水質(zhì) 鄰甲苯胺、鄰苯二胺、3,3-二氯聯(lián)苯胺液液萃取氣相色譜質(zhì)譜法

3水質(zhì)鄰甲苯胺、鄰苯二胺、3,3’-二氯聯(lián)苯胺液液萃取/氣相色譜-質(zhì)譜法警告：二氯甲烷、鄰甲苯胺、鄰苯二胺、3,3’-二氯聯(lián)苯胺等試劑和溶液為揮發(fā)性和半揮發(fā)性有毒物，溶液配制應(yīng)在通風(fēng)廚內(nèi)進(jìn)行，操作時(shí)應(yīng)按規(guī)定要求佩戴防護(hù)面具，避免吸入或接觸皮膚和衣物。1適用范圍本文件規(guī)定了水中3種苯胺類(lèi)化合物鄰甲苯胺、鄰苯二胺、3,3’-二氯聯(lián)苯胺的氣相色譜-質(zhì)譜測(cè)定方法。本文件適用于地下水、地表水、生活污水和工業(yè)廢水中鄰甲苯胺、鄰苯二胺、3,3’-二氯聯(lián)苯胺的測(cè)定。當(dāng)取樣量為1000ml，濃縮體積為1.0ml，采用全掃描方式測(cè)定時(shí)，鄰甲苯胺、鄰苯二胺、3,3’-二氯聯(lián)苯胺的方法檢出限分別為0.01μg/L、0.35μg/L和0.04μg/L。2規(guī)范性引用文件本文件內(nèi)容引用了下列文件中的條款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T601化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的配制GB/T603實(shí)驗(yàn)方法中所用試劑及制品的制備GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法HJ91.1污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范HJ91.2地表水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范HJ164地下水環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范HJ822水質(zhì)苯胺類(lèi)化合物的測(cè)定氣相色譜－質(zhì)譜法3方法原理采用液液萃取提取水樣中鄰甲苯胺、鄰苯二胺、3,3’-二氯聯(lián)苯胺，在pH≥11條件下以二氯甲烷萃取，萃取液經(jīng)脫水、濃縮、凈化后，用氣相色譜/質(zhì)譜儀測(cè)定。依據(jù)目標(biāo)化合物的保留時(shí)間和標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜或特征離子定性，用內(nèi)標(biāo)法定量。4試劑與材料除非另有說(shuō)明，分析時(shí)使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)優(yōu)級(jí)純化學(xué)試劑，實(shí)驗(yàn)用水為新制備蒸餾水。4.1二氯甲烷：農(nóng)殘級(jí)4.2甲醇：農(nóng)殘級(jí)44.3正己烷：農(nóng)殘級(jí)4.4無(wú)水硫酸鈉：分析純，在400℃下加熱4h，置于干燥器冷卻后保存于干凈的試劑瓶中。4.5氫氧化鈉：分析純。4.6氯化鈉：分析純，400℃下加熱4h，置于干燥器冷卻后保存于干凈的試劑瓶中。4.7硫酸溶液：1+14.83,3’-二氯聯(lián)苯胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液：p=1000μg/ml,溶劑為二氯甲烷。購(gòu)買(mǎi)市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，4℃以下密封避光保存，或參考生產(chǎn)商推薦的保存條件。4.9鄰甲苯胺和鄰苯二胺：純度99.5%4.10鄰甲苯胺、鄰苯二胺和3,3’-二氯聯(lián)苯胺標(biāo)準(zhǔn)中間液：p=100μg/ml準(zhǔn)確移取3,3’-二氯聯(lián)苯胺標(biāo)準(zhǔn)貯備液(4.8)、鄰甲苯胺和鄰苯二胺(4.9)貯備液100μl于10.00ml棕色容量瓶(5.8)中，用二氯甲烷定容，混勻，轉(zhuǎn)移至附聚四氟乙烯旋轉(zhuǎn)蓋容量瓶(5.9)，4℃條件下保存。4.11替代物標(biāo)準(zhǔn)(苯胺-d5)貯備液，p=2000mg/L，溶劑為二氯甲烷。購(gòu)買(mǎi)市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，4℃以下密封避光保存，或參考生產(chǎn)商推薦的保存條件。4.12內(nèi)標(biāo)(1,2-二氯苯-d4)貯備液：p=4000mg/L，溶劑為二氯甲烷。購(gòu)買(mǎi)市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液或純品，4℃以下密封避光保存，或參考生產(chǎn)商推薦的保存條件。4.13內(nèi)標(biāo)(菲-D10)貯備液：p=2000mg/L，溶劑為二氯甲烷。購(gòu)買(mǎi)市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液或純品，4℃以下密封避光保存，或參考生產(chǎn)商推薦的保存條件。4.14十氟三苯基膦(DFTPP)貯備液：p=1000.0mg/ml，溶劑為正己烷。可直接購(gòu)買(mǎi)有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，也可用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備，用正己烷稀釋。4.15氯化鈉溶液：ρ(NaCl)=0.05g/ml。稱(chēng)取5g氯化鈉(NaCl)，用水稀釋至100ml，混勻。4.16氮?dú)猓杭兌炔恍∮?9.999%，用于樣品濃縮。4.17氦氣：純度不小于99.999%。5儀器與設(shè)備5.1氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：EI電離源，帶分流/不分流進(jìn)樣口。5.2色譜柱：石英毛細(xì)管柱，長(zhǎng)30m，內(nèi)徑0.25mm，液膜厚0.25μm固定為5%二苯基/95%二甲基聚硅氧烷。5.3氮吹濃縮裝置。5.4固相萃取裝置。5.5凈化柱：弗羅里硅土(Florisil)柱，1000mg/6ml，市售。5.6分液漏斗：60ml、2000ml，具聚四氟乙烯活塞。5.7微量注射器：10μl、50μl、100μl和500μl。55.8容量瓶：A級(jí)，10ml、25ml。5.9試劑瓶：25ml、50ml，附聚四氟乙烯旋轉(zhuǎn)蓋。5.10一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。6樣品采集及保存按照HJ91.1、HJ91.2和HJ164的相關(guān)規(guī)定采集樣品。樣品應(yīng)采集在具磨口塞的棕色玻璃瓶中，水樣充滿(mǎn)樣品瓶。在4℃下避光保存，7d內(nèi)完成萃取。7樣品前處理步驟7.1試樣制備搖勻水樣，準(zhǔn)確量取1000ml(萃取所用樣品體積根據(jù)水質(zhì)可適當(dāng)增減)于2000ml分液漏斗中，加入30g氯化鈉，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)水樣pH≥11，加入替代物標(biāo)準(zhǔn)使用液混勻，加入60ml二氯甲烷萃取10min。靜置分層后，收集有機(jī)相。再加入60ml二氯甲烷重復(fù)萃取一次，合并有機(jī)相并經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。7.1.2濃縮在35℃左右水浴溫度濃縮至1.0ml。用10ml正己烷平衡弗羅里硅土柱，在液面消失前，將萃取液的濃縮液轉(zhuǎn)移至凈化柱中，用3-4ml正己烷洗滌濃縮管，洗滌液一并轉(zhuǎn)移至弗羅里硅土柱上，先用50ml二氯甲烷/正己烷(1:1)洗脫該柱，收集洗脫液1；再用50ml異丙醇/正己烷(5:95)洗脫柱，收集洗脫液2；最后用50ml甲醇/正己烷(5:95)第三次洗脫柱，收集洗脫液3。將洗脫液濃縮至0.5-1.0ml加入內(nèi)標(biāo)，用二氯甲烷定容1.0ml，混勻，待測(cè)。7.2空白樣制備用實(shí)驗(yàn)用水代替樣品，按照試樣制備(7.1)相同的操作步驟，制備空白試樣。8分析步驟8.1儀器參考條件8.1.1氣相色譜參考條件進(jìn)樣口溫度：260℃;進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；控制模式：恒壓色譜柱流量：1.5ml/min；吹掃流量：3.0ml/min；6程序升溫：40℃開(kāi)始保持5min，以5℃/min升溫至100℃,以10℃/min升溫至200℃保持8min，以30℃/min升溫至280℃保持5min。進(jìn)樣體積：1μl目標(biāo)化合物的離子流色譜圖見(jiàn)圖1。1—苯胺-d5，2—1,2-二氯苯-d4，3—鄰甲苯胺，4—鄰苯二胺，5—菲-D10，6—3,3’-二氯聯(lián)苯胺圖1鄰甲苯胺、鄰苯二胺、3,3’-二氯聯(lián)苯胺總離子流圖(10μg/ml)8.1.2質(zhì)譜參考條件：離子源：EI源；離子源溫度：230℃;離子化能量：70eV；接口溫度：290℃;掃描方式：全掃描(Scan)；質(zhì)量范圍：m/z35~500amu；溶劑延遲時(shí)間：7min8.2校準(zhǔn)8.2.1儀器性能檢查儀器使用前用十氟三苯基膦(DFTPP)對(duì)質(zhì)譜儀進(jìn)行調(diào)諧。樣品分析前以及每運(yùn)行12h，將1.0μl十氟三苯基膦(DFTPP)使用液(4.14)注入色譜對(duì)儀器系統(tǒng)進(jìn)行檢查，所得質(zhì)量離子豐度應(yīng)全部符合表1中要求或參照制造商的說(shuō)明。表1十氟三苯基膦(DFTPP)離子豐度規(guī)范要求8.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制7分別吸取不同體積的鄰甲苯胺、鄰苯二胺和3,3’-二氯聯(lián)苯胺標(biāo)準(zhǔn)使用液和替代物標(biāo)準(zhǔn)使用液于二氯甲烷中，制備成6個(gè)濃度點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)系列，其中鄰甲苯胺和3,3＇-二氯聯(lián)苯胺的質(zhì)量濃度分別為0.5μg/ml、1.00μg/ml、2.00μg/ml、3.00μg/ml、5.00μg/ml，鄰苯二胺的質(zhì)量濃度為5.00μg/ml、10.0μg/ml、20.0μg/ml、30.0μg/ml、50.0μg/ml，加入內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)使用液，使內(nèi)標(biāo)濃度為2.00μg/ml。按照儀器參考條件(8.1)進(jìn)行分析，得到不同目標(biāo)化合物質(zhì)譜圖。以目標(biāo)化合物濃度與內(nèi)標(biāo)化合物濃度的比值為橫坐標(biāo)，以目標(biāo)化合物定量離子響應(yīng)值與內(nèi)標(biāo)化合物定量離子響應(yīng)值的比值為縱坐標(biāo)，建立校準(zhǔn)曲線。8.3樣品測(cè)定取待測(cè)試樣(7.1)，按照與繪制校準(zhǔn)曲線相同的儀器分析條件進(jìn)行測(cè)定。8.4實(shí)驗(yàn)室空白試驗(yàn)分析樣品時(shí)，將空白試樣(7.2)按照與繪制校準(zhǔn)曲線相同的儀器分析條件進(jìn)行測(cè)定。9精密度和準(zhǔn)確度2家實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)加標(biāo)量為0.5μg、3.0μg和5.0μg水質(zhì)空白加標(biāo)樣品進(jìn)行了平行測(cè)定，實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為鄰甲苯胺2.9%~7.0%、鄰苯二胺4.9%~6.6%和3,3’-二氯聯(lián)苯胺9.3%~10.8%。9.2準(zhǔn)確度2家實(shí)驗(yàn)室分別對(duì)加標(biāo)量為0.5μg、3.0μg和5.0μg水質(zhì)空白加標(biāo)樣品進(jìn)行了加標(biāo)回收測(cè)定，實(shí)驗(yàn)室間樣品加標(biāo)回收率分別為鄰甲苯胺59.2%~102%、鄰苯二胺62.2%~104%和3,3’-二氯聯(lián)苯胺57.6%~115%。10結(jié)果計(jì)算與表示根據(jù)目標(biāo)化合物的保留時(shí)間和扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖與標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖中的定量離子比較確定。10.2定量分析在定性分析基礎(chǔ)上，根據(jù)定量離子峰面積或峰高，用內(nèi)標(biāo)法定量。當(dāng)樣品中鄰甲苯胺、鄰苯二胺和3,3’-二氯聯(lián)苯胺目標(biāo)化合物定量離子有干擾時(shí)，可使用輔助離子定量。10.2.1平均相對(duì)響應(yīng)因子(RRF)的計(jì)算用RRF定量時(shí)，樣品中目標(biāo)化合物的質(zhì)量濃度Px按公式(1)進(jìn)行計(jì)算。8式中：ρx—樣品中目標(biāo)化合物質(zhì)量濃度，μg/L；Ax—目標(biāo)化合物定量離子響應(yīng)值；Ais—與目標(biāo)化合物相對(duì)應(yīng)的內(nèi)標(biāo)物定量離子響應(yīng)值；ρis—內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量濃度，μg/ml；RFi—目標(biāo)化合物平均響應(yīng)因子；Vex—樣品提取液體積，ml；V0—水樣取樣體積，L；DF—稀釋倍數(shù)。10.2.2校準(zhǔn)曲線定量目標(biāo)化合物采用線性校準(zhǔn)曲線定量時(shí)，目標(biāo)化合物質(zhì)量濃度ρx通過(guò)相應(yīng)的校準(zhǔn)曲線方程進(jìn)行計(jì)算。10.3結(jié)果表示當(dāng)測(cè)定結(jié)果≥1.00μg/L時(shí)，數(shù)據(jù)保留三位有效數(shù)字；當(dāng)測(cè)定結(jié)果＜1.00μg/L時(shí)，數(shù)據(jù)應(yīng)保留至小數(shù)點(diǎn)后二位。11質(zhì)量控制要求每批樣品(<20個(gè)樣品)應(yīng)至少做一個(gè)空白試驗(yàn)，即全程序空白試驗(yàn)，如果目標(biāo)化合物有檢出，應(yīng)查明原因。11.2平行樣測(cè)定每批樣品至少測(cè)定10%的平行樣，樣品數(shù)量少于10個(gè)時(shí)，應(yīng)至少測(cè)定一個(gè)平行樣。當(dāng)測(cè)定結(jié)果為10倍檢出限以?xún)?nèi)(包括10倍檢出限)，平行樣測(cè)定結(jié)果相對(duì)偏差應(yīng)≤50%，當(dāng)測(cè)定結(jié)果大于10倍檢出限，平行樣測(cè)定結(jié)果相對(duì)偏差應(yīng)≤25%。11.3樣品加標(biāo)回收率測(cè)定每批樣品至少做一次加標(biāo)回收率測(cè)定，實(shí)際樣品的加標(biāo)回收率應(yīng)在50%~150%。11.4替代物回收率測(cè)定所有樣品和空白中都需加入替代物，按與樣品相同的步驟分析，替代物的回收率應(yīng)在50%~150%。11.5儀器性能檢查每24h需進(jìn)行儀器性能檢查，得到DFTPP關(guān)鍵離子和豐度必須全部滿(mǎn)足表1要求。11.6校準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線至少需5個(gè)濃度系列，目標(biāo)化合物相對(duì)響應(yīng)因子的RSD應(yīng)小于等于30%或校準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)大于等于0.990，否則應(yīng)查找原因或重新建立校準(zhǔn)曲線。每12小時(shí)分析1次校準(zhǔn)曲線中間濃度點(diǎn)，