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文檔簡(jiǎn)介

第5課時(shí)動(dòng)物的克隆

【選考報(bào)告】

知識(shí)內(nèi)考試屬性及

考情解讀

容要求

1.簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞、組織培養(yǎng);說(shuō)出動(dòng)物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)

展歷程;描述細(xì)胞系及細(xì)胞株的含義。

2.簡(jiǎn)述動(dòng)物的克隆培養(yǎng)法。

3.描述動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度,說(shuō)出動(dòng)物難以克隆的

動(dòng)物的

加試(a)原因。

克隆

4.簡(jiǎn)述動(dòng)物的細(xì)胞融合技術(shù)及應(yīng)用。

5.簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞核移植的概念和程序。

6.列舉動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物細(xì)胞核移植的應(yīng)用和發(fā)展前

景。

課堂導(dǎo)學(xué)夯實(shí)基礎(chǔ),以例求法

一、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)和克隆形成

【知識(shí)梳理】

1.動(dòng)物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)

動(dòng)物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是動(dòng)物的細(xì)胞和組織培養(yǎng)。

2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

⑴培養(yǎng)過(guò)程

I組織塊,的切取I

;」?,---------,「機(jī)械消化|

|組織呷的分散再?gòu)?qiáng)

表現(xiàn)出生長(zhǎng)、分裂、接觸抑制和有

I細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)律的衰老、死亡等生命活動(dòng)現(xiàn)象

⑵原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)

將動(dòng)物組織通過(guò)酶或機(jī)械方法分散成單個(gè)細(xì)胞后進(jìn)行的初次培養(yǎng),稱(chēng)為原代培養(yǎng)。初次培養(yǎng)

的細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖一定時(shí)間后,由于空間不足或細(xì)胞密度過(guò)大導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)枯竭,影響細(xì)胞的生

長(zhǎng),因此需要重新用胰蛋白酶等處理,進(jìn)行分瓶擴(kuò)大培養(yǎng),稱(chēng)為傳代培養(yǎng)。

小貼士細(xì)胞貼壁和接觸抑制

(1)細(xì)胞貼壁:將培養(yǎng)液中分散的動(dòng)物細(xì)胞放入培養(yǎng)瓶中,置于適宜的條件下培養(yǎng),細(xì)胞很快

會(huì)貼附在瓶壁上,稱(chēng)為細(xì)胞貼壁。

(2)接觸抑制:當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱(chēng)

為細(xì)胞的接觸抑制。

注意①打破接觸抑制現(xiàn)象的方法:將貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼

續(xù)培養(yǎng),讓細(xì)胞繼續(xù)增殖。②癌變細(xì)胞沒(méi)有接觸抑制現(xiàn)象。

3.動(dòng)物組織培養(yǎng)

⑴概念:動(dòng)物組織在體外及人工條件下維持生活狀態(tài)或生是特性。

⑵結(jié)果:由于細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、變化,使得培養(yǎng)物的組織成分發(fā)生變化,長(zhǎng)期的培養(yǎng)結(jié)果最終成

了簡(jiǎn)單的細(xì)胞培養(yǎng)。

⑶在廣義的組培中還包括器官培養(yǎng),即器官的原基、器官的一部分或整個(gè)器官在體外和人工

控制的條件下得以保存、生長(zhǎng),在此過(guò)程中保持器官的結(jié)構(gòu)、功能及分化能力。

4.細(xì)胞系和細(xì)胞株

⑴細(xì)胞系:可連續(xù)傳代的細(xì)胞。原代培養(yǎng)物在首次傳代時(shí)就成為細(xì)胞系,能連續(xù)培養(yǎng)下去的

細(xì)胞系稱(chēng)為連續(xù)細(xì)胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系稱(chēng)為有限細(xì)胞系。二倍體細(xì)胞通常為有

限細(xì)胞系。連續(xù)細(xì)胞系被認(rèn)為是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系,大多數(shù)具有異倍體核型。有的連續(xù)細(xì)

胞系是惡性細(xì)胞系,具有異體致瘤性;有的連續(xù)細(xì)胞系獲得了不死性,但保留接觸抑制現(xiàn)象,

不致癌。

⑵細(xì)胞株:通過(guò)一定的選擇或純化方法,從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)

胞稱(chēng)為細(xì)胞株。細(xì)胞株一般具有恒定的染色體組型、同功酶類(lèi)型、病毒敏感性和生化特性等。

可以連續(xù)多次傳代的細(xì)胞株稱(chēng)為連續(xù)細(xì)胞株,可傳代次數(shù)有限的細(xì)胞株稱(chēng)為有限細(xì)胞株。

5.克隆培養(yǎng)法(或細(xì)胞克隆)

⑴概念:把一個(gè)單細(xì)胞從群體中分離出來(lái)單獨(dú)培養(yǎng),使之繁衍成一個(gè)新的細(xì)胞群體的技術(shù)。

⑵結(jié)果:由于來(lái)源于一個(gè)共同的祖細(xì)胞,所以稱(chēng)為純系,也就是克隆。

⑶提高細(xì)胞克隆形成率的措施:選擇適宜的培養(yǎng)基、添加血清(胎牛血清最好)、以滋養(yǎng)細(xì)胞

支持生長(zhǎng)、激素(胰島素等)刺激、使用C02培養(yǎng)箱、調(diào)節(jié)pH等。

02/17

A

【典例剖析】如圖是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答。

⑴動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是(A.細(xì)胞分化B.細(xì)胞增殖C.細(xì)胞全能性D.細(xì)胞

膜流動(dòng)性)。

(2)容器A中的動(dòng)物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是,然后用酶處理,這

是為了使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)。這樣做的目的是。

(3)培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行。在此瓶中培養(yǎng)一段時(shí)間后,有許多細(xì)胞衰老死亡,到這時(shí)的培養(yǎng)

稱(chēng)為。

(4)為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中,用處理,然后配制成,再分裝。

(5)在C瓶中正常培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程稱(chēng)為。

解析(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)理論基礎(chǔ)是細(xì)胞增殖。(2)在進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)應(yīng)盡量使細(xì)胞分散,便于與培

養(yǎng)液充分接觸進(jìn)行物質(zhì)交換,使其分散需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。(3)培養(yǎng)的過(guò)程分

為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩個(gè)大階段。當(dāng)培養(yǎng)到第10代左右,出現(xiàn)許多細(xì)胞衰老死亡現(xiàn)象,這

時(shí)為原代培養(yǎng)。(4)用胰蛋白酶處理使細(xì)胞從玻璃瓶壁上脫離下來(lái),配制成細(xì)胞懸浮液繼續(xù)培

養(yǎng)。(5)在C瓶中的培養(yǎng)屬于傳代培養(yǎng)。

答案(1)B

(2)剪碎組織(機(jī)械消化)胰蛋白使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸(3)原代培養(yǎng)

⑷胰蛋白酶細(xì)胞懸浮液

(5)傳代培養(yǎng)

【防錯(cuò)筆記】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中的“四個(gè)2”

(1)培養(yǎng)過(guò)程為“2”:原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)。

(2)傳代細(xì)胞為“2”:細(xì)胞株、細(xì)胞系。

(3)細(xì)胞生長(zhǎng)特點(diǎn)為“2”:貼壁生長(zhǎng)、接觸抑制。

(4)胰蛋白酶使用為“2”:分散組織塊、分散貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞。

【變式訓(xùn)練】下列動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,屬于原代培養(yǎng)的是()

A.用胰蛋白酶使組織分散成單個(gè)細(xì)胞的過(guò)程

B.從機(jī)體取得細(xì)胞后立即進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程

C.出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后取下的細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程

D.生物制藥廠(chǎng)通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)的方法生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物

解析原代培養(yǎng)是指從動(dòng)物機(jī)體組織取出細(xì)胞后的立即培養(yǎng),直到細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制為止。

因?yàn)榧?xì)胞的接觸抑制,細(xì)胞停止分裂增殖,并逐漸走向衰亡,所以要想繼續(xù)細(xì)胞培養(yǎng),必須

將細(xì)胞取下分裝后才能進(jìn)行,分裝后的細(xì)胞培養(yǎng)是傳代培養(yǎng)。生物制藥廠(chǎng)通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)法,

用于生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物的細(xì)胞一般具有無(wú)限增殖的能力,屬于傳代培養(yǎng)。

答案B

二,動(dòng)物的細(xì)胞融合技術(shù)及其應(yīng)用

【知識(shí)梳理】

L細(xì)胞融合與細(xì)胞雜交

⑴細(xì)胞融合

①概念:是指在一定的條件下將2個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞融合為一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。

②原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性。

③誘導(dǎo)融合的方法

a.物理方法和化學(xué)方法:電激法、聚乙二醇等。

b.生物方法:滅活的病毒(如滅活的仙臺(tái)病毒)。

(2)細(xì)胞雜交

①概念:基因型不同的細(xì)胞間的融合就是細(xì)胞雜交。

②過(guò)程

多核體一雜交細(xì)胞瑞嚏猛

③應(yīng)用:由于細(xì)胞雜交中染色體容易丟失,利用雜交細(xì)胞檢測(cè)特定染色體丟失與特定基因產(chǎn)

物(蛋白質(zhì))減少的對(duì)應(yīng)關(guān)系可以進(jìn)行基因定位。

小貼士滅活病毒誘導(dǎo)融合法

只能用滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑,這是因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子

重新排布,細(xì)胞膜打開(kāi),細(xì)胞發(fā)生融合;不能用不滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑是因?yàn)椴粶缁畹牟?/p>

04/17

毒會(huì)感染細(xì)胞,而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。

2.雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體的制備

⑴制備過(guò)程

小鼠注射抗氣B淋巴細(xì)胞、

誘導(dǎo)多種選擇培養(yǎng)基雜交克隆化培養(yǎng)

‘融合"細(xì)胞—福瘋

抗體檢測(cè)、

骨髓瘤細(xì)胞/

篩選

體外從培養(yǎng)液中提取

能分泌所需/培養(yǎng)

大量單克

抗體的雜交工

4隆抗體

瘤細(xì)胞、體內(nèi)/

培養(yǎng)從小鼠腹水中提取

①用外界抗原刺激動(dòng)物,使其發(fā)生免疫反應(yīng),使(效應(yīng))B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體。

②利用滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇等作介導(dǎo),使經(jīng)免疫的動(dòng)物的脾細(xì)胞與可以無(wú)限傳代的食

髓瘤細(xì)胞融合。

③經(jīng)過(guò)篩選、克隆培養(yǎng),獲得來(lái)自單一細(xì)胞的既能產(chǎn)生特異抗體、又能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)

胞克隆。

⑵單抗的運(yùn)用:可作為特異探針,研究相應(yīng)抗原蛋白的結(jié)構(gòu)、細(xì)胞學(xué)分布及其功能。

小貼士血清抗體與單克隆抗體比較

項(xiàng)目分泌細(xì)胞特點(diǎn)生產(chǎn)

單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞特異性強(qiáng)、靈敏度高產(chǎn)量高,易純化分離

各種(效應(yīng))

血清抗體特異性差、靈敏度低產(chǎn)量低,分離困難

B淋巴細(xì)胞

【典例剖析】狂犬

病病毒是RNA病毒,G蛋白和N蛋白是狂犬病病毒的主要抗原,它們刺激人體后可誘導(dǎo)人

體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體和細(xì)胞免疫反應(yīng)。如圖表示用生物工程制備抗狂犬病病毒單克隆抗體的過(guò)

程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

(1)圖中細(xì)胞1是小鼠體內(nèi)注入________后而獲得的細(xì)胞,細(xì)胞2為細(xì)胞。

細(xì)胞1具有產(chǎn)生_______的功能,細(xì)胞2的突出特點(diǎn)是-誘導(dǎo)細(xì)胞1和2融合的誘

導(dǎo)劑通常是或聚乙二醇。

⑵若細(xì)胞1基因型為HH,細(xì)胞2基因型為SS,則細(xì)胞3的基因型應(yīng)該是o在兩兩

融合后的眾多細(xì)胞中,基因的組合類(lèi)型還可能有。

⑶培養(yǎng)液的配方通常含有糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等,與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的

是,還含有。細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長(zhǎng),隨著細(xì)胞的增多,需要定期用使

細(xì)胞從瓶壁上脫離下來(lái),以便于分裝到更多的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

(4)圖中制備抗狂犬病病毒單克隆抗體過(guò)程利用了(不定項(xiàng)選擇:A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)B.

動(dòng)物細(xì)胞融合C.核移植D.轉(zhuǎn)基因)技術(shù)。

解析B淋巴細(xì)胞能夠產(chǎn)生特異性抗體,但不能在體外大量增殖,骨髓瘤細(xì)胞能夠無(wú)限增殖

但不能產(chǎn)生抗體,二者融合成的雜交瘤細(xì)胞不僅能夠在體外大量繁殖,而且能夠產(chǎn)生與相應(yīng)

的抗原進(jìn)行特異性結(jié)合的抗體。通過(guò)特定的選擇培養(yǎng)基可將雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái),進(jìn)行克隆

化培養(yǎng),便可大量制備單克隆抗體。單克隆抗體的制備利用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞

融合技術(shù)。

答案(1)狂犬病病毒(G蛋白抗原或N蛋白抗原)B淋巴骨髓瘤特異性抗體能夠無(wú)限

增殖滅活的仙臺(tái)病毒(2)HHSSHHHH、SSSS(3)動(dòng)物血清胰蛋白酶(4)AB

【防錯(cuò)筆記】

⑴免疫處理:取B淋巴細(xì)胞的動(dòng)物必須預(yù)先經(jīng)過(guò)免疫處理,否則不會(huì)產(chǎn)生特異性抗體。

⑵融合手段:動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)方式為滅活的病毒處理,其他物理、化學(xué)誘導(dǎo)融合的

手段與植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中原生質(zhì)體融合方法相同。

(3)雜種細(xì)胞:在誘導(dǎo)劑的作用下進(jìn)行細(xì)胞的誘導(dǎo)融合,形成的雜種細(xì)胞有三種:AA型、BB

型、AB型,只有AB型才是我們所需要的雜種細(xì)胞,所以需要用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。

(4)雜交瘤細(xì)胞:制備單克隆抗體時(shí)選用一種抗原處理的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融

合,產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞,它會(huì)兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的特性一在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖,同

時(shí)能產(chǎn)生某種特異性的抗體。

(5)兩次篩選:第一次篩選:B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后,有三種融合情況:B淋巴細(xì)

胞與B淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。而只

有B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)胞。

第二次篩選:對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),在雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生所需

抗體的雜交瘤細(xì)胞。

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(6)獲取單克隆抗體的場(chǎng)所:若在培養(yǎng)基中進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng),則從培養(yǎng)液中提??;若在小

鼠或其他動(dòng)物腹腔中培養(yǎng),則從腹水中提取。

【變式訓(xùn)練】用a表示骨髓瘤細(xì)胞,b表示B淋巴細(xì)胞,則細(xì)胞融合過(guò)程中兩次篩選的目的

分別為()

A.a、aa、ab、bb>b-a、aa、ab-ab細(xì)胞

B.a、aa、ab>bb>b-ab、bb、bfab細(xì)胞

C.a、aa、ab>bb、b—ab一產(chǎn)生特定抗體的ab細(xì)胞

D.a、aa、ab、bb、b—aa—能無(wú)限增殖的aa細(xì)胞

解析第一次篩選是為了獲得雜交瘤細(xì)胞,即ab。第二次篩選是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的

雜交瘤細(xì)胞。

答案C

三、動(dòng)物的克隆繁殖

【知識(shí)梳理】

L動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度

(1)在動(dòng)物發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞的發(fā)育潛能逐漸變窄。

⑵全能性大?。?/p>

受精卵〉胚胎細(xì)胞〉干細(xì)胞>高度分化的體細(xì)胞。

低等動(dòng)物細(xì)胞>高等動(dòng)物細(xì)胞。

2.動(dòng)物難以克隆的根本原因

來(lái)自動(dòng)物的體細(xì)胞均已發(fā)生了分化,基因組中基因的活動(dòng)很不完全,不能像受精卵那樣發(fā)揮

細(xì)胞的全能性,即細(xì)胞分化使得細(xì)胞發(fā)生了基因的差異性表達(dá),以此為起點(diǎn)進(jìn)行動(dòng)物克隆,

難度很大。

3.細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物的克隆繁殖

白色芬蘭母羊

、蘇格蘭黑面母羊

?)卵細(xì)胞

乳腺細(xì)胞

細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核

細(xì)胞核移植

重組細(xì)胞

?)(融合后的卵細(xì)胞)

動(dòng)物組培

(卵裂3次)1

早期胚胎(即八細(xì)胞胚)

胚胎移植|

置入另一頭蘇格蘭黑面母羊子宮

產(chǎn)下羊羔(克隆羊“多莉”)

原理和主要技術(shù):利用細(xì)胞核的全能性進(jìn)行核移植,將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉

細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成為一個(gè)新的胚胎,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)

體(克隆動(dòng)物)。

小貼土動(dòng)物細(xì)胞全能性的理解

(1)動(dòng)物體細(xì)胞由于發(fā)生了分化,基因組中的基因活動(dòng)不完全,即有的基因開(kāi)放,有的基因關(guān)

閉,細(xì)胞全能性受到限制,很難表達(dá)。

⑵由于細(xì)胞核中含有該物種的完整基因組,若給予促進(jìn)細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條

件,動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核仍可表現(xiàn)出全能性。

【典例剖析】世界上第一只克隆綿羊“多莉”的培育程序如圖所示,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。

I重組細(xì)胞I

電脈沖剌激

I早號(hào)胚胎I

一河移植

I另一頭母綿羊子圖

I克隆綿*“多莉T

⑴圖中a所指的細(xì)胞工程名稱(chēng)為0

⑵實(shí)施細(xì)胞工程a時(shí),所需的受體細(xì)胞大多采用動(dòng)物卵細(xì)胞或卵母細(xì)胞的原因是

⑶“多莉”面部的毛色是,請(qǐng)根據(jù)遺傳原理說(shuō)明判斷的依據(jù):

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

(4)繼植物組織培養(yǎng)之后,克隆綿羊的培育成功,證明動(dòng)物細(xì)胞核也具有。

(5)請(qǐng)舉一例,說(shuō)明克隆羊培育成功的實(shí)際意義。

(6)若黑面綿羊的基因型為AA,白面綿羊的基因型為aa,則所得克隆羊的基因型為。

解析細(xì)胞內(nèi)的絕大部分遺傳物質(zhì)(DNA)存在于細(xì)胞核內(nèi)的染色體上,所以生物的絕大部分

性狀如性別、毛色等是由核基因來(lái)控制的。

答案(1)核移植(2)細(xì)胞大,易操作且含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的蛋白質(zhì)因子(3)白色

“多莉”的全部核基因均來(lái)自白面綿羊(4)全能性

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(5)保存瀕危物種,繁育優(yōu)良品種,醫(yī)學(xué)上克隆器官(答出任一項(xiàng)均可)(6)aa

【防錯(cuò)筆記】

(1)在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,必須先去掉受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核,原因是

使核移植動(dòng)物的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自有利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞。

(2)體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物并不是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制,因?yàn)榭?/p>

隆動(dòng)物絕大部分DNA來(lái)自供體細(xì)胞核,但核外還有少部分DNA(如線(xiàn)粒體DNA)來(lái)自受體卵

母細(xì)胞。

I知識(shí)卡片I

1.動(dòng)物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是動(dòng)物的細(xì)胞和組織培養(yǎng)。

2.動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官朦蛋出單個(gè)細(xì)胞懸浮液加培養(yǎng)液原代培養(yǎng).傳代培

養(yǎng)。

3.提高細(xì)胞克隆形成率的措施是選擇適宜的培養(yǎng)基、添加血清、以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長(zhǎng)、激素

刺激、使用CO2培養(yǎng)箱、調(diào)節(jié)pH等。

4.

B淋巴細(xì)胞、rBB細(xì)胞

選擇一雜交瘤

B瘤細(xì)胞

骨髓瘤細(xì)胞/誘導(dǎo)培養(yǎng)細(xì)胞

、瘤瘤細(xì)胞

克隆九六戶(hù)4mg注入f小鼠體內(nèi)培養(yǎng)提取

雜交瘤細(xì)胞一*一-單克隆抗體

〔體外培養(yǎng)

5.“多莉”的生產(chǎn)過(guò)程運(yùn)用了核移植、胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)。

隨堂檢測(cè)分類(lèi)演練,點(diǎn)點(diǎn)突破

1.判斷正誤

(1)從機(jī)體取得細(xì)胞后立即進(jìn)行的培養(yǎng)過(guò)程屬于原代培養(yǎng)。(V)

(2)生物制藥廠(chǎng)通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)的方法生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物,屬于原代培養(yǎng)。(X)

(3)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中可用胃蛋白酶使組織分散成單個(gè)細(xì)胞。(X)

(4)單抗的制備運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。(J)

(5)細(xì)胞核移植是體細(xì)胞克隆的關(guān)鍵步驟。(J)

(6)將雄羊的體細(xì)胞核移入雌羊的卵細(xì)胞中,產(chǎn)生的克隆羊發(fā)育成熟后分泌雌激素。(X)

2.關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞和組織培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是()

A.動(dòng)物細(xì)胞和組織培養(yǎng)是動(dòng)物克隆技術(shù)的基礎(chǔ)

B.用于培養(yǎng)的細(xì)胞最好取自幼齡或胚胎動(dòng)物體內(nèi)的組織細(xì)胞

C.將所取的組織先用胰蛋白酶進(jìn)行處理,使其分散成單個(gè)細(xì)胞

D.動(dòng)物細(xì)胞、組織通過(guò)培養(yǎng)最終在體外能發(fā)育成一個(gè)新個(gè)體

解析動(dòng)物細(xì)胞的全能性隨分化程度的提高而受到限制,分化潛能變?nèi)?。?dòng)物細(xì)胞和組織在

體外不能發(fā)育為成熟的動(dòng)物個(gè)體。

答案D

3.關(guān)于細(xì)胞克隆的說(shuō)法錯(cuò)誤的是()

A.細(xì)胞克隆的遺傳性狀均一,表現(xiàn)的性狀相似

B.細(xì)胞克隆的最基本要求是保證克隆后的后裔細(xì)胞均來(lái)源于單個(gè)細(xì)胞

C.細(xì)胞克隆過(guò)程中需要。2,不需要C02

D.細(xì)胞克隆的最主要用途之一就是從普通細(xì)胞系中分離出缺乏特殊基因的突變細(xì)胞系

解析細(xì)胞克隆是把一個(gè)單細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng),使之繁衍成一個(gè)新的細(xì)胞群體,由于細(xì)胞進(jìn)行有

絲分裂,后裔細(xì)胞的遺傳性狀均一,表現(xiàn)的性狀相似;細(xì)胞克隆的主要用途就是分離出突變

細(xì)胞系。在細(xì)胞克隆過(guò)程中不僅需要02,還要使用C02培養(yǎng)箱用以調(diào)節(jié)pH。

答案c

4.利用細(xì)胞工程方法,以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正

確的是()

A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體

B.體外培養(yǎng)單個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞可以獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體

C.將等量效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合,經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞

D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者

解析經(jīng)過(guò)抗原刺激后的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合,產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞,克隆化培養(yǎng)

后的雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高的單克隆抗體。SARS病毒感染者體內(nèi)有病毒核

衣殼蛋白質(zhì),用相應(yīng)的單克隆抗體與之發(fā)生特異性結(jié)合的方法可加以診斷。

答案D

5.人的血清白蛋白在臨床上需求量很大,通常從人血中提取。由于艾滋病病毒(HIV)等人類(lèi)感

染性病原體造成的威脅與日俱增,使人們對(duì)血液制品顧慮重重。如果將人的血清白蛋白基因

導(dǎo)入奶牛細(xì)胞中,那么利用牛的乳汁來(lái)生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能。大致過(guò)程如下:

a.將人的血清白蛋白基因?qū)氪颇膛E咛ゼ?xì)胞,形成重組細(xì)胞①;

b.取出重組細(xì)胞①的細(xì)胞核,注入牛去核卵細(xì)胞中形成重組細(xì)胞②;

電脈沖刺激重組細(xì)胞②,促使其形成早期胚胎;

10/17

d.將胚胎移植到母牛的子宮中,最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛。

(1)重組細(xì)胞①的獲得是利用了技術(shù),它實(shí)現(xiàn)了奶牛胚胎細(xì)胞中的DNA與

的重組。

⑵重組細(xì)胞②的獲得是利用了克隆技術(shù)中的技術(shù),使重組細(xì)胞①的細(xì)胞核與牛的

________融合O

⑶由圖可知,動(dòng)物克隆技術(shù)的基礎(chǔ)是(A.動(dòng)物細(xì)胞融合B.動(dòng)物細(xì)胞的全能性C.

動(dòng)物細(xì)胞和組織培養(yǎng)D.核移植)。

(4)利用轉(zhuǎn)基因牛乳汁提取藥物工藝簡(jiǎn)單,甚至可直接飲用治病。如果將藥物蛋白基因移到動(dòng)

物(如牛)的膀胱上皮細(xì)胞中,利用轉(zhuǎn)基因牛的尿液生產(chǎn)提取藥物比乳汁提取藥物的更大優(yōu)越

性是:、。

(5)重組細(xì)胞②培養(yǎng)成早期胚胎利用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。下列與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)無(wú)密切關(guān)

系的是(A.細(xì)胞全能性的揭示B.噬菌體的研究C.細(xì)胞周期調(diào)節(jié)控制機(jī)理的分析

D.對(duì)癌變機(jī)理和衰老原因的研究)。

解析(1)基因工程可將目的基因——人的血清白蛋白基因與受體細(xì)胞牛胚胎細(xì)胞的DNA進(jìn)

行重組。(2)克隆技術(shù)中的細(xì)胞核移植技術(shù)可將去核的牛卵細(xì)胞與含有目的基因的供體細(xì)胞核

融合構(gòu)建重組細(xì)胞②。(4)建立膀胱生物反應(yīng)器的好處是可以不分動(dòng)物的性別及不同生長(zhǎng)發(fā)育

期,均可產(chǎn)生所需藥物。(5)噬菌體是細(xì)菌病毒,無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),A、C、D項(xiàng)所述的內(nèi)容都與細(xì)

胞培養(yǎng)技術(shù)密不可分。

答案(1)基因工程人的血清白蛋白基因(2)核移植去核卵細(xì)胞(3)C(4)處于不同發(fā)

育時(shí)期的動(dòng)物都可生產(chǎn)雌性和雄性動(dòng)物都可生產(chǎn)(5)B

教材問(wèn)題詳解助教興學(xué),教材通關(guān)______________________________________________________

[思考與練習(xí)](第38頁(yè))

一、判斷題

1.X[細(xì)胞系指可連續(xù)傳代的細(xì)胞,細(xì)胞株是指通過(guò)一定的選擇或純化方法,從原代培養(yǎng)物

或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞。]

2.X[細(xì)胞克隆的最基本要求是必須保證分離出來(lái)的細(xì)胞是一個(gè)而不是多個(gè),即必須肯定所

建成的克隆來(lái)源于單個(gè)細(xì)胞。]

3.V

4.X[“多莉”是利用體細(xì)胞進(jìn)行核移植克隆的。]

二、簡(jiǎn)答題

L制備單克隆抗體時(shí),B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體,但不能無(wú)限增殖;骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖,

但不能產(chǎn)生抗體,只有二者融合形成的雜交瘤細(xì)胞才能既無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生抗體。雜交瘤

細(xì)胞用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,在該培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核

的細(xì)胞都會(huì)死亡,只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)。這種雜種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖,

又能產(chǎn)生特異性的抗體。對(duì)上述經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)

多次培養(yǎng)篩選就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。

2.克隆的細(xì)胞來(lái)源不同:前者是動(dòng)物胚胎細(xì)胞,后者是動(dòng)物體細(xì)胞??寺〉姆椒ú煌呵罢?/p>

是胚胎細(xì)胞直接克隆,后者是體細(xì)胞核移植到去核卵細(xì)胞中進(jìn)行克隆??寺〉慕Y(jié)果不同:前

者是胚胎細(xì)胞無(wú)性繁殖的結(jié)果,其本質(zhì)還是兩性生殖細(xì)胞結(jié)合后的有性生殖產(chǎn)物;后者是與

體細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)相同的重建合子發(fā)育的產(chǎn)物,是真正意義上的克隆。

課時(shí)作業(yè)課后訓(xùn)練,練出高分___________________________________________________________

(時(shí)間:30分鐘滿(mǎn)分:50分)

—v選擇題(共8小題,每小題2分,共16分)

1.實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()

A.甲過(guò)程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒

B.乙過(guò)程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶消化

C.丙過(guò)程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型

D.丁過(guò)程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性

解析進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)前需要對(duì)提供實(shí)驗(yàn)材料的動(dòng)物進(jìn)行消毒,A正確;進(jìn)行培養(yǎng)的組織需先

用胰蛋白酶處理,使其消化分散成單個(gè)細(xì)胞,B正確;丙過(guò)程屬于原代培養(yǎng),細(xì)胞的核型穩(wěn)

定,C錯(cuò)誤;丁過(guò)程屬于傳代培養(yǎng),期間細(xì)胞屬于細(xì)胞系,具有異質(zhì)性,D正確。

答案C

2.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()

A.培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞

B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變

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C.二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的

D.惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

解析動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中有接觸抑制現(xiàn)象,細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中會(huì)貼壁生長(zhǎng),形成一層細(xì)胞,

相互接觸后停止生長(zhǎng)??寺∨囵B(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中,僅有極少數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變。二倍

體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)一般傳至10代后就不易傳下去了。惡性細(xì)胞系的細(xì)胞具有不死性,可以進(jìn)

行傳代培養(yǎng)。

答案D

3.下列關(guān)于動(dòng)物克隆的敘述中,錯(cuò)誤的是()

A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)獲得的有限細(xì)胞株大多數(shù)具有異倍體核型

B.細(xì)胞克隆可以從普通細(xì)胞系中分離出缺乏特殊基因的突變細(xì)胞系

C.提高動(dòng)物細(xì)胞克隆形成率需要以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長(zhǎng)及激素刺激等條件

D.核移植形成的重組細(xì)胞在初次分裂時(shí)核基因不轉(zhuǎn)錄

解析連續(xù)細(xì)胞系被認(rèn)為是發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系,大多數(shù)具有異倍體核型。

答案A

4.胃癌是我國(guó)發(fā)生率很高的一種惡性疾病,制備抑制胃癌細(xì)胞增殖的單克隆抗體對(duì)治療胃癌

具有重要意義??刮赴﹩慰寺】贵w制備過(guò)程如下圖。以下說(shuō)法正確的是()

’的胃迪小虹甲

癌細(xì)胞融合;笳選,丙(專(zhuān)一抗體一抗胃癌單

骨髓腐細(xì)胞A)克隆化培養(yǎng)檢驗(yàn)陽(yáng)性)克隆抗體

A.誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞與甲融合,可用的誘導(dǎo)因素只有滅活的病毒

B.在甲、乙、丙及骨髓瘤細(xì)胞中,乙、丙經(jīng)培養(yǎng)后,均可獲得大量的抗胃癌單克隆抗體

C.用人的胃癌細(xì)胞反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體

D.單克隆抗體制備過(guò)程中需加入血清

解析誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的因素除了滅活的病毒外,還有振動(dòng)、離心、聚乙二醇、電激等;

只有細(xì)胞丙既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗胃癌單克隆抗體;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要向合成培養(yǎng)

基中加入血清,因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中需要一些未知天然成分,而血清中含有這些天然成

分。

答案D

5.將基因型為Aa和基因型為Bb的動(dòng)物體細(xì)胞混合,用滅活的仙臺(tái)病毒處理后,不可能獲得

下列哪種基因型的細(xì)胞()

A.AAaaB.AaBb

C.AabbD.BBbb

解析基因型為Aa和基因型為Bb的動(dòng)物體細(xì)胞之間可以自由融合,在兩兩(即Aa和Aa、

Aa和Bb、Bb和Bb)融合的情況下,可產(chǎn)生AAaa、AaBb、BBbb三種基因型的細(xì)胞。

答案C

6.科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆

抗體。與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞是()

A.經(jīng)過(guò)特定抗原免疫的B淋巴細(xì)胞

B.不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞

C.經(jīng)過(guò)特定抗原免疫的T淋巴細(xì)胞

D.不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞

解析骨髓瘤細(xì)胞必須與經(jīng)過(guò)特定抗原免疫的B淋巴細(xì)胞融合,形成雜交瘤細(xì)胞,才能大量

增殖并產(chǎn)生能夠與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合的單克隆抗體。

答案A

7.下圖為克隆羊“多莉”的培育過(guò)程示意圖:

甲羊的乳早

腺細(xì)胞核宜植入丙羊子宮.克隆羊

細(xì)

件發(fā)育、分娩"“多莉”

乙羊的去胎

核卵細(xì)胞一

下列各項(xiàng)有關(guān)表述錯(cuò)誤的是()

A.克隆羊“多莉”的主要性狀與甲羊一致,因?yàn)槠浼?xì)胞核基因來(lái)自甲羊

B.克隆羊“多莉”的培育過(guò)程中采用的生物技術(shù)有核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等

C.乙羊的去核卵細(xì)胞為重組細(xì)胞的基因表達(dá)提供了細(xì)胞內(nèi)的環(huán)境條件

D.此過(guò)程說(shuō)明高度分化的動(dòng)物細(xì)胞具有全能性

解析生物的性狀主要由細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)控制,克隆羊的性狀與提供細(xì)胞核的個(gè)體基本

一致,A正確;甲羊的體細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中形成重組胚胎后,在體外適宜條件下

培養(yǎng)至早期胚胎,再移植到第三只羊的子宮內(nèi)完成妊娠、分娩等過(guò)程,B正確;選擇去核卵

細(xì)胞的原因是因?yàn)槠浼?xì)胞大,易操作,且細(xì)胞質(zhì)中含有使體細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì),C正

確;此實(shí)驗(yàn)只能說(shuō)明高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性,D錯(cuò)誤。

答案D

8.下列有關(guān)克隆技術(shù)的敘述正確的是()

A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),保留接觸抑制的連續(xù)細(xì)胞系獲得不死性,但不致癌

B.由于植物細(xì)胞具有全能性,水稻等在多次傳代培養(yǎng)后,細(xì)胞全能性的表達(dá)能力不變

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c.從個(gè)體中分離出單個(gè)組織進(jìn)行培養(yǎng)是細(xì)胞克隆最基本要求

D.原生質(zhì)體的獲取需在較低滲透壓的環(huán)境下進(jìn)行

解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),保留接觸抑制的連續(xù)細(xì)胞系獲得不死性,但不致癌,A正確;從個(gè)

體中分離單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),是細(xì)胞克隆最基本要求,C錯(cuò)誤。

答案A

二、非選擇題(共4小題,共34分)

9.(9分)動(dòng)物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對(duì)于研究器官的生理、病理過(guò)程及其機(jī)制意義重大。如圖是

一個(gè)新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

璃蓋

養(yǎng)

⑴肝臟切成小薄片,這有利于肝臟細(xì)胞

(2)氣室中充入5%CO2氣體的主要作用是

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

⑶如果經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織移植給患者,培養(yǎng)的細(xì)胞來(lái)源最好是

______________________________________________________________,以避免移植后發(fā)生

免疫排斥現(xiàn)象。

⑷動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面_______時(shí),細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖,

這種現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的。此時(shí),瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是,要使貼壁的細(xì)胞

從瓶壁上分離下來(lái),需要用酶處理。

(5)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多,絕大部分細(xì)胞分裂停止,進(jìn)而出現(xiàn)現(xiàn)象;

但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖,而被稱(chēng)為。

解析(1)肝臟切成小薄片,有利于肝臟細(xì)胞透過(guò)濾紙從培養(yǎng)液中吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。同時(shí)有利于

與外界進(jìn)行氣體交換和自身代謝廢物的排出。(2)組織培養(yǎng)時(shí)5%CO2有維持培養(yǎng)液pH的功能。

(3)皮膚克隆就是皮膚細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂增殖,其遺傳物質(zhì)沒(méi)有改變,培養(yǎng)的細(xì)胞來(lái)源最好是

患者本人的健康皮膚,以防移植后發(fā)生排斥現(xiàn)象。(4)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生

長(zhǎng)到相互接觸時(shí),就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱(chēng)為接觸抑制。瓶壁上形成的細(xì)胞成單層排

列,要使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái),需用胰蛋白酶處理,溶解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)。(5)

隨著細(xì)胞傳代次數(shù)增多,絕大部分細(xì)胞分裂停止,出現(xiàn)衰老或死亡現(xiàn)象。

答案(1)吸收氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物(2)維持培養(yǎng)液適宜的pH(3)患者本人的健

康皮膚(4)相互接觸接觸抑制單層(或一層)胰蛋白(5)衰老甚至死亡連續(xù)細(xì)胞系

10.(8分)下圖為單克隆抗體制備過(guò)程的各階段圖解,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。

O**.O

已產(chǎn)生免疫反應(yīng)注射特定抗原培養(yǎng)骨髓雜交瘤體外培養(yǎng)陽(yáng)

的B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞細(xì)胞性細(xì)胞

ABCDE

骨髓瘤細(xì)胞單克隆抗體陽(yáng)性的細(xì)胞射到小鼠體內(nèi)

FGHI

⑴請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過(guò)程的順序連接起來(lái):

⑵在單克隆抗體制備過(guò)程中選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞

具有、的特性。

⑶由圖中可以看出,在單克隆抗體制備過(guò)程中運(yùn)用了和

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