第03章 消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全課件

第3章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院劉晶星教授第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全消毒滅菌常用術(shù)語滅菌（sterilization）：殺滅物體上所有微生物的方法。消毒（disinfection）：殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物的方法。防腐（antisepsis）：防止或抑制皮膚表面細(xì)菌生長繁殖的方法。清潔（cleaning）：是指通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數(shù)量的過程。無菌（asepsis）和無菌操作：無菌是無活菌的意思，多是滅菌的結(jié)果。防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其它物品的操作技術(shù)，稱為無菌操作。第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全第一節(jié)消毒滅菌的方法一、物理消毒滅菌法（一）熱力滅菌法

1.干熱滅菌法

焚燒；燒灼；干烤；紅外線

2.濕熱滅菌法巴氏消毒法(pasteurization)；煮沸法；流動(dòng)蒸汽消毒法；間歇蒸汽滅菌法(fractionalsterilization)；高壓蒸汽滅菌法(autoclaving)第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全高壓蒸汽滅菌器第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全一、物理消毒滅菌法（一）熱力滅菌法（二）輻射殺菌法

1.紫外線

2.電離輻射

3.微波（microwave）（三）濾過除菌法

1.濾菌器(filter）液體除菌

2.空氣除菌采用生物潔凈技術(shù)（四）干燥與低溫抑菌法第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全濾器和層流室第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全二、化學(xué)消毒滅菌法（一）高效消毒劑（high-leveldisinfectants）

1.含氯消毒劑；2.過氧化物消毒劑；

3.醛類消毒劑；4.環(huán)氧乙烷（二）中效消毒劑（intermediate-leveldisinfectants）

1.含碘消毒劑；2.醇類消毒劑（三）低效消毒劑（low-leveldisinfectants）

1.季銨鹽類；2.氯已定；3.高錳酸鉀第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全固體二氧化氯消毒劑第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全第二節(jié)消毒滅菌的運(yùn)用（一）高危器械物品

用時(shí)需進(jìn)入無菌組織的物品。所有這些物品都應(yīng)該滅菌。（二）中危器械物品

用時(shí)不進(jìn)入無菌組織但接觸黏膜的器械。采用消毒即可。（三）低危器械物品

只接觸未損傷皮膚但不進(jìn)入無菌組織和不接觸黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。（四）快速周轉(zhuǎn)的醫(yī)療器械

一、醫(yī)療器械物品的消毒滅菌第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全（二）室內(nèi)空氣消毒滅菌

1.物理消毒法

①紫外線照射（1.5W/m3，1h）最常用；②濾過除菌：空氣通過孔徑小于0.2μm的高效過濾裝置以除去細(xì)菌和帶菌塵埃。

2．化學(xué)消毒法

包括化學(xué)消毒劑噴霧和熏蒸：①過氧乙酸噴霧、熏蒸；②過氧化氫噴霧；③二氧化氯溶液噴灑；④中草藥點(diǎn)燃煙熏。（三）手和皮膚的消毒用肥皂和流動(dòng)水經(jīng)常并正確洗手病原微生物污染時(shí)應(yīng)用消毒劑消毒。第二節(jié)消毒滅菌的運(yùn)用第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全（四）黏膜的消毒

（五）病人排泄物與分泌物的消毒滅菌

（六）病人污染物品的消毒

（七）飲水的消毒

（八）環(huán)境的消毒

第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全第三節(jié)影響消毒滅菌效果的因素一、微生物的種類二、微生物的物理狀態(tài)三、微生物的數(shù)量四、消毒劑性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間五、溫度六、酸堿度七、有機(jī)物第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全第四節(jié)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全生物安全（biosafety）是生物技術(shù)安全（safetyofbiotechnology）的簡稱。

狹義地指現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開發(fā)、應(yīng)用及轉(zhuǎn)基因生物可能對生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生潛在的危害。廣義地指與生物有關(guān)的各種因素對社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、人類健康及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全

病原微生物所致的安全問題，如病原微生物實(shí)驗(yàn)室的安全隱患、生物武器、生物恐怖、重大傳染病的暴發(fā)流行等，也是人類社會(huì)所面臨的最現(xiàn)實(shí)的生物安全問題。

病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全的核心是防擴(kuò)散和防感染。

關(guān)于病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全，我國法令包括對病原微生物的分類管理，對實(shí)驗(yàn)室的分級管理，實(shí)驗(yàn)室感染的控制以及監(jiān)督和法律責(zé)任等。

第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全一、病原微生物的分類

根據(jù)傳染性、感染后對個(gè)體或者群體的危害程度，病原微生物分為四類：

第一類是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。

第二類是指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。

第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全一、病原微生物的分類

第三類是指能夠引起人或動(dòng)物疾病，但一般情況下對人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。

第四類是指在通常情況下不會(huì)引起人或動(dòng)物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。

第一類、第二類統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。

第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全二、病原微生物實(shí)驗(yàn)室的分級級別處理對象一級對人體、動(dòng)植物或環(huán)境危害較低，不具有對健康成人、動(dòng)植物致病的致病因子。二級對人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險(xiǎn)的致病因子，對健康成人、動(dòng)植物和環(huán)境不會(huì)造成嚴(yán)重危害，具有有效的預(yù)防和治療措施。三級對人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴(yán)重的甚至是致命的疾病，或?qū)?dòng)植物和環(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預(yù)防治療措施。四級對人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險(xiǎn)的致病因子。沒有預(yù)防治療措施。第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全一、二級實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。三級、四級實(shí)驗(yàn)室從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。

從事高致病性病原微生物相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)應(yīng)當(dāng)有２名以上的工作人員共同進(jìn)行。在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的同一個(gè)獨(dú)立安全區(qū)域內(nèi)，只能同時(shí)從事一種高致病性病原微生物的相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。應(yīng)有健全安全保衛(wèi)制度。

第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)掌握實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程、生物安全防護(hù)知識(shí)和實(shí)際操作技能。應(yīng)有符合要求的防護(hù)用品，應(yīng)建立健康檔案；進(jìn)行預(yù)防接種。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有科學(xué)、嚴(yán)格的管理制度，定期對實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備、材料等進(jìn)行檢查、維護(hù)和更新，應(yīng)對廢水、廢氣以及其他廢物進(jìn)行合理處置，防止環(huán)境污染。第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全生物安全第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全三、實(shí)驗(yàn)室感染的控制以及監(jiān)督和法律責(zé)任

實(shí)驗(yàn)室感染控制工作包括定期檢查實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)、病原微生物菌（毒）種和樣本保存與使用、安全操作、實(shí)驗(yàn)室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實(shí)施情況。

實(shí)驗(yàn)室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時(shí)，預(yù)防、控制措施包括：①封閉被病原微生物污染的實(shí)驗(yàn)室或可能造成病原微生物擴(kuò)散的場所；②開展流行病學(xué)調(diào)查；③對病人進(jìn)行隔離治療，對相關(guān)人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢查；④對密切接觸者進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察；⑤進(jìn)行現(xiàn)場消毒；⑥對染疫或者疑似染疫的動(dòng)物采取隔離、撲殺等措施。第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全

監(jiān)督的主要內(nèi)容是監(jiān)督病原微生物實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行國家有關(guān)法律、行政法規(guī)、國家標(biāo)準(zhǔn)和要求的記錄、檔案及報(bào)告的情況。

法律責(zé)任的核心是承擔(dān)造成傳染病傳播、流行或者其他嚴(yán)重后果的法律責(zé)任。第03章消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全思考