γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測(cè)定SOPGGT臨床意義檢驗(yàn)科生化項(xiàng)目SOP

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測(cè)定文件編號(hào)：版本號(hào)：頁(yè)碼：1檢測(cè)原理γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶能催化谷氨酰部分從γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸（GCNA）轉(zhuǎn)化成雙甘氨肽，由此釋放出在405nm波長(zhǎng)吸光的5-氨基-2-硝基苯甲酸鹽。此變化與γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶的活性成正比。γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸+雙甘氨肽L-γ-谷氨酰-雙甘氨肽+5-氨基-2-硝基苯甲酸鹽2標(biāo)本采集與處理2.1采血方法空腹采不抗凝靜脈血2~3ml。2.2標(biāo)本保存室溫或4℃可穩(wěn)定72.3注意事項(xiàng)標(biāo)本應(yīng)避免脂血、溶血、黃疸。采血管中有草酸鉀和氟化鈉的混合物會(huì)使γ?谷氨酰轉(zhuǎn)移酶活性降低15%。3試劑和設(shè)備3.1試劑采用西門(mén)子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品（上海）有限公司提供的試劑盒。3.1.1試劑組成試劑船1~6孔為γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸0.69mg，片劑；7~8孔為雙甘氨肽90mM/L，3.1.2試劑準(zhǔn)備直接使用。3.1.3試劑保存試劑2~8℃3.2質(zhì)控品美國(guó)BIORAD液體多項(xiàng)質(zhì)控品。3.3校準(zhǔn)品西門(mén)子校準(zhǔn)品。3.4儀器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自動(dòng)生化分析系統(tǒng)。4操作程序4.1檢測(cè)過(guò)程流程簽收樣品→離心→上機(jī)檢測(cè)→審核報(bào)告→簽發(fā)報(bào)告→標(biāo)本保存。γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測(cè)定文件編號(hào)：版本號(hào)：頁(yè)碼：4.2樣品簽收嚴(yán)格按照標(biāo)本接收程序簽收標(biāo)本。4.3標(biāo)本處理以2500~3000r/min,離心6~10min，分離血清上機(jī)測(cè)定。如不能及時(shí)檢測(cè)，分離血清于2-8℃4.4標(biāo)本檢測(cè)4.4.1手工編排測(cè)試項(xiàng)目：樣品按編號(hào)裝入樣品架，主屏幕按F1:ENTERDATA，在Position處輸入樣品所在樣品架字母及所在位置號(hào)，按enter，在PatientName處選擇性輸入病人名字，按enter，在SampleNo處輸入樣品號(hào)，按enter，在Tests處使用檢驗(yàn)鍵或檢驗(yàn)組合鍵選擇相應(yīng)項(xiàng)目，根據(jù)需要選擇相應(yīng)的按鍵改變Mode（按F7:MEXTMODE選擇樣品管類(lèi)型）、Priority（按F4:NEXTPRIORITY選擇樣品的處理模式）、Fluid（按F8:NEXTFLUID選擇標(biāo)本類(lèi)型）。4.4.2雙向條形碼標(biāo)本分離血清后直接運(yùn)行儀器。4.4.3運(yùn)行：輸入完畢后按F3:LOADLIST，確認(rèn)樣品已經(jīng)裝載在樣本盤(pán)上，按Run鍵，儀器開(kāi)始進(jìn)行樣品檢測(cè)。4.4.4檢驗(yàn)后標(biāo)本保存標(biāo)本檢驗(yàn)完成后用采血管原蓋蓋緊，保存于標(biāo)本冷藏庫(kù)內(nèi)，按日期放好，保存期為7天。5校準(zhǔn)程序5.1校準(zhǔn)品準(zhǔn)備和儲(chǔ)存直接使用，2~8℃5.2校準(zhǔn)條件在室內(nèi)質(zhì)控失控、更換試劑批號(hào)、更換儀器主要配件或進(jìn)行大保養(yǎng)后均需校準(zhǔn)。無(wú)特殊情況校準(zhǔn)周期為3個(gè)月。5.3校準(zhǔn)程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按項(xiàng)目鍵選擇所需要校準(zhǔn)的項(xiàng)目名稱(chēng)METHOD，選中相應(yīng)試劑批號(hào)LOT，輸入操作者姓名Operator、校準(zhǔn)液貨號(hào)CalibratorProduct和批號(hào)Lot，以及最低值校準(zhǔn)液在樣品架上的位置StartatPosition，最后把校準(zhǔn)液各個(gè)水平的值按照由低到高的順序輸?shù)綄?duì)應(yīng)位置，按F4：ASSIGNCUPS指定樣品杯，校準(zhǔn)液按順序排列在樣品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”運(yùn)行鍵運(yùn)行校準(zhǔn)程序。6質(zhì)量控制程序6.1質(zhì)控品準(zhǔn)備和儲(chǔ)存質(zhì)控品為液體，可以直接使用。原包裝質(zhì)控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期，未開(kāi)啟2~8℃可保存90d,開(kāi)啟后2~8℃6.2質(zhì)控水平和分析批長(zhǎng)度γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測(cè)定文件編號(hào)：版本號(hào)：頁(yè)碼：每24小至少進(jìn)行一批，每批2個(gè)濃度水平。6.3質(zhì)控操作程序與4.4標(biāo)本檢測(cè)步驟相同，只需要按F4:NEXTPRIORITY將ROUTINE修改成QC狀態(tài)。7性能參數(shù)本法線(xiàn)性范圍為0~800U/L,對(duì)于超過(guò)測(cè)定線(xiàn)性范圍的結(jié)果，用酶稀釋液對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋?zhuān)斎胂♂屢蜃雍笤僦匦聶z測(cè)。8生物參考區(qū)間女性：5~55U/L男性：15~85U/L。9臨床意義γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶廣泛地分布在腎、胰、前列腺、肝等人體組織內(nèi)，促使γ谷氨酰酞水解，轉(zhuǎn)移γ谷?；?。γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(γ-GT)廣泛地分布在腎、胰、前列腺、肝等人體組織內(nèi)，促使γ谷氨酰酞水解，轉(zhuǎn)移γ谷?；?。GGT主要用于診斷肝膽疾病。原發(fā)性肝癌、胰腺癌和乏特壺腹癌時(shí),血清GGT活力顯著升高,特別在診斷惡性腫瘤患者有無(wú)肝轉(zhuǎn)移和肝癌術(shù)后有無(wú)復(fù)發(fā)時(shí),陽(yáng)性率可達(dá)90%。嗜酒或長(zhǎng)期接受某些藥物治療如苯巴比妥、苯妥因鈉、安替比林者,血清GGT活性常常升高?？诜茉兴帟?huì)使GGT值增高20%。但是,GGT作為肝癌標(biāo)志物的特異性較差,急性肝炎、慢性肝炎活動(dòng)期、阻塞性黃疸、膽道感染、膽石癥、急性胰腺炎時(shí)都可以升高。腎臟中GGT含量最高,但腎臟疾病時(shí),血液中該酶活性增高卻不明顯,有人認(rèn)為,腎單位病變時(shí),GGT經(jīng)尿排出,測(cè)定尿中酶活力可以有助于診斷腎臟疾患。10參考文獻(xiàn)[1]西門(mén)子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品（上海）有限公司γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）測(cè)定試劑說(shuō)