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備案號(hào):58311-2018DB22DB22/T394.3—2017保健用品微生物檢驗(yàn)方法第3部分:銅綠假單胞菌測(cè)定MicrobiologicalexaminemethodforhealthcarematerialPart3:DeterminationofPseudomonasaeruginosa吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I本部分代替DB22/T394-2004《1警示——使用本標(biāo)準(zhǔn)的人員應(yīng)有正規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。本標(biāo)準(zhǔn)并未指出所有可能的安全問銅綠假單胞菌Pseudomonasaer4.1滅菌生理鹽水:詳見附錄A.1。4.3滅菌吐溫-80:詳見附錄A.3。25.6無菌錐形瓶:100mL、25.14冰箱:2℃~5℃。驗(yàn)時(shí),應(yīng)從不少于2個(gè)包裝單位的取樣中共取10g(5.1)或10mL(5.2)。包裝量小于20g的樣品,采樣6.2.1供檢驗(yàn)樣品,應(yīng)嚴(yán)格保持原有的包裝狀態(tài)。容器不應(yīng)有破裂,在檢驗(yàn)前不得6.2.2接到樣品后,應(yīng)立即登記,編寫檢驗(yàn)序號(hào),并按檢驗(yàn)要求盡快檢驗(yàn)。如不能6.2.3若只有一個(gè)樣品而同時(shí)需做多種分析,如微生物、毒理、化學(xué)等,則宜先取6.2.4在檢驗(yàn)過程中,從打開包裝到全部檢驗(yàn)操作結(jié)束,均須防止微生物的再污染水溶性液體樣品,用滅菌吸管吸取10mL加到90mL(5.440℃~44℃水浴中(5.5)振蕩混合在40℃~44℃水浴中乳化,制成1:10的懸液。3親水性的樣品,稱取10g,加到裝有玻璃疏水性樣品,稱取10g,放到滅菌的研缽(5.7)中,加10mL滅菌液體石蠟,研磨成粘稠狀再加入10mL滅菌吐溫-80,研磨待溶解后,加70mL滅菌生理鹽水,在40℃~44℃水浴中充分混合,制成稱取10g,加到90mL滅菌生理鹽水中,充分振蕩(5.8)混勻,使其分散混懸,靜置后,取上清上,置36℃±1℃培養(yǎng)(5.9)18h~24h。凡4加入氯仿3mL~5mL(5.2充分振蕩使培養(yǎng)物中的綠膿菌素溶解于氯仿液內(nèi),待氯仿提取液呈藍(lán)色時(shí),用吸管將氯仿移到另一試管中并加入1mol±2h,觀察結(jié)果。凡在硝酸鹽胨水培養(yǎng)基內(nèi)的小倒管(5.12)中有氣體者,即為陽取出放置于4℃±2℃冰箱(5.14)10min報(bào)告被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌;如綠膿菌素試驗(yàn)陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣和42℃生長(zhǎng)試5試劑或材料A.1.1成分A.1.2制法A.4.1成分A.4.2制法6A.5.1成分A.5.2制法A.6.1成分無水磷酸二氫鉀硫酸鎂(MgSO4﹒7H2O)0.5gA.6.2制法除瓊脂和酚紅外,將其它成分加到蒸餾水中,加熱溶解,調(diào)pH為7.2,加A.7.1.2革蘭氏碘液碘7將碘與碘化鉀先進(jìn)行混合,加入蒸餾水少許,充分A.7.1.3脫色液A.7.1.4復(fù)染液A.7.1.4.1沙黃復(fù)染液A.7.2.1將涂片在火焰上固定,滴加結(jié)晶紫染色液,染1min,A.7.2.2滴加革蘭氏碘液,作用1min,A.8.1成分A.8.2制法將蛋白胨、氯化鎂和硫酸鉀加到蒸餾水中,加溫使其溶解,調(diào)pH至7.4,加入瓊脂和甘油,加熱溶A.9.1成分
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