聚乳酸及其制品中辛酸亞錫的測定 高效液相色譜法（征求意見稿）

1聚乳酸及其制品中辛酸亞錫的測定高效液相色譜法本文件規(guī)定了聚乳酸及其制品中辛酸亞錫含量測定的高效液相色譜法。本文件適用于聚乳酸及其制品中辛酸亞錫含量的測定。本文件檢測限為300mg/kg。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T16631高效液相色譜法通則3原理試料中的辛酸亞錫在堿性條件下水解生成辛酸鈉，水解液中辛酸鈉在18-冠-6醚的催化下與ω-溴苯乙酮進行衍生反應，N2吹干、流動相復溶后，注入高效液相色譜儀，262nm波長處測定，內(nèi)標法定量。4試劑和材料除非另有說明，本方法所用試劑均為優(yōu)級純。水應符合GB/T6682中一級水的要求，且使用前煮沸30min后蓋塞冷卻。注:實驗所涉及的玻璃器皿均需120℃加熱處理，塑料管先用乙醇沖洗、50℃加熱處理后使用。4.1乙腈(CH3CN)：色譜純。4.2甲醇(CH3OH)：色譜純。4.3二氯甲烷(CH2Cl2)：色譜純。24.4氫氧化鈉(NaOH)。4.5正己烷(C6H14)。4.6辛酸標準溶液(1000μg/mL)：CAS號：124-07-2，冷藏避光條件下保存。4.7庚酸標準溶液(1000μg/mL)：CAS號：111-14-8，冷藏避光條件下保存。4.8ω-溴苯乙酮：純度≥95.0%4.918-冠-6醚：純度≥95.0%。4.10氫氧化鈉(NaOH)溶液(1.0mol/L)：稱取40.0g氫氧化鈉，用水溶解并定容至1000mL。4.11ω-溴苯乙酮衍生試劑溶液(0.025mol/L)：準確稱取25.3mgω-溴苯乙酮于5mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容，密封保存。4.1218-冠-6醚衍生試劑溶液(0.005mol/L)：準確稱取65.0mg18-冠-6醚于50mL容量瓶中，用水溶解并定容，密封保存。4.13辛酸標準工作液：準確移取適量辛酸標準溶液(4.6)，用水稀釋成一系列辛酸標準工作液，當天配制，現(xiàn)用現(xiàn)配。4.14庚酸內(nèi)標工作液：準確移取適量庚酸標準溶液(4.7)1mL，用水稀釋至10mL，當天配制，現(xiàn)用現(xiàn)配。s儀器和設備5.1高效液相色譜儀：配紫外檢測器或二極管陣列檢測器。5.2分析天平：感量0.1mg和0.01g。5.3超聲波清洗器。5.4離心機：轉(zhuǎn)速不低于8000r/min。5.5帶磁力攪拌的冷凝加熱回流裝置：攪拌速度可調(diào)，加熱溫度80℃~100℃。5.6渦旋振蕩器。5.7恒溫培養(yǎng)箱：(50±2)℃。5.8氮吹儀：可控溫。5.9微孔濾膜：孔徑0.22μm，有機相。6試樣制備3聚乳酸樣品采用對角線分割法，取對角部分，如樣品較大可將其切碎，充分混勻，用四分法取樣或經(jīng)冷凍研磨粉碎。取200g混勻放入聚乙烯瓶中于-20℃~-16℃條件下保存。稱取試樣時，應攪拌均勻。7分析步驟7.1水解稱取5g試樣(精確至0.01g)于250mL球形燒瓶中，加入50mL二氯甲烷(4.3)，超聲10min使樣品溶解，加入50mL氫氧化鈉(NaOH)溶液(4.9)，加入一顆磁力攪拌子，于冷凝加熱回流裝置上反應1h，溫度設置為80℃。反應完畢冷卻后取上層水解溶液10mL于8000r/min離心5min，取上層溶液5mL用1.0mol/L鹽酸溶液調(diào)pH至7.0±0.1，備用。7.2衍生準確量取100μL上述上層溶液，加100μL內(nèi)標溶液，加0.5mL1.50mol/LHClO4，渦旋混合2min，加1mL正己烷，渦旋混合2min，3000r/min離心20min。準確量取上層正己烷溶液0.5mL，加20μL0.05mol/LKOH-甲醇溶液，混合，氮氣吹干，加衍生試劑溶液(4.10)100μL、衍生試劑溶液(4.11)50μL，渦旋混合、密封，于恒溫干燥箱中50℃反應0.5h。反應液50℃下氮氣吹干，加入0.5mL流動相復溶，過微孔濾膜，用于測定。7.4標準曲線的制作將標準系列工作溶液分別注入反向液相色譜儀中，內(nèi)標法標準系列工作溶液中辛酸與其對應內(nèi)標庚酸的濃度比為橫坐標，以辛酸的峰面積與其對應內(nèi)標庚酸的峰面積比為縱坐標，繪制標準曲線。辛酸與其對應內(nèi)標庚酸衍生物的色譜圖見附錄A中圖1。8測定8.1色譜參考條件a)色譜柱：C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），或相當者；b)流動相：甲醇-水（75+25，V/V）；c)流速：1.0mL/min；d)檢測波長：262nm；e）進樣量：20μL；4f）柱溫：35℃。8.2定性分析將試樣溶液注入液相色譜儀中進行測定，同樣測試條件下，試樣溶液中辛酸和庚酸的保留時間與標準工作溶液中相應的保留時間相比，偏差應在±2.5%以內(nèi)。8.3定量分析將試樣溶液注入液相色譜儀中，得到辛酸的峰面積，根據(jù)相應的標準曲線得到試樣溶液中辛酸的濃度。試樣溶液中的響應值應在標準曲線線性范圍內(nèi)，超過線性范圍，可適當減少取樣量重新測定。8.4空白試驗不稱取試樣，按試樣的水解、衍生和濃縮分析步驟操作。應不含有干擾待測組分的物質(zhì)。內(nèi)標法需要做不加內(nèi)標的樣品試驗，確認加入內(nèi)標的可行性。9結果計算試樣中辛酸亞錫的含量以質(zhì)量分數(shù)ω計，單位以毫克每千克(mg/kg)表示，按式(1)計算。X×f×n(1)式中：X-----樣品中辛酸亞錫含量，單位為毫克每千克(mg/kg)；C-----根據(jù)標準曲線算出的樣液中辛酸的含量，單位為微克每毫升(μg/mL)；V-----試樣加水提取后的定容體積，單位為毫升(mL)；m-----試樣的質(zhì)量，單位為克(g)；n-----樣液的稀釋倍數(shù)；f-----由辛酸換算為辛酸亞錫的換算系數(shù)。注:計算結果需扣除空白值,測定結果取兩次測定的算術平均值,計算結果保留至三位有效數(shù)字。10.