

24、配制牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基的流程是什么？（計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、倒平板。）

25、應(yīng)該在什么時(shí)候調(diào)節(jié)PH?（熔化之后、滅菌之前。）

26、為什么稱(chēng)取時(shí)動(dòng)作要迅速？（牛肉膏和蛋白陳都容易吸潮。）

27、溶化過(guò)程中不斷用玻璃棒攪拌的作用？（防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。）

28、培養(yǎng)基滅菌后，溫度要冷卻到多少左右時(shí)才能用來(lái)倒平板？用什么來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？

50。匚可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行

倒平板了。

29、為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？（通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。）

30、倒平板操作中，平板冷卻凝固后還需要如何操作？目的是什么？

平板冷凝后，將平板倒置。可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

31、在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生

物嗎？為什么？

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空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。

32、微生物的接種方法包括平板劃線(xiàn)法、稀釋涂布平板法、斜面接種、穿刺接種,其中最

常用的是平板劃線(xiàn)法、稀釋涂布平板法,其核心是防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純凈度。

33、用平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法接種的目的是：使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在

培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，以便于純化菌種。

34、平板劃線(xiàn)法的原理是什么？

平板劃線(xiàn)法是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線(xiàn)的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培

養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線(xiàn)后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體，這就是菌

落。

35、平板劃線(xiàn)法的操作步驟？

①將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。

②在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開(kāi)棉塞。

③將試管口通過(guò)火焰。

④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。

⑤將試管通過(guò)火焰，并塞上棉塞。

⑥左手將皿蓋打開(kāi)一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線(xiàn),蓋上

皿蓋。注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)皿。

⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線(xiàn)的末端開(kāi)始往第二區(qū)域內(nèi)劃線(xiàn)。重復(fù)以上操作，在三、

四、五區(qū)域內(nèi)劃線(xiàn)。注意不要將最后一區(qū)的劃線(xiàn)與第一區(qū)相連。

⑧將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

36、為什么使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？（防止雜菌污染。）

37、為什么在操作的每一步以及每次劃線(xiàn)之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線(xiàn)操作結(jié)束以后，仍然要灼燒，為

什么？說(shuō)出每一次灼燒的原因。

①操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；

②每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線(xiàn)時(shí)，接種環(huán)

上的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端，從而通過(guò)劃線(xiàn)次數(shù)的增加，使每次劃線(xiàn)時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,

以便得到菌落。

③劃線(xiàn)結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。

38、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后在進(jìn)行劃線(xiàn)？（以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。）

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39、在做第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)？

劃線(xiàn)后，線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)條起始處要少，每次從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目

隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。

40、為什么最后一次劃線(xiàn)區(qū)不能與第一區(qū)相連？

最后一次劃線(xiàn)區(qū)的細(xì)菌數(shù)目最少，不能與第一區(qū)相連，可以保證最終能得到單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌

落。

41、稀釋涂布平板法的原理是什么？

稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培

養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能

在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。

42、用何種物質(zhì)來(lái)對(duì)菌液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)繛槭裁匆M(jìn)行梯度稀釋?zhuān)?/p>

無(wú)菌水。進(jìn)行梯度稀釋的原因：菌液中的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落。

43、在用移液管進(jìn)行稀釋時(shí)？應(yīng)該在菌液中吹吸三次，目的是什么？

使菌液與水充分混勻，從而達(dá)到稀釋的目的。

44、移液管需要經(jīng)過(guò)滅菌,操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1—2cm處。

45、涂布平板的操作步驟？

①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。

②取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。

③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8~10s。

④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。

46、如何檢驗(yàn)培養(yǎng)基的滅菌是否合格？

將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入在370c恒溫箱中培養(yǎng)12h和24ho若未接種的

培養(yǎng)基無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。

47、培養(yǎng)時(shí)放在什么中進(jìn)行培養(yǎng)？培養(yǎng)的溫度多少？（恒溫箱，37℃O）

48、如果培養(yǎng)基上觀(guān)察到了不同形態(tài)的菌落，說(shuō)明了什么？

說(shuō)明在接種過(guò)程中受到了雜菌的污染；或者培養(yǎng)基的制備不合格。

49、為了保持菌種的純凈，需要進(jìn)行菌種的保藏。對(duì)于頻繁使用的菌種采用臨時(shí)保藏法。對(duì)于需要

長(zhǎng)期保存的菌種采用甘油管藏法.

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50、臨時(shí)保藏法需要將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長(zhǎng)成后,

將試管放入的冰箱中保藏。

51、臨時(shí)保藏法有什么缺點(diǎn)？

保存的時(shí)間不長(zhǎng)，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。

52、甘油管藏法:在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘迪后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,

與甘油充分混勻后，放在二?空的冷凍箱中保存。

課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)

1、尿素能不能直接被農(nóng)作物吸收？需要被分解成什么才可以被植物利用？

尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨

之后，才能被植物利用。

2、土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)槟芎铣墒裁矗?/p>

士康中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣裳勖浮?/p>

3、如何尋找目的菌株？

在尋找目的菌株時(shí)，要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。

4、實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是什么？

人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。

5、為什么以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基能夠選擇出分解尿素的微生物？

培養(yǎng)基中尿素作為唯一氮源，只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長(zhǎng)。

6、什么是選擇培養(yǎng)基？

將允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱(chēng)做選擇培養(yǎng)基。

7、培養(yǎng)基中加入青霉素能分離出什么微生物？加入高濃度食鹽能分離出什么微生物？

加入青霉素能分離出酵母菌和霉菌。（青霉素抑制細(xì)菌、放線(xiàn)菌的生長(zhǎng)）

加入高濃度食鹽能分離出金黃色葡萄球菌。

8、培養(yǎng)基中缺乏氮源能分離出什么微生物？缺乏有機(jī)碳源能分離出什么微生物？

培養(yǎng)基中不加入氮元素，可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物；

培養(yǎng)基中不加入有機(jī)碳源可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物；

9、培養(yǎng)基中以NH3作為唯一氮源能分離出什么微生物？以石油作為唯一碳源能分離出什么微生物？

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以NH3作為唯一氮源能分離出硝化細(xì)菌；

以石油作為唯一碳源能分離出能分解石油的微生物。

10.測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。

11、常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是什么？

稀釋涂布平板法。

12、為什么通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中的活菌數(shù)？（稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌

的數(shù)目的原理）

當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)

計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活細(xì)菌。

13、為了保證結(jié)果正確，一般選擇菌落數(shù)在什么范圍的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)？（30-300.）

14、某位同學(xué)在106濃度下涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230，他的結(jié)果是否合理？為什么？

不合理。沒(méi)有設(shè)置重復(fù)組，結(jié)果不具有說(shuō)服力。

15、某位同學(xué)在同樣的濃度下涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為21、212和256，他的結(jié)果是否

合理？為什么？

合理。因?yàn)樵谕粋€(gè)稀釋度下得到兩個(gè)菌落數(shù)目接近的平板，且菌落數(shù)在30-300之間。

16、某位同學(xué)在同樣的濃度下涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為21、212和256,該同學(xué)以這三

個(gè)平板上菌落數(shù)的平均值163作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果。他的結(jié)果是否合理？為什么？

不合理。設(shè)置的重復(fù)組中有一組結(jié)果相差太遠(yuǎn)，且菌落數(shù)不在30-300之間。

17、統(tǒng)計(jì)樣品菌落數(shù)目，為使結(jié)果具有說(shuō)服力，應(yīng)設(shè)置重復(fù)組。

18、如何根據(jù)平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的細(xì)菌數(shù)？

統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板，計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值

每克樣品中的菌落數(shù)=（C/V）*M其中，C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布

平板時(shí)所用的稀釋液的體積（創(chuàng)），M代表稀釋倍數(shù).

19、用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目,（實(shí)際活菌數(shù)量比測(cè)得的數(shù)量偏

高）原因是什么？

因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀(guān)察到的只是一個(gè)菌落。

20、除了稀釋涂布平板法外，還有什么測(cè)定微生物數(shù)量的方法？用到什么工具？

顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。

21、用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目,原因是什么？

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顯微鏡直接計(jì)數(shù)法不能區(qū)分活菌和死菌，死菌也計(jì)數(shù)在內(nèi)。

22、設(shè)置對(duì)照的目的是什么？

設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。對(duì)照

實(shí)驗(yàn)是指除了被測(cè)試的條件以外，其他條件都相同的實(shí)驗(yàn)，其作用是比照試驗(yàn)組，排除任何其他可能原

因的干擾，證明確實(shí)是所測(cè)試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。

23、檢驗(yàn)選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，應(yīng)該如何設(shè)置對(duì)照？

用接種了菌液的牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基和接種了菌液的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照，在牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基

上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，則說(shuō)明選擇培養(yǎng)基起到了選擇作用。

24、分離和計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)流程？

土壤取樣-制備培養(yǎng)基一樣品的稀釋一取樣涂布一培養(yǎng)觀(guān)察一菌落計(jì)數(shù)

25、土壤取樣時(shí)，為什么要鏟去表層土?

土壤中的微生物，大約70%—90%是細(xì)菌。細(xì)菌適宜在酸堿度接近中性的潮濕土壤中生長(zhǎng)，絕大多

數(shù)分布在距地表3—8cm的土壤層。

26、測(cè)定土壤中細(xì)菌、放線(xiàn)菌、真菌的數(shù)量分別選用什么稀釋倍數(shù)進(jìn)行平板培養(yǎng)？

測(cè)定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，一般選用。、、

14105106

測(cè)定放線(xiàn)菌的數(shù)量，一般選用103、10%105

測(cè)定真菌的數(shù)量,一般選用1。2、10\IO4

27、為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？（因?yàn)橥寥乐懈黝?lèi)微生物的數(shù)量是不同的。）

28、細(xì)菌、放線(xiàn)菌、霉菌各自的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間？

不同種類(lèi)的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間。細(xì)菌30-37℃1-2天；

放線(xiàn)菌25—28℃5—7天；霉菌25—28℃3—4天。

29、微生物培養(yǎng)時(shí)要每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取什么的記錄作為結(jié)果？原因是什么？

選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。

30、一般來(lái)說(shuō)，在一定條件下（相同培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間）,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌

落特征.

31、菌落特征包括哪些方面？（菌落的性狀、大小、隆起程度和顏色等方面。）

32、在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該從哪些方面注意無(wú)菌操作？（至少3點(diǎn)）

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①取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都需要滅菌。

②應(yīng)在火焰旁稱(chēng)取土壤。在火焰附近將稱(chēng)好的土樣倒入錐形瓶中，塞好棉塞。

③在稀釋土壤溶液的過(guò)程中，每一步都要在火焰旁操作。

33、什么是鑒別培養(yǎng)基？（根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品。）

34、在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，會(huì)有什么顏色變化？（指示劑將變紅。）

35、為什么能通過(guò)酚紅指示劑來(lái)鑒定能分解尿素的細(xì)菌？

在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的眼酶將尿素分解成了氨。氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，PH

升高，酚紅指示劑將變紅。

36、測(cè)定飲用水中的大腸桿菌數(shù)目可以用什么方法？

濾膜法。將已知體積的水過(guò)濾后，將濾膜放在伊紅舞培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑魚(yú)?？梢?/p>

根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量。

課題3分解纖維素的微生物的分離

1、纖維素是由什么首尾相連而成的高分子化合物？（葡萄糖。）

2.地球上含量最豐富的多糖類(lèi)物質(zhì)是什么？（纖維素。）

3、為什么纖維素能被土壤中某些微生物分解利用？（因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶。）

4、纖維素酶是一種復(fù)合酶，由哪些組分組成？

纖維素酶是一種復(fù)合酶,它至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苗酶。

5、纖維素是如何被纖維素酶分解成葡萄糖的？

C1酶、CX酶使纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖普酶將纖維二糖分解成葡萄糖。

6、篩選纖維素分解菌的方法是什么？（剛果紅染色法。能夠通過(guò)顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選。）

7、篩選纖維素分解菌的原理是什么？通過(guò)什么現(xiàn)象來(lái)判斷有纖維素分解菌？

剛果紅（簡(jiǎn)稱(chēng)CR）是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解

后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們?cè)诤欣w維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)

基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培

養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣，我們就可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分

解菌。

8、分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程？

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土壤取樣一選擇培養(yǎng)（此步是否需要，應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來(lái)確定）一梯度稀釋T將

樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上一挑選產(chǎn)生透明圈的菌落

9、為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌？

由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對(duì)提高，因此從

這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。

10、土壤取樣時(shí)，為什么將濾紙埋在土壤中？

將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。

一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。

11、選擇培養(yǎng)的目的是什么？

通過(guò)選擇培養(yǎng)熠加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物.

12、為什么選擇培養(yǎng)能夠"濃縮"所需的微生物？

在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這

種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮”的作用。

13、選擇培養(yǎng)用固體培養(yǎng)基還是液體培養(yǎng)基，為什么？

液體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基可以使?fàn)I養(yǎng)成分充分消耗，有利于菌種大量繁殖。

14、選擇培養(yǎng)時(shí)振蕩培養(yǎng)的目的是什么？

提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量；同時(shí)使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。

15、如何判斷一個(gè)培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基還是液體培養(yǎng)基？（是否加入瓊脂（凝固劑I）

16、以纖維素作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基可以選擇出什么微生物？為什么？

可以選擇出纖維素分解菌，因?yàn)橐岳w維素作為唯一碳源，有利于纖維素分解菌生長(zhǎng)，同時(shí)抑制其他

微生物生長(zhǎng)。

17、鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基用固體培養(yǎng)基還是液體培養(yǎng)基？（固體培養(yǎng)基。）

18、剛果紅染色法有哪兩種方法？分別是如何操作的？

一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，另一種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅。

方法一：在長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)基上，覆蓋質(zhì)量濃度為lmg/ml的CR溶液，10—15min后，倒去CR溶

液，加入lmol/L的Nad溶液,15min后倒掉NaCI溶液，此時(shí)，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周?chē)鷮?huì)出現(xiàn)

透明圈。

方法二：配制質(zhì)量濃度為10mg/ml的CR溶液，滅菌后，按照每200ml培養(yǎng)基加入1ml的比例加入

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CR溶液，混勻后倒平板。等培養(yǎng)基上長(zhǎng)出菌落后，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周?chē)鷮?huì)出現(xiàn)明顯的透明圈。

19、兩種剛果紅染色法中哪種方法剛果紅需要滅菌？哪種方法剛果紅不需要滅菌？

菌落形成后加入剛果紅，剛果紅不需要滅菌；菌落形成前倒平板時(shí)加入剛果紅，剛果紅需要滅菌。

20、為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行什么實(shí)驗(yàn)？（發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)。）

21、纖維素酶的發(fā)酵方法有哪兩種？（液體發(fā)酵和固體發(fā)酵。）

22、纖維素酶的測(cè)定是通過(guò)對(duì)什么物質(zhì)進(jìn)行定量測(cè)定？

對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定。

專(zhuān)題6植物有效成分的提取

課題1植物芳香油的提取

1、天然香料的來(lái)源？（植物、動(dòng)物。）

2、植物芳香油的特點(diǎn)及組成？（植物芳香油揮發(fā)性強(qiáng)，成分復(fù)雜，主要包括菇類(lèi)化合物及其衍生物。）

3、植物芳香油的提取方法有哪些？（蒸饋、壓榨和萃取。）

4、植物芳香油提取的常用方法是什么？（水蒸氣蒸謠法。）（注意："氣"字不要寫(xiě)錯(cuò)）

5、水蒸氣蒸儲(chǔ)法的原理、適用范圍、不足？

原理：利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái)形成油水混合物，冷卻后混合物又會(huì)重新分

出油層和水層。

適用范圍：適用于提取玫瑰油、逋荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油。

不足：水中蒸播會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問(wèn)題。

6、壓榨法的原理、適用范圍、不足？

原理：通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油。

適用范圍：適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取。

不足：出油率低。

7、萃取法的原理、適用范圍、不足？

原理：使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)出有機(jī)溶劑后就可獲得芳香油。

適用范圍：適用范圍廣，要求原料的顆粒盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶劑中。

不足：使用的有機(jī)溶劑必須事先精制，除去雜質(zhì)，否則會(huì)影響芳香油的質(zhì)量。

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8、根據(jù)蒸儲(chǔ)過(guò)程中原料放置的位置，可以將水蒸氣蒸儲(chǔ)法分為哪幾類(lèi)？

水中蒸儲(chǔ)：原料放在沸水中加熱蒸儲(chǔ)。

水上蒸譚：原料隔放在沸水上加熱蒸儲(chǔ)。

水氣蒸儲(chǔ)：利用外來(lái)高溫水蒸氣加熱蒸溜。

9、為什么柑橘和檸檬中的芳香油不能用蒸儲(chǔ)法提??？應(yīng)用什么方法提??？

因?yàn)樗姓粼鲿?huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問(wèn)題。因此，柑橘和檸檬芳香油的制備通常使用壓

榨法。

10、提取玫瑰精油的實(shí)驗(yàn)流程：

鮮玫瑰花+清水一水蒸氣蒸儲(chǔ)一油水混合物一分離油層（加入NaCI）-除水（加入無(wú)水NaSO4）一

過(guò)濾一玫瑰油

11、在提取玫瑰精油時(shí)要用的哪兩種物質(zhì)？作用分別是？

NaCI:促使油水分離。無(wú)水Na2s。4：除去油層中的水分。

12、玫瑰花瓣與清水的質(zhì)量比？（玫瑰花瓣與清水的質(zhì)量比為1:4。）

13、用于提煉玫瑰精油的玫瑰花期是？（每年5月上、中旬，此階段花朵含油量最高。）

14、玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)有哪些？

玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，能隨水蒸氣一同蒸儲(chǔ)。

15、用水蒸氣蒸憎法提取玫瑰精油，在水中蒸憎、水上蒸儲(chǔ)和水氣蒸儲(chǔ)的方法中，妞麴1更簡(jiǎn)便易行。

16、如何處理水蒸氣蒸憎后收集到的乳白色的乳濁液？

錐形瓶中收集到的乳白色的乳濁液，這是玫瑰油與水的混合物。

①向乳濁液中加入NaCI,增加鹽的濃度，就會(huì)出現(xiàn)明顯的分層。

②然后再用分液漏斗將油層和水層分開(kāi)。

③加入無(wú)水Na2s。4除去油層中的水分。

④過(guò)濾除去固體Na2s。4就可以得到玫瑰油了。

17、哪些因素會(huì)導(dǎo)致玫瑰精油的品質(zhì)較差？提高玫瑰精油品質(zhì)的方法是什么？

影響玫瑰精油品質(zhì)的因素：蒸微溫度和蒸儲(chǔ)時(shí)間。

蒸情溫度太高，蒸惘時(shí)間太短,產(chǎn)品品質(zhì)就比較差。

如果要提高玫瑰精油的品質(zhì)，可以延長(zhǎng)蒸饋的時(shí)間。

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18、橘皮精油的主要成分是什么？（檸檬烯。）

19、為什么不能用水蒸氣蒸儲(chǔ)法提取橘皮精油？

橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸譚時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解，使用水中蒸情又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊的問(wèn)題。

20、提取橘皮精油的方法是什么？（壓榨法。）

21、提取橘皮精油的實(shí)驗(yàn)流程：（石灰水浸泡一漂洗T壓榨T過(guò)濾T靜置T再次過(guò)濾一橘皮油）

22、石灰水的作用？（能夠破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分解果膠，防止橘皮壓榨時(shí)滑脫，提高出油率。）

23、柑橘皮中有大量的果蠟、果膠和水分，如果直接壓榨，出油率較低。為了提高出油率，應(yīng)該怎么做？

將柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。

24、壓榨是一個(gè)什么過(guò)程？

（壓榨是機(jī)械加壓過(guò)程，既將原料壓緊，防止原料滑脫，又要將油分?jǐn)D壓出來(lái)。）

25、為了使橘皮油易于與水分離，要加入哪兩種物質(zhì)？（相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%的NaHCCh和5%

的Na2s04。）

26、壓榨液的處理？

①先用鰻布袋過(guò)濾除去固體物和殘?jiān)?/p>

②然后離心進(jìn)一步除去質(zhì)量較小的殘留固體物；

③再用縫漏斗將上層的橘皮油分離出來(lái)；

④然后靜置5-7d,使雜質(zhì)沉淀,用吸管吸出上層澄清橘皮油，其余部分通過(guò)型過(guò)濾,濾液與吸出

的上層橘油合并，成為最終的橘皮精油。

27、橘皮在石灰水中的浸泡時(shí)間為？目的是什么？

10h以上。為了使橘皮浸透，這樣壓榨時(shí)不會(huì)滑脫，出油率高，并且壓榨液的黏稠度不會(huì)太高，過(guò)濾

時(shí)不會(huì)堵塞篩眼。

課題2胡蘿卜素的提取

1、胡蘿卜素可以分為哪幾類(lèi)？分類(lèi)依據(jù)是什么？

根據(jù)碳碳雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為a、樂(lè)Y三類(lèi)。

2、胡蘿卜素中最主要的組成成分是哪一類(lèi)？（B-胡蘿卜素。）

3、為什么可以用胡蘿卜素來(lái)治療夜盲癥、幼兒生長(zhǎng)發(fā)育不良、干皮癥等？

一分子的B一胡蘿卜素在人或動(dòng)物的小腸、肝臟等器官被氧化成兩分子的維生素A。夜盲癥、幼兒生

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長(zhǎng)發(fā)育不良、干皮癥都是因缺乏維生素A而引起的疾病。

4、胡蘿卜素除了用來(lái)治療各種疾病外，還有什么用途？

常用的食品色素；天然胡蘿卜素還具有使癌變細(xì)胞恢復(fù)成正常細(xì)胞的作用。

5、胡蘿卜素的性質(zhì)？

橘黃色結(jié)晶，化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醛等有機(jī)溶劑。

6、在用胡蘿卜做菜時(shí)，為什么會(huì)呈現(xiàn)出橘黃色？在用胡蘿卜做菜時(shí)要多加些油，原因是什么？

胡蘿卜素溶解在油中產(chǎn)生的。多加油的原因：胡蘿卜素易溶解在油中，溶解的胡蘿卜素容易被人體

吸收，因此炒胡蘿卜時(shí)要多加些油。

7、在工業(yè)生產(chǎn)上，提取天然B一胡蘿卜素的方法有哪幾種？

①?gòu)闹参镏刑崛。虎趶拇竺娣e養(yǎng)殖的巖藻中獲得；③利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)。

8、從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是什么？原因是？（萃取法。因?yàn)楹}卜素易溶于有機(jī)溶劑。）

9、胡蘿卜素能用水蒸氣蒸儲(chǔ);才是取嗎？原因是？

不能用水蒸氣蒸謠法。因?yàn)樗魵庹糁{法適用于分離揮發(fā)性較強(qiáng)的物質(zhì)，而胡蘿卜素不易揮發(fā)，不能

隨水蒸氣蒸憎出來(lái)。

10、提取胡蘿卜素的實(shí)驗(yàn)流程：（粉碎一干燥一萃取一過(guò)濾一濃縮一胡蘿卜素）

1L水溶性有機(jī)溶劑有哪些？水不溶性有機(jī)溶劑有哪些？

水溶性有機(jī)溶劑（能與水混溶）：乙醇、丙酮

水不溶性有機(jī)溶劑（不能與水混溶）：石油酸、乙酸乙酯、乙醛、苯、四氯化碳等

12、萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)具備什么條件？

（具有較高沸點(diǎn)，能夠充分溶解胡蘿卜素，且不與水混溶。）

13、乙副口丙酮能夠用于胡蘿卜素的萃取嗎？為什么？

不能。乙醇和丙酮是水溶性有機(jī)溶劑，在萃取中能與水混溶而影響萃取效果。

14、萃取的效率主要取決于什么？同時(shí)還受到哪些因素的影響？

主要因素：萃取劑的性質(zhì)和使用量。

次要因素：原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時(shí)間等。

15、一般來(lái)說(shuō)，要想萃取效果好，要保證什么？

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一般來(lái)說(shuō)，原料顆粒小，萃取