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文檔簡介

ICS07.080

CCSC04

DB4403

深圳市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB4403/TXXX—XXXX

DNA合成實驗室環(huán)境和安全要求

EnvironmentalandsafetyrequirementsofDNAsynthesislaboratory

(送審稿)

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實施

深圳市市場監(jiān)督管理局發(fā)布

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DNA合成實驗室環(huán)境和安全要求

1范圍

本文件規(guī)定了DNA合成實驗室布局設(shè)置、環(huán)境建設(shè)以及安全管理的要求。

本文件適用于引物合成和基因合成的實驗室。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本

文件。

GB/T536液體無水氨

GB2894安全標(biāo)志及其使用導(dǎo)則

GB13690化學(xué)品分類和危險性公示通則

GB15258化學(xué)品安全標(biāo)簽編寫規(guī)定

GB19489實驗室生物安全通用要求

GB50016建筑設(shè)計防火規(guī)范

GB50140建筑滅火器配置設(shè)計規(guī)范

AQ3013危險化學(xué)品從業(yè)單位安全標(biāo)準(zhǔn)化通用規(guī)范

TSGD0001壓力管道安全技術(shù)監(jiān)察規(guī)程—工業(yè)管道

TSG21固定式壓力容器安全技術(shù)監(jiān)察規(guī)程

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

引物合成primersynthesis

200nt以下的單鏈DNA基于經(jīng)典固相亞磷酰胺三酯法合成。

注:一般可直接通過核酸合成儀合成獲得,包括各種常規(guī)或修飾單鏈寡核苷酸合成以及探針、探針庫合成。

3.2

基因合成genesynthesis

按照預(yù)定核苷酸的順序,將脫氧核苷酸逐個進行人工連接合成DNA鏈的方法。

3.3

寡核苷酸oligonucleotide

二至三十個核苷酸殘基以磷酸二酯鍵連接而成的線性多核苷酸片段。寡核苷酸可由儀器自動合成,

它可作為DNA合成的引物、基因探針等。

注:在使用這一術(shù)語時,對核苷酸殘基的數(shù)目并無嚴(yán)格規(guī)定,在不少文獻(xiàn)中,把含有三十甚至更多個核苷酸殘基的

多核苷酸分子也稱作寡核苷酸。

[來源:GB/T34797-2017,3.1]

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4縮略語

下列縮略語適用于本文件。

DNA:脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid)

PCR:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerasechainreaction)

5布局設(shè)置要求

5.1功能規(guī)劃

DNA合成實驗室宜按照功能不同分為引物合成實驗室和基因合成實驗室。

5.2引物合成實驗室

5.2.1引物合成實驗室宜設(shè)置引物合成室、引物氨解室、分析純化室、電泳室和氣瓶間,各實驗室功

能如附錄A所示,潔凈度及壓力要求宜參考附錄B。

5.2.2引物合成室地面應(yīng)采用耐酸堿腐蝕材質(zhì)。

5.2.3引物合成室應(yīng)安裝溫濕度控制系統(tǒng)和監(jiān)控系統(tǒng)。

5.2.4引物合成室應(yīng)安裝可燃?xì)怏w監(jiān)測報警系統(tǒng)。

5.2.5引物合成室應(yīng)安裝獨立的送排風(fēng)系統(tǒng),應(yīng)確保實驗室空氣只能通過過濾處理后經(jīng)專用的排風(fēng)管

道排出。

5.2.6引物氨解室應(yīng)安裝通風(fēng)系統(tǒng),排氣管道應(yīng)通過獨立的路線到建筑物外面。通風(fēng)櫥實驗臺面應(yīng)防

水、耐腐蝕、耐熱和堅固。

5.2.7氣瓶間應(yīng)安裝保險裝置(如護架和護鏈)以防止氣瓶的意外移動,其中液氨鋼瓶應(yīng)存放于氨氣

防爆柜并安裝氨氣泄漏監(jiān)測報警系統(tǒng)。

5.2.8氣瓶間應(yīng)安裝氧氣含量監(jiān)測裝置,以防止氬氣、氦氣等惰性氣體泄露導(dǎo)致空氣中含氧量降低而

發(fā)生窒息。

5.2.9應(yīng)在實驗室工作區(qū)配備洗眼裝置。

5.2.10應(yīng)配備實驗室用緊急噴淋裝置。

5.3基因合成實驗室

5.3.1基因合成實驗室宜設(shè)置試劑準(zhǔn)備室、基因合成室、模板制備室、PCR室、電泳室、培養(yǎng)室、樣

本室,各實驗室功能如附錄A所示,潔凈度及壓力要求宜參考附錄B。

5.3.2基因合成室應(yīng)符合GB19489的要求。

5.3.3實驗臺面應(yīng)防水、耐腐蝕、耐熱和堅固。

6環(huán)境建設(shè)要求

6.1溫度要求

6.1.1DNA合成實驗室應(yīng)安裝溫度監(jiān)控系統(tǒng),24h實時監(jiān)測室內(nèi)的溫度。

6.1.2DNA合成實驗室溫度應(yīng)控制在18℃~26℃,應(yīng)配備溫度監(jiān)控設(shè)備。

6.2相對濕度要求

6.2.1DNA合成實驗室應(yīng)安裝濕度監(jiān)控系統(tǒng),24h實時監(jiān)測室內(nèi)的相對濕度。

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6.2.2引物合成室相對濕度應(yīng)不大于40%,應(yīng)配備濕度控制設(shè)備(如除濕機)和監(jiān)控設(shè)備。在核酸合

成儀上進行引物合成操作前,環(huán)境相對濕度應(yīng)達(dá)到引物合成室濕度要求,并形成記錄。

6.2.3引物合成室以外的其他DNA合成實驗室相對濕度應(yīng)控制在30%~70%,應(yīng)配備濕度監(jiān)控設(shè)備。

7安全管理要求

7.1化學(xué)試劑安全

7.1.1DNA合成使用的試劑涉及有毒有害物質(zhì)和危險化學(xué)品時,應(yīng)根據(jù)GB13690設(shè)立相應(yīng)的安全儲存

制度,應(yīng)建立相關(guān)的程序文件,并實施化學(xué)品管理及使用程序,記錄登記儲存與使用情況。

7.1.2使用有毒有害物質(zhì)和危險化學(xué)品的工作區(qū)域,設(shè)計應(yīng)符合AQ3013的要求。

7.1.3DNA合成使用的危化試劑應(yīng)存儲在防爆柜中,設(shè)專人管理并做好領(lǐng)取發(fā)放記錄。

7.1.4DNA合成產(chǎn)生的廢液應(yīng)暫時存放在指定的安全地方,應(yīng)貼好危險廢液標(biāo)識。

7.1.5DNA合成產(chǎn)生的廢液應(yīng)定期由具有危險廢棄物處理資質(zhì)的環(huán)保公司轉(zhuǎn)運處理。

7.2氨氣使用安全

7.2.1氨氣使用應(yīng)符合GB/T536的要求。

7.2.2液氨鋼瓶應(yīng)存放于陰涼、通風(fēng)、干燥的房間,應(yīng)存放于氨氣防爆柜中并上鎖。

7.2.3氨氣存儲及使用終端應(yīng)安裝氨氣泄漏監(jiān)測報警裝置及外排系統(tǒng)。

7.2.4應(yīng)做好液氨設(shè)備、液氨壓力管道的日常維護保養(yǎng),定期組織自檢,建立日常使用操作記錄和巡

查記錄。發(fā)現(xiàn)老化、滲漏等異常情況,立即采取措施進行整改,腐蝕嚴(yán)重的應(yīng)及時更新。

7.2.5應(yīng)制定漏氨重點部位,特別是管道法蘭、閥門法蘭和設(shè)備法蘭等連接密封部位的檢修維修計劃,

并建立相應(yīng)檢修維修記錄,記錄中應(yīng)明確檢查部位、方法、人員、周期等內(nèi)容。

7.2.6應(yīng)按照TSGD0001及TSG21的規(guī)定進行定期檢驗,并檢測合格,檢測報告存檔備查。

7.2.7應(yīng)在液氨儲存和使用崗位設(shè)置明顯的安全警示標(biāo)志和安全告知牌,內(nèi)容應(yīng)包括但不限于:液氨

的理化性質(zhì)、危險特性、儲存要求、滅火方法、急救措施、泄漏處置、個人防護措施及報警電話。

7.2.8氨氣使用終端的氨解儀應(yīng)放置在通風(fēng)櫥中,保證使用過程中通風(fēng)櫥開啟。

7.3設(shè)施設(shè)備安全

7.3.1應(yīng)根據(jù)工作范圍配備滿足其功能所需的全部設(shè)施設(shè)備,制定設(shè)施設(shè)備清單,并定期更新。

7.3.2設(shè)施設(shè)備應(yīng)由經(jīng)過培訓(xùn)和授權(quán)的人員操作和維護。

7.3.3每次使用前或使用中應(yīng)根據(jù)監(jiān)控指標(biāo)確認(rèn)設(shè)施設(shè)備的性能處于正常工作狀態(tài),并記錄。

7.3.4設(shè)施設(shè)備應(yīng)由專業(yè)人員定期校準(zhǔn)或檢定。

7.3.5應(yīng)在設(shè)施設(shè)備的顯著部位標(biāo)示出其唯一編號、校準(zhǔn)或驗證日期、下次校準(zhǔn)或驗證日期、準(zhǔn)用或

停用狀態(tài)。

7.3.6應(yīng)為設(shè)施設(shè)備制定預(yù)防性維護和維修措施,依據(jù)制造商的建議,定期進行設(shè)施設(shè)備系統(tǒng)維護工

作,制定有序的設(shè)施設(shè)備更換計劃。

7.3.7應(yīng)停止使用并安全處置性能已顯示出缺陷或超出規(guī)定限度的設(shè)施設(shè)備。

7.4消防安全

7.4.1防火系統(tǒng)建設(shè)應(yīng)符合GB19489的規(guī)定。

7.4.2滅火器的配置應(yīng)符合GB50140的規(guī)定。

7.4.3消防設(shè)施的設(shè)置應(yīng)符合GB50016的規(guī)定。

7.4.4各實驗室防火系統(tǒng)宜用干式滅火,不宜設(shè)置消防噴淋系統(tǒng)。

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7.4.5實驗室的防火和安全通道設(shè)置應(yīng)符合國家的消防規(guī)定和要求。

7.5安全標(biāo)識

安全標(biāo)識的設(shè)計和編寫應(yīng)符合GB2894和GB15258的規(guī)定。

7.6個人防護安全

7.6.1進入實驗室人員應(yīng)穿實驗服和戴橡膠手套。

7.6.2進入引物合成室人員應(yīng)佩戴護目鏡和防有機蒸汽的活性炭口罩或半面罩/全面罩防毒面具。

7.6.3進入電泳室人員在紫外線下工作應(yīng)佩戴具有紫外線防護功能的護目鏡和/或防護面罩,并遮蔽暴

露的皮膚。

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A

A

附錄A

(資料性)

DNA合成實驗室功能

DNA合成實驗室功能如下:

a)引物合成室:用于核酸合成儀的存放,進行引物合成操作;

b)引物氨解室:用于合成完成的引物的氨解后處理;

c)分析純化室:用于引物產(chǎn)品的分析檢測、分離純化和分裝濃縮;

d)氣瓶間:用于存放引物合成使用的氬氣、氦氣以及引物氨解使用的氨氣;

e)試劑準(zhǔn)備室:用于實驗室常規(guī)試劑的配制;

f)基因合成室:用于引物池化、連接和轉(zhuǎn)化;

g)模板制備室:用于PCR模板制備;

h)PCR室:用于PCR體系配制、PCR擴增和產(chǎn)物純化;

i)電泳室:用于瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、凝膠成像和切膠回收;

j)培養(yǎng)室:用于無菌接種、菌種擴大培養(yǎng)和菌落篩選;

k)樣本室:用于各類樣本包括菌液、PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒和引物等的存儲。

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B

B

附錄B

(資料性)

DNA合成實驗室潔凈度及環(huán)境壓力參考要求

DNA合成實驗室潔凈度及環(huán)境壓力要求宜參見表B.1。

表B.1DNA合成實驗室潔凈度及環(huán)境壓力參考要求

潔凈度

實驗室環(huán)境壓力

萬級

引物合成室

負(fù)壓-10Pa

引物氨解室

引物合成實驗室分析純化室正壓+10Pa

電泳室負(fù)壓-10Pa

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