家兔小腸平滑肌實驗小腸運動形式的

家兔小腸平滑肌實驗

小腸運動形式的觀察離體組織灌流方法(了解)保證離體器官存活的條件：

1.溫度2.營養(yǎng)3.PH4.酸堿度5.滲透壓…..目前的離體灌流組織應用：

1.家兔離體小腸

2.大鼠、小鼠離體子宮

3.大鼠離體動脈條

4.豚鼠離體氣管條

5.蟾蜍、蛙、大鼠離體心臟

………...消化道平滑肌的一般生理特性：收縮遲緩：舒縮運動≥20S/次。富有伸展性：伸長可達原來長度2—3倍。緊張性：常保持一種微弱的持續(xù)收縮狀態(tài)。節(jié)律性收縮：離體后于合適環(huán)境中仍能節(jié)律性收縮。對電刺激不敏感，對化學、機械等刺激敏感。1小腸平滑肌也具有上述生理特性。2實驗原理實驗原理和背景知識小腸運動受到神經(jīng)和體液的調節(jié)小腸的運動形式緊張性收縮分節(jié)運動蠕動移行性復合運動（MMC）體液調節(jié):胃腸激素如胃泌素、縮膽囊素、促胰液素等神經(jīng)調節(jié):掌握消化道平滑肌的一般生理特性。觀察某些因素（溫度、pH值、藥物）對小腸平滑肌舒縮活動的影響。觀察哺乳動物小腸的運動形式以及神經(jīng)和某些藥物對其運動的影響。學習哺乳動物類離體小腸平滑肌的制備方法。實驗目的實驗材料動物：家兔藥品：25%氨基甲酸乙酯、臺氏液、1mol/L鹽酸溶液、1mol/LNaOH溶液、0.001%乙酰膽堿溶液、001%去甲腎上腺素溶液、1%氯化鈣溶液器材：恒溫平滑肌實驗裝置、生物信號采集系統(tǒng)、張力換能器、計算機、兔臺及手術器械在體實驗01麻醉和固定：稱重，計算麻藥計量（4ml/kg的25%氨基甲酸乙酯），耳緣靜脈麻醉，鑒別后固定于兔臺上。02腹部手術：腹部剪毛、自劍突下沿腹部正中線切開腹壁（10cm）。打開腹腔，暴露胃腸道并尋找小腸。用皮鉗夾住兩側腹壁并提起形成皮兜。03觀察：①正常小腸的運動形式；②局部滴加乙酰膽堿后小腸的運動形式；③局部滴加去甲腎上腺素后小腸的運動形式。04實驗步驟取出腸段置于室溫臺氏液中輕輕漂洗，去除當腸內容物，將腸管分成數(shù)段，每段長2-3cm，兩端各用系好線的蛙心夾夾住。離體實驗找出胃幽門與十二指腸交界處，由此取長20—30cm的腸管，不留腸系膜。家兔一只，處死后迅速行腹部手術。將離體平滑肌連接于設定溫度好溫度（38℃）恒溫平滑肌槽、張立換能器（書圖7-1,p121）上。打開電腦和生物信號采集系統(tǒng)。實驗方法張力換能器蛙心夾浴槽小腸段收縮曲線：---上升支舒張曲線：---下降支基線上移：緊張性升高基線下降：緊張性下降幅度增加：收縮力增強幅度減低：收縮力減弱波峰間距：代表收縮頻率離體小腸收縮曲線代表意義離體實驗：1觀察離體小腸平滑肌的正常波形2觀察pH值對小腸平滑肌的作用：3浴槽內加1mol/LHCI溶液2-4滴，觀察平滑肌的反應（觀察后立即沖洗和更換臺氏液）。4實驗步驟231乙酰膽堿的作用：浴槽內加入0.001%的乙酰膽堿溶液2-4滴，觀察平滑肌的反應（觀察后立即沖洗和更換臺氏液）。去甲腎上腺素的作用：浴槽內加入0.001%的去甲腎上腺素溶液2-4滴，觀察平滑肌的反應（觀察后立即沖洗和更換臺氏液）。觀察溫度的影響：分別加入室溫臺式液、25℃臺式液，觀察平滑肌的反應。離體實驗：觀察項目實驗過程中必須保證標本的供氧(通氣)及浴槽內臺氏液的恒溫(38℃)。1灌流浴槽內的液面高度應保持恒定。2放大器零點調好后不要再移動旋鈕，以免影響基線。上述各藥液加入的量系參考數(shù)據(jù)，效果不明顯者可以添加。3每次實驗效果明顯后立即放掉含藥液的臺氏液，并沖洗多次，以免平滑肌出現(xiàn)不可逆反應。4每項處理必須有處理標記。5注意事項23145制備小腸平滑肌標本時，為什么要取小腸上段，尤其是十二指腸段的平滑肌？要保持小腸平滑肌較好的活性，實驗過程中要注意什么？本實驗藥品對小腸平滑肌的作用效果及其機制。取腸時為什么采用擊昏家兔而不用在麻醉下進行?胃腸平滑肌有哪些運動形式以及生理特性思考題實驗結果分析正常NaOHHClAchNA氯化鈣25℃No.1加入乙酰膽堿，可見收縮的幅度上升，基線抬高，頻率加快。No.2消化道平滑肌細胞產(chǎn)生動作電位的離子基礎是鈣內流，ACh--M受體結合，使鈣通道開放，使肌漿中的鈣升高，進而激活肌纖蛋白-肌凝蛋白-ATP系統(tǒng)，使平滑肌收縮，肌張力增加。故乙酰膽堿對小腸運動有加強作用。實驗結果分析加入去甲腎上腺素可見收縮的幅度小，基線下移，頻率較慢。01消化道平滑肌細胞上有αβ兩種受體，NA可作用于α受體，使肌膜及肌質網(wǎng)上的鉀離子通道開放，鉀的外流增加，使膜發(fā)生超極化，腸肌興奮性下降，肌張力下降。同時，NA還作用于β受體，使腸肌膜細胞中的cAMP合成增加，肌膜及肌質網(wǎng)上鈣外流增加，也使肌張力下降。02實驗結果分析加入HCl溶液可見小腸平滑肌收縮的幅度減小，基線下移，頻率較慢?？赡苁菤潆x子與鈣有競爭作用，氫離子增加，使鈣與腸肌細胞的鈣調素（Ca-M）結合少，而使腸肌細胞的收縮力下降。氫氧離子中和氫離子，從而削弱了氫離子與鈣離子的競爭作用，使鈣調素與鈣離子結合數(shù)量增多所至。加入氫氧化鈉：小腸平滑肌收縮的幅度增大，基線上移。03010204實驗結果分析加入氯化鈣溶液可見小腸平滑肌收縮的幅度增加，基線抬高，頻率加快。1細胞外液中存在較多的鈣離子，而鈣離子則是肌肉收縮的必要條件。平滑肌細胞興奮→肌膜被激活→細胞外鈣離子進入膜內，而且肌漿網(wǎng)釋放鈣離子→鈣離子濃度升高→鈣離子與鈣調蛋白結合→肌球蛋白激酶活化→