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備案號：51449-2016DB32TechnicalregulationfortissuecultureseedlingsofAnthura江蘇省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I本標準主要起草人：葉曉青、佘建明、梁麗建、賈新平、鄧衍明、孫曉波、湯日1紅掌種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，僅注日期件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標選擇交通便捷、地勢平坦、光照充足、通風良好、水電配套、排灌便利的場地進行設(shè)施建設(shè)。用于玻璃、塑料器皿及其他實驗用具的清洗、干燥和保存，藥品的稱量、溶解、配制，培配制、分裝、包扎和滅菌，以及植物材料的預(yù)處理、培養(yǎng)材料的觀察分放置超凈工作臺，開展植物材料的無菌操作，包括外植體的消毒、接種、培養(yǎng)物的轉(zhuǎn)移和試管苗2用于試管苗的煉苗、移栽和生長，根據(jù)實際情況可選擇玻璃溫室或薄膜溫室，必須具備夏蒸餾水器、冰箱、培養(yǎng)箱、天平、電熱磁攪拌器4.1接種前準備工作4.1.1培養(yǎng)基配制和滅菌以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，添加瓊脂6.0g/L～6分化培養(yǎng)基：MS+BA0.5mg/L～1.0mg/L+芽增殖培養(yǎng)基：MS+BA0.1mg/L～0.5mg/L+生根培養(yǎng)基為：1/2MS+NAA0.1mg/L～0.3mg/L+IBA0.1mg/L培養(yǎng)基配制完畢后，分裝至組培瓶中。在121℃下高壓滅菌154.1.2超凈工作臺消毒4.1.3接種人員的準備②入室時穿戴上經(jīng)過消毒的工作服、帽子、口罩和鞋子34.2外植體接種4.2.1外植體選取和清洗外植體在加有適量洗衣粉的自來水中浸泡后，用4.2.2接種工具的消毒4.2.3外植體的滅菌然后再用0.1%的升汞滅菌8min～10mi4.2.4材料切割將葉片平放在無菌濾紙上進行切割操作，先用解剖刀沿主脈切開葉片，再將兩側(cè)縱切成3mm左右寬4.2.5接種器內(nèi)分布均勻。接種完畢立即蓋好瓶蓋并作好標4.3培養(yǎng)4.3.1分化培養(yǎng)愈傷組織生長50d左右可將愈傷組織切割成2mm～3mm的小塊，均勻接種于分化培養(yǎng)基表面。4.3.2增殖培養(yǎng)44.3.3生根培養(yǎng)4.4煉苗移栽4.4.1煉苗4.4.2移栽基質(zhì)4.4.3移栽取出試管苗，以一手的拇指和食指輕捏莖葉部，在流水下輕輕洗凈根部附著的瓊脂。一減少對根系的傷害。移栽時每穴栽1苗，4.4.4消毒移栽后立即噴施一遍800

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