血液自動分析的檢測原理及臨床應(yīng)用（臨床檢驗技術(shù)課件）

檢測原理目錄CONTENTⅠ電阻抗法檢測原理Ⅱ光化學檢測原理聯(lián)合檢測原理Ⅲ血栓與止血一般檢查Ⅵ血小板檢驗Ⅴ電阻抗法檢測原理電阻抗法血細胞計數(shù)原理又名庫爾特原理。概述01電阻抗法血細胞計數(shù)原理01電阻抗法血細胞計數(shù)原理01電阻抗法血細胞計數(shù)原理根據(jù)電阻抗原理，將體積分為35～450fl的白細胞，分為256個通道，淋巴細胞位于35～90fl的小細胞區(qū)，中性粒細胞位于160fl以上的大細胞區(qū)，單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、原始細胞、幼稚細胞等，位于90～160fl的中間型細胞區(qū)。02白細胞分類計數(shù)原理白細分類計數(shù)直方圖根據(jù)各亞群占總體的比例，計算出各亞群細胞的百分率，并同時計算各亞群細胞的絕對值02白細胞分類計數(shù)原理光（化）學檢測原理01激光散射法用于細胞的分類計數(shù)01激光散射法用于細胞的分類計數(shù)02常用于血液分析儀檢測的染料

熒光染料非熒光染料主要用于核酸染色，被激光照射后產(chǎn)生熒光和散射光有：亞甲基藍、氯唑黑E和過氧化物酶等03非熒光染料亞甲基藍用于核酸染色過氧化物酶試劑用于單核細胞、嗜酸性粒細胞、中性粒細胞的染色氯唑黑E用于單核細胞、嗜酸性粒細胞、中性粒細胞顆粒及白細胞的膜結(jié)構(gòu)染色03非熒光染料經(jīng)過染色的細胞，隨鞘液流經(jīng)激光檢測區(qū)時，被染色部分可發(fā)生，光吸收現(xiàn)象，使光檢測器接收到的散射光強度發(fā)生改變，將各種光（化）學信息，進行綜合分析，可準確區(qū)分正常類型的細胞?？偨Y(jié)血液中血紅蛋白的測定，采用分光光度法，應(yīng)用的是朗伯比爾定律聯(lián)合檢測原理01體積、電導、光散射法應(yīng)用電阻抗原理可測定細胞體積采用高頻電磁探針，測量細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，細胞核漿比例及細胞內(nèi)化學成分利用細胞內(nèi)顆粒物對單色光的散射程度不一，獲得細胞內(nèi)部顆粒信息02光散射與細胞化學法用各種白細胞在染色下，著色不同，進行分類計數(shù)單個細胞通過激光束時，利用不同類型的白細胞對光的阻擋及散射特點不同，來進行分類計數(shù)03多角度偏振散射光當單個細胞通過激光束時，從0度、7度、90度及90度去偏振，4個不同位點收集光的信息，由于不同類型的白細胞體積大小，內(nèi)部結(jié)構(gòu)不一樣，對光的阻擋及散射都有著自己的特點，以此可對白細胞進行分類計數(shù)04電阻抗、射頻、流式細胞術(shù)與核酸熒光染色法04電阻抗、射頻、流式細胞術(shù)與核酸熒光染色法利用流式及核酸熒光染色法，獲得每個細胞的前向散射光（FSC）,側(cè)向散射光(SSC)，和側(cè)向熒光（SFL）三種光信號，綜合這些參數(shù)可以對白細胞進行分類計數(shù)。05雙鞘流技術(shù)和細胞化學染色非嗜堿性粒細胞分類計數(shù)通道嗜堿性粒細胞分類計數(shù)專用通道采用雙通道對白細胞進行分類計數(shù)05雙鞘流技術(shù)和細胞化學染色用氯唑黑E，將白細胞進行染色分類利用激光流式細胞技術(shù)，檢測細胞信息綜合這些參數(shù)可以對白細胞進行分類計數(shù)臨床應(yīng)用目錄CONTENTⅠ血細胞分析儀的操作方法、注意事項Ⅱ血細胞分析儀檢測參數(shù)及臨床應(yīng)用細胞分布圖及臨床應(yīng)用Ⅲ血栓與止血一般檢查Ⅵ常見報警及干擾因素Ⅳ檢測結(jié)果顯微鏡復(fù)查規(guī)則Ⅴ血細胞分析儀的使用及注意事項血細胞分析儀的使用及注意事項

血細胞分析儀血細胞分析儀的使用及注意事項在使用血細胞分析儀前，必須先掌握分析儀的檢測原理血細胞分析儀的使用及注意事項不同類型、型號的儀器操作程序并不完全相同操作前應(yīng)仔細參閱儀器的說明書認真學習實驗室的標準操作程序掌握正確的操作方法掌握正確的操作步驟開始使用儀器獨立檢測標本血細胞分析儀的使用及注意事項標本準備：使用EDTA-K2抗凝全血，采集靜脈血適量，充分混勻，常溫保存，立即送檢儀器準備：開機前檢查器配套試劑、環(huán)境溫度、廢物液桶，開啟電源，待儀器完成自檢室內(nèi)質(zhì)控：完善室內(nèi)質(zhì)控的檢測，確定儀器在控開始檢測：將待測血清置于檢測架上，編制檢測命令，啟動檢測程序結(jié)果審核與報告：審核檢測的結(jié)果，發(fā)出檢測報告操作步驟血細胞分析儀細胞分布圖及臨床應(yīng)用01紅細胞直方圖的臨床應(yīng)用是一條近似正態(tài)分布的單峰曲線，通常位于36～360fl范圍內(nèi)，橫坐標表示紅細胞體積，縱坐標表示,不同體積紅細胞,出現(xiàn)的頻率。正常紅細胞主要分布在50～200fl范圍內(nèi)02異常紅細胞直方圖分析紅細胞直方圖時，應(yīng)注意觀察直方圖峰的位置、峰底開口寬度、峰頂形狀及有無雙峰現(xiàn)象03對紅細胞直方圖的分析一方面有助于貧血的診斷，如缺鐵性貧血、巨幼細胞性貧血及鐵粒幼細胞性貧血；另一方面，也可用于貧血的療效觀察。缺鐵性貧血巨幼細胞性貧血地中海貧血缺鐵性貧血治療有效后03對紅細胞直方圖的分析正常紅細胞直方圖小紅細胞且大小不均紅細胞直方圖03對紅細胞直方圖的分析正常紅細胞直方圖大紅細胞且大小不均紅細胞直方圖03對紅細胞直方圖的分析IDA治療有效紅細胞直方圖呈雙峰正常紅細胞直方圖03對紅細胞直方圖的分析MA治療有效紅細胞直方圖呈雙峰正常紅細胞直方圖04白細胞直方圖的臨床應(yīng)用04白細胞直方圖的臨床應(yīng)用淋巴細胞增多白細胞直方圖04白細胞直方圖的臨床應(yīng)用原始幼稚白細胞增多正常紅細胞直方圖04白細胞直方圖的臨床應(yīng)用中間細胞增多白細胞增多04白細胞直方圖的臨床應(yīng)用中間細胞增多白細胞增多05血小板直方圖的臨床應(yīng)用05血小板直方圖的臨床應(yīng)用06散點圖的臨床應(yīng)用平面二維（X、Y軸）圖像三維（X、Y、Z軸）圖像07白細胞散點圖的臨床應(yīng)用08紅細胞散點圖顯示光散射與細胞體積、血紅蛋白濃度的關(guān)系，它提供紅細胞的原始測定數(shù)據(jù)，和紅細胞的計數(shù)結(jié)果。血細胞分析儀常見報警和干擾因素概述報警形式圖形符號文字顏色變化當檢測結(jié)果,超出實驗室設(shè)定的參考區(qū)間時,儀器可出現(xiàn)報警。01血細胞分析儀常見報警白細胞檢測常用的報警提示有原始細胞?未成熟粒細胞?異型淋巴細胞?有核紅細胞?WBC散射圖異常核左移01血細胞分析儀常見報警紅細胞檢測常用的報警提示有紅細胞大小不均小紅細胞增多低色素性貧血紅細胞聚集？紅細胞碎片？HGB

干擾？RBC溶血不良大紅細胞增多乳糜血01血細胞分析儀常見報警血小板檢測常用的報警提示有PLT直方圖異常大血小板？血小板

聚集？02常見的干擾因素干擾RBC、Hb、MCV、MCH和MCHC等參數(shù)的常見因素冷凝集標本血液中存在冷凝集素，使紅細胞在離體后發(fā)生聚集。判斷方法：儀器出現(xiàn)“RBC聚集？”的報警，或MCV＞llOfl，標本管壁有小的RBC聚集塊。糾正方法：將標本置37℃孵育30分鐘，立即上機檢測。脂血標本脂血是最常見的干擾因素判斷方法：儀器出現(xiàn)“乳糜/血紅蛋白干擾”的報警；或MCHC≥365g/L；離心可見血漿出現(xiàn)渾濁。糾正方法：可采用離心，血漿置換后，再進行檢測溶血標本標本溶血時，由于紅細胞破壞導致紅細胞計數(shù)較真實值偏低，MCV減低，HCT也較真實值，偏低；MCH和MCHC都增高。解決方法：重新采集標本檢測02常見的干擾因素干擾RBC的常見因素有核紅細胞（NRBC）：在某些病理情況下外周血出現(xiàn)有核紅細胞糾正方法：利用手工分類計數(shù)對白細胞計數(shù)進行校正。紅細胞溶血不良：見于某些疾病，標本進行前處理時，不能將紅細胞完全溶解破壞解決辦法：采用手工方法分類計數(shù)WBC。02常見的干擾因素干擾WBC的常見因素有核紅細胞（NRBC）：在某些病理情況下外周血出現(xiàn)有核紅細胞糾正方法：利用手工分類計數(shù)對白細胞計數(shù)進行校正。紅細胞溶血不良：見于某些疾病，標本進行前處理時，不能將紅細胞完全溶解破壞解決辦法：采用手工方法分類計數(shù)WBC。02常見的干擾因素干擾PLT的常見因素小細胞性貧血標本：某些貧血患者的小紅細胞，被當成血小板進行計數(shù)，使PLT假性增高。糾正方法：用手工方法計數(shù)PLT。血小板聚集或血小板衛(wèi)星現(xiàn)象：血小板聚集及血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，使PLT計數(shù)假性降低。解決方法：解決血小板聚集的問題，再上機檢測。細胞碎片：儀器PLT計數(shù)異常增高；儀器出現(xiàn)“紅細胞溶血不良”或“碎片”的報警。解決辦法：采用手工方法計數(shù)PLT。02常見的干擾因素干擾網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的常見因素瘧原蟲和豪-焦（Howell-Jollys）小體使網(wǎng)織紅細胞計數(shù)（RET）假性增高。血細胞分析儀各項檢測參數(shù)及臨床應(yīng)用概述01紅細胞體積分布寬度RDW其參考區(qū)間為11.5%～14.5%。RDW有助于貧血的診斷與鑒別診斷用紅細胞體積的變異系數(shù)RDW-CV%表示RDW：紅細胞不均一性的參數(shù)02RDW的臨床應(yīng)用包括結(jié)合RDW和MCV兩個參數(shù)，作為貧血形態(tài)學分類的依據(jù)鑒別缺鐵性貧血和地中海貧血缺鐵性貧血患者的早期診斷和療效觀察02RDW的臨床應(yīng)用包括未成熟粒細胞（IG）及大型未染色細胞（LUC）的臨床意義。未成熟粒細胞（IG）IG增高可見于感染、腫瘤、類白血病反應(yīng)、骨髓增生性疾病和慢性粒細胞白血病等。大型未染色細胞（LUC）增多，主要見于感染、免疫性疾病、白血病等。02RDW的臨床應(yīng)用包括平均血小板體積（MPV）、血小板分布寬度（PDW）、大血小板比率（P-LCR）及血小板比容（PCT）的臨床應(yīng)用：1．平均血小板體積（MPV）MPV增高：見于血小板，在周圍血液中破壞增多，骨髓代償生成，增加時；也可見于骨髓纖維化、血栓性疾病及血栓前狀態(tài)、脾切除、慢性粒細胞白血病、巨大血小板綜合征等。MPV減低：骨髓造血系統(tǒng)衰竭時MPV下降，病情越嚴重，MPV越低；另外，嚴重感染伴敗血癥、脾亢、化療后、再生障礙性貧血及巨幼細胞性貧血時MPV減低。2．血小板分布寬度，增高見于急性白血病化療后、巨幼細胞性貧血、慢性粒細胞白血病、脾切除、巨大血小板綜合征、血栓性疾病等。血小板分布寬度減低：見于反應(yīng)性血小板增多癥、再生障礙性貧血。3．大血小板比率（P-LCR）P-LCR增高見于免疫性血小板減少、慢性出血、血小板增多癥、感染等。4．血小板比容（PCT）增高見于反應(yīng)性及原發(fā)性血小板增多癥、慢性粒細胞白血病早期。血小板比容減低，見于再生障礙性貧血、化療后及血小板減少癥時。02RDW的臨床應(yīng)用包括血細胞分析儀網(wǎng)織紅細胞成熟度分類血細胞分析儀網(wǎng)織紅細胞成熟度分類熒光(RNA)強度ReticulocytesPLTRBC高熒光強度低熒光強度中熒光強度WBC前向散射光(細胞大小)03網(wǎng)織紅分類的臨床應(yīng)用血細胞分析儀網(wǎng)織紅細胞成熟度分類未成熟網(wǎng)織紅細胞比率（IRF）的值，可作為評價骨髓造血功能，最早、且較靈敏的指標。紅細胞血型分類及命名01血型的概念血型（BG）是血液成分的一種遺傳多態(tài)性，是產(chǎn)生抗原抗體的遺傳性狀。血型是由血型基因決定的，不僅紅細胞表面存在抗原差異，白細胞、血小板、各種組織細胞表面亦存在抗原差異，并且血漿及體液中也存在抗原或抗體的差異。人類血型不僅與輸血有密切的關(guān)系，也與器官移植、骨髓移植、溶血性疾病、法醫(yī)鑒定及考古等有關(guān)。02紅細胞血型分類國際輸血協(xié)會（ISBT）紅細胞表面抗原命名委員會根據(jù)紅細胞血型抗原的生化特性、遺傳學特性、血清學表現(xiàn)等特點將所發(fā)現(xiàn)的人類紅細胞血型抗原分為血型系統(tǒng)、血型集合、高頻抗原組和低頻抗原組。03紅細胞血型命名對紅細胞血型的命名長期以來沒有統(tǒng)一規(guī)定，習慣上有的血型抗原用大寫英語字母表示，如ABO血型系統(tǒng)的A、B抗原；有的以大、小寫字母混合組成，如Lewis系統(tǒng)的Lea、Leb抗原；有的則以字母加數(shù)字來表示，如Duffy系統(tǒng)的Fy3、Fy5。03紅細胞血型命名1996年，ISBT紅細胞抗原命名委員會確定了紅細胞血型的命名和表述方法：6位數(shù)字和字母/數(shù)字兩種表述方式，前者適用于計算機語言，后者適用于一般閱讀、書寫和印刷。ISBT還規(guī)定，已有的命名不改變，新發(fā)現(xiàn)的抗原必須按“字母＋數(shù)字”符號系統(tǒng)標記。04紅細胞血型表述6位數(shù)字的前3位數(shù)字表示某一血型系統(tǒng)（001～030），后3位數(shù)字表示抗原的特異性。如001001、001002、001003、分