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DB22DB22/T3090—2019綿羊幼畜超排技術(shù)規(guī)程Juvenileinvitroembryotransfertechnologystandardsregulationsonsheep吉林省市場(chǎng)監(jiān)督管理廳發(fā)布I本標(biāo)準(zhǔn)由吉林省畜牧業(yè)管理局提出并歸口。123間隔12h間隔12h栓第14天,手術(shù)法暴露供體卵巢,用含有2mL吸卵緩沖每孔30枚~40枚,培養(yǎng)條件為38.5℃,5%CO2,95%空氣,飽和濕度,成熟時(shí)間為24h。4CO2培養(yǎng)箱中上游孵育獲能處理20min~30min,顯微鏡下觀(guān)察精子將成熟培養(yǎng)24h的卵丘—卵母細(xì)胞復(fù)合體移入含0.2%透明質(zhì)酸酶的Hepes-TCM199溶液中?!?05個(gè)/mL。受精條件為38.5℃,5%CO2,95%空氣,飽和濕度,受精時(shí)間20h~24h。件為38.5℃,5%CO2,5%O2,90%N2,飽和濕度。每孔20枚~30枚胚胎,再進(jìn)行胚胎鑒定和分級(jí),將2~4細(xì)胞期胚胎培養(yǎng)24h,轉(zhuǎn)入預(yù)先在CO2培養(yǎng)箱中平衡2h以上的四孔細(xì)胞培養(yǎng)皿中,每孔培養(yǎng)條件為38.5℃,5%CO2,5%O2,90%N2,飽和濕度。培養(yǎng)48h后間隔6h~8h觀(guān)察胚胎發(fā)育56
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