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文檔簡(jiǎn)介
ICS67.050
CCSA68
團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)
T/HZBXXXXX—2024
LC-MS/MS液質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定涼茶中非法添加
的22種化學(xué)藥物
LC-MS/MSDeterminationof22illegallyaddedchemicaldrugsinherbalteaby
liquidchromatography-massspectrometry
（征求意見稿）
XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施
惠州市標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)發(fā)布
T/HZBXXXXX—2024
LC-MS/MS液質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定涼茶中非法添加的22種化學(xué)藥物
1范圍
本文件規(guī)定了涼茶中非法添加的22種化學(xué)藥物的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測(cè)定方法。
本文件適用于涼茶中甲氧芐啶、洛美沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、對(duì)乙酰氨基酚、氨基比林、非那
西丁、氯霉素、氯唑沙宗、潑尼松、氫化可的松、吡羅昔康、甲基潑尼松龍、地塞米松、曲安奈德、舒
林酸、醋酸潑尼松、酮洛芬、美洛昔康、醋酸地塞米松、芬布芬、雙氯芬酸鈉的測(cè)定。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，
僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本
文件。
GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法
3術(shù)語和定義
本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。
4試劑與材料
除非另有說明，本方法所用試劑均為色譜純，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。
試劑
4.1.1甲醇（CH3OH）：色譜純。
4.1.2乙腈（CH3CN）：色譜純。
4.1.3甲酸（HCOOH）：色譜純。
溶液配制
4.2.180%（V/V）乙腈水溶液：量取20mL水于80mL乙腈（4.1.2）中，混合均勻。
4.2.20.1%甲酸溶液：量取1mL甲酸（4.1.3），加水定容至1000mL，混勻備用。
標(biāo)準(zhǔn)品
化學(xué)藥物標(biāo)準(zhǔn)品：純度≥95%，或經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
4.4.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：甲氧芐啶、洛美沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、對(duì)乙酰氨基酚、氨基比林、非那
西丁、氯霉素、氯唑沙宗、潑尼松、氫化可的松、吡羅昔康、甲基潑尼松龍、地塞米松、曲安奈德、舒
林酸、醋酸潑尼松、酮洛芬、美洛昔康、醋酸地塞米松、芬布芬、雙氯芬酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇配制成標(biāo)
準(zhǔn)儲(chǔ)備液，其中甲氧芐啶，氧氟沙星，非那西丁和吡羅昔康濃度為1μg/mL；洛美沙星，對(duì)乙酰氨基酚，
氨基比林，舒林酸和美洛昔康終濃度為5μg/mL；其余13種成分濃度為10μg/mL。再根據(jù)需要用乙腈
稀釋成相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)工作液。置于-20℃冰箱中避光保存，有效期為3個(gè)月。
4.4.2混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液：取適量標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，用80%（v/v）乙腈水溶液進(jìn)行稀釋，配制成混
合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液。其中甲氧芐啶，氧氟沙星，非那西丁和吡羅昔康終濃度為0.1ng/mL、0.2ng/mL、
0.5ng/mL、1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL，洛美沙星，對(duì)乙酰氨基酚，氨基比林，
舒林酸和美洛昔康終濃度為0.5ng/mL、1.0ng/mL、2.5ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、25.0ng/mL、
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50.0ng/mL，其余13種成分濃度為1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、
50.0ng/mL、100.0ng/mL，臨用時(shí)配制。
材料
微孔有機(jī)過濾膜：0.22μm。
5儀器和設(shè)備
液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源。
天平：感量為0.001g和0.01mg。
離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥5000r/min。
渦旋混合器。
超聲波振蕩器。
移液器：5mL、10mL。
具塞塑料離心管：50mL。
6測(cè)定步驟
樣品制備
準(zhǔn)確稱取涼茶樣品（液體）1.0g（精確到0.001g）混勻后，置于50mL塑料離心管中，加入30mL
乙腈，渦旋混合均勻，超聲提取30min，靜置至室溫，用乙腈定容至刻度，搖勻，以8000r/min離心10
min，經(jīng)0.22μm有機(jī)濾膜過濾，待測(cè)定。
測(cè)定
6.2.1色譜參考條件
a)色譜柱：C18色譜柱，2.1×100mm，1.7μm或同等性能的色譜柱；
b)流速：0.3mL/min；
c)進(jìn)樣體積：1μL；
d)柱溫：35℃；
e)A為0.1%甲酸溶液；B為乙腈。梯度洗脫見表1。
表1流動(dòng)性梯度洗脫條件
時(shí)間/min流動(dòng)相A/%流動(dòng)相B/%
09010
1.08020
2.07525
3.56040
11.01585
12.09010
15.09010
6.2.2質(zhì)譜/質(zhì)譜參考條件
a)離子源：電噴霧離子源（ESI）；
b)掃描方式：正、負(fù)離子；
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c)檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；
d)霧化氣：氮?dú)猓?/p>
e)脫溶劑管溫度：250℃；
f)離子源溫度:400℃；
g)霧化氣流量：3.0L/min；
h)干燥氣流量：10.0L/min；
i)質(zhì)譜采集參數(shù)見表2。
表222種化學(xué)藥物質(zhì)譜參數(shù)
母離子子離子
序號(hào)物質(zhì)名稱電離模式CE（V）
（m/z）（m/z）
*230.124
1甲氧芐啶ESI+291.05
261.127
*265.126
2洛美沙星ESI+352.1
308.218
*261.128
3氧氟沙星ESI+362.2
318.220
*233.124
4諾氟沙星ESI+320.1
276.118
*110.219
5對(duì)乙酰氨基酚ESI+152.05
93.022
*113.011
6氨基比林ESI+232.1
187.07
*110.123
7非那西丁ESI+180.1
138.218
*152.017
8氯霉素ESI-321.1
257.212
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母離子子離子
序號(hào)物質(zhì)名稱電離模式CE（V）
（m/z）（m/z）
*75.824
9氯唑沙宗ESI-168.05
132.224
*341.113
10潑尼松ESI+359.15
147.324
*121.223
11氫化可的松ESI+363.2
105.141
*121.121
12吡羅昔康ESI+332.1
164.118
*357.312
13甲基潑尼松龍ESI+375.25
161.121
*355.315
14地塞米松ESI+393.2
147.328
*397.216
15曲安奈德ESI+435.25
339.116
*233.252
16舒林酸ESI+357.05
248.135
*295.016
17醋酸潑尼松ESI+401.15
147.127
*105.129
18酮洛芬ESI+255.1
209.014
4
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母離子子離子
序號(hào)物質(zhì)名稱電離模式CE（V）
（m/z）（m/z）
*115.121
19美洛昔康ESI+352.05
141.120
*309.217
20醋酸地塞米松ESI+435.25
337.215
*181.124
21芬布芬ESI+255.1
237.112
*250.111
22雙氯芬酸鈉ESI-294.1
214.3519
注1：*為定量離子。
注2：表2所列參考質(zhì)譜條件僅供參考，當(dāng)采用不同質(zhì)譜儀器時(shí)，儀器參數(shù)可能存在差異，測(cè)定前應(yīng)將質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化
到最佳。
定性測(cè)定
取試樣溶液（6.1）與混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液（4.4.2）在相同分析條件下測(cè)定，試樣中如呈現(xiàn)定量離
子對(duì)和定性離子對(duì)的色譜峰，被測(cè)成分的特征離子峰保留時(shí)間與混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液（4.4.2）對(duì)應(yīng)的
保留時(shí)間一致，且選擇的定性離子的相對(duì)豐度比與相當(dāng)混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液（4.4.2）的定性離子的相
對(duì)豐度比的最大偏差不超過表3的規(guī)定，則可以判定試樣中存在對(duì)應(yīng)的組分。
表3定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度比的最大允許偏差
相對(duì)離子豐度（%）k＞50%50%≥k＞20%20%≥k＞10%k≤10%
允許的最大偏差（%）±20±25±30±50
定量測(cè)定
取混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液（4.4.2）按儀器參考條件（6.2）依次測(cè)定，以待測(cè)組分的系列濃度為橫
坐標(biāo)，待測(cè)組分的峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)大于0.99。
取試樣溶液（6.1）按儀器參考條件（6.2）進(jìn)行測(cè)定，將對(duì)應(yīng)的定量離子對(duì)色譜峰面積代入標(biāo)準(zhǔn)曲
線。按“7”項(xiàng)下公式，計(jì)算樣品中被測(cè)組分的含量，平行測(cè)定次數(shù)不少于兩次。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖參見附錄A。
空白溶液的測(cè)定
空白溶液（5.1）同試樣溶液測(cè)定步驟操作。
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7結(jié)果的計(jì)算
試樣中被測(cè)組分的含量按式（1）計(jì)算：
C